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环状RNA CHACR调控压力超负荷诱导心肌肥大和氧化应激损伤

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中国组织工程研究 2025年第25期29卷 5362-5373页

作者：王霜韩瑜袁敏曹济民孙腾山西医科大学细胞生理学教育部重点实验室山西省细胞生理学重点实验室山西医科大学基础医学院生理学系山西省太原市030001

背景:病理性心肌肥大是多种心脏疾病的危险促进因素,但其发病机制仍未阐明。环状RNA与心肌肥大密切相关,然而环状RNA CHACR在心肌肥大中的作用及调控机制尚未见报道。目的:探究环状RNA CHACR在压力超负荷诱导心肌肥大中的作用及机制。方... 详细信息

背景:病理性心肌肥大是多种心脏疾病的危险促进因素,但其发病机制仍未阐明。环状RNA与心肌肥大密切相关,然而环状RNA CHACR在心肌肥大中的作用及调控机制尚未见报道。目的:探究环状RNA CHACR在压力超负荷诱导心肌肥大中的作用及机制。方法:①心脏原位注射环状RNA CHACR过表达慢病毒1周后进行横向主动脉缩窄手术诱导小鼠心肌肥大。术后8周,计算心脏质量/胫骨长比值和肺质量/胫骨长比值,测量心肌细胞表面积,检测肥大标志基因表达水平和心肌纤维化程度,评估心功能。②H9c2心肌细胞给予环状RNA CHACR过表达慢病毒处理72 h,然后加入1μmol/L血管紧张素Ⅱ处理24 h诱导心肌细胞肥大。通过检测心肌细胞表面积、肥大标志基因表达水平、蛋白质/DNA比值评估细胞肥大情况,通过检测活性氧水平和线粒体膜电位评估氧化应激损伤情况。结果与结论:①在体内和体外心肌肥大模型中,环状RNA CHACR的表达水平均显著降低(P<0.01);②过表达环状RNA CHACR显著抑制了横向主动脉缩窄手术诱导的小鼠心肌肥大表型,主要表现为心脏体积减小、心脏质量/胫骨长比值显著降低(P<0.05),肺质量/胫骨长比值显著降低(P<0.05),心肌细胞表面积显著减小(P<0.05),以及心肌肥大相关标志基因心房利钠肽(P<0.05)、脑钠肽(P<0.05)表达水平降低;③过表达环状RNA CHACR显著抑制了横向主动脉缩窄手术诱导的小鼠心脏纤维化,表现为纤维化面积减小(P<0.01)和纤维化标志基因Acta1的表达水平降低(P<0.05);④过表达环状RNA CHACR显著改善了小鼠心功能,主要表现为射血分数(P<0.05)和短轴缩短率(P<0.01)显著升高;(5)过表达环状RNA CHACR显著抑制了血管紧张素Ⅱ诱导的心肌细胞肥大,主要表现为心肌细胞表面积显著减小(P<0.05),心房利钠肽(P<0.05)和脑钠肽(P<0.05)表达水平显著下调,以及蛋白质/DNA比值显著减小(P<0.05);(6)过表达环状RNA CHACR显著抑制了血管紧张素Ⅱ诱导的活性氧水平升高(P<0.001)和线粒体膜电位降低(P<0.05)。结果表明,环状RNA CHACR在体内和体外心肌肥大模型中表达水平显著降低,过表达环状RNA CHACR显著抑制心肌肥大,减轻心肌纤维化,改善心功能,并且显著减轻了血管紧张素Ⅱ诱导的心肌细胞氧化应激损伤。

关键词：心肌肥大环状RNA CHACR 血管紧张素Ⅱ 横向主动脉缩窄手术氧化应激损伤

miR-143通过靶向FASN抑制肝癌HepG2细胞脂质形成

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上海交通大学学报（医学版） 2015年第3期35卷 337-342页

作者：李卫萍李锦平李元宏任来峰宋维芳山西医科大学汾阳学院药理教研室汾阳032200 山西医科大学汾阳学院生物化学与分子生物学教研室汾阳032200 山西医科大学汾阳学院病理生理教研室汾阳032200

目的研究miR-143对肝癌Hep G2细胞脂质形成的影响及其分子机制。方法应用qRT-PCR方法检测miR-143在临床肝癌和癌旁组织以及肝癌细胞系和正常肝细胞系中的表达。通过油红O染色实验检测miR-143对肝癌细胞脂质形成的影响。Western blottin... 详细信息

目的研究miR-143对肝癌Hep G2细胞脂质形成的影响及其分子机制。方法应用qRT-PCR方法检测miR-143在临床肝癌和癌旁组织以及肝癌细胞系和正常肝细胞系中的表达。通过油红O染色实验检测miR-143对肝癌细胞脂质形成的影响。Western blotting检测miR-143对肝癌细胞中脂肪酸合成酶(FASN)表达的影响。通过报告基因实验检测miR-143及其抑制子对报告基因载体FASN-CDS活性的影响。结果 qRTPCR结果表明在临床肝癌组织和Hep G2细胞中miR-143的表达显著低于癌旁组织和Chang liver肝细胞系(P<0.01)。油红O染色实验结果显示,miR-143能显著降低肝癌细胞中脂质的形成。qRT-PCR和Western blotting结果证实,miR-143可以显著下降FASN的mRNA和蛋白表达水平。报告基因检测结果表明,在Hep G2细胞中miR-143可以显著降低FASN-CDS报告基因的活性(P<0.01);相反,miR-143抑制子可以显著升高FASN-CDS的活性(P<0.01)。在Hep G2细胞中miR-143抑制子可以上调FASN的表达并促进脂质形成。结论 miR-143可以通过抑制FASN的表达阻碍肝癌细胞脂质形成。

关键词： miR-143 肝癌脂质形成 FASN

Effects of multiple intrathecal administration of L-arginine with different doses on formalin-induced nociceptive behavioral responses in rats

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Neuroscience Bulletin 2010年第3期26卷 211-218页

作者：李宽祁文秀山西医科大学太原030001 山西医科大学汾阳学院生理学教研室汾阳032200

Objective To investigate the effects of nitric oxide （NO） with different doses on modulation of inflammatory pain, and its possible *** NO precursor L-arginine （L-Arg） was intrathecally administered in rats at a dose of 10 μg per day （low dose group） or 250μg per day （high dose group） for a succession of 4 *** saline was applied as a *** the rats were subcutaneously injected with formalin （100μL,2%） into the right hindpaw,and the nociceptive behavioral responses within 1 h were *** 4 h after formalin injection,neuronal NO synthase （nNOS） and c-Fos expression in spinal dorsal horn was examined with immunocytochemistry *** The subcutaneous injection of formalin evoked biphasic behaviors of licking or biting the injected *** was no difference in acute phase of formalin test among the 3 groups,while in tonic phase,the licking and biting time,and the protein levels of nNOS and c-Fos in spinal dorsal horn were significantly decreased in low dose group and increased in high dose group,compared with those in control *** These results suggest that multiple administration of NO with different doses may produce different *** one hand,the low dose of NO can induce *** the other hand,the high dose of NO can induce pronociception.

关键词： L-arginine nitric oxide formalin test pain nitric oxide synthase genes c-fos spinal cord

核转录因子-κB在实验性肝纤维化中的表达、分布及意义

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中国病理生理杂志 2010年第1期26卷 12-16页

作者：宋维芳徐军全许瑞玲王登妮王明亮宋彬妤山西医科大学汾阳学院病理生理学教研室山西汾阳032200 山西医科大学汾阳学院科技中心山西汾阳032200 山西医科大学病理生理学教研室山西太原030001

目的:研究核转录因子-κB(NF-κB)在实验性肝纤维化过程中的表达、分布及意义。方法:雌性Wistar大鼠随机分为正常组、肝纤维化模型组和NF-κB抑制剂吡咯烷二硫代氨基甲酸盐(PDTC)组,PDTC组大鼠在给CCl4的同时给予PDTC灌胃。肝组织羟脯氨... 详细信息

目的:研究核转录因子-κB(NF-κB)在实验性肝纤维化过程中的表达、分布及意义。方法:雌性Wistar大鼠随机分为正常组、肝纤维化模型组和NF-κB抑制剂吡咯烷二硫代氨基甲酸盐(PDTC)组,PDTC组大鼠在给CCl4的同时给予PDTC灌胃。肝组织羟脯氨酸(Hyp)含量测定,鲎试剂法测定血浆内毒素水平,赖氏法测定丙氨酸氨基转移酶(ALT),TBA法检测丙二醛(MDA)的水平,免疫组化法测定NF-κB的表达,Western blot-ting检测结缔组织生长因子(CTGF)的表达。结果:免疫组化显示NF-κBp65在正常肝组织中少量表达于中央静脉周围的肝细胞胞浆内,肝纤维化模型组肝组织可见程度不等的细胞浆和(或)细胞核表达,主要分布于纤维化区、肝窦区、血管壁及部分胆管细胞、变性肝细胞也可见阳性染色,阳性细胞数从第1周末就显著高于正常对照组,PDTC组阳性细胞数明显低于同期肝纤维化模型组(P<0.05);肝纤维化模型组内毒素含量、NF-κB以及CTGF表达明显升高,且两两均呈正相关;PDTC组内毒素含量呈先升高后降低趋势,NF-κBp65和CTGF表达显著低于同期肝纤维化模型组,且二者呈正相关(r=0.815,P<0.01),内毒素与NF-κBp65和CTGF表达无相关性。结论:内毒素可能通过激活NF-κB通路上调CTGF的表达。

关键词：内毒素类 NF-κB 结缔组织生长因子肝硬化吡咯烷二硫代氨基甲酸盐

miR-103通过抑制FBW7的表达促进肝癌细胞增殖

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中山大学学报（医学科学版） 2014年第4期35卷 500-505页

作者：李元宏李卫萍任来峰宋维芳山西医科大学汾阳学院生物化学与分子生物学教研室山西汾阳032200 山西医科大学汾阳学院药理教研室山西汾阳032200 山西医科大学汾阳学院病理生理教研室山西汾阳032200

【目的】研究miR-103对肝癌细胞增殖功能的影响及其作用机制。【方法】Real time PCR方法检测miR-103在肝癌组织和细胞中的表达。将miR-103 inhibitor转染到肝癌细胞中,分为实验组(转染miR-103 inhibitor)和对照组(转染Negative Contro... 详细信息

【目的】研究miR-103对肝癌细胞增殖功能的影响及其作用机制。【方法】Real time PCR方法检测miR-103在肝癌组织和细胞中的表达。将miR-103 inhibitor转染到肝癌细胞中,分为实验组(转染miR-103 inhibitor)和对照组(转染Negative Control),通过MTT实验检测肝癌细胞的增殖变化。Real time PCR和Western blotting检测转染miR-103 mimics后肝癌细胞中FBW7 mRNA和蛋白的表达变化。通过重荧光素酶报告基因实验检测转染miR-103 mimics或inhibitor后FBW7-3’UTR活性的变化。【结果】Real time PCR结果显示miR-103在肝癌组织和HepG2细胞系中均高于癌旁组织和LO2肝细胞系(P<0.05)。MTT实验结果显示,转染miR-103 inhibitor实验组肝癌细胞的存活细胞数低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。Real time PCR和Western blotting结果显示,转染miR-103 mimics实验组肝癌细胞中FBW7的mRNA和蛋白表达水平都低于对照组.重荧光素酶报告基因实验结果显示,与对照组相比,转染miR-103 mimics的实验组中FBW7-3’UTR报告基因活性显著降低(P<0.05);与对照组相比,转染miR-103 inhibitor的实验组中FBW7-3’UTR活性显著升高(P<0.05)。进一步实验发现,转染FBW7后能显著下调由miR-103 mimics所引起的细胞增殖作用。【结论】miR-103可以通过抑制FBW7的表达来促进肝癌细胞增殖。

关键词： miR-103 肝癌增殖 FBW7

乌头碱与钾离子通道激动剂合用对离体大鼠心脏的正性肌力作用研究

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中国药理学通报 2001年第5期17卷 570-572页

作者：张世忠吴博威山西医科大学汾阳学院生理学教研室汾阳032200

目的　研究钾离子通道激动剂吡那地尔与乌头碱合用时乌头碱对心功能不全大鼠离体心脏的正性肌力作用。方法　本实验利用Langendorff离体心脏灌流装置 ,以左室收缩压 (LVSP)、左室压上升最大速率 ( +dp/dtmax)、左室压下降最大速率 ( -dp... 详细信息

目的　研究钾离子通道激动剂吡那地尔与乌头碱合用时乌头碱对心功能不全大鼠离体心脏的正性肌力作用。方法　本实验利用Langendorff离体心脏灌流装置 ,以左室收缩压 (LVSP)、左室压上升最大速率 ( +dp/dtmax)、左室压下降最大速率 ( -dp/dtmax)、左室舒张末压 (LVEDP)为指标 ,在①单纯使用乌头碱②乌头碱与吡那地尔 (KATP通道激动剂 )合用两种情况下 ,观察了乌头碱对腹主动脉狭窄法造成的心功能减退大鼠离体心脏的正性肌力作用。结果　实验结果表明①乌头碱对心功能不全大鼠离体心脏具有一定正性肌力作用 ,②乌头碱在激动钾通道的情况下 ,与单纯使用乌头碱相比 ,强心的有效浓度范围增大 ,强心效果明显增强 (P <0 0 5 )。结论　乌头碱对心功能减退的心脏具有强心作用 ,激动心肌钾通道可显著增强乌头碱的强心作用和有效浓度范围。

关键词：乌头碱吡那地尔变力性钾离子通道激动剂

A型肉毒毒素重链对大鼠脊髓损伤局部颈上神经节蛋白10的表达及神经突起再生的影响

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中国康复医学杂志 2018年第10期33卷 1142-1148,1155页

作者：王亚芳高扬李志强刘雅赵明伟袁海霞李夏青山西医科大学基础医学院病理生理教研室太原030001

目的:探讨人工重组A型肉毒毒素重链(BoNT/A重链)对大鼠脊髓损伤局部颈上神经节蛋白10(SCG10)表达、神经突起再生以及损伤侧后肢感觉及运动功能的影响,为阐明BoNT/A重链促神经突起生长的作用提供实验依据。方法:大鼠单侧腰段脊髓横断损... 详细信息

目的:探讨人工重组A型肉毒毒素重链(BoNT/A重链)对大鼠脊髓损伤局部颈上神经节蛋白10(SCG10)表达、神经突起再生以及损伤侧后肢感觉及运动功能的影响,为阐明BoNT/A重链促神经突起生长的作用提供实验依据。方法:大鼠单侧腰段脊髓横断损伤模型基础上局部及鞘内给予BoNT/A重链;于用药后不同时间提取局部蛋白进行双向电泳,并根据双向电泳提示的蛋白点群变化的分子量和等电点,选取SCG10为目标蛋白行Western Blot检测及神经突起测定;通过抓力和热痛敏实验测试损伤侧后肢的运动和感觉功能情况。结果:(1)BoNT/A重链可干预脊髓损伤后局部蛋白谱的变化,MW位于18—25kDa、等电点在5—7范围的蛋白点可以作为蛋白点群变化的代表之一;(2)作为分子量位于18—25kDa/等电点在5—7的蛋白成分之一的SCG10在单纯损伤时较正常对照组其表达有所增高,给予BoNT/A重链后, SCG10的表达显著增强(P<0.05);(3)免疫荧光结果显示:单纯损伤时SCG10的阳性表达主要分布于损伤周边细胞的胞体,应用BoNT/A重链后,SCG10阳性分布于胞浆和细胞突起且以损伤近头端的周边区域较为显著;(4)突起测定结果显示:BoNT/A重链可促进脊髓损伤周边神经细胞突起增长,包括突起数目增多及含有突起的神经细胞百分比增多(P<0.05);(5)给予BoNT/A重链后,损伤侧后肢肌力明显优于单纯损伤组(P<0.05),但感觉功能未见明显改善。结论:脊髓损伤局部给予BoNT/A重链可促进生长相关蛋白SCG10的表达并促进损伤周边神经细胞突起生长,改善肌肉抓力。BoNT/A重链有助于脊髓损伤后的再生修复。

关键词：肉毒毒素 A型肉毒毒素重链脊髓损伤颈上神经节蛋白10 神经突起神经再生

α7nAChR和nNOS在Aβ诱导的认知障碍大鼠皮质及海马表达的时间和空间变化

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生理学报 2016年第6期68卷 775-782页

作者：王艳莉刘丽霞王少虎祁文秀山西医科大学基础医学院太原030001 山西医科大学汾阳学院生理学教研室汾阳032200

本研究旨在观察α7烟碱型乙酰胆碱受体(α7 nicotinic acetylcholine receptor,α7n ACh R)与神经元型一氧化氮合酶(neuronal nitric oxide synthetase,n NOS)在Aβ诱导的认知障碍大鼠皮质和海马时间和空间的分布与变化。取Sprague-Dawl... 详细信息

本研究旨在观察α7烟碱型乙酰胆碱受体(α7 nicotinic acetylcholine receptor,α7n ACh R)与神经元型一氧化氮合酶(neuronal nitric oxide synthetase,n NOS)在Aβ诱导的认知障碍大鼠皮质和海马时间和空间的分布与变化。取Sprague-Dawley(SD)大鼠60只,随机分成6组,其中3个实验组分别经侧脑室注射凝聚态Aβ1-42(2.5μg/μL,4μL),连续观察7 d(7 d Aβ组)、14 d(14 d Aβ组)和21 d(21 d Aβ组);3个对照组则分别注射和实验组等量生理盐水并观察相同的时间。用Y迷宫刺激器检测大鼠的学习和记忆行为能力,用免疫组织化学和Western blot检测皮质和海马CA1、CA3、DG各区α7n ACh R和n NOS阳性细胞分布和蛋白表达量的变化。结果显示,与各自对照组相比,3个实验组大鼠的学习和记忆行为能力降低,前额叶皮质和海马各区α7n ACh R和n NOS的表达均显著下调,特别在前额叶皮质浅层和海马CA3区变化明显;3个实验组之间比较结果显示,Aβ诱导的认知障碍大鼠学习和记忆功能、前额叶皮质和海马α7n ACh R和n NOS表达均随着Aβ作用时间的延长呈进行性下降。以上结果提示,前额叶皮质和海马α7n ACh R和n NOS表达的共同降低可能是Aβ诱导的大鼠认知功能障碍的基础。

关键词：阿尔茨海默病 α7烟碱型乙酰胆碱受体神经元型一氧化氮合酶皮质海马时间和空间

BAK和BAG-1蛋白在结直肠癌中的表达及其意义

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中国生物制品学杂志 2010年第7期23卷 755-757,766页

作者：张朝霞山西医科大学汾阳学院病理教研室山西汾阳032200

目的探讨BAK和BAG-1蛋白在结直肠癌中的表达及其意义。方法采用免疫组化SP法对80例结直肠癌、40例结直肠腺瘤及25例癌旁正常结直肠黏膜组织中BAK和BAG-1蛋白的表达进行检测,并分析其与结直肠癌临床病理特征之间的相关性。结果 BAK和BAG-... 详细信息

目的探讨BAK和BAG-1蛋白在结直肠癌中的表达及其意义。方法采用免疫组化SP法对80例结直肠癌、40例结直肠腺瘤及25例癌旁正常结直肠黏膜组织中BAK和BAG-1蛋白的表达进行检测,并分析其与结直肠癌临床病理特征之间的相关性。结果 BAK和BAG-1蛋白在结直肠癌中过度表达,表达率分别为72.5%(58/80)和80%(64/80),且BAG-1蛋白与肿瘤的分化程度呈负相关,BAK蛋白与肿瘤的分化程度呈正相关。有淋巴结转移的结直肠癌,其BAG-1蛋白的表达率为96.7%(29/30),无淋巴结转移的结直肠癌,其BAG-1蛋白的表达率为70%(35/50),两者相比差异有统计学意义(P<0.01)。结论 BAK和BAG-1蛋白的过度表达与肿瘤的分化程度密切相关,且BAG-1蛋白的过度表达还与肿瘤的淋巴结转移密切相关;结直肠癌的发生机制可能涉及BAK和BAG-1调节环路中多个基因的异常。

关键词：结直肠肿瘤 bcl-2同源拮抗杀伤蛋白质 BAG-1蛋白免疫组织化学