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小剂量顺铂通过下调Th17细胞频率缓解小鼠自身免疫性肝炎

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免疫学杂志 2021年第1期37卷 46-50页

作者：刘青青田海霞康行田艳杨昊罗旭光樊卫平山西医科大学微生物与免疫教研室太原030001

目的探索小剂量顺铂对小鼠自身免疫性肝炎(AIH)Th17细胞的影响及相关机制。方法将24只小鼠随机分为正常组(normal group)、AIH+顺铂组(AIH+Cisplatin group)和AIH+生理盐水组(AIH+NS group)。后2组利用S100/FCA建立小鼠AIH模型后,分别... 详细信息

目的探索小剂量顺铂对小鼠自身免疫性肝炎(AIH)Th17细胞的影响及相关机制。方法将24只小鼠随机分为正常组(normal group)、AIH+顺铂组(AIH+Cisplatin group)和AIH+生理盐水组(AIH+NS group)。后2组利用S100/FCA建立小鼠AIH模型后,分别腹腔注射0.2 ml含1 mg/kg的顺铂和生理盐水,每周1次连续3周。检测小鼠血清转氨酶ALT、AST水平;HE染色观察小鼠肝组织病理改变;流式细胞术检测脾细胞中Th17细胞频率;免疫组化检测肝组织IL^(-1)7A的表达;Western blot检测肝组织中STAT3和磷酸化STAT3的表达。结果与AIH+NS组相比,AIH+Cisplatin组转氨酶明显下降、肝组织病理好转、IL^(-1)7A表达及Th17细胞比例下调、磷酸化STAT3的表达下降。结论小剂量顺铂可能通过抑制STAT3信号下调Th17细胞频率并减少IL^(-1)7A的分泌,缓解小鼠AIH。

关键词：顺铂自身免疫性肝炎 Th17细胞 IL-17A STAT3

二甲双胍激活腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)缓解伴刀豆球蛋白A诱导的小鼠急性爆发型肝炎

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细胞与分子免疫学杂志 2022年第4期38卷 302-307页

作者：刘青青田海霞杨昊康行刘海霞杨晓丹罗旭光樊卫平山西医科大学微生物与免疫教研室山西太原030001 临汾市中心医院山西临汾041000

目的研究二甲双胍(Met)对伴刀豆球蛋白A(ConA)所致急性爆发型肝炎小鼠的保护作用并探索其机制。方法C57BL/6小鼠随机分为正常对照组(NC组)、ConA组、Met组,每组8只。后两组分别灌饲0.2 mL生理盐水和100 mg/kg Met连续5 d后,尾静脉注射0.... 详细信息

目的研究二甲双胍(Met)对伴刀豆球蛋白A(ConA)所致急性爆发型肝炎小鼠的保护作用并探索其机制。方法C57BL/6小鼠随机分为正常对照组(NC组)、ConA组、Met组,每组8只。后两组分别灌饲0.2 mL生理盐水和100 mg/kg Met连续5 d后,尾静脉注射0.1 mL ConA(25 mg/kg)建立小鼠急性爆发型肝炎模型,18 h后处死。全自动生化分析仪检测小鼠血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)及总胆红素(TB)水平;HE染色观察小鼠肝组织病理改变;免疫组织化学染色法检测肝组织巨噬细胞浸润;实时定量PCR检测肝脏组织白细胞介素1β(IL-1β)、IL-6及肿瘤坏死因子α(TNF-α)的mRNA表达;血细胞分析仪检测小鼠外周血白细胞(WBC)总数及其中淋巴细胞数量,流式细胞术检测脾细胞中Th17细胞比例;免疫荧光组织化学染色检测肝组织胱天蛋白酶3(caspase-3)的表达;Western blot法检测肝组织腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)和磷酸化的AMPK蛋白表达。结果与ConA组相比,Met组小鼠血清ALT、AST及TB明显下降,肝病变减轻,巨噬细胞浸润减少,外周血白细胞总数及其中淋巴细胞数量增多,脾脏中Th17淋巴细胞比例下调,IL-1β、IL-6及TNF-α的水平降低,凋亡下降,磷酸化的AMPK的表达升高。结论Met通过激活AMPK,降低Th17细胞比例,抑制肝脏炎细胞浸润和炎细胞因子产生,减轻ConA诱导的肝损伤。

关键词：伴刀豆球蛋白A(ConA) 急性爆发型肝炎(FH) 二甲双胍(Met) 腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)

雷帕霉素调控丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶/雷帕霉素靶蛋白复合物通路对类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞增殖和凋亡的影响

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中华风湿病学杂志 2023年第12期27卷 814-819页

作者：胡晓榕李伟范茹刘宇清张芬张帆陈俊伟张升校山西医科大学基础医学院微生物与免疫教研室太原030001 山西医科大学第二医院风湿免疫科太原030001

目的探讨雷帕霉素对RA滑膜成纤维细胞(RA-FLS)增殖、凋亡的影响及作用机制。方法收集关节置换术中获得的RA患者滑膜组织,用胰酶消化法提取原代FLS。利用细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测雷帕霉素对RA-FLS增殖的影响,将RA-FLS分为对照组、雷... 详细信息

目的探讨雷帕霉素对RA滑膜成纤维细胞(RA-FLS)增殖、凋亡的影响及作用机制。方法收集关节置换术中获得的RA患者滑膜组织,用胰酶消化法提取原代FLS。利用细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测雷帕霉素对RA-FLS增殖的影响,将RA-FLS分为对照组、雷帕霉素组(10 nmol/L)。流式细胞术检测雷帕霉素对RA-FLS细胞凋亡的影响。实时荧光定量(RT)-PCR法检测雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(AKT)、B淋巴细胞瘤(Bcl)-2相关X基因(Bax)、Bcl-2 mRNA表达水平。蛋白印迹法检测Bax、Bcl-2、mTOR、磷酸化(p)-mTOR(2448)、AKT、p-AKT及mTOR复合物1(mTORC1)下游相关分子S6激酶1(S6K1)、p-S6K1、真核翻译启动因子-4E结合蛋白1(4EBP1)、p-4EBP1的蛋白表达水平。2组间差异比较采用两独立样本t检验。结果雷帕霉素干预的RA-FLS的增殖效率明显弱于对照组,且雷帕霉素的药物抑制率随着雷帕霉素浓度的升高而升高;雷帕霉素组的细胞凋亡率较对照组升高[(5.31±0.59)%与(3.49±0.40)%,t=7.83,P=0.001];与对照组相比,雷帕霉素组Bax mRNA表达明显升高(1.35±0.04与1.00±0.00),t=15.60,P=0.004,Bcl-2 mRNA(0.790±0.003与1.000±0.000,t=85.50,P=0.007)、mTOR mRNA(0.41±0.08与1.00±0.00,t=14.37,P=0.044)、AKT mRNA(0.59±0.08与1.00±0.00,t=7.54,P=0.017)表达降低,差异均有统计学意义;与对照组相比,雷帕霉素组Bax蛋白表达明显升高(0.75±0.10与0.48±0.09,t=4.04,P=0.007),Bcl-2(0.632±0.055与0.758±0.020,t=7.35,P=0.002)、p-AKT/AKT(0.61±0.07与0.88±0.04,t=5.61,P=0.005)、p-mTOR/mTOR(0.92±0.12与1.28±0.09,t=5.05,P=0.002)、p-S6K1/S6K1(0.884±0.020与1.023±0.058,t=4.52,P=0.004)、p-4EBP1/4EBP1(0.86±0.05与1.11±0.05,t=6.00,P=0.004)蛋白表达水平降低,差异均有统计学意义。结论雷帕霉素可能通过抑制AKT/mTORC1通路抑制RA-FLS细胞增殖并诱导其凋亡。

关键词：关节炎,类风湿成纤维细胞雷帕霉素细胞凋亡 mTORC1

ERK抑制剂U0126通过下调cyclin D1与survivin蛋白表达抑制乳腺癌细胞增殖

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中国药理学通报 2019年第8期35卷 1061-1066页

作者：田继华常思佳郭海秀冀贺王艳红山西医科大学微生物学与免疫学教研室

目的研究ERK通路抑制剂U0126对乳腺癌细胞增殖的抑制作用,并探讨其调控机制。方法培养人乳腺癌细胞株MCF-7、MDA-MB231,将细胞分组干预,MTT法检测各组细胞增殖情况;流式细胞仪检测各组细胞周期及细胞凋亡;Western blot检测细胞中p-ERK/... 详细信息

目的研究ERK通路抑制剂U0126对乳腺癌细胞增殖的抑制作用,并探讨其调控机制。方法培养人乳腺癌细胞株MCF-7、MDA-MB231,将细胞分组干预,MTT法检测各组细胞增殖情况;流式细胞仪检测各组细胞周期及细胞凋亡;Western blot检测细胞中p-ERK/ERK、cyclin D1、survivin及cleaved caspase-3蛋白表达。结果 MTT结果显示,U0126干预24、48 h后,MCF-7、MDA-MB231细胞抑制率明显增加(P<0.01);MCF-7、MDA-MB231细胞经U0126干预24 h后,检测细胞周期及细胞凋亡,G 0/G 1期细胞比例较对照组明显增加,S及G 2期细胞比例下降(P<0.05);而干预组细胞凋亡率较未干预组明显增多(P<0.01);U0126处理人乳腺癌细胞2 h后,可阻断ERK的磷酸化,减少cyclin D1的蛋白表达,抑制survivin而上调cleaved caspase-3的表达,与对照组相比差异有显著性(P<0.01)。结论 U0126通过阻断MCF-7、MDA-MB231细胞中ERK信号通路,调控cyclin D1,将细胞周期阻断在G 0/G 1期,抑制survivin而增加cleaved caspase-3表达,增加细胞凋亡,继而使乳腺癌细胞MDA-MB231、MCF-7的增殖受到抑制。

关键词： ERK U0126 MCF-7 MDA-MB231 cyclin D1 survivin

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CircRNA在自身免疫疾病中的研究进展

中国生物制品学杂志 2019年第3期32卷 347-350页

作者：雷波玄秀云樊卫平山西医科大学微生物与免疫教研室山西太原030001

Circular RNA(简称CircRNA)为一类新发现、长链非编码的内源性环状RNA分子,能够参与基因组转录及转录后水平的调节,竞争内源性RNA特异性结合miRNA,进而通过调控其活性影响下游靶基因的表达,参与发育、凋亡,影响诸多疾病的进程。最新的... 详细信息

Circular RNA(简称CircRNA)为一类新发现、长链非编码的内源性环状RNA分子,能够参与基因组转录及转录后水平的调节,竞争内源性RNA特异性结合miRNA,进而通过调控其活性影响下游靶基因的表达,参与发育、凋亡,影响诸多疾病的进程。最新的研究证实,CircRNA调控了类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis,RA)、系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)、多发性硬化症(multiple sclerosis,MS)等自身免疫性疾病的发生,有望作为此类疾病诊断标志物或治疗靶标。本文就CircRNA的生物学特性及其在自身免疫性疾病中的研究状况作一综述。

关键词： CircRNA 类风湿性关节炎系统性红斑狼疮多发性硬化症

氢气抑制白细胞介素22(IL-22)反应缓解胶原蛋白诱导关节炎(CIA)小鼠症状

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细胞与分子免疫学杂志 2022年第5期38卷 400-405页

作者：田艳康行杨昊张淑婷王雨樊卫平山西医科大学基础医学院微生物学与免疫学教研室山西太原030001

目的探讨氢气(H2)对胶原诱导关节炎(CIA)小鼠的治疗作用及相关机制。方法18只DBA/1小鼠随机分为正常对照组、CIA组和H2治疗组,每组6只。CIA组和H_(2)治疗组小鼠采用牛Ⅱ型胶原蛋白诱导CIA模型,H2治疗组小鼠在第15~60天进行H_(2)吸入治疗... 详细信息

目的探讨氢气(H2)对胶原诱导关节炎(CIA)小鼠的治疗作用及相关机制。方法18只DBA/1小鼠随机分为正常对照组、CIA组和H2治疗组,每组6只。CIA组和H_(2)治疗组小鼠采用牛Ⅱ型胶原蛋白诱导CIA模型,H2治疗组小鼠在第15~60天进行H_(2)吸入治疗(300 mL/L,3 h/d)。比较各组小鼠关节炎症状评分;HE染色进行关节病理评分;流式细胞术、免疫组织化学染色检测脾和关节中白细胞介素22(IL-22)阳性细胞变化;ELISA检测血清及关节软骨中IL-22水平;Western blot法检测关节软骨中磷酸化的信号转导子和转录激活子3(p-STAT3)和磷酸化的核因子κB(p-NF-κB)蛋白表达。结果与正常对照组相比,CIA组关节炎症状评分和病理评分显著升高、脾细胞和关节软骨中IL-22+细胞比例升高、血清和关节软骨中IL-22含量增加,关节软骨中p-STAT3和p-NF-κB蛋白表达增高,H_(2)治疗后均显著降低。结论H2可能通过抑制STAT3/NF-κB通路抑制IL-22炎症反应,缓解CIA小鼠症状。

关键词：氢气(H2) 胶原蛋白诱导关节炎(CIA) 白细胞介素22(IL-22) 信号转导子与转录激活子3(STAT3) 核因子kB(NF-kB)

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不同剂量环磷酰胺对小鼠免疫功能的影响

免疫学杂志 2018年第4期34卷 308-312页

作者：康慧琳樊卫平雷波田艳张淑婷山西医科大学微生物与免疫教研室太原030001

目的探索不同剂量环磷酰胺(CTX)对正常小鼠免疫功能的影响,为CTX临床应用提供实验数据。方法 C57BL/6小鼠24只,随机分为对照组、低剂量组和高剂量组,分别给生理盐水(NS)、低剂量和高剂量的CTX,检测血常规、Treg比率、T细胞和B细胞增殖... 详细信息

目的探索不同剂量环磷酰胺(CTX)对正常小鼠免疫功能的影响,为CTX临床应用提供实验数据。方法 C57BL/6小鼠24只,随机分为对照组、低剂量组和高剂量组,分别给生理盐水(NS)、低剂量和高剂量的CTX,检测血常规、Treg比率、T细胞和B细胞增殖功能及巨噬细胞吞噬功能、细胞增殖周期及凋亡比率。结果 RBC、WBC、PLT数量在高剂量组显著降低,对照组与低剂量组无差异;Treg占CD4+T细胞的比例在低剂量组显著下降,对照组与高剂量组无差异;T、B细胞增殖指数及巨噬细胞吞噬功能在低剂量组高于对照组和高剂量组,高剂量组低于对照组;细胞凋亡比率在高剂量组明显增加,对照组与低剂量组间无差异;高剂量组细胞阻滞在S期,对照组与低剂量组间无差异。结论低剂量CTX通过下调Treg、增强免疫细胞的功能,促进机体免疫;而高剂量CTX通过抑制DNA的复制、促进细胞凋亡和降低免疫细胞功能,使机体处于免疫抑制状态。相关数据可以为CTX的临床应用提供借鉴。

关键词：环磷酰胺 CD4^+CD25^+调节性T细胞免疫抑制免疫促进

人类巨细胞病毒IgG抗体ELISA检测试剂的研制

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免疫学杂志 2017年第4期33卷 349-353页

作者：陈武娟贺美荣杨蓉李娜樊卫平山西医科大学微生物免疫教研室太原030001

目的建立并评价人类巨细胞病毒PP65 Ig G抗体间接ELISA检测试剂。方法原核表达并纯化重组HCMV PP65332~561蛋白,包被酶标板,优化试剂检测条件,试制HCMV-Ig G间接ELISA试剂,分析试剂的精密度,并通过对100份样本的检测,与市售进口HCMV-Ig ... 详细信息

目的建立并评价人类巨细胞病毒PP65 Ig G抗体间接ELISA检测试剂。方法原核表达并纯化重组HCMV PP65332~561蛋白,包被酶标板,优化试剂检测条件,试制HCMV-Ig G间接ELISA试剂,分析试剂的精密度,并通过对100份样本的检测,与市售进口HCMV-Ig G间接ELISA试剂比较,分析了自制试剂的特异性、敏感性和符合率。结果试制的ELISA试剂批内和批间变异度均小于10%,与其他疱疹病毒感染血清均无交叉反应;与进口试剂的总符合率达到95%。结论该方法具有良好的特异性、敏感性,稳定性和可重复性,为HCMV病毒感染的流行病学调查提供了新的备选方法。

关键词：人类巨细胞病毒 PP65 ELISA IgG

中介素通过抑制内质网应激保护缺氧复氧损伤的大鼠肾小管上皮细胞

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中国药学杂志 2020年第2期55卷 105-110页

作者：亢晶王娟娟田继华王桂琴王艳红山西医科大学微生物学与免疫学教研室太原030001

目的探讨中介素(intermedin,IMD)通过抑制内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)途径的细胞凋亡,发挥对大鼠肾小管上皮细胞NRK-52E缺氧复氧(hypoxia/reoxygenation,H/R)损伤的保护机制。方法 NRK-52E细胞随机分为对照组;H/R组;空质粒(H/R+p IRES2)组;IMD(H/R+IMD)组。四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞活力;Annexin V-FITC/PI双染细胞凋亡检测试剂盒检测细胞凋亡;Realtime PCR法和Western-blot法分别检测ERS相关经典分子GRP78、CHOP、Caspase 12在mRNA及蛋白水平的表达;ER特异性荧光染料Dapoxyl用于观察ER形态变化。结果 MTT结果显示,H/R组NRK-52E细胞存活率较对照组明显下降,而IMD转染后细胞存活率提高;肾小管上皮细胞NRK-52E经H/R处理后出现凋亡,细胞凋亡率显著增加,同时H/R可导致ERS途径经典分子GRP78、CHOP、Caspase 12的mRNA和蛋白表达均显著上调;IMD转染后可显著降低NRK-52E细胞凋亡,细胞凋亡率降低,ERS途径经典分子GRP78、CHOP、Caspase 12的mRNA和蛋白表达均明显下降。内质网染色结果显示,H/R可以导致内质网结构受损,Dapoxyl染料聚集,荧光强度加强,内质网颗粒感增强,荧光颗粒分布不均、浓集,并有空泡;IMD转染后内质网结构受损减轻。结论大鼠肾小管上皮细胞NRK-52E H/R损伤过程中可能存在ERS凋亡途径的活化,IMD可以通过抑制ERS相关的凋亡信号通路,从而减少肾小管上皮细胞凋亡,减轻肾脏IRI。

关键词：中介素缺氧复氧损伤内质网应激凋亡