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HSP90在APP/PS1小鼠海马组织中年龄依赖性表达变化

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生理学报 2024年第2期76卷 257-265页

作者：王冰怡刘思钰郝凯敏祁文秀山西医科大学汾阳学院汾阳032200

本研究旨在观察阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)动物模型海马组织中热休克蛋白90(heat shock protein 90,HSP90)、β-淀粉样蛋白(amyloid-β,Aβ)以及Tau磷酸化水平在不同月龄的变化规律。将6、9、12月龄的APP/PS1转基因小鼠分为... 详细信息

本研究旨在观察阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)动物模型海马组织中热休克蛋白90(heat shock protein 90,HSP90)、β-淀粉样蛋白(amyloid-β,Aβ)以及Tau磷酸化水平在不同月龄的变化规律。将6、9、12月龄的APP/PS1转基因小鼠分为3个实验组,同月龄的C57BL/6J小鼠为相应对照组,每组8只。用Morris水迷宫检测各组小鼠的认知行为学能力;Western blot或免疫组织化学检测小鼠海马组织中HSP90、Aβ_(1-42)的表达以及Tau蛋白磷酸化水平;qRT-PCR检测海马组织hsp90 mRNA的表达;尼氏染色检测小鼠海马神经细胞形态和数量的变化。结果显示,APP/PS1转基因小鼠相较于同月龄的C57BL/6J小鼠,其海马组织中HSP90和hsp90 mRNA的表达降低(P<0.05或P<0.01),Aβ_(1-42)和Tau蛋白磷酸化水平则升高(P<0.05或P<0.01);不同月龄的APP/PS1转基因小鼠之间比较后发现,其海马组织中HSP90和hsp90 mRNA表达降低(P<0.05或P<0.01)以及Aβ_(1-42)和Tau蛋白磷酸化水平升高(P<0.01或P<0.05)均随着月龄的增加呈现进行性发展,同时其认知能力也逐渐减退。以上结果提示,APP/PS1小鼠海马组织中HSP90表达降低、Aβ_(1-42)和Tau蛋白磷酸化水平升高及其认知功能降低均呈现年龄依赖性。

关键词：阿尔茨海默病 HSP90 APP/PS1小鼠

plin1基因敲除对小鼠产生胰岛素抵抗的影响程度比较研究

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营养学报 2024年第2期46卷 171-176页

作者：张富强杨佳敏高学坤陈朝阳乔舒燕炯山西医科大学公共卫生学院山西医科大学动物实验中心

目的比较高脂饮食、高脂饮食联合腹腔注射链脲佐菌素（STZ）、plin1敲除(plin1-/-)和plin1敲除 (plin1-/-)加高脂饮食对小鼠胰岛素抵抗（IR）的影响程度。方法C57BL/6J小鼠分为5组：普通饮食组（W-N）、高脂饮食组（W-H）、高脂饮食+ST... 详细信息

目的比较高脂饮食、高脂饮食联合腹腔注射链脲佐菌素（STZ）、plin1敲除(plin1-/-)和plin1敲除 (plin1-/-)加高脂饮食对小鼠胰岛素抵抗（IR）的影响程度。方法C57BL/6J小鼠分为5组：普通饮食组（W-N）、高脂饮食组（W-H）、高脂饮食+STZ组（W-S）、plin1-/-普通饮食组（K-N）和plin1-/-高脂饮食组（K-H），每组8只，喂养12 w，测量小鼠体重，空腹血糖（FBG），葡萄糖耐量（GTT）和胰岛素耐量（ITT），并计算GTT和ITT曲线下面积，12 w后收集血清，处死小鼠，取出脂肪组织，检测空腹血清胰岛素水平（FINS）、血清甘油三酯（TG）、游离脂肪酸（FFA），计算稳态模型评估胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）、Western blotting检测脂肪组织磷脂酰肌醇3激酶（PI3K）、蛋白激酶B（AKT）、葡萄糖转运体4（GLUT4）蛋白表达水平。结果与W-N组比较，其余四组小鼠FBG、GTT和ITT曲线下面积、HOMA-IR、血清TG均明显升高、PI3K、p-AKT和GLUT4蛋白表达均显著下调（P<0.05）,W-H组体重显著升高（P<0.05）,K-N组体重显著下降（P<0.05）,K-N组、K-H组、W-S组FINS显著升高（P<0.05）,W-H组FFA显著升高（P<0.05）,K-N组FFA显著降低（P<0.05）。与K-N组相比，W-H组、 K-H组和W-S组小鼠体重显著升高（P<0.05）;W-H组小鼠血清FFA显著升高（P<0.05）;W-S组小鼠FBG显著升高，PI3K蛋白表达显著下调（P<0.05）;K-H组和W-S组GTT和ITT曲线下面积、HOMA-IR、血清TG、FFA显著升高、p-AKT和GLUT4蛋白表达显著下调（P<0.05）。W-H组小鼠FBG、GTT和ITT曲线下面积、FINS、HOMA-IR、 TG、PI3K、p-AKT、GLUT4蛋白表达无明显变化。结论plin1-/-诱导小鼠IR程度与高脂饮食喂养的小鼠相当，但低于高脂饮食+STZ诱导的小鼠，高脂饮食喂养的plin1-/-小鼠IR程度大于plin1-/-小鼠。[营养学报，2024,46（2）:171-176 ]

关键词：围脂滴蛋白基因敲除胰岛素抵抗

猫棒束孢联合环磷酰胺对H22荷瘤小鼠的治疗作用

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中国实验动物学报 2024年第3期32卷 362-368页

作者：史晓伟陈静静余国彦张艺尹陈丽霞赵莉莉杨永明王靖阎磊杨喜花山西医科大学公共卫生学院太原030001 山西医科大学附属肿瘤医院实验动物中心太原030013

目的研究冬虫夏草来源的猫棒束孢(Isaria felina,IF)联合环磷酰胺(cyclophosphamide, CTX)对肝癌H22荷瘤小鼠的治疗作用。方法建立H22荷瘤小鼠模型,随机分组,设正常对照组(NC group,蒸馏水)、模型对照组(MC group,蒸馏水)、CTX组(CTX ... 详细信息

目的研究冬虫夏草来源的猫棒束孢(Isaria felina,IF)联合环磷酰胺(cyclophosphamide, CTX)对肝癌H22荷瘤小鼠的治疗作用。方法建立H22荷瘤小鼠模型,随机分组,设正常对照组(NC group,蒸馏水)、模型对照组(MC group,蒸馏水)、CTX组(CTX group, 25 mg/kg)、IF组(IF group, 400 mg/kg)和IF+CTX组(IF+CTX group, IF 400 mg/kg+CTX 25 mg/kg),每组5只小鼠;蒸馏水、IF灌胃给药,CTX腹腔注射给药,连续给药10 d。实验结束后,计算各组小鼠平均肿瘤体积和瘤重、抑瘤率、q值、免疫器官脏器指数;检测血常规和血清细胞因子含量;观察肿瘤组织苏木精-伊红(HE)染色病理形态变化。结果各给药组小鼠的肿瘤体积和重量均显著低于MC组(P<0.05)。CTX组、IF组、IF+CTX组小鼠的抑瘤率分别为49.3%、34.2%、72.8%,q值为1.09。IF+CTX组白细胞(WBC)、淋巴细胞(Lymph)、血小板(PLT)数量显著高于CTX组(P<0.05)。MC组小鼠的脾指数显著高于NC组,IF+CTX组小鼠脾指数显著低于MC组(P<0.05)。MC组小鼠的血清IFN-γ水平显著低于NC组,IF组和IF+CTX组的IFN-γ水平显著高于MC组和CTX组(P<0.05)。MC组肿瘤细胞生长状态良好,数量多,排列紧密;CTX组、IF组和IF+CTX组肿瘤组织可见肿瘤细胞排列松散,多处肿瘤细胞灶性坏死,坏死细胞核固缩碎裂。结论 IF和CTX联用对H22荷瘤小鼠有相加的抑瘤作用,可减轻小鼠的免疫功能抑制,具有免疫调节功能。

关键词：猫棒束孢 H22荷瘤小鼠联合给药免疫调节

基于生物信息学分析阿尔茨海默病相关多脑区免疫机制及治疗中药预测

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药物评价研究 2024年第7期 1520-1528页

作者：宋晓娜高耀王晓堂陈文璐闫晓如范炤宋国华山西医科大学基础医学院山西医科大学第一医院精神卫生科山西医科大学实验动物中心山西医科大学转化医学研究中心

目的利用生物信息学技术筛选阿尔茨海默病（AD）不同脑区差异表达基因，探讨各脑区的免疫机制，以预测潜在的治疗中药。方法从GEO数据库获得AD的样本数据，进行差异表达基因（DEGs）分析及加权基因共表达网络分析（WGCNA），对各脑区... 详细信息

目的利用生物信息学技术筛选阿尔茨海默病（AD）不同脑区差异表达基因，探讨各脑区的免疫机制，以预测潜在的治疗中药。方法从GEO数据库获得AD的样本数据，进行差异表达基因（DEGs）分析及加权基因共表达网络分析（WGCNA），对各脑区最相关的模块进行蛋白质-蛋白质相互作用（PPI）网络分析获得核心基因，并使用受试者工作特征曲线（ROC）曲线评估其诊断价值。对差异基因进行免疫通路富集分析，并使用CIBERSORT算法分析免疫细胞浸润模式，通过Coremine Medical筛选治疗AD的潜在中药。结果大脑的内嗅皮层（EC）区有3 280个差异基因、海马体（HIP）区有1 591个差异基因、内侧颞回（MTG）区有3 995个差异基因、后扣带（PC）区有2 056个差异基因、额上回（SFG）区有907个差异基因、初级视觉皮层（VCX）区有1 480个差异基。其中EC与VCX区与blue模块相关性高、HIP与PC区与turquoise模块相关性高、MTG、SFG别与绿色和黄色模块相关性高。PPI网络显示EC区有4个Hub基因，HIP区有13个Hub基因，MTG区有4个Hub基因，PC区有9个Hub基因，SFG区有17个Hub基因，VCX区有13个Hub基因。不同脑区富集有不同免疫通路的模块。通过基因映射到姜黄为治疗AD的潜在中药，其映射到EP300、PPARG、CCND1、GSK3B、BCL2、EGFR、KDR、MYC和IL1B等基因上。结论 AD患者在不同脑区表现出多样化的免疫途径，这种差异与AD发病机制紧密相连。姜黄有望作为治疗AD的潜在中药。

关键词：阿尔茨海默病生物信息学中药筛选免疫细胞浸润姜黄

中国地鼠口腔颊囊鳞癌组织的非靶代谢组学分析

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实用口腔医学杂志 2024年

作者：张锐虎王渊续国强高继萍宋国华陈朝阳轩瑞晶山西省实验动物与人类疾病动物模型重点实验室山西医科大学实验动物中心山西医科大学基础医学院微生物与免疫学教研室

目的:探讨口腔鳞状细胞癌(OSCC)发病的代谢基础及相关分子机制。方法:将20只中国地鼠分为模型组和对照组(n=20)采用化学诱导法建立颊囊黏膜鳞癌模型;色谱-质谱联用鉴定2组鼠颊囊的代谢物,以正交偏最小二乘判别分析模型的变量权重值>1和P... 详细信息

目的:探讨口腔鳞状细胞癌(OSCC)发病的代谢基础及相关分子机制。方法:将20只中国地鼠分为模型组和对照组(n=20)采用化学诱导法建立颊囊黏膜鳞癌模型;色谱-质谱联用鉴定2组鼠颊囊的代谢物,以正交偏最小二乘判别分析模型的变量权重值>1和P<0.05为标准,筛选两组样本中的差异代谢物,进行KEGG通路富集分析。结果:二甲基苯并蒽-石蜡油溶液涂抹18周,模型组地鼠颊囊有弥漫性白斑分布、乳头状突起明显,病理学诊断为高分化鳞癌;脂类和类脂质分子是癌变组织和正常组织的主要差异代谢物;不饱和脂肪酸生物合成重编程、胆固醇积累、色氨酸分解代谢增强、天冬氨酸上调、嘧啶和嘌呤合成增加等是OSCC发生发展中的重要代谢特征。结论:靶向这些代谢途径的分子干预,有望抑制OSCC发病和进展。

关键词：中国地鼠口腔颊囊鳞癌组织非靶代谢组

基于聚乙烯亚胺的还原响应型胶束提高反义寡核苷酸转染效率及其体内抗肿瘤作用研究

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中国现代应用药学 2024年第9期41卷 1159-1167页

作者：杨爽潘飞贺蓓蓓石敏飞何翠萍郑彬山西医科大学基础医学院山西医科大学药学院

目的在支化聚乙烯亚胺(polyethyleneimine,PEI)基础上，合成一种含有二硫键的聚合物PEI-ss-PEG2000-DSPE，并将其制备成阳离子胶束(P-ss-PD)，在人乳腺癌细胞株中考察P-ss-PD胶束降低细胞毒性，提高反义寡核苷酸(Antisense oligonucleo... 详细信息

目的在支化聚乙烯亚胺(polyethyleneimine,PEI)基础上，合成一种含有二硫键的聚合物PEI-ss-PEG2000-DSPE，并将其制备成阳离子胶束(P-ss-PD)，在人乳腺癌细胞株中考察P-ss-PD胶束降低细胞毒性，提高反义寡核苷酸(Antisense oligonucleotides,ASO)转染效率的能力，并对P-ss-PD胶束在裸鼠体内的抗肿瘤效果进行研究。方法以二硫键为连接臂，将PEG2000-DSPE接枝到支化PEI上合成PEI-ss-PEG2000-DSPE。采用乙醇注入法制备P-ss-PD胶束，与ASO结合后得到P-ss-PD/ASO纳米复合物。采用激光粒度分析仪测定不同质量比的P-ss-PD/ASO纳米复合物的粒径和zeta电位。采用琼脂糖凝胶阻滞试验考察P-ss-PD/ASO纳米复合物的结合度，确定最佳质量比；同时考察P-ss-PD胶束的还原响应能力。采用CCK8试剂盒检测P-ss-PD胶束的细胞毒性。使用流式细胞仪和高内涵细胞成像分析系统考察P-ss-PD胶束在MDAMB-231细胞中的转染效率。建立MDA-MB-231荷瘤裸鼠模型，考察P-ss-PD胶束的抑瘤活性。结果当质量比为300∶1时，P-ss-PD/ASO纳米复合物粒径最小且稳定性较好，平均粒径为(58.90±4.08)nm，平均zeta电位值为(16.80±1.23)mV，形态为均一的球形。P-ss-PD/ASO纳米复合物具有还原响应力，在高度还原性条件下能够释放装载的ASO。在体外细胞实验中，与未修饰的PEI相比，P-ss-PD胶束的细胞毒性显著降低，细胞转染效率显著提高。在体内动物实验中，P-ss-PD/ASO纳米复合物对荷瘤裸鼠的肿瘤生长抑制率>50%。结论本研究制备的P-ss-PD胶束是一种低毒高效的非病毒载体，具有还原响应释放特性，在ASO药物递送方面具有应用前景。

关键词：聚乙烯亚胺还原响应反义寡核苷酸转染抗肿瘤

Gli2调控Hedgehog通路活化对Tca8113细胞增殖、转移和上皮间充质转化的影响

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中国比较医学杂志 2024年第3期34卷 1-9页

作者：刘茂林王晓堂宋晓娜马云辉常潇琪宋国华山西医科大学资产管理部太原030001 山西医科大学实验动物中心实验动物与人类疾病动物模型山西省重点实验室太原030001

目的本研究通过在细胞水平检测Gli2对口腔癌细胞Tca8113增殖、生长、迁移和侵袭的影响,明确Gli2调控口腔癌细胞迁移和侵袭的分子机制。方法本研究利用siRNA抑制Tca8113细胞中Gli2的表达,通过CCK-8、平板克隆以及transwell小室实验分... 详细信息

目的本研究通过在细胞水平检测Gli2对口腔癌细胞Tca8113增殖、生长、迁移和侵袭的影响,明确Gli2调控口腔癌细胞迁移和侵袭的分子机制。方法本研究利用siRNA抑制Tca8113细胞中Gli2的表达,通过CCK-8、平板克隆以及transwell小室实验分别检测Gli2对Tca8113细胞增殖、生长、迁移与侵袭的影响。进一步利用qRT-PCR与Western blot实验探究Gli2调控Tca8113细胞恶性增殖和转移机制。结果口腔癌细胞Tca8113中Gli2的mRNA和蛋白表达升高。干扰Gli2表达可抑制Tca8113细胞增殖、生长、迁移及侵袭。进一步研究发现干扰Gli2表达可抑制Hedgehog(Hh)通路关键因子的mRNA与蛋白表达。此外,干扰Gli2表达可显著影响上皮间充质转化(epithelial mesenchymal transformation, EMT)通路关键因子的mRNA与蛋白表达。结论口腔癌病变过程中Gli2被异常激活,干扰Gli2表达显著抑制口腔癌细胞的增殖、生长、迁移和侵袭。Gli2通过调控Hh通路与EMT通路,进而影响口腔癌细胞的迁移和侵袭。本研究为阐明口腔癌的发病机制提供新思路,并为口腔癌的临床治疗提供新视角。

关键词： Tca8113细胞口腔癌 Gli2 细胞迁移细胞侵袭 Hedgehog通路上皮间充质转化

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人工智能在法医学研究领域的文献可视化分析

法医学杂志 2024年第1期40卷 1-14页

作者：董祎铭赵春梅陈念念罗丽李展鹏王利凯李晓倩任廷淦高彩荣郭相杰山西医科大学法医学院山西晋中030600 山西医科大学第一临床医学院山西太原030000 山西医科大学转化医学研究中心山西太原030000 临床决策研究大数据山西省重点实验室山西太原030000

目的分析2012—2022年Web of Science核心合集数据库中人工智能在法医学研究领域的文献,探索该领域的研究热点和发展趋势。方法通过文献计量工具CiteSpace对2012—2022年Web of Science核心合集数据库关于人工智能在法医学领域的736... 详细信息

目的分析2012—2022年Web of Science核心合集数据库中人工智能在法医学研究领域的文献,探索该领域的研究热点和发展趋势。方法通过文献计量工具CiteSpace对2012—2022年Web of Science核心合集数据库关于人工智能在法医学领域的736篇文献进行可视化分析,对相关文献的作者、机构、国家(地区)、标题、期刊、关键词、引用的参考文献等信息进行分析。结果 736篇文献来自69个国家(地区)289家机构的355位作者,发表于220种期刊,发文量呈逐年上升趋势。其中美国发文量最高,中国位列第二,机构中司法鉴定科学研究院发文量最高。Forensic Science International、Journal of Forensic Sciences、International Journal of Legal Medicine在发表文献和被引频次中均排名靠前。对关键词进行分析发现,人工智能在法医学领域的研究热点主要集中在利用人工智能技术进行性别年龄推断、死亡原因分析、死亡时间推断、个体识别等方面。结论应注重国际合作与机构间合作,加强交叉学科间的研究。探索先进的人工智能技术应用于法医各学科领域将是未来研究的热点与方向。

关键词：法医学文献计量学人工智能 CiteSpace Web of Science 可视化分析

基因编辑技术在免疫缺陷动物模型研究中的应用进展

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中国比较医学杂志 2024年第5期34卷 134-143页

作者：马云辉王晓堂高继萍宋国华山西医科大学实验动物中心实验动物与人类疾病动物模型山西省重点实验室太原030001

免疫缺陷动物模型在临床前研究中发挥重要作用,是现代生物医学研究领域的重要实验工具,广泛应用于免疫学、遗传学、肿瘤学与微生物学等研究领域。基因编辑是针对生物体基因组进行靶向修饰的技术,从出现到应用,极大推动了生物医学研究领... 详细信息

免疫缺陷动物模型在临床前研究中发挥重要作用,是现代生物医学研究领域的重要实验工具,广泛应用于免疫学、遗传学、肿瘤学与微生物学等研究领域。基因编辑是针对生物体基因组进行靶向修饰的技术,从出现到应用,极大推动了生物医学研究领域的发展。基因编辑技术主要包括HEs、ZFNs、TALENs与CRISPR/Cas9系统。目前,研究者已利用该技术建立了多种类型的免疫缺陷动物模型,各有其优势和局限性。近年来,大量研究证实人源化免疫缺陷动物模型能够精准模拟癌细胞、药物以及免疫系统在人体内的作用,可以更好地模拟人类疾病,广泛用于研究人类免疫生物学及人类复杂疾病的潜在机制。本文对利用基因编辑技术构建免疫缺陷动物模型的研究应用进展进行综述,对基因编辑技术在免疫缺陷动物模型制备中存在的问题及优化策略深入探讨,并对其未来发展前景进行了展望,以期为研究者选用和建立免疫缺陷动物模型提供参考。

关键词：免疫缺陷动物模型基因编辑技术锌指核酸酶转录激活因子样效应核酸酶 CRISPR/Cas9