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甘草酚调节肠道菌群及其代谢产物激活自噬拮抗5-氟尿嘧啶致小鼠结肠损伤的机制研究

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营养学报 2024年

作者：路上云徐佳丽许杨张会霞刘子玲邱服斌山西医科大学公共卫生学院营养与食品卫生学教研室

目的探究甘草酚（glycyrol， GC）是否通过调节肠道菌群及其代谢产物激活自噬减轻结肠损伤。方法雄性Balb/C小鼠（6 w龄）适应性喂养1 w后，随机分为对照组(N)：灌胃生理盐水14 d+腹腔注射生理盐水3 d；结肠损伤模型组(5-FU)：灌胃生... 详细信息

目的探究甘草酚（glycyrol， GC）是否通过调节肠道菌群及其代谢产物激活自噬减轻结肠损伤。方法雄性Balb/C小鼠（6 w龄）适应性喂养1 w后，随机分为对照组(N)：灌胃生理盐水14 d+腹腔注射生理盐水3 d；结肠损伤模型组(5-FU)：灌胃生理盐水14 d+腹腔注射5-氟尿嘧啶（5-fluorouracil，5-FU，100 mg/kg) 3d；甘草酚干预组(GC)：灌胃GC (20 mg/kg) 14d+腹腔注射生理盐水3d；GC+5-FU组：灌胃GC （20 mg/kg）14d+腹腔注射5-FU (100 mg/kg) 3d；抗生素组(AB) ：灌胃抗生素（200 μL）14d+腹腔注射生理盐水3d；GC+5-FU+AB组：灌胃抗生素（200 μL）14d+灌胃GC (20 mg/kg) 14d+腹腔注射5-FU（100 mg/kg）3d，每组8只。采用HE染色、Western blot分析等，确定GC对小鼠结肠损伤的保护作用；通过16S rDNA高通量测序、代谢组学等分析GC对小鼠肠道菌群结构、肠道菌群代谢产物、结肠自噬水平的影响；利用相关性分析，阐明GC是否通过调节肠道菌群及其代谢产物激活自噬保护结肠损伤的作用机制。结果与5-FU组相比，GC可显著增加小鼠的体重、摄食量，提高结肠超氧化物歧化酶 (superoxide Dismutase，SOD)、过氧化氢酶（catalase，CAT）活力，显著降低结肠白细胞介素-1β (interleukin 1 beta， IL-1β)、白细胞介素-6 (interleukin 6， IL-6) 和肿瘤坏死因子-α (tumor necrosis factor alpha， TNF-α)的表达水平，并明显减轻小鼠结肠组织病理学损伤；GC还可以改善小鼠肠道菌群结构，上调厚壁菌门和弯曲菌门的丰度、下调变形菌门和拟杆菌门的丰度，恢复拟杆菌科、毛螺旋菌科和普雷沃氏菌科等的异常变化，并显著下调胆钙化醇等6种肠道菌群代谢产物的水平，明显上调TNK等8种肠道菌群代谢产物的水平；相关性分析结果显示，多种肠道菌群代谢产物与小鼠结肠自噬水平有相关性。结论 GC激活自噬减轻结肠损伤与其调节肠道菌群及其代谢产物有关。

关键词：甘草酚结肠自噬肠道菌群代谢产物

抑制Hippo-YAP信号通路的激活对维生素D缺乏所致大鼠不良妊娠结局的改善作用

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营养学报 2024年第1期46卷 34-39页

作者：乔瑜王煚楠韩雨孙晓霞邱服斌山西医科大学公共卫生学院营养与食品卫生学教研室太原030001

目的探讨抑制Hippo-YAP信号通路的激活是否能改善维生素D缺乏(vitamin D deficiency,VDD)所导致的胎盘及胚胎发育不良。方法按照体质量将4w龄SD雌性大鼠随机分为对照组(Ctrl)、VD缺乏组(VDD)、VD缺乏阴性对照组(VDD+vehicle)与VD缺乏抑... 详细信息

目的探讨抑制Hippo-YAP信号通路的激活是否能改善维生素D缺乏(vitamin D deficiency,VDD)所导致的胎盘及胚胎发育不良。方法按照体质量将4w龄SD雌性大鼠随机分为对照组(Ctrl)、VD缺乏组(VDD)、VD缺乏阴性对照组(VDD+vehicle)与VD缺乏抑制剂组(VDD+XMU-MP-1),Ctrl组采用标准饲料喂养,VDD组采用VD缺乏饲料喂养,喂养8 w后雌雄合笼。VDD+vehicle组与VDD+XMU-MP-1组在妊娠0-10 d(GD 0-10)进行腹腔注射。结果VD缺乏8 w后,与Ctrl组相比,VDD组血清25(OH)D水平均降低,且Ctrl组与VDD组、VDD+vehicle组间差异均有统计学差异(P<0.05);GD18时,与Ctrl组相比,VDD组血清25(OH)D水平略有降低。GD18时,与Ctrl组相比,VDD组、VDD+vehicle组(P<0.01)及VDD+XMU-MP-1组(P<0.01)胎盘25(OH)D水平均降低;与Ctrl组相比,其他三组胎盘1,25(OH)2D水平均有所降低,且Ctrl组与VDD+vehicle组、VDD+XMU-MP-1组均有统计学差异(P<0.01)。与Ctrl组相比,VDD组胎盘(P<0.01)、胚胎(P<0.05)重量明显下降,与VDD+vehicle组相比,VDD+XMU-MP-1组胎盘重量有所增加,组间有统计学差异(P<0.05),而胚胎重量略有增加;与Ctrl组相比,VDD组胎盘直径、胚胎冠臀长明显降低,且均有统计学差异(P<0.01),与VDD+vehicle组相比,VDD+XMU-MP-1组胎盘直径(P<0.05)、胚胎冠臀长(P<0.01)有所增加。结论维生素D缺乏对胚胎发育的损害作用涉及胎盘组织Hippo-YAP通路的激活,Hippo-YAP信号通路可能是预防维生素D缺乏所致不良妊娠结局的潜在靶点。

关键词：维生素D(VD) Hippo-YAP信号通路妊娠结局胎盘发育

2016—2022年深圳市肠道病毒71型流行情况及VP1区基因特征分析

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中华微生物学和免疫学杂志 2024年第6期44卷 519-524页

作者：李凯陈龙何雅青孟君杨洪吕子全姚相杰张海龙山西医科大学公共卫生学院营养与食品卫生学教研室太原030001 深圳市疾病预防控制中心深圳518055

目的了解2016—2022年深圳市普通手足口病(HFMD)病例中肠道病毒71型(EV71)流行情况及VP1区基因特征。方法收集2016—2022年深圳市哨点医院普通HFMD样本,采用荧光RT-PCR方法筛选EV71阳性样本,并将筛选出的38份样本进行VP1序列全长扩增和... 详细信息

目的了解2016—2022年深圳市普通手足口病(HFMD)病例中肠道病毒71型(EV71)流行情况及VP1区基因特征。方法收集2016—2022年深圳市哨点医院普通HFMD样本,采用荧光RT-PCR方法筛选EV71阳性样本,并将筛选出的38份样本进行VP1序列全长扩增和测序,进而运用DNAStar和MEGA 6等生物信息学软件对其进行比对和系统进化分析。结果2016—2022年深圳市哨点医院中HFMD患者EV71感染例数从2016年的136例降低到2022年的0例,其中2018—2019年EV71感染例数相比2016—2017年下降了96.3%(257/267),2020—2022年EV71感染例数均降为0,而在此期间,HFMD患者中EV71疫苗接种率从6.4%上升到39.6%;进化分析显示,2016—2022年深圳市的38株EV71之间核苷酸同源性为91.8%~99.9%,氨基酸同源性为98.3%~100.0%,均属于C4a亚型;其中有26株属于本地流行株,11株为外省输入株,与海南、云南、四川、天津、河南、吉林等地流行株亲缘关系较近,还有1株2017年毒株属于境外输入,与美国流行株OP207969-USA-2017亲缘关系最近;进一步将深圳市2016—2022年EV71流行株与EV71重症株进行比较,发现4个与重症相关的氨基酸突变位点,分别为R22H、K43R、I249V、T289A。结论2016—2022年深圳市EV71流行株均属于C4a亚型,随着疫苗接种率提高,其感染病例数呈下降趋势。同时深圳市EV71毒株分布呈现本地株大幅度减少,外地输入株为主的特点。深圳市2016—2022年EV71样本毒株中共有4个与重症相关的氨基酸突变位点,其中22R、289T位于VP1的N端和C端,与EV71吸附靶向细胞有关,43R位点与Annexin2蛋白结合有关,会增强细胞结合力。

关键词：手足口病肠道病毒71型 VP1基因突变基因型

神经元-星形胶质细胞代谢偶联在糖尿病认知障碍中的作用研究进展

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中华糖尿病杂志 2024年第7期16卷 819-822页

作者：谢皓然赵海峰山西医科大学公共卫生学院营养与食品卫生学教研室、煤炭环境致病与防治教育部重点实验室太原030001

糖尿病作为最常见的代谢性疾病之一,可损害包括大脑在内的多个器官,已成为全球范围内重要的公共卫生问题。约60%~70%的糖尿病患者存在认知障碍,且糖尿病引起认知障碍与脑组织中物质代谢紊乱密切相关。星形胶质细胞作为大脑中最丰富的胶... 详细信息

糖尿病作为最常见的代谢性疾病之一,可损害包括大脑在内的多个器官,已成为全球范围内重要的公共卫生问题。约60%~70%的糖尿病患者存在认知障碍,且糖尿病引起认知障碍与脑组织中物质代谢紊乱密切相关。星形胶质细胞作为大脑中最丰富的胶质细胞,在糖代谢、脂质代谢、氨基酸代谢及神经营养因子代谢等多方面支持神经元的正常功能,该文对糖尿病认知障碍中的神经元-星形胶质细胞代谢偶联异常进行综述,为精准防治糖尿病认知障碍提供新靶点。

关键词：糖尿病神经元-星形胶质细胞代谢偶联胰岛素抵抗葡萄糖代谢脂质代谢氨基酸代谢

茶多酚通过mTOR/PINK1线粒体自噬信号通路改善衰老2型糖尿病大鼠肾脏足细胞损伤

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营养学报 2024年第3期46卷 255-262页

作者：冯文娟谢皓然陈爽直王希李学敏赵海峰山西医科大学公共卫生学院营养与食品卫生学教研室山西省疾病预防控制中心毒理科

目的探讨茶多酚（TP）通过mTOR/PINK1线粒体自噬信号通路改善衰老2型糖尿病（T2DM）大鼠肾脏足细胞损伤的机制。方法适应性喂养大鼠1 w，根据体重随机分为对照组（Con组, n=10）和衰老T2DM造模组（n=30）。造模组饲喂高糖高脂饲料并每... 详细信息

目的探讨茶多酚（TP）通过mTOR/PINK1线粒体自噬信号通路改善衰老2型糖尿病（T2DM）大鼠肾脏足细胞损伤的机制。方法适应性喂养大鼠1 w，根据体重随机分为对照组（Con组, n=10）和衰老T2DM造模组（n=30）。造模组饲喂高糖高脂饲料并每d腹腔注射D-半乳糖，Con组饲喂普通饲料并每d腹腔注射等量生理盐水。4 w后，造模组一次性腹腔注射25 mg/kg链脲佐菌素（STZ）,Con组腹腔注射等量的柠檬酸缓冲液。2 w后，测定空腹血糖（FBG）≥16.7 mmol/L即判定为T2DM大鼠造模成功。将成模的大鼠根据FBG随机分为衰老T2DM组（model组）、300 mg/kg TP组（TP组）及3 mg/kg罗格列酮组（RSG组），每组各10只。灌胃干预8 w后，血糖仪检测FBG,Western blot检测肾脏P53的表达；拍摄肾脏图片并记录肾脏质量，计算肾脏指数，CBB法测定大鼠24 h UP含量；透射电镜观察肾脏足细胞微观结构；Western Blot检测大鼠肾脏Nephrin、LC3、P62、HSP60、mTOR、p-mTOR和PINK1的表达。结果干预8w后，与Con组相比，Model组大鼠FBG以及肾脏P53的表达水平明显升高（P0.05）。结论 TP可改善衰老T2DM模型大鼠肾脏足细胞损伤，其作用机制可能与改善mTOR/PINK1信号通路介导的线粒体自噬有关。[营养学报，2024,46(3):255-262]

关键词：茶多酚衰老T2DM 肾脏足细胞线粒体自噬 mTOR/PINK1

广州市妇女孕期膳食质量与胎儿免疫功能的关系

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卫生研究 2024年第3期53卷 382-388页

作者：唐薇张智玮全春霞毛丽梅南方医科大学公共卫生学院营养与食品卫生学系广州510515

目的了解广州市孕妇孕期膳食质量情况,探究孕期膳食指数与胎儿免疫功能的关系。方法于2010年9月—2011年2月招募在广州市越秀区和白云区妇幼保健院进行常规体检的孕期妇女作为研究对象,采用膳食问卷3天24小时膳食回顾法调查孕期膳食情况... 详细信息

目的了解广州市孕妇孕期膳食质量情况,探究孕期膳食指数与胎儿免疫功能的关系。方法于2010年9月—2011年2月招募在广州市越秀区和白云区妇幼保健院进行常规体检的孕期妇女作为研究对象,采用膳食问卷3天24小时膳食回顾法调查孕期膳食情况,通过问卷收集孕妇的一般人口学信息,分娩时收集新生儿脐血,实验室检测脐血免疫球蛋白和免疫细胞因子水平。采用孕期膳食质量指数(diet quality index for pregnancy,DQI-P)、孕期膳食平衡指数(dietary balance index for pregnancy,DBI-P)和替代地中海膳食评分(alternate Medierranean diet score,aMED)对孕期膳食质量进行评价。采用多元线性回归分析等方法探究孕期膳食指数与胎儿免疫功能的关系。结果研究对象DQI-P评分总分均值为55.8±10.0,食物总体多样性和蛋白质食物来源多样性平均得分高达12.0±2.4和4.8±0.7,产能营养素供能比和脂肪酸供能比平均得分只有0.3±1.0和0.4±1.0,提示该人群孕期膳食多样性较好,但膳食充足性、适宜度以及平衡性不佳。DBI-P总分为-19.2±9.4;正端分为4.6±2.9,仅有7.2%的研究对象孕期膳食存在中高度摄入过量问题;负端分为23.9±7.9,提示该人群膳食处于中度摄入不足状态;膳食质量距分值为28.5±7.1,仅有0.6%的研究人群整体膳食情况较为均衡,67.9%的孕妇存在中高度摄入不平衡问题。aMED总分为4.9±1.3,豆类和坚果食物摄入量少于人群中位数的比例分别为62.5%和79.1%,提示该人群豆类和坚果食物摄入不足。校正孕妇年龄、胎次、产次、孕前BMI、孕期增重、分娩方式等混杂因素后,多元线性回归分析显示孕期DQI-P与胎儿IgG呈正相关,与白细胞介素-6呈负相关(β=0.143,β=-0.155,P<0.05);DBI-P与白细胞介素-6呈负相关(β=-0.177,P<0.01);aMED与干扰素-γ呈负相关(β=-0.161,P<0.01)。结论广州市孕期妇女膳食质量较低,膳食结构不平衡。较高的孕期膳食质量能促进胎儿免疫系统发育,提高胎儿免疫功能水平。

关键词：膳食质量膳食评价指数胎儿免疫功能

尿中多环芳烃羟基代谢物浓度与睡眠质量的关联性研究

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环境与职业医学 2024年第3期41卷 303-310页

作者：任琴李新张志艳王馨宋展飞张红梅山西医科大学公共卫生学院环境卫生学教研室山西太原030001 太原钢铁有限公司总医院放射卫生科山西太原030003

[背景]睡眠是人体必需的生理活动,研究发现睡眠质量受空气污染的影响。多环芳烃(PAHs)作为空气污染物中的神经毒性化合物,其与睡眠质量的关联尚不明确。[目的]探讨PAHs暴露与睡眠质量之间的关联性,为改善睡眠质量提供基础资料。本研究... 详细信息

[背景]睡眠是人体必需的生理活动,研究发现睡眠质量受空气污染的影响。多环芳烃(PAHs)作为空气污染物中的神经毒性化合物,其与睡眠质量的关联尚不明确。[目的]探讨PAHs暴露与睡眠质量之间的关联性,为改善睡眠质量提供基础资料。本研究采用横断面调查,以职业性接触PAHs的焦化厂工人(632名)为接触组,以该企业能源动力厂工人(477名)为对照组,所有工人均为三班倒轮班制。问卷调查收集其性别、工龄、年龄、教育程度、吸烟情况、饮酒情况、食用油炸食品情况、做饭次数、烹饪燃料等基本信息;采集夜班后晨起中段尿,用气相色谱-质谱联用法(GC-MS)检测尿中8种PAHs代谢物(OH-PAHs)浓度;用匹兹堡睡眠质量指数量表(PSQI)评估工人的睡眠质量,PSQI得分越高,表示睡眠质量越差。采用多元线性回归模型、贝叶斯核机回归(BKMR)、分位数g分析工人尿中OH-PAHs水平与睡眠质量之间的关联性。[结果]接触组OH-PAHs浓度的中位数及第25、75百分位数[M(P_(25),P_(75))为88.84(46.27,151.96)μg·L^(-1)],高于对照组的浓度[54.33(24.86,97.97)μg·L^(-1)];接触组PSQI总分(x±s)(5.16±3.84)高于对照组(4.60±3.17)。多元线性回归分析发现:经自然对数转换后的8种OH-PAHs浓度总和(lnΣ_(8)OH-PAHs)每上升一个单位,PSQI总分升高0.3646(95%CI:0.1337~0.5955);lnΣOH-PAHs_(低环)每上升一个单位,PSQI总分升高0.2954(95%CI:0.0941~0.4967)。BKMR分析表明:当lnΣ_(8)OH-PAHs浓度增加时,PSQI总分逐渐上升;分位数g显示lnΣ_(8)OH-PAHs浓度每上升一个四分位数,PSQI总分增加0.4062%(95%CI:0.1176%~0.6949%)。[结论]接触组工人尿OH-PAHs浓度较高,睡眠质量差,OH-PAHs浓度与工人睡眠质量呈负相关。

关键词：多环芳烃羟基代谢物睡眠质量贝叶斯核机回归分位数g

METTL3介导的PDK1 mRNA m^(6)A修饰通过Akt/mTOR信号通路促进肺上皮细胞增殖

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中国生物化学与分子生物学报 2024年第7期40卷 934-946页

作者：靳艾李梦宇孙青竹山西医科大学公共卫生学院营养与食品卫生学教研室太原030001 山西医科大学营养与食品科学研究所太原030001 山西医科大学煤炭环境致病与防治教育部重点实验室太原030001 山西医科大学黄河流域生态公共卫生安全研究中心西北农林科技大学动物科技学院动物科学系陕西杨凌712100

腺苷N6-位点甲基化(m^(6)A)在细胞增殖过程中发挥重要作用。RNA甲基转移酶3(METTL3)作为催化m^(6)A关键酶,其介导m^(6)A修饰在肺上皮细胞增殖中的作用机制尚不明确。本研究旨在探讨METTL3介导m^(6)A修饰调控肺上皮细胞增殖的效应及机制... 详细信息

腺苷N6-位点甲基化(m^(6)A)在细胞增殖过程中发挥重要作用。RNA甲基转移酶3(METTL3)作为催化m^(6)A关键酶,其介导m^(6)A修饰在肺上皮细胞增殖中的作用机制尚不明确。本研究旨在探讨METTL3介导m^(6)A修饰调控肺上皮细胞增殖的效应及机制。结果显示,在肺上皮细胞中敲低METTL 3显著抑制细胞生长,而过表达METTL3则促进了细胞增殖(P<0.05)。进一步的蛋白质免疫印迹结果显示,细胞生长和增殖的关键蛋白质PCNA在METTL 3敲降的肺上皮细胞中蛋白质水平的表达显著下调,并且Akt以及mTOR的磷酸化水平显著降低(P<0.05)。细胞免疫荧光结果发现,METTL 3敲降的肺上皮细胞中m^(6)A修饰水平显著降低(P<0.05)。实时荧光定量PCR及蛋白质免疫印迹结果表明,Akt-mTOR信号通路上游调控分子PDK1的mRNA和蛋白质表达水平在METTL 3敲降的肺上皮细胞中显著下降(P<0.05)。机制上,m^(6)A-IP-qPCR和RIP-qPCR结果进一步表明,METTL3催化PDK 1 mRNA的3′UTR区域m^(6)A修饰,进而被YTH N6-甲基腺苷RNA结合蛋白1(YTHDF1)识别,增强其mRNA的稳定性。总之,本研究揭示了METTL3通过增强PDK1 m^(6)A修饰,进而激活Akt-mTOR信号通路,促进细胞增殖。本研究为METTL3在上皮细胞增殖中的新角色提供了证据,同时为治疗肺上皮细胞损伤修复提供了新的治疗靶点。

关键词：甲基转移酶3 RNA m^(6)A修饰细胞增殖肺上皮细胞磷酸肌醇依赖性蛋白激酶-1

甘草酚和5-FU联合处理对结肠癌细胞增殖、凋亡及化疗敏感性的影响

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山西医科大学学报 2024年第4期55卷 419-426页

作者：许杨徐佳丽张会霞路上云邱服斌山西医科大学公共卫生学院营养与食品卫生学教研室太原030001

目的探讨甘草酚(GC)和5-FU联合处理对结肠癌细胞的增殖、凋亡及化疗敏感性的影响及机制。方法以人结肠癌细胞系HCT116为研究对象,细胞分别以0,2.5,5,10,15,20μmol/L 5-FU以及0,5,10,20,30,40μmol/L GC处理细胞48 h,用结晶紫染色法计... 详细信息

目的探讨甘草酚(GC)和5-FU联合处理对结肠癌细胞的增殖、凋亡及化疗敏感性的影响及机制。方法以人结肠癌细胞系HCT116为研究对象,细胞分别以0,2.5,5,10,15,20μmol/L 5-FU以及0,5,10,20,30,40μmol/L GC处理细胞48 h,用结晶紫染色法计算细胞存活率以确定最佳处理浓度。HCT116细胞分别以10μmol/L 5-FU、20μmol/L GC及10μmol/L 5-FU+20μmol/L GC处理12,24,36,48,60 h,用结晶紫染色法计算细胞存活率以确定最佳处理时间。HCT116细胞分别常规培养(对照组)、10μmol/L 5-FU、20μmol/L GC及10μmol/L 5-FU+20μmol/L GC处理48 h,采用结晶紫染色法测定细胞存活率,流式细胞术测定细胞凋亡率,蛋白免疫印迹法检测裂解多聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(cleaved-PARP)、程序性死亡配体1(PD-L1)、磷酸化组蛋白H3(p-Histone H3)和磷酸化蛋白酪氨酸激酶2(p-JAK2)的表达水平。固定5-FU与GC的浓度比例为1∶2,细胞分别以不同浓度的5-FU、GC单独或联合处理细胞48 h,采用Chou-Talalay方程计算协同指数(combination index,CI)评估二者之间的协同效应。结果5-FU和GC抑制细胞增殖的最佳浓度分别为10μmol/L和20μmol/L,5-FU和GC联合处理HCT116细胞抑制增殖的最佳时间为48 h。结晶紫染色结果显示,与对照组相比,5-FU+GC组细胞存活率显著降低(P<0.01);与5-FU组和GC组相比,5-FU+GC组细胞存活率降低,但差异无统计学意义。流式细胞术结果显示,与对照组相比,5-FU+GC组细胞凋亡率显著升高(P<0.01)。协同指数计算结果显示,所有处理组合的CI值均小于1,GC和5-FU的联合处理有协同效应。蛋白免疫印迹结果表明,与对照组相比,5-FU+GC组HCT116细胞中cleaved-PARP表达上调(P<0.05),PD-L1和p-JAK2表达显著下调(P<0.05),p-Histone H3表达显著下调(P<0.01);与5-FU组相比,5-FU+GC组HCT116细胞中cleaved-PARP表达显著上调(P<0.05),p-Histone H3表达显著下调(P<0.01)。结论GC和5-FU联合处理通过下调JAK2的磷酸化水平抑制PD-L1、p-Histone H3的表达,抑制HCT116细胞增殖,诱导细胞凋亡,并增加其化疗敏感性。

关键词：甘草酚结肠癌细胞细胞增殖细胞凋亡化疗敏感性