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独活寄生汤含药血清细胞外囊泡对类风湿关节炎滑膜成纤维细胞的影响

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中国组织工程研究 2025年第23期29卷 4915-4923页

作者：岳进茹张育敏刘静淑步亚男吴婧若陈佳王建茹山西中医药大学基础医学院国家中医药管理局基因表达调控实验室山西省晋中市030606 山西医科大学基础医学院山西省太原市030012

背景:独活寄生汤是治疗类风湿关节炎的经典方剂,但具体作用机制尚不清楚,细胞外囊泡具有细胞间通讯及传递信号的强大功能,可能是该方剂发挥作用的信号载体。目的:探讨独活寄生汤含药血清细胞外囊泡对类风湿关节炎滑膜成纤维细胞增殖、... 详细信息

背景:独活寄生汤是治疗类风湿关节炎的经典方剂,但具体作用机制尚不清楚,细胞外囊泡具有细胞间通讯及传递信号的强大功能,可能是该方剂发挥作用的信号载体。目的:探讨独活寄生汤含药血清细胞外囊泡对类风湿关节炎滑膜成纤维细胞增殖、迁移、侵袭及凋亡的影响。方法:肿瘤坏死因子α体外诱导构建类风湿关节炎滑膜成纤维细胞模型,实验分为5组:正常组、模型组、独活寄生汤含药血清组、独活寄生汤含药血清细胞外囊泡组、生理盐水血清细胞外囊泡组。采用CCK-8法筛选独活寄生汤含药血清及独活寄生汤含药血清细胞外囊泡作用的最佳浓度及时间;ELISA检测细胞上清炎症因子水平;划痕实验检测细胞迁移能力;Transwell实验检测细胞侵袭能力及迁移能力;Hoechst染色检测细胞凋亡情况;qRT-PCR及Western blot检测细胞凋亡相关基因及蛋白表达。结果与结论:(1)独活寄生汤含药血清作用的最佳体积分数为10%,独活寄生汤含药血清细胞外囊泡作用的最佳质量浓度为10 ng/mL,二者作用的最佳时间均为24 h;(2)与模型组相比,独活寄生汤含药血清、独活寄生汤含药血清细胞外囊泡及生理盐水血清细胞外囊泡均能抑制类风湿关节炎滑膜成纤维细胞的炎症因子表达(P<0.05)、划痕愈合(P<0.05)、迁移及侵袭(P<0.05),且独活寄生汤含药血清细胞外囊泡的抑制作用更为突出(P<0.05);(3)独活寄生汤含药血清及独活寄生汤含药血清细胞外囊泡均可促进类风湿关节炎滑膜成纤维细胞的凋亡;(4)与模型组相比,独活寄生汤含药血清、独活寄生汤含药血清细胞外囊泡及生理盐水血清细胞外囊泡均可增加促凋亡因子Caspase-3、Caspase-9、Bax表达(P<0.05),降低抑凋亡因子Bcl-2表达(P<0.05),且独活寄生汤含药血清细胞外囊泡对凋亡相关因子的调节作用更显著。上述实验结果表明独活寄生汤含药血清细胞外囊泡可以抑制类风湿关节炎滑膜成纤维细胞的过度增殖、迁移、侵袭并促进其凋亡。

关键词：独活寄生汤类风湿关节炎滑膜成纤维细胞细胞外囊泡增殖迁移侵袭凋亡

基于线粒体凋亡途径探讨“秩边透水道”针法对弱精子症小鼠生殖功能的影响

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中国针灸 2025年第01期 71-81页

作者：郝健亨常博雅任佳高珍张艳林王海军冀来喜成都中医药大学针灸推拿学院山西中医药大学第二临床学院

目的：观察“秩边透水道”针法对弱精子症小鼠睾丸组织线粒体凋亡途径中关键调控因子的影响，探究其对生殖功能保护作用的可能机制。方法：将30只C57BL/6雄性小鼠随机分成空白组、模型组和针刺组，各10只。模型组和针刺组小鼠给予环磷... 详细信息

目的：观察“秩边透水道”针法对弱精子症小鼠睾丸组织线粒体凋亡途径中关键调控因子的影响，探究其对生殖功能保护作用的可能机制。方法：将30只C57BL/6雄性小鼠随机分成空白组、模型组和针刺组，各10只。模型组和针刺组小鼠给予环磷酰胺（30 mg·kg-1·d-1）腹腔注射7 d制备弱精子症模型。造模成功后针刺组小鼠予“秩边透水道”针法干预，每日1次，每次20 min，共干预2周。观察小鼠一般情况，并记录小鼠造模前、造模后和干预后体质量。干预后，记录小鼠睾丸质量并计算睾丸系数；检测小鼠精子质量；ELISA法检测血清睾酮（T）、卵泡刺激素（FSH）、黄体生成素（LH）含量；HE染色法观察睾丸组织形态；透射电镜观察睾丸组织线粒体超微结构；JC-1染色检测睾丸组织线粒体膜电位水平；TUNEL染色法观察睾丸组织凋亡细胞情况；实时荧光定量PCR法和Western blot法分别检测睾丸组织B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2关联X的蛋白（Bax）、细胞色素c(Cyt C)、凋亡蛋白酶活化因子1(Apaf-1)、半胱氨酸蛋白酶（Caspase）9、Caspase-3 mRNA和蛋白表达；免疫组化法检测睾丸组织剪切的Caspase-3(Cleaved Caspase-3)阳性表达。结果：与空白组比较，模型组小鼠精神萎靡，毛发粗糙，饮食与活动量减少，体质量减轻（P部分生精小管形态异常，生精细胞数量减少，线粒体数量减少，线粒体内嵴发生断裂缺失，出现空泡现象；线粒体膜电位降低（P部线粒体超微结构改善；线粒体膜电位升高（P<0.01）；睾丸组织凋亡细胞阳性率降低（P<0.01）；睾丸组织Bax、Cyt C、Apaf-1、Caspase-9、Caspase-3 mRNA和蛋白表达降低（P<0.01,P<0.05）,Bcl-2 mRNA和蛋白表达升高（P<0.05）,Cleaved Caspase-3平均吸光度值降低（P<0.01）。结论：“秩边透水道”针法可能通过抑制线粒体凋亡途径，减轻环磷酰胺诱导的弱精子症小鼠睾丸组织损伤，改善小鼠的生殖功能。

关键词：弱精子症针刺秩边透水道线粒体凋亡

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龟鹿二仙胶含药血清对膝骨关节炎小鼠软骨细胞模型自噬和凋亡的影响及作用机制研究

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中医正骨 2025年

作者：沈默金郑珍萍吴伟欣杨美鑫顾富城耿秋东王和鸣李楠福建中医药大学中医学院中医骨伤及运动康复教育部重点实验室

目的:探讨龟鹿二仙胶含药血清对白细胞介素-1β诱导的膝骨关节炎（knee osteoarthritis,KOA）小鼠软骨细胞模型自噬和凋亡的影响及作用机制。方法:将10只SD大鼠随机分为龟鹿二仙胶含药血清制备组和空白血清制备组,分别给予龟鹿二仙胶药... 详细信息

目的:探讨龟鹿二仙胶含药血清对白细胞介素-1β诱导的膝骨关节炎（knee osteoarthritis,KOA）小鼠软骨细胞模型自噬和凋亡的影响及作用机制。方法:将10只SD大鼠随机分为龟鹿二仙胶含药血清制备组和空白血清制备组,分别给予龟鹿二仙胶药液和生理盐水灌胃,连续灌胃1周后,采集腹主动脉血,制备龟鹿二仙胶含药血清和空白血清。取培养至第2代的C57BL/6小鼠膝关节软骨细胞,分为空白血清组、模型组、龟鹿二仙胶含药血清组。模型组、龟鹿二仙胶含药血清组加入终浓度为10 ng·mL-1的白细胞介素-1β,诱导培养24 h后,空白血清组、模型组加入10%空白血清,龟鹿二仙胶含药血清组加入10%龟鹿二仙胶含药血清,继续培养24 h。采用流式细胞分析仪检测各组软骨细胞凋亡率,采用电子显微镜观察各组软骨细胞自噬小体,分别采用实时定量PCR和蛋白质免疫印迹法检测AMP活化蛋白激酶（AMP-activated protein kinase,AMPK）、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mammalian target of rapamycin,mTOR）、UNC-51样自噬激活激酶1 （UNC-51 like autophagy activating kinase 1,ULK1）、自噬相关蛋白5（autophagy related protein 5,ATG5）、微管相关蛋白1轻链3B（microtubule associated protein 1 light chain 3B,LC3B）、B淋巴细胞瘤-2相关X蛋白（Bcl-2 associated X protein,Bax）、基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinase,MMP）-13、趋化因子配体2（chemokine ligand 2,CCL2）的mRNA和蛋白表达水平。结果:（1）软骨细胞凋亡率检测结果。模型组软骨细胞凋亡率高于空白血清组（P=0.000）,龟鹿二仙胶含药血清组软骨细胞凋亡率低于模型组（P=0.000）。（2）软骨细胞自噬小体观察结果。空白血清组可见双层膜封闭的球状自噬小体,模型组自噬小体数量较空白血清组减少,龟鹿二仙胶含药血清组自噬小体数量较模型组增加。（3）软骨细胞自噬和凋亡相关基因mRNA和蛋白表达水平检测结果。模型组软骨细胞AMPK、ULK-1、ATG5、LC3B、Bcl-2的mRNA和蛋白表达水平均低于空白血清组（P=0.000,P=0.000,P=0.000,P=0.000,P=0.000;P=0.002,P=0.000,P=0.000,P=0.000,P=0.000）,mTOR、Bax、MMP-13、CCL2的mRNA和蛋白表达水平均高于空白血清组（P=0.002,P=0.000,P=0.000,P=0.000;P=0.004,P=0.000,P=0.000,P=0.000）;龟鹿二仙胶含药血清组软骨细胞AMPK、ULK1、ATG5、LC3B、Bcl-2的mRNA和蛋白表达水平均高于模型组（P=0.000,P=0.003,P=0.001,P=0.001,P=0.001;P=0.020,P=0.002,P=0.000,P=0.008,P=0.004）,mTOR、Bax、MMP-13、CCL2的mRNA和蛋白表达水平均低于模型组（P=0.008,P=0.001,P=0.000,P=0.000;P=0.040,P=0.000,P=0.001,P=0.000）。结论:龟鹿二仙胶含药血清能够增强KOA软骨细胞自噬,抑制其凋亡与细胞外基质降解,且龟鹿二仙胶含药血清可能通过激活AMPK/mTOR/ULK1信号通路发挥作用。

关键词：骨关节炎,膝龟鹿二仙胶软骨细胞自吞噬细胞凋亡信号传导 TOR丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶小鼠

超声引导下针刀松解黄韧带对兔退变腰椎间盘整合素α5、β1表达的影响

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中国组织工程研究 2025年第2期29卷 331-338页

作者：陈灿赵宇胡斌涵杜梦凡刘俊宁牛素生张燕福建中医药大学中医学院福建省福州市350122 福建中医药大学中医骨伤及运动康复教育部重点实验室福建省福州市350122

背景:针刀松解黄韧带可有效改善腰椎退行性患者的症状,超声引导可增加针刀松解的精准性,但针刀松解黄韧带后对退变椎间盘的具体影响及可能的机制尚待明确。目的:探讨超声引导下针刀松解黄韧带对兔腰椎间盘退变的作用。方法:取24只新西兰... 详细信息

背景:针刀松解黄韧带可有效改善腰椎退行性患者的症状,超声引导可增加针刀松解的精准性,但针刀松解黄韧带后对退变椎间盘的具体影响及可能的机制尚待明确。目的:探讨超声引导下针刀松解黄韧带对兔腰椎间盘退变的作用。方法:取24只新西兰兔,采用随机数字表法分为对照组(n=6)与造模组(n=18)。造模组采用横断L5/6、L6/7节段棘上、棘间韧带并保持站立姿势对腰椎施加轴向载荷的方式建立兔腰椎间盘退变模型,造模成功后再随机分为模型组、超声针刀组、假针刀组,每组6只,超声针刀组在超声引导下使用针刀松解L7/S1右侧黄韧带,假针刀组针刀入路同超声针刀组,但不松解黄韧带,1次/周,共4次。针刀干预后30 d,利用MRI观察L7/S1椎间盘髓核信号强度变化,苏木精-伊红染色观察L7/S1椎间盘形态变化,免疫组化染色检测L7/S1椎间盘髓核内Ⅰ,Ⅱ型胶原表达,RT-PCR、Western Blot检测L7/S1椎间盘中整合素α5、β1、p38、核因子κB的表达。结果与结论:①MRI成像显示,模型组兔椎间盘髓核呈灰-黑色,髓核灰度值明显低于对照组(P<0.01);超声针刀组兔椎间盘髓核亮度较模型组升高,髓核灰度值高于模型组(P<0.01);②苏木精-伊红染色显示,模型组髓核形状不规则,髓核细胞数量减少,细胞外基质被压缩,纤维环破裂,终板结构与边界不清,软骨细胞排列紊乱;与模型组相比,超声针刀组髓核细胞数量增多,纤维环破裂情况有改善,软骨终板细胞排列较为规则;③免疫组化染色显示,与对照组比较,模型组髓核内Ⅰ型胶原阳性表达增加(P<0.01),Ⅱ型胶原阳性表达减少(P<0.01);与模型组比较,超声针刀组髓核内Ⅰ型胶原阳性表达减少(P<0.01),Ⅱ型胶原阳性表达增加(P<0.01);④RT-PCR、Western Blot检测显示,与对照组比较,模型组兔椎间盘中整合素α5、整合素β1、p38、核因子κB的mRNA与蛋白表达均升高(P<0.01);与模型组比较,超声针刀组兔椎间盘中整合素α5、整合素β1、p38、核因子κB的mRNA与蛋白表达均降低(P<0.01);⑤结果表明,超声引导下针刀松解黄韧带可改善兔腰椎间盘退变程度,该作用与通过调控整合素α5、β1表达、抑制p38和核因子κB表达有关。

关键词：腰椎间盘退变针刀黄韧带超声引导整合素

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四逆汤中甘草对附子解毒作用的相关性分析

中国中药杂志 1996年第1期21卷 50-52页

作者：裴妙荣王世民李晶山西中医学院

将四逆汤附子、干姜用量固定，甘草取６个水平，得６个不同配伍的四逆汤，应用薄层扫描法测定其乌头碱的含量，并进行统计学分析。结果表明：四逆汤中乌头碱的含量随甘草剂量的增加而减少，二者呈高度负相关，ｆ＝—０．９９４５。

关键词：四逆汤解毒作用薄层扫描药理

以就业能力为导向的高职语文写作教学策略探索

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学周刊 2025年第1期1卷 55-58页

作者：赵越山西卫生健康职业学院卫管·人文社科部山西晋中030619

以就业能力为导向的高职语文写作教学,是当前职业教育改革中的一项重要实践。文章简析了就业能力导向下的高职语文写作教学的现实意义,并进行了教学策略探讨,提出六大核心措施,即设计模拟工作情境强化实践写作、应用思维导图工具辅助文... 详细信息

以就业能力为导向的高职语文写作教学,是当前职业教育改革中的一项重要实践。文章简析了就业能力导向下的高职语文写作教学的现实意义,并进行了教学策略探讨,提出六大核心措施,即设计模拟工作情境强化实践写作、应用思维导图工具辅助文章结构规划、分析典型职场文本以培养逻辑思维、实施个性化教学与定制写作任务、建立快速反馈系统促进写作技能提升、跨学科写作任务拓宽学生视野与知识范畴,以及引入新媒体写作教学,以期综合提升学生的职场适应力和沟通表达能力。

关键词：就业能力导向高职语文写作教学

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经典名方黄芩汤源流考证与古今应用分析

中国实验方剂学杂志 2025年第3期 184-191页

作者：李予欣梁绿圆曹佳蕾黄憧羿万和伽魏炳琦赵梦婷田潇阳马丙祥党伟利河南中医药大学第一附属医院儿科医院河南中医药大学儿科医学院河南梁济时中医药科技研究院经典名方研究与开发中心河南康岐食品科技有限公司河南中医药大学中医学院

黄芩汤疗效确切，是一首被历代医家推崇的经典治痢名方，于2023年入选国家中医药管理局公布的《古代经典名方目录（第二批）——汉族医药》。笔者采用文献计量学的方法，旨在对经典名方黄芩汤进行文献考证，以期为开发黄芩汤的现代制剂... 详细信息

黄芩汤疗效确切，是一首被历代医家推崇的经典治痢名方，于2023年入选国家中医药管理局公布的《古代经典名方目录（第二批）——汉族医药》。笔者采用文献计量学的方法，旨在对经典名方黄芩汤进行文献考证，以期为开发黄芩汤的现代制剂提供文献依据。该研究以“黄芩汤”为关键词，共检索到历代黄芩汤相关古籍共2 026条，筛选出有效数据23条，涉及15部中医古籍。从黄芩汤的历史源流、组成、剂量、基源、炮制、煎服法、功效与应用进行考证分析。结果表明黄芩汤首见于张仲景的《伤寒论》，全方清热止利，和中降逆，是当今临床广泛应用的经典名方之一。由于该方临床疗效确切，后世多在黄芩汤上有所加减，虽方名不同，但多体现后世医家对仲景组方思想的继承和发展。该方古代主治病证广泛，但总以痢疾、腹痛等消化系统疾病为主。现代应用涉及消化、呼吸、眼耳鼻喉、妇科、皮肤、肌肉骨骼系统及结缔组织等，具体在溃疡性结肠炎、腹泻、急性肠炎、湿热痢疾更有优势。通过挖掘梳理黄芩汤的古籍文献，确定其关键信息，以期为经典名方的临床应用及新药研发提供科学参考。

关键词：经典名方黄芩汤文献考证关键信息用量用法临床应用

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酸枣仁配方饮品的制备工艺优化及成分分析

食品工业科技 2025年

作者：陈尧楠董露露衡依然李宏宇闫艳杜晨晖山西中医药大学中药与食品工程学院山西大学中药现代研究中心

为深度挖掘酸枣仁的营养价值，通过优化酸枣仁配方饮品的制备工艺，并对优化后的配方饮品进行成分分析，以提高饮品的品质和功能性。以感官评分为标准，采用单因素实验及响应面试验优化酸枣仁饮品工艺配方，采用高效液相色谱法测定酸枣... 详细信息

为深度挖掘酸枣仁的营养价值，通过优化酸枣仁配方饮品的制备工艺，并对优化后的配方饮品进行成分分析，以提高饮品的品质和功能性。以感官评分为标准，采用单因素实验及响应面试验优化酸枣仁饮品工艺配方，采用高效液相色谱法测定酸枣仁配方饮品中助眠类有效成分及脂肪酸类成分，采用凯氏定氮法测定粗蛋白含量，采用氨基酸自动分析仪测定氨基酸含量。结果表明：酸枣仁配方饮品最佳配方为220 ℃温度下炒制酸枣仁26 min，按照1.2:1:1质量比添加乳粉、冻干粉、植脂末。酸枣仁饮品中乌药碱、木兰花碱、维采宁Ⅱ、斯皮诺素、6?-阿魏酰斯皮诺素、酸枣仁皂苷A、酸枣仁皂苷B等7种助眠类有效成分总含量为2.838 mg/g。主要营养成分脂肪酸总量为19.961 mg/g，蛋白质含量10.2%，共检出氨基酸种类18种，总含量5.904 g/100 g，以氨基酸评分、化学评分为标准，第一限制性氨基酸均为色氨酸。所开发的酸枣仁饮品冲调后颜色呈深棕色，有酸枣仁独特的风味，营养成分丰富，且具有多种助眠类有效成分，进一步丰富了酸枣仁冲调饮品的商品形式，有利于促进以酸枣仁为基础的大健康产业发展。

关键词：酸枣仁配方饮品工艺优化咖啡风味成分分析

三种腰椎间盘突出症大鼠模型制备方法的比较与评价

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中国组织工程研究 2025年第14期29卷 2930-2936页

作者：尹浩吉美奇胡志祥吴涵吕恒李圣云李蕾翟春涛吕玉娥山西中医药大学第二临床学院山西省晋中市030619 山西省针灸医院山西省太原市030006

背景:目前实验中有多种腰椎间盘突出症大鼠模型,但各自存在一定的优缺点,其中最常见的造模方法包括自体髓核移植和纤维环穿刺模型。目的:建立自体髓核移植模型(剪除棘突+乳突/剪除侧突+乳突)以及纤维环穿刺模型,比较及评估3种模型的特... 详细信息

背景:目前实验中有多种腰椎间盘突出症大鼠模型,但各自存在一定的优缺点,其中最常见的造模方法包括自体髓核移植和纤维环穿刺模型。目的:建立自体髓核移植模型(剪除棘突+乳突/剪除侧突+乳突)以及纤维环穿刺模型,比较及评估3种模型的特点。方法:将40只成年雄性SD大鼠随机分为4组,每组10只,分别为假手术组、棘突组、侧突组及纤维环穿刺组,其中假手术组大鼠仅切开皮肤,暴露棘突后并缝合;棘突组大鼠剪除L5棘突和乳突并取2枚尾椎髓核放于椎间孔处;侧突组大鼠剪除L5侧突和乳突并取2枚尾椎髓核放于椎间孔处;纤维环穿刺组大鼠剪除乳突后,进行纤维环穿刺术,并行椎间盘注射白细胞介素1β。分别在造模前和造模后检测大鼠热缩足潜伏期,造模结束后2周进行腰椎MRI检测;苏木精-伊红染色和番红-固绿染色观察椎间盘病理改变;免疫荧光观察CD68阳性表达。结果与结论:①热痛阈检测结果显示:与假手术组相比,模型组大鼠在造模后痛觉敏感均降低,耐受时间均降低(P<0.05);②腰椎MRI影像显示:棘突组和纤维环穿刺组髓核组织突出明显,更符合常见腰椎间盘突出患者MRI影像;③苏木精-伊红染色观察:与假手术组比较,各模型组髓核组织存在不同程度退变,炎性细胞浸润和脊索细胞降解,出现空洞样改变,其中纤维环穿刺组病理改变最严重;④番红-固绿染色显示:与假手术组比较,3组模型的髓核组织边界模糊,存在广泛炎性反应,纤维环存在不同程度退变;⑤CD68+免疫荧光阳性结果显示:与假手术组相比,3组模型的CD68+表达更高、范围更广,其中纤维环穿刺组表达最高。结果说明3种方法均能有效建立腰椎间盘突出大鼠模型,其中剪除乳突后建立纤维环穿刺模型优于剪除棘突+乳突组自体髓核移植模型,前2种模型优于剪除侧突+乳突组自体髓核移植模型。

关键词：自体髓核移植纤维环穿刺腰椎间盘突出症 MRI CD68+ 动物模型