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血浆代谢相关生物标志物检测在转移性结直肠癌诊断中的应用

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中华肿瘤防治杂志 2024年第7期31卷 420-425页

作者：尤铂文单军奇姚瑶任冰冰陈薪如孙燕来王永胜山东第一医科大学(山东省医学科学院)研究生院山东济南250117 山东省肿瘤防治研究院山东第一医科大学(山东省医学科学院)山东济南250117 山东省肿瘤防治研究院山东省肿瘤医院结直肠外科二病区山东第一医科大学(山东省医学科学院)山东济南250117 山东省肿瘤防治研究院山东省肿瘤医院乳腺外一病区山东第一医科大学(山东省医学科学院)山东济南250117

目的通过靶向代谢组学探讨非转移性结直肠癌(nmCRC)和转移性结直肠癌(mCRC)患者的新生物标志物和治疗策略。方法选取2022-01-01-2023-01-01山东省肿瘤医院招募的30例nmCRC患者和30例年龄和性别与之匹配的mCRC患者。采集nmCRC和mCRC患者... 详细信息

目的通过靶向代谢组学探讨非转移性结直肠癌(nmCRC)和转移性结直肠癌(mCRC)患者的新生物标志物和治疗策略。方法选取2022-01-01-2023-01-01山东省肿瘤医院招募的30例nmCRC患者和30例年龄和性别与之匹配的mCRC患者。采集nmCRC和mCRC患者血浆样本,使用液相色谱法-串联质谱法检测氨基酸、胆汁酸和脂肪酸的血浆代谢物,并分析其相关性及诊断价值。结果共检测到27种氨基酸、16种脂肪酸和9种胆汁酸,其中乙醇胺(P=0.017)、牛磺酸(P=0.003)和色氨酸(P=0.013)、甘氨胆酸(P=0.015)、C15∶0(P=0.001)、C17∶1(P=0.005)、C17∶0(P=0.037)、C18∶3(P=0.021)、C18∶2(P=0.007)、C20∶3(P=0.024)、C20∶1(P=0.011)、C22∶5(P=0.028)、C24∶1(P=0.017)表达下降。受试者工作特征曲线(ROC)分析显示13种代谢标志物诊断mCRC的曲线下面积(AUC)范围为0.668~0.809,可以很好地区分nmCRC和mCRC。其中GCA和CA19-9具有良好的相关性,r=0.736,P=0.036。nmCRC和mCRC患者平均CA19-9值分别为25.25±35.67和1020.56±2545.23,t=-2.142,P=0.036。CA19-9或GCA单独分析CRC肝转移患者AUC值分别为0.768和0.677,CA19-9和GCA联合分析时AUC值为0.828。结论代谢组学呈现了一种针对CRC的新颖无创识别方法,有望成为一种用于诊断mCRC的有效方法。

关键词：血浆代谢相关生物标志物结直肠癌代谢组学液相色谱法-串联质谱法

CD8^(+)T细胞癌巢/间质比对早期非小细胞肺癌隐匿性淋巴结转移的影响

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中华肿瘤防治杂志 2024年第12期31卷 731-737,758页

作者：李超卓景洪标胡梦钰杨丽颖孙晓蓉邢力刚山东第二医科大学临床医学院山东潍坊261053 山东省肿瘤防治研究院(山东省肿瘤医院病理科) 山东第一医科大学(山东省医学科学院)山东济南250117 山东省肿瘤防治研究院(山东省肿瘤医院核医学科) 山东第一医科大学(山东省医学科学院)山东济南250117 山东省肿瘤防治研究院(山东省肿瘤医院放疗科) 山东第一医科大学(山东省医学科学院)山东济南250117 山东第一医科大学(山东省医学科学院)研究生部山东济南250117 山东大学齐鲁医学院山东济南250012

目的分析临床早期非小细胞肺癌(NSCLC)患者肿瘤原发灶的肿瘤中心(TC)和侵袭性边缘(IM,包括癌巢和间质)的CD8^(+) T细胞和程序性死亡受体-1(PD-1)^(+) CD8 T细胞的浸润水平,并探究其与隐匿性淋巴结转移(OLNM)的关系。方法回顾性收集201... 详细信息

目的分析临床早期非小细胞肺癌(NSCLC)患者肿瘤原发灶的肿瘤中心(TC)和侵袭性边缘(IM,包括癌巢和间质)的CD8^(+) T细胞和程序性死亡受体-1(PD-1)^(+) CD8 T细胞的浸润水平,并探究其与隐匿性淋巴结转移(OLNM)的关系。方法回顾性收集2014-01-01-2021-12-31在山东省肿瘤医院接受根治性手术的154例临床早期NSCLC患者的术后组织标本,构建组织芯片(TMA),并进行多重免疫荧光染色以评估TC和IM的CD8及PD-1^(+) CD8的密度。曼-惠特尼U检验分析NSCLC伴OLNM和无OLNM患者的CD8和PD-1^(+) CD8浸润差异。使用中位数将患者分为高/低密度组,二元logistic回归分析OLNM发生的影响因素。结果在临床早期NSCLC的TC和IM上,CD8分别占所有细胞的4.6%和5.6%,PD-1^(+) CD8分别占CD8的9.1%和6.9%。临床早期NSCLC患者发生OLNM时,IM的总CD8及间质CD8浸润增加(cN^(-)pN^(+)vs cN^(-)pN^(-), 63.78 vs 43.87,Z=2.995,P=0.003;93.57 vs 60.84,Z=2.631,P=0.009),同时TC间质和IM癌巢中的PD-1^(+) CD8/CD8比例降低(cN^(-)pN^(+)vs cN^(-)pN^(-), 7.5%vs 10.2%,Z=-2.227,P=0.026;4.4%vs 8.4%,Z=-2.093,P=0.036)。多因素logistic回归分析显示,TC的癌巢CD8/间质CD8比例降低是早期NSCLC发生OLNM的独立危险因素(OR=2.339, 95%CI:1.201~4.556,P=0.012)。结论 TC的癌巢CD8/间质CD8比降低,CD8向癌巢内浸润减少,与早期NSCLC的OLNM发生有关,同时TC间质和IM癌巢中的CD8表面PD-1表达降低。

关键词：非小细胞肺癌隐匿性淋巴结转移肿瘤免疫微环境 CD8 程序性死亡受体-1

基于生物信息学分析的弓形虫TgSUB3多抗制备

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中国病原生物学杂志 2024年第6期19卷 690-694页

作者：李瑾张欣雷战谢金晶王龙江尹昆徐超魏庆宽孙慧山东第一医科大学(山东省医学科学院) 山东省寄生虫病防治研究所山东济宁272033 山东第一医科大学(山东省医学科学院)

目的在利用生物信息学全面分析TgSUB3序列的基础上,制备针对该蛋白B细胞抗原表位的兔源多克隆抗体。方法采用生物信息学软件对TgSUB3蛋白的理化性质、空间结构、磷酸化/糖基化位点、B细胞抗原表位等进行分析。用原核表达、纯化的TgSUB3... 详细信息

目的在利用生物信息学全面分析TgSUB3序列的基础上,制备针对该蛋白B细胞抗原表位的兔源多克隆抗体。方法采用生物信息学软件对TgSUB3蛋白的理化性质、空间结构、磷酸化/糖基化位点、B细胞抗原表位等进行分析。用原核表达、纯化的TgSUB3重组蛋白免疫新西兰大白兔,于4次加强免疫后第7 d制备兔血清,采用Protein A亲和纯化抗体蛋白,分别利用SDS-PAGE和ELISA分析抗体纯度和效价。结果生物信息学分析TgSUB3为不稳定亲水性蛋白,无信号肽,跨膜区为19-39aa,包含1个Peptidases_S8结构域(358-617aa)。二级结构中无规卷曲占51.29%,α螺旋占26.11%。TgSUB3包含65个磷酸化位点和126个糖基化位点。B细胞抗原表位区集中在45-290aa和715-937aa。SDS-PAGE显示纯化的TgSUB3多抗为单一55 ku条带,ELISA检测TgSUB3抗体滴度为1:102400。结论成功制备了兔源TgSUB3抗血清,经纯化获得高纯度高滴度的多抗。

关键词：弓形虫 SUB3蛋白多克隆抗体生物信息学

基于孟德尔随机化方法探究可干预危险因素与支气管哮喘之间的因果关系

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现代预防医学 2024年第7期51卷 1166-1174页

作者：常新伟付延鑫白亚虎纪思禹高胜寒王冉宁康山东第一医科大学(山东省医学科学院)研究生部潍坊医学院研究生部山东第一医科大学附属职业病医院呼吸内科

目的运用两样本孟德尔随机化（Mendelian randomization,MR）方法探究生活方式、饮食、睡眠及社会经济地位等因素与支气管哮喘的因果关系。方法研究主要使用逆方差加权法(IVW)进行两样本MR分析,同时采用留一法、异质性检验、水平基因... 详细信息

目的运用两样本孟德尔随机化（Mendelian randomization,MR）方法探究生活方式、饮食、睡眠及社会经济地位等因素与支气管哮喘的因果关系。方法研究主要使用逆方差加权法(IVW)进行两样本MR分析,同时采用留一法、异质性检验、水平基因多效性检验来验证结果的稳定性和可靠性。结果 IVW模型结果显示吸烟（OR=1.17,95%CI:1.08～1.28）、饮酒（OR=1.22,95%CI:1.05～1.41）、久坐（OR=1.78,95%CI:1.38～2.31）、睡眠时长（OR=2.29,95%CI:1.38～2.31）、体重指数（OR=1.41,95%CI:1.29～1.53）与支气管哮喘患病风险增加有关。新鲜水果摄入（OR=0.50,95%CI:0.34～0.73）、干果摄入（OR=0.54,95%CI:0.34～0.73）、谷类食物摄入（OR=0.62,95%CI:0.41～0.94）、教育程度（OR=0.57,95%CI:0.34～0.73）、社会活动（OR=0.26,95%CI:0.34～0.73）会降低支气管哮喘的发病风险。ME-Egger截距检测结果不存在多效性，故MR在本研究中为因果推断的有效方法。饮酒（Q=139.92,P=0.001）、久坐（Q=151.37,P=0.003）、干果摄入（Q=40.00,P=0.007）、谷类食物摄入（Q=72.95,P=0.001）、体重指数（Q=584.12,P<0.001）异质性检验结果 P值均<0.05，故重点关注随机效应IVW模型。结论吸烟、饮酒、久坐、睡眠时长、体重指数可能是支气管哮喘的危险因素。新鲜水果摄入、干果摄入、谷类食物摄入、教育程度、社会活动可能是支气管哮喘的保护因素。

关键词：孟德尔随机化支气管哮喘可干预风险因素因果关系

2021年烟台市近海海鱼异尖线虫感染率及居民异尖线虫病防治知识知晓率调查

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中国血吸虫病防治杂志 2024年第1期36卷 74-78,110页

作者：陈瑶李丹王龙江卜灿灿李曰进王用斌许艳闫歌张本光山东省寄生虫病防治研究所、山东第一医科大学(山东省医学科学院) 山东济宁272000

目的了解2021年山东省烟台市近海海鱼异尖线虫感染率和当地居民异尖线虫病相关知识知晓情况,为制定异尖线虫病防控措施提供参考依据。方法2021年11月,于山东省烟台市顺鑫港口购买海鱼,检测海鱼异尖线虫感染情况,并分析不同鱼种、不同部... 详细信息

目的了解2021年山东省烟台市近海海鱼异尖线虫感染率和当地居民异尖线虫病相关知识知晓情况,为制定异尖线虫病防控措施提供参考依据。方法2021年11月,于山东省烟台市顺鑫港口购买海鱼,检测海鱼异尖线虫感染情况,并分析不同鱼种、不同部位异尖线虫感染率。采用Spearman秩相关分析海鱼体长和体质量与异尖线虫感染度间的相关性,对当地居民饮食习惯和异尖线虫病防治知识知晓率进行问卷调查。结果共解剖海鱼20种201尾,其中11种77尾检出异尖线虫,鱼种异尖线虫感染检出率为55.00%(11/20)、海鱼总感染率为38.31%(77/201);异尖线虫感染阳性海鱼中累计检出异尖线虫3468条,平均感染度为45.04条/尾。Spearman秩相关结果显示,鮟鱇鱼体长(rs=0.74,P生熟菜板不分比例差异有统计学意义(χ^(2)=17.89,P生食或半生食海产品习惯者比例差异有统计学意义(χ^(2)=28.27,P<0.01)。结论2021年烟台市近海海域海鱼异尖线虫感染率、感染度均较高,当地居民异尖线虫病防治知识知晓率较低;应加大对居民异尖线虫病健康教育,降低异尖线虫感染风险。

关键词：异尖线虫异尖线虫病海鱼问卷调查烟台市

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自育与非自育淡色库蚊体内菌群多样性比较

中国血吸虫病防治杂志 2024年第1期36卷 52-58,73页

作者：类晶晶吕文祥王文倩王海防郭秀霞程鹏公茂庆刘丽娟山东省寄生虫病防治研究所、山东第一医科大学(山东省医学科学院) 山东济宁272033

目的了解自育与非自育淡色库蚊体内菌群组成与多样性差异,从而为探索淡色库蚊自育发生机制提供参考依据。方法收集25℃自育与非自育淡色库蚊成蚊,利用Illumina NovaSeq 6000测序平台对细菌16S核糖体RNA基因高变区进行测序。采用α多样... 详细信息

目的了解自育与非自育淡色库蚊体内菌群组成与多样性差异,从而为探索淡色库蚊自育发生机制提供参考依据。方法收集25℃自育与非自育淡色库蚊成蚊,利用Illumina NovaSeq 6000测序平台对细菌16S核糖体RNA基因高变区进行测序。采用α多样性指数分析菌群丰富度和多样性,采用β多样性指数分析菌群结构差异,通过线性判别分析效应大小(linear discriminant analysis effect size,LEfSe)鉴别组间在丰度上具有显著差异的菌群。结果自育与非自育淡色库蚊体内菌群隶属18个门、28个纲、70个目、113个科和170个属,优势菌门主要有变形菌门、拟杆菌门等。在属水平,沃尔巴克氏体菌属为共有优势菌属,在自育及非自育淡色库蚊中的相对丰度分别为(77.6±11.3)%和(47.5±8.5)%;粪杆菌属(0.4%±0.1%)、杜氏杆菌属(0.5%±0.0%)、马赛菌属(0.5%±0.1%)等为自育淡色库蚊特有菌属。α多样性分析显示,自育淡色库蚊体内菌群Chao1指数和ACE指数大于非自育淡色库蚊(P均>0.05),而Shannon指数(P>0.05)和Simpson指数(P<0.05)小于非自育淡色库蚊。LEfSe分析结果显示,共计48个分类单元在自育和非自育淡色库蚊间存在显著差异(P均<0.05)。结论自育与非自育淡色库蚊体内菌群多样性存在显著差异。

关键词：淡色库蚊自育 16S核糖体RNA 菌群构成 Alpha多样性 Beta多样性

刚地弓形虫感染对小鼠脑组织转录本m^(6)A甲基化修饰的影响

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2024年第1期42卷 27-35,47页

作者：解晓曼孙航代莉莎朱文菊王利磊谢环环董宏杰张俊梅王琦周贝贝赵桂华徐超尹昆山东省寄生虫病防治研究所山东第一医科大学(山东省医学科学院)济宁272033

目的分析刚地弓形虫感染对小鼠脑组织转录本的N6-甲基腺苷(m6A)甲基化修饰水平的影响。方法20只雌性C57BL/6J小鼠随机分为TgCtwh6感染组(7只)、LHG感染组(7只)和对照组(TgCtwh6感染组、LHG感染组的对照各3只)。TgCtwh6感染组、LHG感染... 详细信息

目的分析刚地弓形虫感染对小鼠脑组织转录本的N6-甲基腺苷(m6A)甲基化修饰水平的影响。方法20只雌性C57BL/6J小鼠随机分为TgCtwh6感染组(7只)、LHG感染组(7只)和对照组(TgCtwh6感染组、LHG感染组的对照各3只)。TgCtwh6感染组、LHG感染组分别灌胃接种中国Ⅰ型wh6株(TgCtwh6)和中国Ⅲ型LHG株刚地弓形虫感染小鼠脑组织悬液0.2ml(20个包囊/鼠),对照组灌胃等量的生理盐水。分别在接种后15、30和45 d,用抽签法随机抽取感染组小鼠各1只,麻醉后处死,取脑组织,于显微镜下分别记录大脑皮层区、海马区和嗅球区的包囊数。感染后45 d每组分别取3只小鼠的全脑组织,提取总RNA,制备基因组文库,进行转录组测序,筛选差异甲基化位点(DML),统计感染组和对照组的mRNA的差异m6A甲基化位点及其所在转录本;对甲基化位点所在转录本进行基因本体功能注释(GO)分析,京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析,对甲基化差异转录本进行基因集富集分析(GSEA)。选取甲基转移酶样3(METTL3)、肥胖相关蛋白(FTO)和YTH结构域3(YTHDF3)等3种m6A甲基化修饰蛋白基因,以甘油醛-3-磷酸脱氢酶基因为内参,实时荧光定量逆转录PCR(qRT-PCR)检测其相对转录水平。结果感染组小鼠均感染成功。感染后45 d,大脑皮层、海马和嗅球的包囊数分别为(5676±10)、(4773±9)、(243±10)个。感染组和对照组共检出760650个甲基化位点,其中GGACA、GGACC、GGACT、ACGAT等4种m6A模体的甲基化水平分别占16.8%(127923/760650)、4.6%(35164/760650)、3.8%(28983/760650)和0.4%(3122/760650);共检出高甲基化位点所在转录本127016条,其中GGACA、GGACC、GGACT和ACGAT所在的转录本分别为71727、27754、24556和2979条。感染组与对照组小鼠脑组织转录组中ACGAT、GGACA、GGACC、GGACT等4种m6A模体的DML位点总数为9233,其中高甲基化位点4832个,低甲基化位点4851个。GO分析结果显示,DML所在转录本显著富集于生物过程中的细胞过程、细胞组分中的细胞和分子功能中的结合等功能。DML所在转录本的KEGG富集分析结果显示,分子间相互作用网络主要富集在溶酶体、剪接体和多巴胺能突触信号通路等途径中。对生物过程的GO富集分析结果显示,DML所在的转录本中,生物过程相关的部分转录本主要富集于蛋白糖基化、神经元凋亡负调控、蛋白质的入核转运等过程。GSEA分析结果显示,对照组和两个感染组的组间差异甲基化高分富集于成纤维细胞增殖负调控通路和Hippo信号通路相关的转录本子集中,其中筛选出ENSMUST00000105393、ENSMUST00000006523、ENSMUST00000055261和ENSMUST00000038658等4个关键转录本,分别编码共刺激因子配体(ICOSL)、富含半胱氨酸肠蛋白1(CRIP1)、MOB激酶激活剂1A201(MOB1A201)和MOB1A202,与对照组相比,TgCtwh6感染组、LHG感染组的这4个基因表达均上调。qRT-PCR结果显示,TgCtwh6感染组、LHG感染组小鼠脑组织mettl3 mRNA相对表达水平分别为5.47±1.09、1.63±0.06,与对照组(1.01±0.11)比较差异均有统计学意义(t=4.05、5.03,均P一致。结论弓形虫慢性感染可导致小鼠脑组织转录本m6A甲基化修饰水平升高,并可能通过对icosl、crip1和mob1a等关键差异转录本的修饰调控,造成宿主脑组织内与精神行为相关的生物学进程和信号通路的改变。

关键词：刚地弓形虫 m6A修饰转录本脑包囊纳米孔三代测序

2017—2022年山东省输入性疟疾流行病学特征

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2024年第2期42卷 140-146页

作者：许艳王龙江孔祥礼李曰进卜灿灿闫歌张本光王用斌山东省寄生虫病防治研究所山东第一医科大学(山东省医学科学院)济宁272033

目的了解2017—2022年山东省输入性疟疾流行病学特征,为进一步做好防止输入再传播工作提供科学依据。方法从中国疾病预防控制信息系统传染病报告信息管理系统和寄生虫病防治信息管理系统中收集2017—2022年山东省输入性疟疾疫情、病例... 详细信息

目的了解2017—2022年山东省输入性疟疾流行病学特征,为进一步做好防止输入再传播工作提供科学依据。方法从中国疾病预防控制信息系统传染病报告信息管理系统和寄生虫病防治信息管理系统中收集2017—2022年山东省输入性疟疾疫情、病例流行病学个案调查等资料,建立数据库,采用SPSS 26.0软件对疟疾病例分类、感染来源、流行病学特征、病例诊治情况等进行统计分析,率的比较采用χ2检验,时间间隔分布的比较用非参数检验,利用SaTScan v10.1软件对疟疾病例的空间聚集性进行扫描分析,利用GraphPad Prism 8.3.0软件进行绘图。结果2017—2022年,山东省共报告输入性疟疾820例,均为境外输入性病例。新冠疫情前(2017—2019年)、新冠疫情期间(2020—2022年)分别报告670例、150例。820例均为实验室确诊病例,恶性疟、卵形疟、间日疟、三日疟病例分别占69.5%(570/820)、19.0%(156/820)、7.3%(60/820)和4.1%(34/820),无混合感染和未分型病例。感染来源地以非洲为主(95.9%,786/820)。全省16个市均有病例报告,济宁、烟台、威海、青岛和济南5个市共报告511例,占62.3%(511/820)。空间扫描分析发现7个病例聚集区,其中威海环翠、烟台牟平等13个县(市、区)为一类聚集区(相对危险度=3.98,P省共191例跨地区就诊病例,占23.3%(191/820)。全省18所疟疾救治定点医疗机构共报告本市就诊病例421例(55.3%,421/762)。患者发病到初诊、初诊到确诊时间间隔中位数分别为1、0 d。患者初诊单位为省级、市级、县级、县级以下医疗机构的分别占9.9%(81/820)、36.1%(296/820)、31.5%(258/820)和16.6%(136/820),疟疾诊断正确率分别为88.9%(72/81)、84.1%(249/296)、76.4%(197/258)和5.2%(7/136);初诊单位为其他机构(疾控机构、检验检疫机构等)的占6.0%(49/820),诊断正确率为87.8%(43/49)。不同机构疟疾诊断正确率差异有统计学意义(χ2=321.959,P山东省输入性疟疾病例多、分布广,存在输入再传播的风险。

关键词：疟疾流行病学特征空间聚集性跨地区就诊山东省

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网络哀伤辅导在安宁疗护中的应用进展

中华护理杂志 2024年第5期59卷 556-561页

作者：张淼淼张丽闫荣丁敏孟祥敏徐萍山东第一医科大学/山东省医学科学院护理学院济南市250000 山东第一医科大学附属肿瘤医院血液肿瘤病区山东第一医科大学附属肿瘤医院预防管理部

哀伤辅导是安宁疗护的主要内容之一,对缓解临终患者及丧亲者的哀伤情绪具有重要作用。网络作为开展哀伤辅导的一个新型平台,具有跨时间及空间、匿名性、灵活性等优点。该文针对网络哀伤辅导相关理论模型、应用载体、干预方法、可行性及... 详细信息

哀伤辅导是安宁疗护的主要内容之一,对缓解临终患者及丧亲者的哀伤情绪具有重要作用。网络作为开展哀伤辅导的一个新型平台,具有跨时间及空间、匿名性、灵活性等优点。该文针对网络哀伤辅导相关理论模型、应用载体、干预方法、可行性及效果评价工具或指标进行综述,分析利用网络开展哀伤辅导存在的困境,并提出临床实践建议,旨在为国内医护人员开展相关研究,推进网络哀伤辅导在安宁疗护领域中的应用提供参考。

关键词：安宁疗护哀伤辅导网络综述护理