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红景天苷促进MC3T3-E1细胞成骨分化能力的体外实验

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中国组织工程研究 2025年第2期29卷 231-237页

作者：刘朝辉韩晓谦段昕郭鹏达张云涛滨州医学院附属医院口腔科山东省滨州市256600 山东省临沭县妇幼保健院山东省临沂市276700

背景:骨缺损可直接影响牙齿种植的成功率及种植体的长期稳定性。研究显示红景天苷可促进成骨细胞增殖、分化,但对于其成骨分化相关通路具体研究不多。目的:体外细胞实验研究红景天苷对MC3T3-E1细胞增殖和分化的影响,并探究其对相关基因... 详细信息

背景:骨缺损可直接影响牙齿种植的成功率及种植体的长期稳定性。研究显示红景天苷可促进成骨细胞增殖、分化,但对于其成骨分化相关通路具体研究不多。目的:体外细胞实验研究红景天苷对MC3T3-E1细胞增殖和分化的影响,并探究其对相关基因和蛋白表达的影响。方法:采用CCK-8实验和碱性磷酸酶实验筛选红景天苷(0.5,1,5,10,50μmol/L)促进MC3T3-E1细胞增殖和分化的最佳浓度。实验分为4组:对照组、红景天苷组、红景天苷+LY294002组、LY294002组,分别用成骨诱导液、含10μmol/L红景天苷、10μmol/L红景天苷+10μmol/L LY294002、10μmol/L LY294002的成骨诱导液进行培养,观察红景天苷及PI3K/Akt信号通路抑制剂LY294002对成骨相关基因和蛋白表达的影响。结果与结论:①CCK-8实验和碱性磷酸酶实验显示:红景天苷促进MC3T3-E1细胞增殖的作用在10μmol/L时最显著;②与对照组相比,红景天苷可以促进矿化、促进细胞黏附、减少细胞死亡,提高Runx-2、骨钙素、骨桥蛋白的mRNA表达(P<0.01),提高Runx-2和p-Akt蛋白表达(P<0.01);而添加PI3K/Akt信号通路抑制剂LY294002则可逆转以上结果;③结果表明,红景天苷能促进MC3T3-E1细胞矿化,并能促进成骨相关基因、蛋白的表达,这可能与PI3K/Akt信号通路的激活有关。

关键词：红景天苷 MC3T3-E1细胞细胞分化成骨矿化 LY294002 PI3K/Akt信号通路

洋葱WRKY基因家族鉴定及其在鳞茎发育过程中的表达分析

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山东农业科学 2025年

作者：李艳伟王振宝杨妍妍霍雨猛孙亚玲刘冰江山东省农业科学院蔬菜研究所

为了探讨洋葱WRKY转录因子家族的功能，本研究基于洋葱全基因组和鳞茎不同发育时期的转录组数据，利用生物信息学方法筛选并鉴定到55个AcWRKY基因家族成员，其编码氨基酸长度为144～683 aa，等电点为5.11～9.65，氨基酸脂肪系数为47.14... 详细信息

为了探讨洋葱WRKY转录因子家族的功能，本研究基于洋葱全基因组和鳞茎不同发育时期的转录组数据，利用生物信息学方法筛选并鉴定到55个AcWRKY基因家族成员，其编码氨基酸长度为144～683 aa，等电点为5.11～9.65，氨基酸脂肪系数为47.14～77.24，均为亲水性蛋白。亚细胞定位预测表明，这55个AcWRKY蛋白都定位在细胞核中。进化树分析显示，洋葱WRKY家族基因分为GroupⅠ、GroupⅡ和Group Ⅲ三大类，其中Group Ⅱ组可进一步分为5个亚组，洋葱和拟南芥WRKY蛋白在各组中均有分布，推测相同组或亚组中洋葱与拟南芥的WRKY转录因子可能具有相似的功能。保守结构域分析发现，所有AcWRKYs均具有高度保守的WRKYGQK基序及其特有的锌指结构，少数成员存在保守结构域的变异。基因结构和保守基序分析结果显示，不同AcWRKY成员的外显子和motif在数量和分布上存在一定差异，同一组或亚组的成员表现出一定的相似性。转录组数据分析结果表明，绝大多数AcWRKYs基因直接或者间接参与了洋葱鳞茎的发育与形成。本研究结果可为深入研究AcWRKY基因在洋葱鳞茎形成中的机制研究提供参考。

关键词：洋葱 WRKY基因家族生物信息学分析基因表达转录组分析

DCE-MRI直方图定量参数联合DWI在乳腺癌早期诊断中的应用价值

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中国CT和MRI杂志 2025年第1期23卷 106-108页

作者：刘文霞贡琦刘利吴丽萍郑岚张茂红枣庄市妇幼保健院医学影像科山东枣庄277100

目的探讨MRI动态增强扫描(DCE-MRI)直方图定量参数联合扩散加权成像(DWI)在乳腺癌早期诊断中的应用价值。方法回顾性收集2017年9月至2021年9月期间在本院进行手术治疗的1 20例女性乳腺病变患者,依据术后病理结果分为良性组(n=78)与恶... 详细信息

目的探讨MRI动态增强扫描(DCE-MRI)直方图定量参数联合扩散加权成像(DWI)在乳腺癌早期诊断中的应用价值。方法回顾性收集2017年9月至2021年9月期间在本院进行手术治疗的1 20例女性乳腺病变患者,依据术后病理结果分为良性组(n=78)与恶性组(n=42),两组均在手术前进行DCEMRI及DWI检查,依据软件得出DCE-M RI直方图定量参数及ADC值,比较DCE-MRI直方图定量参数及ADC的组间差异,绘制ROC曲线,分析直方图定量参数与DWI联合用于早期诊断乳腺癌的价值。结果相较于良性组,恶性组的K~(trans)中位数、平均值、第90%位数,Kep第90%位数、V_p中位数、平均值、第50%位数均高,ADC值低于良性组,差异有统计学意义(P0.7,诊断效能较好,最佳敏感度、特异度为90.50%、96.20%。结论DCE-MRI直方图定量参数联合DWI在乳腺癌早期诊断中具有较高的临床应用价值。

关键词： MRI动态增强扫描直方图扩散加权成像乳腺癌早期诊断

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富血小板血浆干预细胞自噬和凋亡治疗骨关节炎

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中国组织工程研究 2025年第13期29卷 2802-2811页

作者：王耀敏张克凡王德宁任强李健石辉滨州医学院附属医院山东省滨州市256600 滨州医学院山东省滨州市264003

背景:富血小板血浆通过调节自噬和凋亡细胞因子、信号转导通路等方面在干预骨关节炎发展过程中发挥了重要作用。目的:总结近年来富血小板血浆在骨关节炎中发挥作用的细胞因子与信号通路,以及与软骨细胞自噬和凋亡的相关性,为未来治疗骨... 详细信息

背景:富血小板血浆通过调节自噬和凋亡细胞因子、信号转导通路等方面在干预骨关节炎发展过程中发挥了重要作用。目的:总结近年来富血小板血浆在骨关节炎中发挥作用的细胞因子与信号通路,以及与软骨细胞自噬和凋亡的相关性,为未来治疗骨关节炎提供有效的靶点。方法:在中国知网、万方数据库、维普、PubMed、Web of Science和Medline数据库进行文献检索,以“富血小板血浆,软骨细胞,细胞凋亡,细胞自噬,骨关节炎,细胞因子,信号通路”作为中文检索词,以“platelet-rich plasma,chondrocyte,apoptosis,autophagy,osteoarthritis,cytokines,signaling pathway”作为英文检索词,对最终纳入的66篇文献进行了系统性的总结和归纳。结果与结论:现有研究显示富血小板血浆能够通过多种途径促进软骨修复,助力骨组织愈合,其主要分为3个方面:①富血小板血浆参与调控了微自噬小体的延伸、闭合与成熟,并在特定条件下促进软骨细胞巨自噬和分子伴侣介导的细胞自噬,促进LC3Ⅱ/Ⅰ、Beclin1等自噬相关因子的表达,抑制P62/SQSTM1的表达,目前尚未有明确的研究直接探讨富血小板血浆对热休克蛋白的具体作用,未来在这一领域值得进一步研究;②富血小板血浆释放的各类生长因子抑制促凋亡因子Caspase、白细胞介素1β、肿瘤坏死因子α的表达,促进抗凋亡因子Bcl-2的表达,阻止软骨细胞凋亡和变性;③富血小板血浆通过激活PI3K/AKT/mTOR信号通路、NF-κB信号转导通路、死亡受体通路、线粒体应激通路等途径,抑制Bax和Caspase的表达,阻止细胞色素c的释放,从而抑制软骨细胞死亡和坏死性凋亡。综合而言,富血小板血浆促进软骨修复、支持软骨再生及发挥抗炎作用,其在软骨细胞中实现生物效应通常依赖于细胞自噬和凋亡相关细胞因子及信号通路的调控。

关键词：富血小板血浆软骨细胞细胞凋亡细胞自噬骨关节炎细胞因子信号通路

鸽圆环病毒荧光定量PCR检测方法的建立及应用

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动物医学进展 2025年第1期46卷 68-73页

作者：刘存刘砚涵祝夕超李法凯张栋邵新宇田野孙圣福陈静山东省动物疫病预防与控制中心(山东省人畜共患病流调监测中心) 山东济南250100 莱州市程郭畜牧兽医站山东烟台261437 山东省农业科学院家禽研究所山东济南250023

为了建立鸽圆环病毒(PiCV)的快速检测方法,依据PiCV Rep基因的保守序列区域设计了荧光定量PCR的引物和探针,并建立了快速检测PiCV的荧光定量PCR方法。结果显示,构建的PiCV荧光定量PCR方法在1.44×10,1~1.44×10^(7)/μL拷贝标准品间具... 详细信息

为了建立鸽圆环病毒(PiCV)的快速检测方法,依据PiCV Rep基因的保守序列区域设计了荧光定量PCR的引物和探针,并建立了快速检测PiCV的荧光定量PCR方法。结果显示,构建的PiCV荧光定量PCR方法在1.44×10,1~1.44×10^(7)/μL拷贝标准品间具有良好的线性关系,线性相关系数达0.9866;该方法具有良好的敏感性,其检测病毒系列含量下限为14.4拷贝/μL;该方法特异性良好,与鸽新城疫病毒、鸽疱疹病毒、鸽腺病毒等病毒及鸽组织DNA不存在交叉反应;该方法重复性较好,批内重复试验变异系数均介于0.454%~0.473%,批间重复试验变异系数均介于0.367%~0.869%。与传统普通PCR方法相比,所建立的PiCV荧光定量PCR方法敏感性更高,临床样品PiCV检出率更高,两者检测符合率为93.75%。结果表明,所建立的PiCV荧光定量PCR方法为临床检测鸽圆环病毒提供了一种快速、灵敏的检测方法,为PiCV的流行病学调查和主动监测提供了技术支撑。

关键词：鸽圆环病毒荧光定量PCR Rep基因检测

单细胞联合转录组测序分析原发性开角型青光眼小梁网组织细胞通信变化

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眼科新进展 2025年第1期45卷 39-45页

作者：赵雅婷赵春峰王文晶蒋晓迪姜雅琴山东第二医科大学临床医学院山东省潍坊市261000 潍坊眼科医院山东省潍坊市261041

目的探究原发性开角型青光眼(POAG)房角细胞类型和细胞通信模式变化。方法从基因表达综合(GEO)数据库中下载单细胞数据集GSE231749(包含POAG的食蟹猴房角组织样本3例和健康食蟹猴房角组织样本3例,数据更新时间为2023年),分别设为POAG组... 详细信息

目的探究原发性开角型青光眼(POAG)房角细胞类型和细胞通信模式变化。方法从基因表达综合(GEO)数据库中下载单细胞数据集GSE231749(包含POAG的食蟹猴房角组织样本3例和健康食蟹猴房角组织样本3例,数据更新时间为2023年),分别设为POAG组与健康对照组。采用R包“Seurat”对数据进行降维、聚类、分群和可视化,并通过R包“CellChat”进行了细胞通信分析,确认POAG组和健康对照组细胞通信模式的差异。同时,联合GEO数据库中转录组测序(RNA-seq)数据集GSE27276(包含POAG的人类房角组织样本17例和健康人房角组织样本19例,数据更新时间为2023年)的差异基因分析,确定具体的细胞通信信号变化。结果健康对照组与POAG组细胞类型无明显差异,均可分为小梁网细胞、巨噬细胞、黑素细胞、周细胞、施莱姆氏管细胞、有髓施万细胞、无髓施万细胞、平滑肌细胞和血管内皮细胞。POAG组与健康对照组细胞间通信强度具有显著差异,其中,POAG组巨噬细胞移动抑制因子(MIF)-CD74、CX3C趋化因子配体1(CX3CL1)-CX3C趋化因子受体1(CX3CR1)、HBB等通信概率显著上调,分泌型磷蛋白1(SPP1)-(ITGA8+ITGB1)、SPP1-(ITGA4+ITGB1)、IGF2-IGF2R、CCL8-CCR1、CCL8/26/24/2-ACKR2等信号明显下调;RNA-seq分析证实,POAG组HBB、HBD、HBA、CD74等基因表达水平均高于健康对照组。结论小梁网组织中通过MIF/CD74信号上调、SPP1-(ITGA8+ITGB1)、SPP1-(ITGA4+ITGB1)信号下调共同参与纤维化过程,这可能是POAG潜在的致病机制。

关键词：开角型青光眼 RNA测序单细胞分析细胞间通信巨噬细胞移动抑制因子分泌型磷蛋白1

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基于真核表达塞内卡病毒A VP2蛋白的间接ELISA检测方法

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中国兽医杂志 2025年第1期61卷 65-74页

作者：裴宗飞于凯蓝安欣娜陈俊雯张永宁中国农业大学动物医学院北京海淀100193 山东省农业生态与资源保护总站(山东省绿色食品发展中心) 山东济南250131

为建立检测塞内卡病毒A(SVA)抗体的间接酶联免疫吸附试验(ELISA),本试验利用昆虫杆状病毒表达系统表达SVA的主要结构蛋白和保护性抗原VP2,通过间接免疫荧光试验(IFA)验证VP2的免疫反应性,并使用氨基三乙酸镍(NiNTA)树脂亲和纯化重组VP2... 详细信息

为建立检测塞内卡病毒A(SVA)抗体的间接酶联免疫吸附试验(ELISA),本试验利用昆虫杆状病毒表达系统表达SVA的主要结构蛋白和保护性抗原VP2,通过间接免疫荧光试验(IFA)验证VP2的免疫反应性,并使用氨基三乙酸镍(NiNTA)树脂亲和纯化重组VP2蛋白。以纯化的VP2蛋白为包被抗原,利用棋盘滴定法确定最优的抗原包被浓度和待检血清稀释度,通过优化反应条件和确定临界值,建立了检测SVA抗体的间接ELISA检测方法,并评估了其特异性、敏感性、重复性及与IFA的检测符合率。结果显示,重组VP2蛋白在杆状病毒感染的Sf9细胞内呈现可溶性表达,能够被SVA VP2特异性单克隆抗体2F5识别;经Ni-NTA纯化后,获得了分子量约31 kDa的重组VP2蛋白;间接ELISA的最佳抗原包被浓度为2μg/mL,最佳血清稀释度为1∶100,最佳酶标二抗稀释度为1∶10000;阴阳性临界值为0.287;与口蹄疫病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪流行性腹泻病毒、猪丁型冠状病毒、伪狂犬病毒和猪圆环病毒2型抗血清无交叉反应;批内与批间变异系数均低于10%。利用建立的间接ELISA检测了实验室保存的52份猪血清样本,与IFA的检测符合率为96.15%(50/52)。综上,本试验间接ELISA的成功建立为SVA抗体检测和流行病学调查提供了有力工具。

关键词：塞内卡病毒A(SVA) VP2蛋白昆虫杆状病毒表达系统间接ELISA 抗体

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油莎豆含油率的近红外光谱检测模型研究

山东农业科学 2025年

作者：魏海峰时学双党锡强米玛顿珠张梦媛常唯赤列措姆张斌高文伟新疆农业大学农学院山东省农业科学院农作物种质资源研究所日喀则市农牧业科学研究推广中心青州市农业农村局日喀则市南木林县农业农村局

为建立油莎豆块茎含油率的近红外光谱快速无损检测模型，提高育种材料的早代选择效率，本研究以109份油莎豆块茎样本为实验材料，采集波长范围为950～1 650 nm、分辨率为1 nm的近红外光谱，并通过索氏提取法测定块茎粗脂肪含量，剔除异... 详细信息

为建立油莎豆块茎含油率的近红外光谱快速无损检测模型，提高育种材料的早代选择效率，本研究以109份油莎豆块茎样本为实验材料，采集波长范围为950～1 650 nm、分辨率为1 nm的近红外光谱，并通过索氏提取法测定块茎粗脂肪含量，剔除异常样本后共得到103份样本，使用SPXY法将其按3:1的比例划分为校正集与验证集。分别采用标准正态变换、多元散射校正、一阶导、二阶导、SG平滑以及混合方法对原始光谱进行预处理，并基于此建立偏最小二乘回归（PLSR）模型，通过对模型性能的对比分析，筛选出在校正集和验证集上预处理效果均较好的MSC+SG法，用于油莎豆含油率检测模型的构建。然后用竞争性自适应重加权采样（CARS）、无信息变量消除（UVE）算法以及MLP神经网络进行特征波长提取，并构建PLSR模型，结果显示，用CARS和UVE算法分别提取出115个和251个特征波段，建模效果均比全波段建模效果好，其中CARS-PLSR模型预测性能最优，校正集交叉验证均方根误差(RMSECV)、决定系数(R2CV)分别为1.328和0.903，验证集RMSEP、RP2分别为1.206和0.888，验证集相对分析误差(RPDP)为3.040；而MLP-PLSR模型的预测精度与CARS-PLSR模型接近，RMSECV、RCV2分别为1.387和0.903，RMSEP、RP2分别为1.207和0.887，RPDP为3.040，但提取的特征波长仅77个，是3种方法中最少的，说明MLP法能够更有效降低光谱信息重叠，滤除无关信息，更适合用于油莎豆含油率检测。综上，本研究初步建立了基于近红外光谱的油莎豆含油率快速无损检测模型，可为提高育种工作的检测效率提供有效方法，并为油莎豆含油率无损检测提供技术支持。

关键词：油莎豆含油率近红外光谱偏最小二乘回归(PLSR) MLP神经网络特征波长提取

基于多光谱和高光谱的茶树越冬期REC、SPAD和MDA预测模型

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光谱学与光谱分析 2025年第1期45卷 256-263页

作者：徐阳毛艺霖李赫王玉王双双钱文俊丁兆堂范凯青岛农业大学茶叶研究所山东青岛266109 山东省农业科学院茶叶研究所山东济南250100

抗寒生理指标的测定是评价茶树抗寒性的重要途径。传统上,茶树抗寒性的评价方法主要是通过测定茶树在低温胁迫下的理化参数。然而,这些方法不仅费时费力,而且具有破坏性。该研究建立了一种基于多光谱和高光谱成像技术的茶树抗寒性REC、S... 详细信息

抗寒生理指标的测定是评价茶树抗寒性的重要途径。传统上,茶树抗寒性的评价方法主要是通过测定茶树在低温胁迫下的理化参数。然而,这些方法不仅费时费力,而且具有破坏性。该研究建立了一种基于多光谱和高光谱成像技术的茶树抗寒性REC、SPAD、MDA预测模型。首先,采集了低温胁迫下32份育种材料的多光谱与高光谱图像,并测定相应茶树叶片的REC、SPAD、MDA、SP和SS含量。其次,对其中的高光谱图像数据采用MSC、SNV、S-G、1-D和2-D五种方法进行光谱预处理,采用UVE和SPA两种方法筛选特征波段。最后,分别对多光谱和高光谱数据采用SVM、RF和PLS算法建立茶树抗寒性REC、SPAD、MDA预测模型。结果表明,(1)MSC、SNV、S-G、1-D和2-D联合预处理后的光谱更加稳定,峰谷更加突出,模型的准确性和可靠性更高;(2)UVE算法筛选的特征波段数量最多,而SPA算法筛选的特征波段数量最少,更适合高光谱数据建立回归模型;(3)RF模型在多光谱成像预测叶片的REC(R_(p)=0.7352,RMSEP=0.0771)、SPAD(R_(p)=0.5029,RMSEP=6.6818)和MDA含量(R_(p)=0.7846,RMSEP=8.8853)方面具有最高的精度;SPA-SVM模型在高光谱成像预测叶片的SPAD(R_(p)=0.7349,RMSEP=4.1546)和MDA(R_(p)=0.6858,RMSEP=8.5488)方面具有最高的精度,SPA-PLS模型在预测REC(R_(p)=0.6298,RMSEP=0.0669)方面具有最高的精度。因此,基于多光谱、高光谱成像和机器学习算法的REC、SPAD、MDA预测模型提供了一种准确、无损和高效的方法,对茶树抗寒性评价具有重要意义。

关键词：茶树多光谱成像高光谱成像机器学习无损检测抗寒性