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基于Wnt/β-catenin通路探究对叶百部碱抗卵巢癌的作用机制

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中草药 2024年第17期55卷 5887-5897页

作者：何石燕英菲雨夏星高红伟王孝勋广西中医药大学广西壮瑶药重点实验室壮瑶药协同创新中心

目的探讨对叶百部碱抗卵巢癌的作用机制。方法以人卵巢癌SKOV3细胞为研究对象，设置对照组、顺铂（15μg/mL）组和对叶百部碱（50、75、100μg/mL）组。采用MTT法检测对叶百部碱对细胞活力的影响；光学显微镜观察药物干预后细胞形态；... 详细信息

目的探讨对叶百部碱抗卵巢癌的作用机制。方法以人卵巢癌SKOV3细胞为研究对象，设置对照组、顺铂（15μg/mL）组和对叶百部碱（50、75、100μg/mL）组。采用MTT法检测对叶百部碱对细胞活力的影响；光学显微镜观察药物干预后细胞形态；EdU实验检测对叶百部碱对细胞增殖活性的影响；克隆形成实验检测细胞克隆能力；划痕实验和Transwell实验观察细胞迁移和侵袭能力；Hoechst 33258核染色观察细胞凋亡形态；流式细胞术检测细胞凋亡和周期分布情况；Western blotting检测B细胞淋巴瘤-2（B-cell lymphoma-2,Bcl-2）、Bcl-2关联X蛋白（Bcl-2 associated X protein,Bax）、细胞周期蛋白D1（Cyclin D1）、骨髓细胞瘤病毒癌基因（cellular-myelocytomatosis viral oncogene,c-myc）蛋白、β-连环蛋白（β-catenin）、E-钙黏蛋白（E-cadherin）、N-钙黏蛋白（N-cadherin）表达。结果与对照组比较，对叶百部碱对SKOV3细胞具有显著的增殖抑制作用（P<0.01）；对叶百部碱能改变细胞形态，细胞出现凋亡迹象；对叶百部碱显著抑制细胞克隆形成及迁移、侵袭能力（P<0.01）；对叶百部碱组细胞荧光强度增强，细胞核固缩破裂，细胞凋亡率显著升高（P<0.01）,G0/G1期和G2/M期细胞比例显著降低（P<0.01）,S期细胞比例显著升高（P<0.01）；对叶百部碱组Bax/Bcl-2、E-cadherin蛋白表达显著上调（P<0.01）,Cyclin D1、c-myc、β-catenin、N-cadherin蛋白表达显著下调（P<0.05、0.01）。结论对叶百部碱通过下调Wnt/β-catenin信号通路及上调Bax/Bcl-2的表达，促进SKOV3细胞凋亡，抑制其增殖、迁移与侵袭，并将细胞阻滞在S期，进而发挥抗肿瘤作用。

关键词：对叶百部碱卵巢癌 SKOV3细胞 Wnt/β-catenin信号通路增殖侵袭凋亡

基于代谢组学研究中药固肠止泻丸治疗小鼠溃疡性结肠炎的机制

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中国新药杂志 2024年第11期33卷 1144-1154页

作者：范安琪侯宝龙朱洁梁艳妮王征陕西中药资源产业化省部共建协同创新中心/秦药特色资源研究开发国家重点实验室(培育)/陕西省创新药物研究中心/陕西中医药大学咸阳712083

目的:固肠止泻丸为溃疡性结肠炎患者的临床专家推荐用药。课题组前期研究发现固肠止泻丸对结肠炎的临床效果与肠道微生物密切相关,但固肠止泻丸在治疗溃疡性结肠炎方面的作用机制仍不明确。方法:采用2.5%葡聚糖硫酸钠建立溃疡性结肠炎... 详细信息

目的:固肠止泻丸为溃疡性结肠炎患者的临床专家推荐用药。课题组前期研究发现固肠止泻丸对结肠炎的临床效果与肠道微生物密切相关,但固肠止泻丸在治疗溃疡性结肠炎方面的作用机制仍不明确。方法:采用2.5%葡聚糖硫酸钠建立溃疡性结肠炎小鼠模型,探讨固肠止泻丸对溃疡性结肠组织病理变化、疾病活动指数、炎症细胞因子的影响。同时采用液相色谱串联质谱技术检测小鼠血清样本中代谢物水平,并结合主成分分析和正交偏最小二乘法判别分析筛选出差异代谢物,采用MetaboAnalyst 5.0确定与差异代谢物有关的代谢通路。结果:固肠止泻丸降低小鼠疾病活动指数评分,改善结肠组织形态,降低小鼠血清中的肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-6、白细胞介素-1β含量,升高白细胞介素-4、白细胞介素-10含量。代谢组学结果显示,与固肠止泻丸调控相关的潜在差异代谢物共18个,主要涉及甘油磷脂代谢、不饱和脂肪酸的合成、亚麻酸代谢、α-亚麻酸代谢、嘌呤代谢。结论:固肠止泻丸对溃疡性结肠炎有一定的防治作用,其机制可能与调节甘油磷脂代谢、不饱和脂肪酸的合成、亚麻酸代谢、α-亚麻酸代谢、嘌呤代谢有关。

关键词：固肠止泻丸溃疡性结肠炎代谢组学液相色谱串联质谱

挤出搓圆法制备中药临方浓缩水丸的复合辅料研究

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中国中药杂志 2024年第3期49卷 607-617页

作者：田文秀薛爱乐李文杰郑敏悦鲜洁晨洪燕龙上海中医药大学上海中医健康服务协同创新中心上海201203 上海中医药大学创新中药研究院上海201203 中药现代制剂技术教育部工程研究中心上海201203

为优选适于挤出搓圆法制备临方浓缩水丸的复合辅料种类和配比,并探究各辅料在临方浓缩水丸制备过程中的影响作用,该研究首先以“零辅料”临方浓缩水丸制备技术中适宜充当“辅料”的纤维料和粉性料中药为对标物料,以粉体物理性质中对软... 详细信息

为优选适于挤出搓圆法制备临方浓缩水丸的复合辅料种类和配比,并探究各辅料在临方浓缩水丸制备过程中的影响作用,该研究首先以“零辅料”临方浓缩水丸制备技术中适宜充当“辅料”的纤维料和粉性料中药为对标物料,以粉体物理性质中对软材物理性质影响较大的吸水性能和转矩流变性为依据,确定复合辅料的种类;进一步采用D-最优混料试验设计方法选出最优复合辅料的配比。为了证明最优复合辅料的通用性,选取3个出膏率分别为低、中、高的中药复方对最优配比进行验证;并以丸剂成型质量的4个参数为指标,探究各辅料对临方浓缩水丸成型的影响。优化得到的复合辅料种类及最佳配比为糊精-微晶纤维素-低取代羟丙纤维素1∶2∶4,采用该复合辅料制备临方浓缩水丸工艺稳定,丸剂成型质量好,适用范围广。其中糊精充当稀释剂,同时会加快丸剂的出条速度;MCC主要起黏合剂的作用,增加丸条的内聚性和黏性;L-HPC作为吸水剂和崩解剂,可以吸收、容纳浓缩液的水分,同时具有强崩解作用。

关键词：中药临方浓缩水丸挤出搓圆法复合辅料 D-最优混料设计

玉女煎体外抗炎最佳活性部位筛选及其物质基础研究

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海军军医大学学报 2024年第1期45卷 64-73页

作者：吕洁王岩松杨娟雷莉妍陕西中药资源产业化省部共建协同创新中心秦药特色资源研究开发国家重点实验室(培育)陕西省创新药物研究中心陕西中医药大学咸阳712083

目的筛选玉女煎复方体外抗炎的最佳活性部位,并对其成分进行分析,探讨其物质基础。方法玉女煎复方采用水提取,提取物浓缩后经D101大孔树脂进行粗分,分为水洗脱、30%乙醇-水洗脱、60%乙醇-水洗脱及95%乙醇-水洗脱4个洗脱部位。采用脂多... 详细信息

目的筛选玉女煎复方体外抗炎的最佳活性部位,并对其成分进行分析,探讨其物质基础。方法玉女煎复方采用水提取,提取物浓缩后经D101大孔树脂进行粗分,分为水洗脱、30%乙醇-水洗脱、60%乙醇-水洗脱及95%乙醇-水洗脱4个洗脱部位。采用脂多糖诱导小鼠巨噬细胞炎症模型评价玉女煎水提液及各洗脱部位的抗炎活性,使用MTT法和Griess法检测细胞活力和一氧化氮生成量。随后对筛选出的最佳活性部位的抗炎活性进行验证。采用ELISA法检测IL-1β、TNF-α、IL-6水平,用显微暗场成像法观察细胞形态,用免疫荧光实验检测细胞内NF-κB p65表达。最后通过中压色谱分离凝胶柱分离结合活性追踪的方法对最佳活性部位成分进行分离,用核磁共振仪进行鉴定。结果玉女煎水提液、水洗脱部位、30%乙醇-水洗脱部位及60%乙醇-水洗脱部位均有抗炎活性,其中水洗脱部位和30%乙醇-水洗部位抗炎活性弱于水提液,60%乙醇-水洗脱部位抗炎活性最强,95%乙醇-水洗脱部位无抗炎活性。60%乙醇-水洗脱部位对脂多糖诱导的细胞形态改变、NF-κB p65表达及入核增加的抑制作用最强,从该部位分离出了sonnerphenolic B、(+)-nyasol、broussonin A、2,4-二甲基苯甲酸和2,4-二羟基苯甲酸5个化合物,其中3个归属知母。结论60%乙醇-水洗脱部位为玉女煎抗炎的最佳活性部位,知母可能是其抗炎活性的主要贡献者。

关键词：玉女煎抗炎作用最佳活性部位物质基础成分分析

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藏药“欧贝”本草考证及资源分布现状

中国现代应用药学 2024年

作者：辜晓英蒋泽英陈红刚张金保晋玲段海婧赵文龙甘肃中医药大学药学院西北中藏药省部共建协同创新中心甘肃省珍稀中药资源评价与保护利用工程研究中心

通过查阅古代藏本草、藏医籍，结合现代文献资料，对“欧贝”药材的译名、基原、药用部位、性味和功效主治等进行考证。结果表明，“欧贝”主要来源于五脉绿绒蒿(Meconopsis quintuplinervia Regel)、红花绿绒蒿(Meconopsis punicea Max... 详细信息

通过查阅古代藏本草、藏医籍，结合现代文献资料，对“欧贝”药材的译名、基原、药用部位、性味和功效主治等进行考证。结果表明，“欧贝”主要来源于五脉绿绒蒿(Meconopsis quintuplinervia Regel)、红花绿绒蒿(Meconopsis punicea Maxim.)、全缘叶绿绒蒿[Meconopsis integrifolia (Maxim.) French.]等14种罂粟科绿绒蒿属植物。其中“欧贝完保”包括5种绿绒蒿，“欧贝玛保”包括3种绿绒蒿，“欧贝赛保”包括4种绿绒蒿，“欧贝嘎保”包括2种绿绒蒿。“欧贝”味甘、苦、涩，性寒、凉。功效为清热解毒、消炎止痛、利尿，尤善清肝肺热；用于治疗各种肝肺热症、肝炎、肺炎、水肿等症。古代藏本草“分级式”记载特点是造成“欧贝”等藏药材多基原的主要原因之一。“欧贝”主要分布于西藏、青海、甘肃、四川和云南五省覆盖的青藏高原地区，生境多见于草地、灌丛、林下和流石滩等。目前多种绿绒蒿已处于濒危状态。本研究旨在对“欧贝”野生资源保护和藏药开发利用提供重要参考。

关键词：欧贝绿绒蒿本草考证资源分布

基于UPLC-CAD指纹图谱和多成分含量测定的痰热清胶囊质量评价

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中国现代应用药学 2024年

作者：刘悦刘富岗孙淑仃李晨冉孙琪赵迪冯素香河南中医药大学呼吸疾病中医药防治省部共建协同创新中心河南省现代中药研发与应用工程研究中心

目的基于超高效液相色谱-电喷雾检测器(UPLC-CAD)建立痰热清胶囊指纹图谱和多成分同时定量的整合分析方法，为优化其质量标准提供参考。方法采用Hypersil GOLD(2.1 mm×100 mm, 3μm)色谱柱，以乙腈-0.1%甲酸水溶液为流动相，梯度洗... 详细信息

目的基于超高效液相色谱-电喷雾检测器(UPLC-CAD)建立痰热清胶囊指纹图谱和多成分同时定量的整合分析方法，为优化其质量标准提供参考。方法采用Hypersil GOLD(2.1 mm×100 mm, 3μm)色谱柱，以乙腈-0.1%甲酸水溶液为流动相，梯度洗脱，流量0.2 mL·min-1，柱温30℃，进样量5μL。CAD雾化器温度35℃，采集频率5 Hz，过滤常数5.0 s。采用UPLC-CAD建立痰热清胶囊的指纹图谱，结合相似度评价、主成分分析对10批痰热清胶囊进行质量评价。同时以连翘酯苷A、黄芩苷、连翘苷、胆酸、熊去氧胆酸、鹅去氧胆酸及去氧胆酸7个活性成分为指标，建立其含量测定方法。结果痰热清胶囊的UPLC-CAD指纹图谱共标定了47个共有峰，相似度均>0.970。经对照品比对指认出9个化学成分。定量分析的7个成分在各自浓度范围内呈良好的线性关系，r值在0.999 1～0.999 8，平均加样回收率(n=6)为96.94%～100.23%,RSD为1.33%～2.62%。10批样品中连翘酯苷A、黄芩苷、连翘苷、胆酸、熊去氧胆酸、鹅去氧胆酸及去氧胆酸的含量分别为10.40～13.40、171.26～186.94、3.54～4.47、3.77～5.25、154.74～168.64、88.71～96.70、10.21～11.50mg·g-1。主成分分析结果显示，主成分1～9是影响痰热清胶囊质量评价的主要因子。结论本研究建立的UPLC指纹图谱和多指标成分含量同时测定方法准确、简单，专属性强，重复性好，可有效地评价痰热清胶囊的质量。

关键词：痰热清胶囊指纹图谱含量测定 UPLC-CAD 质量评价

两株马立克病毒的分离鉴定及其主要致病基因分析

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中国动物传染病学报 2024年第2期32卷 65-72页

作者：闫彩虹金文杰刘文博羊扬钱琨王志强彭大新扬州大学兽医学院江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心扬州225009

为了解国内鸡群马立克病毒(MDV)流行毒株的分子特征,采用细胞培养法对马立克病疑似病鸡抗凝血进行MDV分离,间接荧光法鉴定MDV血清型,PCR扩增分离病毒的meq和pp38两个主要致病基因,所得序列与MDV参考毒株的序列进行比对分析。结果显示,... 详细信息

为了解国内鸡群马立克病毒(MDV)流行毒株的分子特征,采用细胞培养法对马立克病疑似病鸡抗凝血进行MDV分离,间接荧光法鉴定MDV血清型,PCR扩增分离病毒的meq和pp38两个主要致病基因,所得序列与MDV参考毒株的序列进行比对分析。结果显示,共分离鉴定出2株MDV I型毒株,分别命名为JS0316和JS0424。meq基因编码的氨基酸序列结果显示,2个MDV分离株缺乏弱毒疫苗株的特征(A71S、P194-),具有MDV强毒分离株的分子特征(D80Y、V115A、T139A、P176R和P217A)。同时,JS0316 Meq蛋白出现Q93R和V123A突变,pp38蛋白出现L98I和F240S突变,而JS0424 Meq蛋白出现P217T突变,pp38蛋白出现W67G和V210A突变。因此,2株MDV均具有国内流行强毒株的分子特征,同时存在新的基因突变。

关键词：马立克病毒分离鉴定 meq pp38 序列分析

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从神经炎症角度论丹栀逍遥散抗抑郁作用机制的研究进展

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中草药 2024年第7期55卷 2442-2451页

作者：吴梦迪刘黎明苏攀许二平河南中医药大学中医药科学院豫药全产业链研发河南省协同创新中心河南郑州450046

在全球范围内,抑郁症是导致自杀的主要原因之一,造成巨大的经济损失和社会负担。其病因复杂,临床症状多样,确切的发病机制暂无定论。中医理论认为“郁证”的“气郁化火”证型与炎症关系密切。近年来,大量研究证实神经炎症调控在抑郁症... 详细信息

在全球范围内,抑郁症是导致自杀的主要原因之一,造成巨大的经济损失和社会负担。其病因复杂,临床症状多样,确切的发病机制暂无定论。中医理论认为“郁证”的“气郁化火”证型与炎症关系密切。近年来,大量研究证实神经炎症调控在抑郁症发病过程中起到关键作用,提示从神经炎症的角度研发新型抗抑郁药物具有广阔前景。丹栀逍遥散可通过减轻神经炎症治疗抑郁症,且具有显著疗效,相比临床常用抗抑郁药物显示出诸多优势。目前关于丹栀逍遥散基于炎症通路发挥抗抑郁功效的机制探讨较少,因此基于抑郁症的神经炎症发病机制,结合中医“郁证”理论,从丹栀逍遥散及方中药对和核心抗炎活性成分的抗抑郁作用机制进行综述,为丹栀逍遥散及其类方抗抑郁功效提供科学依据,也为抑郁症的机制研究和新型抗抑郁药物研发提供借鉴。

关键词：抑郁症郁证气郁化火神经炎症丹栀逍遥散抗炎活性成分

含热不稳定成分的中药临方浓缩水丸制备工艺选择研究

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中国中药杂志 2024年第3期49卷 618-624页

作者：薛爱乐田文秀李文杰郑敏悦吴飞洪燕龙上海中医药大学上海中医健康服务协同创新中心上海201203 上海中医药大学创新中药研究院上海201203 中药现代制剂技术教育部工程研究中心上海201203

在临方浓缩水丸制备过程中,处方水煎液需要经过受热浓缩与辅料或者饮片细粉混合制备软材。而部分中药成分受热易分解或转化,因此,为了减少处方中热不稳定活性成分的损失,优选中药临方浓缩水丸的制备工艺,该研究以苓桂术甘方、小承气方... 详细信息

在临方浓缩水丸制备过程中,处方水煎液需要经过受热浓缩与辅料或者饮片细粉混合制备软材。而部分中药成分受热易分解或转化,因此,为了减少处方中热不稳定活性成分的损失,优选中药临方浓缩水丸的制备工艺,该研究以苓桂术甘方、小承气方、散偏方、小儿七星方、逍遥方5个含有热不稳定成分中药的复方为模型处方,基于研究团队前期建立的2种临方浓缩水丸制备技术,分别制备全浸膏浓缩水丸以及零辅料浓缩水丸,进行特征图谱表征,并与全方水煎液特征图谱进行对比。结果表明5个模型处方的零辅料浓缩水丸的特征图谱与全方水煎液接近,其特征峰的数量及峰面积均高于全浸膏浓缩水丸,且部分峰的峰面积高于全方水煎液。提示当处方中含有热不稳定成分的中药时,优先选择“药辅合一”的工艺制备零辅料临方浓缩水丸,以便更大程度地保留热不稳定成分,为后续中药临方丸剂的合理开发和应用提供依据。

关键词：中药临方制剂浓缩水丸特征图谱热不稳定成分制备工艺