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牦牛基因组拷贝数变异研究进展

畜牧兽医学报 2024年第3期55卷 933-943页

作者：徐东辉徐宇辉李瑞哲成海建马志杰青海大学畜牧兽医科学院西宁810016 农业农村部青藏高原畜禽遗传育种重点实验室西宁810016 青海省高原家畜遗传资源保护与创新利用重点实验室西宁810016 山东省农业科学院畜牧兽医研究所济南250100 山东省畜禽疫病防治与繁育重点实验室济南250100

拷贝数变异(copy number variation, CNV)是基因组结构变异(structural variation, SV)的重要组成部分。与SNP(single nucleotide polymorphism)相比,CNV显示出更丰富的复杂遗传变异,在家畜重要经济性状遗传机理、疾病诱因和物种进化等... 详细信息

拷贝数变异(copy number variation, CNV)是基因组结构变异(structural variation, SV)的重要组成部分。与SNP(single nucleotide polymorphism)相比,CNV显示出更丰富的复杂遗传变异,在家畜重要经济性状遗传机理、疾病诱因和物种进化等研究方面具有重要意义。牦牛作为青藏高原的重要牛种,近年来随着高通量测序技术的快速发展和参考基因组的不断升级,其全基因组水平上CNV的研究获得重要进展。本文在阐述基因组CNV的形成原理、作用机制和检测方法基础上,综述了近10年来牦牛基因组CNV的研究现状,分析探究了存在的一些问题与不足,并对其未来的发展和应用趋势进行了展望,以期为深入开展牦牛基因组研究和加速牦牛遗传资源的分子育种进程提供参考。

关键词：牦牛基因组拷贝数变异(CNV)

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产气荚膜梭菌四环素耐药基因双重荧光定量PCR检测方法的建立

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畜牧兽医学报 2024年

作者：欧兰欣叶碧锦孙铭飞戚南山李娟吕敏娜林栩慧蔡海明胡俊菁宋勇乐陈祥杰朱易斌尹理君张健騑廖申权张浩吉佛山科学技术学院生命科学与工程学院广东省农业科学院动物卫生研究所广东省畜禽疫病防治研究重点实验室农业农村部禽流感等家禽重大疾病防控重点实验室

旨在开发一种快速、灵敏的针对产气荚膜梭菌四环素类耐药基因tetA（P）和tetB（P）的双重荧光定量PCR检测方法，为快速检测产气荚膜梭菌四环素类抗生素耐药性提供新策略。本研究针对tetA（P）和tetB（P）的保守序列设计引物和探针，构... 详细信息

旨在开发一种快速、灵敏的针对产气荚膜梭菌四环素类耐药基因tetA（P）和tetB（P）的双重荧光定量PCR检测方法，为快速检测产气荚膜梭菌四环素类抗生素耐药性提供新策略。本研究针对tetA（P）和tetB（P）的保守序列设计引物和探针，构建重组质粒，对退火温度和体系进行优化，同时采用药敏纸片琼脂扩散法测定菌株对四环素类药物的敏感性加以验证。结果发现，优化后的反应程序为95 ℃ 30 s；95 ℃ 5 s，56 ℃ 30 s，共 39个循环。使用该反应程序仅能扩增重组质粒，对照菌株无扩增曲线；组内变异系数小于1.3%，组间变异系数小于1.8%，重组质粒最低检测限度为102copies·μL－1。使用本方法对33份产气荚膜梭菌临床分离株样品进行耐药基因检测，同时进行药敏试验，发现本研究建立的检测方法对四环素耐药基因的检出率均为75.8%（25/33），且与药敏试验结果一致。综上，本研究建立了一种特异、敏感、重复性好的产气荚膜梭菌四环素类耐药基因tetA（P）和tetB（P）的双重荧光定量PCR检测方法。

关键词：产气荚膜梭菌四环素 tetA(P) tetB(P) 双重荧光定量PCR

鸡球虫病7价多表位嵌合重组抗原ET seven真核质粒的构建、表达及其初步功能分析

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畜牧兽医学报 2024年

作者：倪君丽刘欣超孙栋方肆云王定爱申翰钦严专强戚南山孙铭飞顾有方广东省农业科学院动物卫生研究所广东省畜禽疫病防治研究重点实验室农业农村部禽流感等家禽重大疾病防控重点实验室温氏食品集团股份有限公司安徽科技学院动物科技学院

为构建以鸡柔嫩艾美耳球虫EtAMA1、EtAMA2、EtMIC3、EtMIC4、EtMIC13、EtROP5和EtSAG1等入侵相关蛋白分子为抗原基础的多表位嵌合重组抗原ET seven真核表达质粒，同时验证其在DF-1细胞中的表达和通过不同辅助递送方式在鸡体内的表达及... 详细信息

为构建以鸡柔嫩艾美耳球虫EtAMA1、EtAMA2、EtMIC3、EtMIC4、EtMIC13、EtROP5和EtSAG1等入侵相关蛋白分子为抗原基础的多表位嵌合重组抗原ET seven真核表达质粒，同时验证其在DF-1细胞中的表达和通过不同辅助递送方式在鸡体内的表达及其免疫功能。本研究利用生信分析获得7个抗原表位，分别提取柔嫩艾美耳球虫不同发育阶段虫体总RNA，通过RT-PCR扩增获得EtAMA1、EtAMA2、EtMIC3、EtMIC4、EtMIC13、EtROP5和EtSAG1等7个抗原的表位区域编码基因，构建基因图谱由公司合成以pcDNA3.1(+)为真核表达载体，构建真核表达质粒pcDNA3.1-ET seven；将鉴定阳性、测序正确的质粒pcDNA3.1-ET seven转染至DF-1细胞，利用RT-PCR和Western blot方法检测ET seven重组基因片段在DF-1细胞中的表达；以磷酸钙纳米颗粒作为辅助质粒递送佐剂检测pcDNA3.1-ET seven在鸡体内引起的细胞因子水平变化，间接ELISA检测特异性IgG抗体水平。结果显示：成功构建真核表达质粒pcDNA3.1-ET seven，RT-PCR和Western blot检测到ET seven的特异性表达，质粒通过磷酸钙纳米佐剂免疫鸡体后，检测细胞因子IL-2、IL-6、IL-10、IL-12、IFN-γ、CD-40均在三次免疫后7 d高水平表达，其中CD-40与IL-6的表达水平最高。pcDNA3.1-ET seven重组质粒结合磷酸钙佐剂肌肉注射二次免疫后7 d间接ELISA检测特异性IgG抗体呈阳性。结果表明，pcDNA3.1-ET seven重组质粒构建成功，在鸡体内有良好的免疫原性，为鸡球虫病的疫苗防控提供新的思路和技术支撑。

关键词：柔嫩艾美耳球虫多表位重组质粒真核表达 DNA疫苗

克拉玛依地区某奶牛场犊牛肺炎病原检测、分离鉴定及药敏试验

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中国奶牛 2024年第4期 32-36页

作者：邹阿玲包灵杰谢本华王磊杨宏军张亮赵奕朵张景艳张康李建喜中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所/甘肃省中兽药工程技术研究中心兰州730050 克拉玛依绿成农业开发有限责任公司克拉玛依834000 山东省农业科学院畜牧兽医研究所/山东省畜禽疫病防治与繁育重点实验室济南250100 深圳易瑞生物技术股份有限公司深圳518101

为确定新疆克拉玛依地区某奶牛场犊牛肺炎的发病病因并提供合适的治疗方案和防控措施,采集该牛场12头患肺炎犊牛的鼻腔黏液,进行了牛呼吸道疾病相关病原检测、分离培养、形态学观察、生化试验、16S rRNA基因测序和药物敏感性试验。结果... 详细信息

为确定新疆克拉玛依地区某奶牛场犊牛肺炎的发病病因并提供合适的治疗方案和防控措施,采集该牛场12头患肺炎犊牛的鼻腔黏液,进行了牛呼吸道疾病相关病原检测、分离培养、形态学观察、生化试验、16S rRNA基因测序和药物敏感性试验。结果显示,犊牛肺炎主要是以牛支原体为主的混合感染发病,从病料中分离得到的菌落呈现典型的“煎蛋样”,经过生化鉴定和16S rRNA测序分析,分离得到1株牛支原体,将其命名*** KLMY株。通过药敏试验从13种药物里选择出恩诺沙星对*** KLMY株最为敏感。通过以上研究表明,造成此次犊牛肺炎的主要病原为牛支原体,且耐药现象严重,本试验结果为该牛场进一步治疗犊牛肺炎提供了合理有效的依据。

关键词：犊牛肺炎牛支原体混合感染药敏试验 16S rRNA

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三种消毒剂对鹅星状病毒杀灭效果的评价

广东畜牧兽医科技 2024年第3期49卷 88-92页

作者：邝瑞欢黄允真李林林向勇翟颀孙敏华李珂信爱国李海贤董嘉文广东省农业科学院动物卫生研究所/农业农村部禽流感等家禽重大疾病防控重点实验室/广东省畜禽疫病防治研究重点实验室广东广州510640 云南省畜牧兽医科学院养禽与禽病研究所云南昆明650224 广州五丰动物保健品有限公司广东广州510640

为了解不同成分的消毒剂对鹅星状病毒的杀灭效果,该试验选择复方戊二醛、二氯异氰脲酸钠粉、聚维酮碘溶液进行杀灭效果评估,以指导临床实践中的消毒灭源工作。经对三种消毒剂在10℃、25℃、37℃下不同稀释比例、不同作用时间对鹅星状病... 详细信息

为了解不同成分的消毒剂对鹅星状病毒的杀灭效果,该试验选择复方戊二醛、二氯异氰脲酸钠粉、聚维酮碘溶液进行杀灭效果评估,以指导临床实践中的消毒灭源工作。经对三种消毒剂在10℃、25℃、37℃下不同稀释比例、不同作用时间对鹅星状病毒的杀灭效果进行实验室评价,结果显示:在室温环境下(25℃),作用时间为1 min、5 min和10 min,复方戊二醛1∶80倍稀释可完全杀灭鹅星状病毒(104.0 EID50),而复方戊二醛1∶300倍稀释及其他两种消毒剂在推荐使用浓度下均未能有效杀灭鹅星状病毒。对于尿囊液里高含量(104.0 EID50)的鹅星状病毒,1∶80倍稀释的复方戊二醛溶液在10℃时需要作用10 min才能有效杀灭星状病毒,但尿囊液里低含量(103.0 EID50)的鹅星状病毒在此浓度下作用1 min就能被完全杀灭。当温度达到25℃时,1∶80倍稀释的复方戊二醛溶液1 min即可杀灭鹅星状病毒;1:160倍稀释的复方戊二醛溶液则需要10 min才能完全杀灭鹅星状病毒。继续升高温度至37℃,1∶80和1∶160倍稀释的复方戊二醛溶液与鹅星状病毒作用1 min即可起到有效杀灭效果。综上所述,采用1∶80倍稀释的复方戊二醛杀灭鹅星状病毒(104.0 EID50),在10℃、25℃和37℃作用的最短时间分别是10 min、1 min和1 min。该研究明确了三种不同消毒剂首次用于消毒,在不同温度和作用时间下对鹅星状病毒的杀灭效果,为鹅星状病毒的生物安全防控提供参考。

关键词：鹅星状病毒消毒复方戊二醛异氰脲酸钠聚维酮碘

miRNA在奶牛子宫内膜炎治疗靶点的研究进展

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中国牛业科学 2024年第2期50卷 75-79页

作者：张志浩张子敬吕世杰朱肖亭李欣淼张格阳闵佳屈俊峰黄永震施巧婷王二耀河南省农业科学院畜牧兽医研究所/河南省畜禽繁育与营养调控重点实验室河南郑州450002 河南农业大学动物科技学院河南郑州450002 河南省科技创新促进中心河南郑州450008 西北农林科技大学动物科技学院陕西杨凌712100

奶牛子宫内膜炎是奶牛常见的产后疾病,给奶牛养殖业造成了很大的损失,加之抗生素的滥用和耐药菌株的出现,使得寻求子宫内膜炎在分子层面的治疗方法更加迫切,本文就子宫内膜炎的病因、危害、诊断方法及miRNA作为治疗靶点进行阐述,以期为... 详细信息

奶牛子宫内膜炎是奶牛常见的产后疾病,给奶牛养殖业造成了很大的损失,加之抗生素的滥用和耐药菌株的出现,使得寻求子宫内膜炎在分子层面的治疗方法更加迫切,本文就子宫内膜炎的病因、危害、诊断方法及miRNA作为治疗靶点进行阐述,以期为子宫内膜炎的治疗提供参考。

关键词：奶牛子宫内膜炎病因危害诊断方法 miRNA

马立克病毒MDLV21株对SPF鸡的致病性与免疫保护

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中国动物传染病学报 2022年

作者：安子齐赵亚楠王淑雯徐敏丽崔宁许传田苏帅山东省农业科学院畜牧兽医研究所山东省畜禽疫病防治与繁育重点实验室山东农业大学动物医学院山东省动物生物工程与疾病防治重点实验室

为了研究缺失RLORF6、Meq基因的鸡马立克病病毒（MDV）MDLV21株对SPF鸡的致病性与免疫保护效果。通过接种SPF鸡，比较MDLV21株对鸡的体重、免疫器官指数、灭活疫苗诱导抗体水平的影响并统计死亡率和肿瘤率；通过攻毒保护试验，统计分析M... 详细信息

为了研究缺失RLORF6、Meq基因的鸡马立克病病毒（MDV）MDLV21株对SPF鸡的致病性与免疫保护效果。通过接种SPF鸡，比较MDLV21株对鸡的体重、免疫器官指数、灭活疫苗诱导抗体水平的影响并统计死亡率和肿瘤率；通过攻毒保护试验，统计分析MDLV21与CVI988/Rispens对MDV超强毒Md5的免疫保护指数。结果显示，MDLV21株接种SPF鸡的体重、胸腺和法氏囊免疫器官指数均与对照组SPF鸡差异不显著；接种鸡与对照组鸡的禽流感、新城疫抗体滴度相似。MDLV21株接种鸡在整个周期没有死亡以及肿瘤发生，脾脏、肝脏组织切片显示细胞结构正常。MDLV21、CVI988/Rispens对感染Md5的SPF鸡分别提供90%、70%的免疫保护。综上，MDV MDLV21株对SPF鸡没有致病性，对MDV Md5具有良好的免疫保护。为MD的防控提供一株新的生物安全性、免疫效果良好的疫苗候选株。

关键词：马立克病毒 RLORF6基因 Meq基因缺失株致病性免疫保护效果

STING信号通路在不同宿主疾病中的研究进展

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广东畜牧兽医科技 2024年第2期49卷 57-64,84页

作者：王焕硕牛瑞辉赵亮罗胜军温肖会宋帅贾春玲周秀蓉吕殿红广东省农业科学院动物卫生研究所/广东省畜禽疫病防治研究重点实验室/农业农村部兽用药物与诊断技术广东科学观测实验站广东广州510640 西藏农牧学院动物科学学院西藏林芝860000 岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心广东肇庆526238

cGAS-STING是一种细胞内DNA感受器,可以针对入侵的病原体和自身免疫性疾病激活先天性免疫应答,STING通路激活可启动干扰素调节因子(IRF3)和核因子(NF-κB)。IRF3能向细胞核内转运,并触发免疫刺激基因(ISGs)和Ⅰ型干扰素(IFNs)的表达,导... 详细信息

cGAS-STING是一种细胞内DNA感受器,可以针对入侵的病原体和自身免疫性疾病激活先天性免疫应答,STING通路激活可启动干扰素调节因子(IRF3)和核因子(NF-κB)。IRF3能向细胞核内转运,并触发免疫刺激基因(ISGs)和Ⅰ型干扰素(IFNs)的表达,导致免疫细胞激活并迁移到靶细胞,NF-κB能驱动炎症细胞因子的产生。cGAS-STING可导致介导炎症反应的蛋白产生,并且能在宿主抵抗入侵的病原、自身免疫性疾病、肿瘤免疫和衰老相关炎症中发挥着独特和关键的作用。该文以cGAS-STING信号通路的结构和功能作为切入点,对其在不同宿主中的调控作用进行综合论述,以期为cGAS-STING的相关研究提供理论依据和参考价值。

关键词： STING 信号通路先天性免疫宿主疾病

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鸡球虫体外培养模型及应用研究进展

中国畜牧兽医 2024年第1期51卷 292-301页

作者：潘晓婷李娟陈兵刘俊杰戚南山廖申权吕敏娜林栩慧蔡海明胡俊菁宋勇乐白银山孙铭飞广东省农业科学院动物卫生研究所广东省畜禽疫病防治研究重点实验室农业农村部禽流感等家禽重大疾病防控重点实验室广州510640 佛山科学技术学院佛山528000 深圳海关动植物检验检疫技术中心深圳518038

鸡球虫病是由艾美耳球虫寄生于鸡肠上皮细胞内所引起的一种寄生性原虫病,感染鸡体重减轻、营养不良、肠道损伤等,严重危害养鸡业的健康发展。球虫的生命周期包括从无性阶段到有性阶段的转换并局限于一个宿主。目前对球虫的研究主要包括... 详细信息

鸡球虫病是由艾美耳球虫寄生于鸡肠上皮细胞内所引起的一种寄生性原虫病,感染鸡体重减轻、营养不良、肠道损伤等,严重危害养鸡业的健康发展。球虫的生命周期包括从无性阶段到有性阶段的转换并局限于一个宿主。目前对球虫的研究主要包括在细胞生物学及其不同生命阶段的蛋白质表达和运输机制、宿主细胞入侵和宿主-寄生虫相互作用、新型药物靶标筛选等方面。鉴于研究问题的多样性,以及减少和取代动物试验的要求,建立高效的体外培养模型成为研究鸡球虫生物学特性、抗球虫疫苗和药物的基本条件。笔者重点阐述了鸡球虫体外培养模型及其在药物抗虫效果研究中的应用,包括鸡胚培养模型、二维培养模型(原代细胞培养模型、传代细胞系培养模型)及三维类器官培养模型。越来越多培养技术的突破为研究球虫生命周期阶段和干预策略开辟了新的途径,也为深入了解鸡球虫致病机制、抗球虫药物研发提供依据。

关键词：鸡艾美耳球虫体外培养模型

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