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纳豆芽孢杆菌的生物学功能和在畜禽生产中的应用

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饲料研究 2024年

作者：张超帅李绍钰河南农业大学动物科技学院河南省农业科学院畜牧兽医研究所

随着饲料禁抗，养殖减抗政策的实施，益生菌作为抗生素的主要替代产品之一，被学者广泛研究。纳豆菌作为芽孢杆菌的一种，具有强抗逆性的同时，还能够分泌产生多种如纳豆激酶（NK）、维生素K、异黄酮等有效活性成分，具有调节胃肠道微... 详细信息

随着饲料禁抗，养殖减抗政策的实施，益生菌作为抗生素的主要替代产品之一，被学者广泛研究。纳豆菌作为芽孢杆菌的一种，具有强抗逆性的同时，还能够分泌产生多种如纳豆激酶（NK）、维生素K、异黄酮等有效活性成分，具有调节胃肠道微生物稳态、抗炎和免疫调节等作用。在畜禽生产中，纳豆菌能够改善肉鸡生产性能和蛋鸡产蛋性能，维持畜禽健康，减少猝死概率；提高猪肉品质，减少肉猪排泄物中的粪臭素的含量，降低对环境的污染；加快肠道微生物区系的构建，减少断奶应激对犊牛的影响，将犊牛断奶日粮提前；改善奶牛瘤胃菌群结构，提高奶牛产奶性能。本文主要对纳豆菌的生物学功能及近年来在畜禽生产中的研究进展进行整合概述，为实际生产提供一定参考。

关键词：纳豆菌生物学功能畜禽生产应用

塞内卡病毒LAMP可视化快速检测方法的建立及初步应用

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中国动物传染病学报 2024年第3期 88-94页

作者：田瑶李琛杨莹李佳昕王硕时建立彭喆徐绍建吴晓燕刘畅韩红韩先杰李俊青岛农业大学动物医学院山东省农业科学院畜牧兽医研究所山东师范大学生命科学院

为建立塞内卡病毒(SVA)的快速检测方法，本研究在SVA高度保守区域，分别设计了5对特异性LAMP引物，并通过反应条件优化、敏感性试验、特异性试验以及临床样本检测，建立了一种经济、特异、敏感的SVA检测方法。在62℃水浴55 min扩增出大... 详细信息

为建立塞内卡病毒(SVA)的快速检测方法，本研究在SVA高度保守区域，分别设计了5对特异性LAMP引物，并通过反应条件优化、敏感性试验、特异性试验以及临床样本检测，建立了一种经济、特异、敏感的SVA检测方法。在62℃水浴55 min扩增出大于220 bp的特异性阶梯状条带，以质粒为模板进行敏感性试验结果表明该方法在5.1 copies/μL时仍可以检测出SVA，比普通PCR敏感1000倍。特异性试验结果显示该方法与猪肺炎支原体(MPH)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪圆环病毒2型(PCV2)、猪圆环病毒3型(PCV3)、猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸综合增病毒(PRRSV)均无交叉反应，应用该方法检测72例临床疑似病料，阳性率为33%(24例)。与普通PCR相比较，该方法操作简便、快速、特异、经济，本研究提供了一种更适于临床检测的SVA检测方法。

关键词：塞内卡病毒环介导等温扩增快速检测

Plackett-Burman和Box-Behnken试验优化莫海威芽孢杆菌HXS-LV12产纤维素酶发酵工艺

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动物营养学报 2024年第1期36卷 564-578页

作者：白长胜王欢尹珺伊李莉吴宪陈亮徐婷婷沈思思田秋丰王岩刘秋瑾苗艳兰世捷江波涛黑龙江省农业科学院畜牧兽医分院黑龙江省饲用中草药发酵工程技术研究中心齐齐哈尔161005 黑龙江省农业科学院畜牧兽医分院齐齐哈尔161005

本试验以莫海威芽孢杆菌HXS-LV12为研究对象,优化其发酵产纤维素酶工艺。首先,通过单因素试验对其发酵工艺(碳源种类、碳源质量浓度、氮源种类、氮源质量浓度、无机盐种类、无机盐质量浓度、转速、接种量、发酵时间、初始pH和发酵温度)... 详细信息

本试验以莫海威芽孢杆菌HXS-LV12为研究对象,优化其发酵产纤维素酶工艺。首先,通过单因素试验对其发酵工艺(碳源种类、碳源质量浓度、氮源种类、氮源质量浓度、无机盐种类、无机盐质量浓度、转速、接种量、发酵时间、初始pH和发酵温度)进行初步优化,然后通过Plackett-Burman试验,筛选出3个显著影响HXS-LV12产纤维素酶的因素,再利用最陡爬坡试验确定其产纤维素酶的最大响应区域,然后通过Box-Behnken试验确定其最优产纤维素酶工艺。优化工艺条件为羧甲基纤维素钠(CMC-Na)质量浓度32.9 g/L,酵母浸粉(YEP)质量浓度17.6 g/L,磷酸氢二钾质量浓度5.7 g/L,转速190 r/min,接种量6.5%,发酵时间24.0 h,初始pH 7.0,发酵温度33.0℃。在此培养条件下,HXS-LV12产纤维素酶活力达到(40.53±0.43)U/mL,是优化前的2.05倍。

关键词：莫海威芽孢杆菌纤维素酶 Plackett-Burman Box-Behnken 发酵工艺优化

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低温对民猪骨骼肌线粒体能量代谢基因的影响

西北农业学报 2024年第7期33卷 1195-1201页

作者：张冬杰马守正汪亮李忠秋刘娣黑龙江省农业科学院畜牧研究所哈尔滨150086

为了探究低温环境下民猪肌肉组织内与线粒体能量代谢相关基因的变化情况,以解析民猪抗寒特性的遗传机制。将9头体质量相近的母猪随机分成3组,每组3头,在冬季将其中2组置于室外半敞篷舍内饲养,分别处理3 d(急性低温处理组)和58 d(慢性低... 详细信息

为了探究低温环境下民猪肌肉组织内与线粒体能量代谢相关基因的变化情况,以解析民猪抗寒特性的遗传机制。将9头体质量相近的母猪随机分成3组,每组3头,在冬季将其中2组置于室外半敞篷舍内饲养,分别处理3 d(急性低温处理组)和58 d(慢性低温处理组),1组置于常规舍内饲养,作为对照组。以背肌为试验材料,采用PCR array方法,对90个与线粒体能量代谢相关基因的表达水平进行检测。结果表明,与对照组相比,急性低温处理组基因的表达水平差异不显著,但慢性低温处理显著改变 ATP5H、 ATP5L、 ATP6V1G3、 COX5A、 COX7A2、 COX7A2L、 NDUFS4、 SDHB、 UQCRQ和 GADD45B基因的表达水平,尤其是 GADD45B,达到了极显著水平(P<0.01),这些基因均为编码OXPHOS系统亚基基因,推测慢性低温诱导了背肌ATP的生成。对 GADD45B基因进一步分析发现,该基因在哺乳动物中高度保守,基本符合分子进化规律,表达具有明显的组织特异性。急性低温处理对民猪背肌内ATP的生成影响不显著,但慢性低温处理诱导ATP的生成,以维持体温恒定。

关键词：民猪骨骼肌低温线粒体能量代谢

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鼠伤寒沙门菌小RNA RybB及伴侣蛋白Hfq对孔蛋白OmpD的表达调控

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微生物学报 2024年第4期64卷 1263-1273页

作者：陈世雄潘永令狐远凤张家莉杨婉武绍碧叶景芬杨琦贵州大学动物科学学院贵州贵阳550025 贵州大学动物疫病研究所贵州贵阳550025 贵州省农业科学院畜牧兽医研究所贵州贵阳550025

【目的】探究小RNA(small RNA,sRNA)RybB和伴侣蛋白Hfq对沙门氏菌孔蛋白OmpD表达的调控作用。【方法】以鼠伤寒沙门菌(Salmonella Typhimurium,STM)为研究对象,将含有编码β-半乳糖苷酶的lacZ报告基因的pCE40质粒转入ompD基因单缺失菌... 详细信息

【目的】探究小RNA(small RNA,sRNA)RybB和伴侣蛋白Hfq对沙门氏菌孔蛋白OmpD表达的调控作用。【方法】以鼠伤寒沙门菌(Salmonella Typhimurium,STM)为研究对象,将含有编码β-半乳糖苷酶的lacZ报告基因的pCE40质粒转入ompD基因单缺失菌株中以获得lacZ报告菌株;在此基础上,利用P22噬菌体转导技术分在lacZ报告菌株中构建rybB全序列缺失、hfq全序列缺失、hfq点序列敲除和hfq序列截短以获得双突变实验菌株,以及rybB全序列缺失和hfq全序列缺失的三突变实验菌株。通过β-半乳糖苷酶活性试验和RT-qPCR探究sRNA RybB及伴侣蛋白Hfq对孔蛋白OmpD表达的调控作用。【结果】成功在lacZ报告菌中构建rybB全序列缺失、hfq全序列缺失、hfq点序列敲除和hfq序列截短等双缺失实验菌株,以及rybB全序列缺失和hfq全序列缺失的三突变实验菌株。与野生型(wild type,WT)菌株相比,在lacZ报告菌株中,hfq基因截短为87个氨基酸序列的突变株中的OmpD蛋白活性下调了2.16%,其余实验株OmpD蛋白的β-半乳糖苷酶活性均呈上升趋势。与WT菌株相比,实验菌株ompD基因转录水平除了STM LT2ΔompD::lacZΔhfq65的上调不具有显著性外,其余实验菌株均显著(P<0.05)上调,其中lacZ报告菌株、rybB全序列缺失和hfq全序列缺失的三突变实验菌株ompD基因转录水平上调最明显,为1.83倍。【结论】ompD基因的转录及蛋白表达主要受hfq基因和sRNA RybB的负反馈调节;Hfq的远端面在对ompD基因的转录抑制中起关键作用。通过多个基因突变菌株的构建,阐述了sRNA伴侣蛋白Hfq与孔蛋白OmpD的相互作用关系,探索了Hfq对ompD的调控关键区域,丰富了sRNA的调控理论。

关键词：鼠伤寒沙门菌 λ-Red同源重组 sRNA RybB Hfq ompD

滑液囊支原体与鸡传染性支气管炎病毒共感染对SPF鸡的致病性研究

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中国预防兽医学报 2024年第2期46卷 113-120页

作者：王晨燕邵国青侯博福建省农业科学院畜牧兽医研究所/福建省畜禽疫病防治工程技术研究中心福建福州350013 江苏省农业科学院兽医研究所江苏南京210014

为比较滑液囊支原体(MS)和鸡传染性支气管炎病毒(IBV)共感染对SPF鸡的致病性,本研究将144只28日龄SPF鸡随机均分为阴性对照组、MS感染组、IBV-M41感染组、IBV-M41+MS共感染组、IBV-QX感染组、IBV-QX+MS共感染组共6组,采用50μL/只剂量... 详细信息

为比较滑液囊支原体(MS)和鸡传染性支气管炎病毒(IBV)共感染对SPF鸡的致病性,本研究将144只28日龄SPF鸡随机均分为阴性对照组、MS感染组、IBV-M41感染组、IBV-M41+MS共感染组、IBV-QX感染组、IBV-QX+MS共感染组共6组,采用50μL/只剂量按相应分组点眼感染MS (106CCU50)、IBV(105EID50),阴性对照组以50μL/只点眼KM2培养基(左眼)和PBS (右眼)。感染后每天观察临床症状,在感染后7 d、14 d、21 d和28 d每组随机剖检6只鸡,观察气囊炎和气囊损伤评分,并采集气管进行病原再分离,其中MS经支原体液体培养基培养后进行PCR鉴定,IBV接种SPF鸡胚后进行RT-PCR鉴定。此外,各组鸡气管均经10%甲醛固定后进行粘膜厚度检测以及病理损伤评分。结果显示:除阴性对照组和MS感染组,其他组鸡在感染后4 d均出现一过性呼吸道症状。剖检结果显示MS感染组鸡在感染后21 d出现气囊炎,28 d仍可见气囊炎;而IBV-M41感染组和IBV-QX感染组鸡在感染后7 d或14 d出现气囊炎,且气囊炎的发生率均未超过50%。感染后14 d IBV-QX+MS共感染组鸡气囊炎发生率达100%(6/6),直至21 d并且大部分鸡气囊炎可持续至感染后28 d (5/6),而IBV-M41+MS共感染组鸡气囊炎仅可持续至感染后21 d,且气囊炎的发生率最高在感染后14 d (5/6)。IBV-QX+MS共感染组鸡平均气囊损伤评分在感染后14 d、21d和28 d均极显著高于单一感染组(P研究为临床IB和MS的防控提供科学参考依据。

关键词：滑液囊支原体鸡传染性支气管炎病毒共感染致病性

鼠伤寒沙门菌oppCDF基因缺失株的构建及生物学特性分析

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中国兽医学报 2024年第3期44卷 491-498页

作者：杨婉张家莉陈世雄武绍碧叶景芬潘永杨琦贵州大学动物科学学院贵州贵阳550025 贵州省农业科学院畜牧兽医研究所贵州贵阳550005

利用λ-Red同源重组技术构建鼠伤寒沙门菌oppCDF基因缺失株,并检测其生长特性、运动性、生物被膜形成能力、胞内存活能力及LD50毒力。结果显示,与野生型菌株相比,oppCDF基因缺失株的生长特性无明显变化;oppCDF基因缺失株可降低鼠伤寒沙... 详细信息

利用λ-Red同源重组技术构建鼠伤寒沙门菌oppCDF基因缺失株,并检测其生长特性、运动性、生物被膜形成能力、胞内存活能力及LD50毒力。结果显示,与野生型菌株相比,oppCDF基因缺失株的生长特性无明显变化;oppCDF基因缺失株可降低鼠伤寒沙门菌的运动性;oppC与oppF基因缺失后可提高鼠伤寒沙门菌生物被膜形成能力;同时,oppC基因缺失可降低在RAW267.4细胞内的存活能力和其在小鼠体内的毒力,oppF基因缺失可显著增强在RAW267.4内的存活能力和对小鼠毒力的影响,而oppD基因缺失后其在小鼠体内的毒力和RAW267.4内的存活率均无显著变化。研究表明,oppCDF基因与鼠伤寒沙门菌的运动性、生物被膜形成和毒力密切相关,为进一步揭示鼠伤寒沙门菌致病作用中的复杂调控和机制提供了理论基础。

关键词：鼠伤寒沙门菌 λ-Red同源重组 oppCDF基因生物学特性

饲料桑对蛋鸡生产性能、蛋品质及肠道组织形态的影响

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中国畜牧兽医 2024年第2期51卷 540-548页

作者：黄静赵娜郭万正金枫陈芳朱伟樊启文杜恩存陶文静黄少文魏金涛湖北省农业科学院畜牧兽医研究所动物胚胎工程及分子育种湖北省重点实验室武汉430064 咸宁市农业科学院咸宁437000

[目的]探讨饲料桑在蛋鸡养殖上的适宜使用量及其应用效果。[方法]试验选用36周龄京红一号蛋鸡270只,随机分为3组,每组6个重复,每个重复15只鸡。对照组饲喂玉米-豆粕型基础饲粮,2个试验组分别在基础饲料中使用1%、3%饲料桑粉。预饲期2周... 详细信息

[目的]探讨饲料桑在蛋鸡养殖上的适宜使用量及其应用效果。[方法]试验选用36周龄京红一号蛋鸡270只,随机分为3组,每组6个重复,每个重复15只鸡。对照组饲喂玉米-豆粕型基础饲粮,2个试验组分别在基础饲料中使用1%、3%饲料桑粉。预饲期2周,正试期12周。正试期内,按重复记录每日投料量、产蛋数、不合格蛋数、总蛋重和蛋鸡死淘情况,每周记录1次余料量;于试验第4、8、12周末,每个重复随机选取5枚蛋进行蛋品质测定;于试验第12周末,每个重复随机选取1只蛋鸡屠宰后分离十二指肠、空肠、回肠样品,测定肠道组织形态。[结果]与对照组相比,(1)正试期1~4周,1%、3%桑粉组蛋鸡产蛋率均显著降低(P<0.05),1%桑粉组平均蛋重显著降低(P<0.05);9~12周,1%、3%桑粉组蛋鸡产蛋率均显著降低(P<0.05);1~12周全期,1%、3%桑粉组蛋鸡产蛋率、平均蛋重均显著降低(P<0.05),1%桑粉组蛋鸡死淘率显著降低(P<0.05)。(2)正试期第4周末,1%桑粉组蛋壳强度显著提高(P<0.05),蛋黄亮度(L*)显著降低(P<0.05),蛋黄红度(a*)显著提高(P<0.05);第8周末,1%桑粉组蛋黄胆固醇含量显著降低(P<0.05);第12周末,1%桑粉组蛋型指数显著降低(P<0.05),蛋壳强度显著提高(P<0.05),1%、3%桑粉组蛋黄胆固醇含量均显著降低(P<0.05)。(3)第12周末,3%桑粉组蛋鸡回肠肌层厚度显著增加(P<0.05);1%桑粉组回肠绒毛高度、绒隐比显著提高(P<0.05)。[结论]饲粮中使用饲料桑粉可降低蛋鸡死淘率,提升蛋品质,对产蛋性能和蛋鸡肠道形态结构均有一定影响。本试验条件下,在蛋鸡饲粮中使用1%饲料桑粉较为适宜。

关键词：饲料桑蛋鸡生产性能蛋品质肠道组织形态

发酵饲料颗粒料对肉鸡生长性能、肉品质及肠道菌群α多样性的影响

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山东农业科学 2024年

作者：陈帅李川皓张相伦公茂华杨景晁盛清凯山东省农业科学院畜牧兽医研究所/山东省畜禽疫病防治与繁育重点试验室山东裕元生物饲料有限公司山东省畜牧总站

旨在研究低温制粒的发酵饲料颗粒料对肉鸡生长性能、血清生化指标、肌肉品质及肠道菌群α多样性的影响。选用1日龄白羽肉鸡144只，随机均分为对照组、10%发酵料组和20%发酵料组，分别饲喂在玉米豆粕型干颗粒饲料基础饲料中添加0、10%、... 详细信息

旨在研究低温制粒的发酵饲料颗粒料对肉鸡生长性能、血清生化指标、肌肉品质及肠道菌群α多样性的影响。选用1日龄白羽肉鸡144只，随机均分为对照组、10%发酵料组和20%发酵料组，分别饲喂在玉米豆粕型干颗粒饲料基础饲料中添加0、10%、20%的发酵饲料颗粒料。结果显示，10%添加剂量对料肉比及胸大肌氨基酸含量无影响，可以提高胸大肌的弹性和内聚性，提高肠道菌群Shannon指数（P<0.05），20%添加剂量显著提高平均日采食量、血清过氧化氢酶、谷胱甘肽过氧化物酶含量（P<0.05）。综上，发酵饲料颗粒料可以改善肉鸡的肌肉品质，建议添加比例为10%。

关键词：发酵饲料颗粒料肉鸡生长性能血清生化指标肌肉品质 α多样性