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去乙酰化酶1基因对牛前体脂肪细胞凋亡影响的研究

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生物化学与生物物理进展 2010年第3期37卷 297-303页

作者：刘晓牧宋恩亮刘桂芬吴公莹谭秀文刘振山万发春山东省农业科学院畜牧兽医研究所济南250100 山东省畜禽疫病防治与繁育重点实验室济南250100 山东畜牧兽医职业学院潍坊261061

去乙酰化酶1(sirtuin type1,SIRTl)是一个新的脂肪细胞调控因子,通过与其靶基因叉头转录因子1(the forkhead box O family1,FoxO1)相互作用,参与细胞增殖、分化、衰老、凋亡和代谢过程.利用吖啶橙(acridine orange,AO)染色、流式细胞仪... 详细信息

去乙酰化酶1(sirtuin type1,SIRTl)是一个新的脂肪细胞调控因子,通过与其靶基因叉头转录因子1(the forkhead box O family1,FoxO1)相互作用,参与细胞增殖、分化、衰老、凋亡和代谢过程.利用吖啶橙(acridine orange,AO)染色、流式细胞仪、荧光定量PCR(quantitative real-timePCR,qPCR)等技术方法,研究SIRT1的抑制剂———烟酸胺(nicotinamide,NAM)处理后对鲁西黄牛皮下前体脂肪细胞(bovine subcutaneous preadipocytes,BSP)和肌内前体脂肪细胞(bovine intramuscular preadipocytes,BIP)凋亡的影响.观察了BSP和BIP的凋亡形态;比较了SIRT1基因抑制后,相关基因如FoxO1等在两种细胞之间的表达差异.结果表明,NAM对BSP和BIP细胞表现出相同的生长抑制作用,处理组的BSP和BIP细胞的凋亡率均显著高于对照组,其作用可能通过抑制SIRT1,激活FoxO1凋亡通路实现.SIRT1及其相关基因对BSP和BIP的调控存在不同途径.

关键词：去乙酰化酶1(SIRT1) 烟酰胺牛前体脂肪细胞凋亡

肉牛肌肉细胞的分离培养和鉴定及其氧化应激模型的建立

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动物营养学报 2020年第5期32卷 2369-2378页

作者：谭秀文游伟刘晓牧靳青魏晨万发春张相伦山东省农业科学院畜牧兽医研究所山东省畜禽疫病防治与繁育重点实验室山东省肉牛生产性能测定中心山东省畜禽健康养殖工程技术中心济南250100

本研究采用组织块法分离培养获得肉牛肌肉细胞并进行鉴定,利用过氧化氢(H2 O2)构建氧化应激模型,为深入研究氧化应激对肉牛肌肉生长发育和肉品质的影响机制提供技术支撑。选用体重为252 kg的利鲁(利木赞×鲁西黄牛)杂交公牛背最长肌,利... 详细信息

本研究采用组织块法分离培养获得肉牛肌肉细胞并进行鉴定,利用过氧化氢(H2 O2)构建氧化应激模型,为深入研究氧化应激对肉牛肌肉生长发育和肉品质的影响机制提供技术支撑。选用体重为252 kg的利鲁(利木赞×鲁西黄牛)杂交公牛背最长肌,利用组织块培养法分离培养肌肉细胞。通过形态学观察、免疫荧光法及流式细胞仪等手段对细胞进行鉴定。采用不同浓度(0、50、100、150、200、250、300、350、400、450μmol/L)的H2 O2处理细胞24 h,通过观察细胞形态、检测细胞存活率及氧化还原状态,筛选适宜作用浓度。然后利用该浓度H2 O2处理细胞不同时间(0、0.75、1.5、3、6、12、24 h),通过分析确定适宜作用时间。结果表明:1)分离获得的细胞长势良好,形状细长,呈纺锤体形和梭形。免疫荧光法和流式细胞仪鉴定肌肉细胞的特异性蛋白(生肌决定因子1和配对盒基因7)均得到较高表达。2)视野内细胞数量随H2 O2浓度升高逐渐减少,至450μmol/L时,细胞发生明显死亡现象。细胞存活率随H2 O2浓度的升高显著降低,与0浓度H202处理相比,300μmol/L时降至65.4%(P所述,本研究通过组织块培养法分离培养获得较高纯度的肉牛肌肉细胞,并成功构建氧化应激模型,H2 O2的适宜作用浓度和时间分别为300μmol/L和6 h。

关键词：肉牛肌肉细胞细胞培养细胞鉴定过氧化氢氧化应激模型

慢病毒介导的靶向NDV P基因shRNA对NDV复制的抑制作用

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病毒学报 2016年第1期32卷 39-45页

作者：杨少华许传田张琳黄艳艳黄庆华胡北侠张秀美山东省农业科学院畜牧兽医研究所山东省畜禽疫病防治与繁育重点实验室山东济南250100

小干扰RNA(siRNA)诱导的RNA降解可以特异性地抑制病毒感染,它作为一种有效的抗病毒治疗方法正被广泛研究。为了探讨慢病毒介导的shRNA对NDV复制的抑制效果,从而为新城疫病毒的抗病毒研究奠定基础,本研究以新城疫病毒(Newcastle disease ... 详细信息

小干扰RNA(siRNA)诱导的RNA降解可以特异性地抑制病毒感染,它作为一种有效的抗病毒治疗方法正被广泛研究。为了探讨慢病毒介导的shRNA对NDV复制的抑制效果,从而为新城疫病毒的抗病毒研究奠定基础,本研究以新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)P基因为靶基因,构建了靶向NDV P基因的shRNA重组慢病毒表达载体RNAi-341和RNAi-671。将其与辅助细胞共转染293T细胞,获得包装好的重组慢病毒;在鸡胚成纤维细胞(Chicken embryo fibroblast,CEF)和SPF鸡胚上进行了干扰实验,并通过荧光定量PCR和病毒滴度测定检测shRNA对NDV的抑制效果。结果发现,RNAi-341和RNAi-671均能抑制FLAG-P蛋白在293T细胞中的瞬时表达。在CEF细胞感染后16h后,NDV的病毒滴度分别降低了66.6倍和30.6倍;在鸡胚感染48h后,RNAi-341和RNAi-671组NDV病毒的增殖量分别减少99%和98%。RNAi-341与RNAi-671不仅能抑制P基因的转录,还能显著降低NP、M、F、HN和L基因的转录水平。与RNAi-671相比,RNAi-341的抑制效果更好。研究结果表明,慢病毒介导的靶向P基因的shRNA具有抗病毒作用,能够抑制NDV在CEF和鸡胚中的复制,从而为临床防治NDV提供一个新方法。

关键词：新城疫病毒 shRNA P基因慢病毒载体

饲粮不同粗饲料原料对闽西南黑兔屠宰性能和肌肉品质的影响

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动物营养学报 2020年第9期32卷 4277-4284页

作者：刘公言孙海涛刘策白莉雅杨丽萍姜文学王文志高淑霞山东省农业科学院畜牧兽医研究所山东省畜禽疫病防治与繁育重点实验室济南250100

本试验旨在研究饲粮不同粗饲料原料对闽西南黑兔屠宰性能和肌肉品质的影响,以期筛选出适宜闽西南黑兔的粗饲料原料及饲粮配方,为闽西南黑兔异地饲养提供参考。试验选取120只体重相近、健康状况良好的35日龄闽西南黑兔,按性别和体重随机... 详细信息

本试验旨在研究饲粮不同粗饲料原料对闽西南黑兔屠宰性能和肌肉品质的影响,以期筛选出适宜闽西南黑兔的粗饲料原料及饲粮配方,为闽西南黑兔异地饲养提供参考。试验选取120只体重相近、健康状况良好的35日龄闽西南黑兔,按性别和体重随机分为3组,每组5个重复,每个重复8只(公母各占1/2),分别饲喂以花生秧粉、苜蓿草粉和豆秸粉为主要纤维源配制的全价饲粮。预试期7 d,正试期105 d。试验结束当天每个重复选取1只公兔和1只母兔屠宰,即每组屠宰10只。结果显示:饲粮不同粗饲料原料对闽西南黑兔宰前活体重、半净膛屠宰率、全净膛屠宰率和腹脂相对重量有显著影响(P0.05),对粗脂肪含量的影响显著(P<0.05),其中苜蓿草粉组的粗脂肪含量比豆秸粉组提高了12.86%(P<0.05)。由此得出,饲粮不同粗饲料原料能够影响闽西南黑兔的屠宰性能和肌肉品质;对于地方品种资源闽西南黑兔,苜蓿草粉优于花生秧粉,花生秧粉优于豆秸粉,但在配制饲粮时营养水平不宜过高,因此以花生秧组饲粮配方最适。

关键词：粗饲料类型闽西南黑兔屠宰性能肌肉品质

三株新城疫病毒强毒株的生物学特性及全基因组序列分析

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病毒学报 2012年第2期28卷 143-150页

作者：杨少华胡北侠许传田颜世敢张琳黄艳艳张秀美山东省农业科学院畜牧兽医研究所山东省畜禽疫病防治与繁育重点实验室济南250100

2009～2011年从北方发病鸡群和鸭群中分离出3株新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)。通过致病性指数测定及交叉血凝抑制试验初步分析了3个毒株的毒力和相互之间的同源性。选取鸡源分离株SDLY01与新城疫疫苗株(LaSota)进行了交叉... 详细信息

2009～2011年从北方发病鸡群和鸭群中分离出3株新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)。通过致病性指数测定及交叉血凝抑制试验初步分析了3个毒株的毒力和相互之间的同源性。选取鸡源分离株SDLY01与新城疫疫苗株(LaSota)进行了交叉保护试验,选取鸭源毒株SD03对樱桃谷鸭进行攻毒实验,同时设计引物对3个毒株进行了全基因组测序,并与36株NDV参考株进行了分子进化分析。结果表明3个分离株F蛋白裂解位点的氨基酸序列均为112R-R-Q-K-R-F117符合强毒株的序列特征,并与致病性指数测定结果相符。交叉血凝抑制试验发现3个分离株与疫苗株LaSota的抗原同源性较低为82.5%～89.4%,两个鸡源分离株间的抗原同源性为90%,而鸭源毒株SD03与鸡源毒株SDSG01同源性为100%。交叉保护试验和攻毒实验结果显示传统的LaSota疫苗能对SDLY01流行株提供100%免疫保护,但第5天仍检测到排毒;鸭源毒株SD03对樱桃谷鸭不致病,但能检出排毒,排毒期最长为5d。全基因组测序与分析表明3个毒株基因组长度均为15 192bp,属于基因Ⅶd型毒株,与同期流行的鹅源及鸭源NDV毒株之间全基因组核苷酸序列具有高度的同源性,揭示鸭源、鹅源NDV与鸡源NDV在遗传学和流行病学上密切相关。

关键词：新城疫病毒全基因组测序基因型

不同收获期对全株玉米青贮营养价值、发酵品质和瘤胃降解率的影响

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动物营养学报 2019年第6期31卷 2807-2815页

作者：姜富贵成海建刘栋胡明苏文政安文娟孔淑慧王亚芳刘方圆宋恩亮山东省农业科学院畜牧兽医研究所济南250100 山东省畜禽疫病防治与繁育重点实验室济南250100 山东省畜禽健康养殖工程技术中心济南250100 山东省畜牧总站济南250022 山东畜牧兽医职业学院潍坊261061

本试验旨在研究不同收获期对全株玉米青贮营养价值、发酵品质和瘤胃降解率的影响。试验抽样采集山东省44个区县130个养殖场130份全株玉米青贮饲料样品,按照收获时玉米籽粒的乳线位置,共分为1/2乳线、2/3乳线和3/4乳线3个时期,样品数量... 详细信息

本试验旨在研究不同收获期对全株玉米青贮营养价值、发酵品质和瘤胃降解率的影响。试验抽样采集山东省44个区县130个养殖场130份全株玉米青贮饲料样品,按照收获时玉米籽粒的乳线位置,共分为1/2乳线、2/3乳线和3/4乳线3个时期,样品数量分别为40、60和30份,测定其营养价值、发酵品质和瘤胃降解率。结果表明:1)随着收获期的延迟,全株玉米青贮的干物质(DM)含量显著增加(P所述,收获期为3/4乳线期时,全株玉米青贮的营养价值和发酵品质最优。

关键词：收获期全株玉米青贮营养价值发酵品质

饲粮能量水平对草原红牛代谢及血清指标的影响

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中国农业科学 2020年第12期53卷 2502-2511页

作者：刘基伟张相伦李旭王蕾秦立红班志斌吴健张国梁万发春吉林省农业科学院畜牧所山东省农业科学院畜牧兽医研究所/山东省畜禽疫病防治与繁育重点实验室

【目的】探讨饲粮不同能量水平对草原红牛气体代谢、养分消化代谢及血清指标的影响,以期为草原红牛饲养标准的制订和高效饲养提供参考依据。【方法】选用12头体重相近(365.08±2.76)kg、健康的草原红牛公牛,随机分为3组,分别饲喂增重净... 详细信息

【目的】探讨饲粮不同能量水平对草原红牛气体代谢、养分消化代谢及血清指标的影响,以期为草原红牛饲养标准的制订和高效饲养提供参考依据。【方法】选用12头体重相近(365.08±2.76)kg、健康的草原红牛公牛,随机分为3组,分别饲喂增重净能为5.65(低能组)、6.05(中能组)和6.43 MJ·kg-1(高能组)的饲粮。试验期20 d,其中,预试期18 d,正试期2 d。正试期利用"大型动物开放回流式呼吸测热装置"开展呼吸测热试验,采用全收粪尿法开展消化代谢试验,试验结束前颈静脉采集血液样本分离血清,测定血清生化指标。【结果】高能组甲烷产生量、甲烷产生量占干物质采食量比例、氧气消耗量及产热量显著高于其他组,二氧化碳产生量显著高于中能组(P0.05),但高能组甲烷能排放量、甲烷能占总能比值显著高于其他组(P0.05)。饲粮能量水平对干物质、有机物、粗脂肪、中性洗涤纤维和酸性洗涤纤维的表观消化率均无显著影响(P>0.05),但干物质和有机物的表观消化率有随饲粮能量水平升高而升高的趋势(P=0.059)。高能组血清总甘油三酯水平显著高于其他两组(P0.05)。【结论】适宜提高饲粮能量水平可提高草原红牛的养分利用率,但能量供给过高时会以甲烷能形式损失。综合来看以中能组效果最佳,推荐350 kg草原红牛适宜消化能和消化蛋白日供给量分别为128.12 MJ·d-1、749.50 g·d-1,代谢能和沉积蛋白日供给量分别为121.78 MJ·d-1、678.75 g·d-1,净能日供给量为55.96 MJ·d-1。

关键词：草原红牛能量气体代谢养分利用血清指标

饲粮中生姜粉添加水平对安哥拉兔产毛性能以及血清激素、生化、免疫和抗氧化指标的影响

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动物营养学报 2021年第12期33卷 7012-7020页

作者：刘公言姜文学杨丽萍刘策高淑霞孙海涛常莹白莉雅山东省农业科学院畜牧兽医研究所山东省畜禽疫病防治与繁育重点实验室济南250100 山东省畜牧协会济南250100

本试验旨在研究饲粮中生姜粉添加水平对安哥拉兔产毛性能以及血清激素、生化、免疫和抗氧化指标的影响,为生姜粉作为绿色饲料添加剂在毛兔生产上应用提供理论参考。试验选用8月龄、体重相近的中系安哥拉兔160只,随机分为4组,每组40只(... 详细信息

本试验旨在研究饲粮中生姜粉添加水平对安哥拉兔产毛性能以及血清激素、生化、免疫和抗氧化指标的影响,为生姜粉作为绿色饲料添加剂在毛兔生产上应用提供理论参考。试验选用8月龄、体重相近的中系安哥拉兔160只,随机分为4组,每组40只(公母各占1/2)。4组安哥拉兔分别饲喂生姜粉添加水平为0(对照)、10、20、30 g/kg的全价配合饲料,饲喂1个养毛期(73 d)。结果表明:1)饲粮中生姜粉添加水平对安哥拉兔的终末体重、耗料量、毛囊密度和产毛量均有显著影响(P所述,生姜粉作为安哥拉兔的饲料添加剂,能够调节脂质代谢,提高血清激素水平和抗氧化能力,提高产毛量,其适宜用量为20 g/kg。

关键词：生姜粉安哥拉兔产毛性能激素免疫性能抗氧化性能

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耐铅镉菌株的分离鉴定及其吸附能力

生物工程学报 2020年第8期36卷 1600-1609页

作者：王建才刘兴华王怀中呼红梅庞丽丽黄保华朱荣生山东省农业科学院畜牧兽医研究所山东济南250100 山东省畜禽疫病防治与繁育重点实验室山东济南250100 山东省畜禽健康养殖工程技术中心山东济南250100 青岛农业大学动物医学院山东青岛266109

堆肥中添加生物钝化剂是当前降低粪便中重金属生物毒性最为有效的方式之一,为了进一步提高其钝化重金属的能力,文中获得了复合重金属高耐性的钝化剂菌株,并探究其生物学特性和吸附特征。采集猪粪堆肥样品并在改良的牛肉膏培养基中分离... 详细信息

堆肥中添加生物钝化剂是当前降低粪便中重金属生物毒性最为有效的方式之一,为了进一步提高其钝化重金属的能力,文中获得了复合重金属高耐性的钝化剂菌株,并探究其生物学特性和吸附特征。采集猪粪堆肥样品并在改良的牛肉膏培养基中分离和筛选耐铅又耐镉的高耐性菌株,通过形态结合分子生物学鉴定该菌株。该菌株分别在不同pH、温度和盐浓度条件下培养获得其最适的生长条件,进而在该条件下分析其对铅镉吸附的特性。结果获得一株耐铅浓度为600 mg/L、镉浓度为120 mg/L的铅镉复合耐性菌株SC19,该菌株为西地西菌属,其最适生长环境为pH值7.0、温度37℃、盐浓度0.5%。培养36 h的稳定期SC19菌株在吸附时间30min时铅的去除率最高,对铅的最大去除率和吸附量分别为60.7%和329.13mg/g;培养8h的对数期在吸附时间30min时镉的去除率最高,对镉的最大去除率和吸附量分别为51.0%和126.19 mg/g。红外光谱分析显示,SC19菌株对铅镉离子的吸附主要是细胞表面的多种活性基团与金属离子发生络合作用。该研究揭示了SC19菌株有较好的二价态铅镉离子吸附能力,可为生物钝化重金属提供重要的微生物种质资源。

关键词：西地西菌属分离鉴定生物学特性铅镉生物吸附