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CRISPR/Cas9基因编辑技术在食用菌中的应用现状

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生物工程学报 2024年第4期40卷 988-1001页

作者：李荣平李荣春云南菌视界生物科技有限公司云南省级(珍稀食用菌)企业工程技术中心昆明市级(食用菌)企业工程技术中心云南昆明650200 云南省张劲松专家工作站云南昆明650200 云南(昆明)张劲松药用真菌专家工作站云南昆明650200 云南农业大学食用菌研究所云南昆明650201

CRISPR/Cas9基因编辑系统是一项通用的基因修饰技术,是植物、动物、真菌以及微生物的功能基因和遗传育种研究的重要技术。本文介绍了该技术在食用真菌的基因研究和遗传育种中的应用现状,包括Cas9和sgRNA的递送和表达策略、遗传转化方法... 详细信息

CRISPR/Cas9基因编辑系统是一项通用的基因修饰技术,是植物、动物、真菌以及微生物的功能基因和遗传育种研究的重要技术。本文介绍了该技术在食用真菌的基因研究和遗传育种中的应用现状,包括Cas9和sgRNA的递送和表达策略、遗传转化方法、突变体筛选以及DNA双链断裂后的靶位点的修复策略。同时总结了该技术在食用菌中应用所面临的主要问题及其优化策略,并结合个人研究背景展望了其未来在食用菌研究中的应用价值。

关键词： CRISPR/Cas9 食用菌基因编辑 Cas9-RNP

发酵处理对广叶绣球菌挥发性成分及风味的影响

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菌物学报 2024年

作者：王宏雨翁梦婷孔子浩张迪福建省农业科学院食用菌研究所特色食用菌繁育与栽培国家地方联合工程研究中心

为探讨植物乳植杆菌发酵及植物乳植杆菌-酿酒酵母混菌发酵对广叶绣球菌冻干粉挥发性成分构成和风味的影响，本文采用了顶空固相微萃取-气质联用（HS-SPME-GC-MS）技术并结合相对气味活度值法（ROAV）和感官评价分析对不同处理的绣球菌... 详细信息

为探讨植物乳植杆菌发酵及植物乳植杆菌-酿酒酵母混菌发酵对广叶绣球菌冻干粉挥发性成分构成和风味的影响，本文采用了顶空固相微萃取-气质联用（HS-SPME-GC-MS）技术并结合相对气味活度值法（ROAV）和感官评价分析对不同处理的绣球菌冻干粉样品进行了检测分析。结果表明，3组样品共检测到72种挥发性物质；未发酵的对照组中醇类物质含量最高，相对含量最高的成分为1-辛烯-3-醇[(47.53±2.09)%]；植物乳植杆菌发酵组中酯类、醛类、醇类含量均较高，相对含量最高的成分为正十二烷[(10.39±0.38)%]；混菌发酵组中吡嗪类物质含量最高，相对含量最高的成分为2，3-二甲基-5-乙基吡嗪[(26.76±1.46)%]。通过ROAV分析，对样品风味有贡献的成分共26种（ROAV≥0.1），其中关键风味成分有9种（ROAV≥1）。3组样品共有的关键风味成分为2-甲基丁醛、1-辛烯-3-醇，赋予了3组样品共有的蘑菇与真菌霉味气味特征；1-庚烯-3-酮为对照组特有关键风味成分，可赋予样品金属味特征；丁酸己酯、5-甲基-2-呋喃甲醇和苯乙醇为植物乳植杆菌发酵组特有关键风味成分，可赋予样品果香味、花香味和焦糖味气味特征；2，6-二乙基吡嗪、2，5-二乙基吡嗪和2，3-二乙基-5-甲基吡嗪为混菌发酵组特有的关键风味成分，可赋予样品坚果气味特征。感官评价分析结果表明：2个发酵处理组的气味差异较大，植物乳杆菌发酵组果香味、焦糖味和蘑菇味都较均衡，且保留了部分食用菌的蘑菇气味特征，而混菌发酵组则以坚果味和焦糖味为主，气味单调；2个发酵处理组均起到较好脱腥效果，挥发性成分分析结果亦表明1-庚烯-3-酮、壬醛、E-2-辛烯醛等腥味特征成分在发酵处理后的样品中均未检出。由此可知，植物乳植杆菌发酵及植物乳植杆菌-酿酒酵母混菌发酵均可显著改变绣球菌冻干粉样品的挥发性成分构成及其气味特征，具有脱腥增香效果。

关键词：广叶绣球菌植物乳植杆菌酿酒酵母发酵挥发性成分风味

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中国皱木耳类群种质资源鉴定和表型性状分析

菌物学报 2024年

作者：曹雪莲陈影王迪唐杰谢丽源刘理旭四川省食用菌研究所国家农业微生物新都观测实验站

以我国27株皱木耳类群种质资源为材料，利用ITS进行分子鉴定，采用多样性分析、相关性分析、聚类分析和主成分分析等方法，对16个表型性状进行评价。结果表明：供试菌株鉴定为皱木耳类群中的两个物种中国皱木耳和皱木耳；16个表型性状的... 详细信息

以我国27株皱木耳类群种质资源为材料，利用ITS进行分子鉴定，采用多样性分析、相关性分析、聚类分析和主成分分析等方法，对16个表型性状进行评价。结果表明：供试菌株鉴定为皱木耳类群中的两个物种中国皱木耳和皱木耳；16个表型性状的Shannon-Wiener’s多样性指数范围为0.42–1.60，平均值0.97；4个数量性状变异系数范围为4.35%–26.49%；部分表型性状间存在相关性；经聚类分析，在欧氏距离1.54处，划分为3个类群，5个表型性状即菌丝体胶质物、菌丝体（栽培种）菌棒颜色变化、鲜耳片腹面主要颜色、耳片质地和子实体成熟期为类群划分的指标性状；主成分分析将16个表型性状转化为5个主成分，累计贡献率为81.55%，第1主成分的方差贡献率26.67%，命名为子实体颜色性状因子、第2主成分的方差贡献率是23.05%，为菌丝体性状因子、第3主成分方差贡献率仅为12.89%，定为生育期-商品性状因子。经综合分析筛选出菌丝体胶质物、鲜耳片腹面主要颜色和子实体成熟期等3个表型性状作为种质评价关键指标。

关键词：皱木耳种质资源表型性状多样性

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生长期对金耳多糖结构特征及抗炎活性的影响

食用菌学报 2024年第3期31卷 42-50页

作者：刘利平刘艳芳孙浩雯冯杰杨林雷曹瑶李荣春张劲松上海市农业科学院食用菌研究所农业农村部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心上海市农业遗传育种重点实验室上海201403 云南菌视界生物科技有限公司云南昆明651708

对生长期为25、35、45 d的金耳子实体(Naematelia aurantialba)多糖(分别编号为NAP-1、NAP-2、NAP-3)的得率、多糖含量、糖醛酸含量、分子量分布特征、单糖组成及体外抗炎活性进行比较。结果表明,NAP-3的得率(34.50%)最高,多糖与糖醛酸... 详细信息

对生长期为25、35、45 d的金耳子实体(Naematelia aurantialba)多糖(分别编号为NAP-1、NAP-2、NAP-3)的得率、多糖含量、糖醛酸含量、分子量分布特征、单糖组成及体外抗炎活性进行比较。结果表明,NAP-3的得率(34.50%)最高,多糖与糖醛酸含量显著高于NAP-1。随着生长期的延长,子实体多糖的重均分子量(weight average molecular weight,M_(w))由1.859×10~6 g·mol^(-1)降低至1.347×10~6 g·mol^(-1)。单糖组成分析结果表明,子实体多糖是一种由木糖、甘露糖、葡萄糖醛酸以及少量葡萄糖组成的酸性杂多糖。不同生长期的金耳子实体多糖均能抑制脂多糖诱导引起的RAW264.7巨噬细胞NO释放与炎症因子分泌,与NAP-2、NAP-3相比,NAP-1抑制效果最强。通过Pearson相关性分析,发现金耳子实体多糖的体外抗炎活性与其M_(w)和甘露糖的摩尔百分比呈正相关,与木糖的摩尔百分比呈负相关。研究结果可为采收获得高抗炎活性的金耳子实体提供技术参数,对金耳健康产品的开发利用提供参考。

关键词：金耳不同生长期多糖分子量单糖组成抗炎活性

不同干燥方式对硫黄鳞伞子实体挥发性成分的影响

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食用菌学报 2024年第1期31卷 102-117页

作者：吴芳徐宁彭思敏王小艳王春晖喻初权姜性坚湖南省食用菌研究所湖南长沙410013

采用气相离子迁移谱(gas chromatography-ion mobility spectroscopy,GC-IMS)分别对硫黄鳞伞(Pholiota conissans)新鲜、冷冻干燥、热风干燥子实体的不同部位(菌盖、菌柄)挥发性成分进行对比分析。结果表明:不同干燥方式对硫黄鳞伞挥发... 详细信息

采用气相离子迁移谱(gas chromatography-ion mobility spectroscopy,GC-IMS)分别对硫黄鳞伞(Pholiota conissans)新鲜、冷冻干燥、热风干燥子实体的不同部位(菌盖、菌柄)挥发性成分进行对比分析。结果表明:不同干燥方式对硫黄鳞伞挥发性成分有影响;3种方式对菌盖、菌柄挥发性成分影响不同。从新鲜样品中共鉴定出挥发性成分48种,主要包括醋酸、多种醇类化合物及少量醛酮化合物等;冷冻干燥样品中共鉴定出挥发性成分78种,具有花果香气的醛酮类及酯类化合物含量较高;热风干燥样品中共鉴定出挥发性成分78种,包括多种醛、酮、酯类,以及甲苯、2-正丁基呋喃、柠檬烯、2-正戊基呋喃、苏合香烯等多种杂环化合物。采用相对气味活度值(relative odor activity value,ROAV)进行分析,ROAV≥1.00的挥发性化合物为关键风味成分,新鲜样品中关键风味成分主要有醋酸、3-辛醇、3-甲基-1-丁醇、乙醇、2-甲基丙醛、乙酸己酯等,菌盖、菌柄中ROAV较高的分别是醋酸、3-辛醇。在2种干燥样品中,关键风味成分主要有丁酸乙酯、3-甲基丁酸己酯、1-辛烯-3-醇、2-甲基丙醛、丁醛、壬醛、2-庚酮、二甲基三硫醚等;热风干燥样品中特有风味成分为(E)-2-辛烯醛、2-羟基苯甲醛、2-甲基-3-呋喃硫醇。

关键词：硫黄鳞伞冷冻干燥热风干燥相对气味活度值

莲子壳主料对代栽灵芝生长及其生产效益的影响

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菌物学报 2024年第2期43卷 87-98页

作者：张波叶雷谭伟李小林杨学圳周洁四川省食用菌研究所四川成都610066

莲子壳作为农业副产物体量较大,可用作食用菌栽培原料。本研究以资源化利用莲子壳和拓展灵芝栽培原料来源、降本增效为目的,以10%、20%、40%、60%和80%的莲子壳替代基础配方(杂木屑45%、玉米芯45%、麦麸5%、玉米粉4%、石膏1%)的木屑和... 详细信息

莲子壳作为农业副产物体量较大,可用作食用菌栽培原料。本研究以资源化利用莲子壳和拓展灵芝栽培原料来源、降本增效为目的,以10%、20%、40%、60%和80%的莲子壳替代基础配方(杂木屑45%、玉米芯45%、麦麸5%、玉米粉4%、石膏1%)的木屑和玉米芯,研究各试验配方的灵芝农艺性状、品质及生产效益,从中优选出莲子壳基质高效配方,为探究莲子壳在代料灵芝生产中的应用提供依据。结果表明,培养料添加一定比例莲子壳可促进灵芝菌丝生长,60%处理的菌丝生长速度最快,达4.44mm/d;基料添加莲子壳会减少菌柄长度、菌盖厚度和子实体含水量,对菌盖大小、菌柄直径和单朵鲜重无明显影响。活性成分测定结果表明,随栽培料莲子壳比例的增加,灵芝子实体多糖和蛋白质含量明显增加,80%处理的多糖含量(10.57mg/g)是对照的1.66倍、蛋白质含量(15.14%)显著高于对照(14.12%);而栽培料莲子壳对灵芝子实体三萜酸的影响呈“低比例促进、高比例抑制”趋势。另外,莲子壳配方会显著提高灵芝子实体氨基酸总量,以10%处理最高,氨基酸总量为32.44%,该处理检测到13种氨基酸的含量最高值。生产效益分析表明,栽培料添加莲子壳可显著提高灵芝栽培利润,以80%处理栽培利润最高(1.22元/袋)。综上所述,莲子壳作为原料栽培灵芝有明显增产效果,可进一步示范推广。

关键词：灵芝代料栽培莲子壳生产效益

超声辅助低共熔溶剂提取的鳞杯伞多糖的体外消化与酵解特性

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菌物学报 2024年第4期43卷 81-94页

作者：耿雪冉王无霞刘荣柱张德芳侯淑婷李泽辉葛广亮常明昌孟俊龙山西农业大学食品科学与工程学院山西太谷030801 黄土高原食用菌山西省重点实验室山西太谷030801 山西省食用菌工程技术研究中心山西太谷030801

本研究主要探讨体外消化与粪便发酵对超声辅助低共熔溶剂提取的鳞杯伞多糖(D-CSFP)的化学组成、结构特征和生物活性的影响。结果表明,经唾液-胃-肠消化后,D-CSFP的还原糖含量分别从0.44mg/mL上升到0.45、0.55和0.57mg/mL;分子量分别由35... 详细信息

本研究主要探讨体外消化与粪便发酵对超声辅助低共熔溶剂提取的鳞杯伞多糖(D-CSFP)的化学组成、结构特征和生物活性的影响。结果表明,经唾液-胃-肠消化后,D-CSFP的还原糖含量分别从0.44mg/mL上升到0.45、0.55和0.57mg/mL;分子量分别由35312Da降低到32090、25519和25473Da,但D-CSFP的官能团结构无明显改变。体外粪便发酵后,D-CSFP发酵液的OD600数值呈先增高后下降的趋势,为0.63→1.24→1.19;pH由6.75降低至6.13(P菌(如Bacteroides、Prevotella和Dialister)的相对丰度,抑制有害菌(如Klebsiella)的繁殖。综上所述,D-CSFP可作为一种潜在功能性食品被充分开发利用。

关键词：鳞杯伞多糖消化与酵解短链脂肪酸肠道菌群

赖氨酸修饰对梯棱羊肚菌黑色素结构和理化特性的影响

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农业工程学报 2024年第5期40卷 297-306页

作者：常明昌曹群珞刘文婷许亚萍徐丽婧孟俊龙冯翠萍程艳芬耿雪冉山西农业大学食品科学与工程学院晋中030801 山西省食用菌工程技术研究中心晋中030801

为了进一步提高梯棱羊肚菌黑色素的提取率及溶解性,该研究采用单因素、Plackett-Burman试验、响应面试验对纤维素酶-超声波协同提取梯棱羊肚菌黑色素的提取工艺进行优化。通过赖氨酸修饰,并对修饰前后的梯棱羊肚菌黑色素进行结构表征、... 详细信息

为了进一步提高梯棱羊肚菌黑色素的提取率及溶解性,该研究采用单因素、Plackett-Burman试验、响应面试验对纤维素酶-超声波协同提取梯棱羊肚菌黑色素的提取工艺进行优化。通过赖氨酸修饰,并对修饰前后的梯棱羊肚菌黑色素进行结构表征、理化性质及稳定性分析。结果表明,在NaOH浓度为1.54 mol/L,纤维素酶添加量为20 mg/g,纤维素酶酶解时间为78.6 min,料液比为1:30,酶解温度为40℃,超声时间为80 min条件下提取的梯棱羊肚菌黑色素最优。未修饰的梯棱羊肚菌黑色素不溶于水,色价值为480.24,修饰后的黑色素溶解度为1 016 g/L,色价值为1 771.18,比未修饰的黑色素在溶解性、色价值方面均有所提高。此外,在不同的温度、光照、pH条件下,修饰前后的梯棱羊肚菌黑色素均比较稳定。以上研究结果为梯棱羊肚菌黑色素的高效提取及其产品的开发利用奠定了理论基础。

关键词：氨基酸超声波梯棱羊肚菌黑色素纤维素酶理化性质

辽宁省玉米秸秆基质栽培糙皮侧耳菌株筛选评价

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中国瓜菜 2024年第2期37卷 106-111页

作者：刘国丽肖军陈珣马晓颖龚娜辽宁省农业科学院食用菌研究所沈阳110161

为筛选出适宜辽宁地区以玉米秸秆为主要栽培基质的优良糙皮侧耳菌株,以19个糙皮侧耳菌株为试验材料,对菌丝长势、满袋时间、污染率、生物学效率及农艺性状等指标进行测定和比较分析。结果表明,C14号菌株综合指标优于其他供试菌株,其母... 详细信息

为筛选出适宜辽宁地区以玉米秸秆为主要栽培基质的优良糙皮侧耳菌株,以19个糙皮侧耳菌株为试验材料,对菌丝长势、满袋时间、污染率、生物学效率及农艺性状等指标进行测定和比较分析。结果表明,C14号菌株综合指标优于其他供试菌株,其母种和栽培种在玉米秸秆基质中菌丝长势均较好,生物学效率较高,为105.8%,子实体菌盖颜色深灰色,菌柄3.1~6.8 cm,朵大韧性好,菇型紧凑,菌盖肥厚,中等大小,光泽好,可作为生产用优良菌株。C10、C2号菌株子实体性状一般,但其母种及栽培种在玉米秸秆基质中菌丝长势强、生物学效率高,利用秸秆能力强,可作为品种选育的备选材料。

关键词：糙皮侧耳菌丝玉米秸秆筛选评价