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K562细胞TMS1基因甲基化状态及三氧化二砷对其去甲基化作用

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中华血液学杂志 2014年第3期35卷 197-201页

作者：李洪丽董小锋王焱徐文伟董琳毕可红朱传升山东大学附属千佛山医院血液科济南250014 山东大学附属千佛山医院普外科济南250014

目的探讨慢性髓性白血病细胞系K562细胞甲基化诱导静止基因（TMS1）甲基化程度及三氧化二砷（As2O3）对其甲基化状态的逆转作用及其机制。方法K562细胞经不同浓度As2O3处理48h，采用甲基化特异性PCR（MsP）法检测As2O3处理前后K562细胞T... 详细信息

目的探讨慢性髓性白血病细胞系K562细胞甲基化诱导静止基因（TMS1）甲基化程度及三氧化二砷（As2O3）对其甲基化状态的逆转作用及其机制。方法K562细胞经不同浓度As2O3处理48h，采用甲基化特异性PCR（MsP）法检测As2O3处理前后K562细胞TMS1基因甲基化程度；RT-PCR及Westernblot法检测As2O3处理前后K562细胞TMS1mRNA及蛋白表达，Westemblot法检测凋亡蛋白Bcl-2、Bax表达水平的变化；用细胞凋亡检测试剂盒（Annexin V／PI）标记、流式细胞术检测细胞凋亡。结果K562细胞TMS1基因呈完全甲基化，TMS1mRNA及蛋白呈低表达状态，相对表达水平分别为0．01＋0．01、0．09~0．02；2jgnol／LAs2O3可完全逆转K562细胞TMS1的甲基化水平，TMS1mRNA及蛋白相对表达水平分别为0．72±0．04和1．3±0．06，与处理前相比明显升高（P〈0．01）；细胞凋亡检测结果显示，与对照组相比，2gmol／LAs2O3处理组细胞凋亡率明显增加[（2．05±0．16）％对（12．24±1．06）％，P〈0．05）]。与对照组相比，2μmol／LAs2O3处理组K562细胞抗凋亡蛋白Bcl-2表达降低，促凋亡蛋白Bax表达明显增高，Bcl-2／Bax比值明显降低（1．94±0．14对0．56士0．12，P〈0．01）。结论As2O3可通过逆转抑癌基因TMS1的甲基化状态，恢复其表达，并通过下调Bcl．2／Bax比值促进K562细胞凋亡。

关键词： K562细胞基因 TMS1 DNA甲基化细胞凋亡砷剂

机器学习预测肱骨近端骨折钢板内固定后继发性螺钉切出的风险

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中国组织工程研究 2025年第15期29卷 3179-3187页

作者：徐大星涂泽松纪木强许伟鹏牛维广州中医药大学广东省广州市510006 佛山市中医院三水医院骨科广东省佛山市528100 佛山市中医院骨科广东省佛山市528000 广东省中医院关节外科广东省广州市510120

背景:继发性螺钉切出关节面是肱骨近端骨折锁定钢板内固定术后的主要并发症之一,切出的螺钉会磨损关节盂和引起肩峰撞击,影响肩关节功能。因此,准确的风险预测有积极的临床意义。目的:通过机器学习方法筛选肱骨近端骨折钢板内固定后继... 详细信息

背景:继发性螺钉切出关节面是肱骨近端骨折锁定钢板内固定术后的主要并发症之一,切出的螺钉会磨损关节盂和引起肩峰撞击,影响肩关节功能。因此,准确的风险预测有积极的临床意义。目的:通过机器学习方法筛选肱骨近端骨折钢板内固定后继发性螺钉切出的风险因素,开发并验证风险预测模型,便于临床医生早期甄别并干预高风险患者。方法:收集2013年6月至2022年6月接受锁定钢板内固定治疗的214例肱骨近端骨折患者的临床资料作为训练组建立模型,将同一时间段另一医院收治的同类患者61例纳入外部验证组。按照患者术后是否出现继发性螺钉切出,分为螺钉切出组和螺钉维持组。训练组利用随机森林、支持向量机、逻辑回归3种机器学习算法构建预测模型;采用递归特征消除法、10折交叉验证重抽样作为变量的筛选方法,并将3种模型准确度最高时纳入变量的交集作为与螺钉切出高度相关的可靠风险变量。通过R语言软件构建动态预测模型,以网页计算器形式展示,并对模型进行内、外部验证。模型内部检验采用Bootstrap法重抽样1000次,使用受试者工作特征曲线下面积、校准曲线、临床决策曲线评价模型的区分度、校准能力及临床应用价值。通过Youden指数确定预测模型的最佳风险分界值,据此将外部验证组患者分为高、低风险组,根据模型风险预测能力的准确度来评价其稳定性和外延性。结果与结论:①机器学习算法筛选出继发性螺钉切出高度相关的4个风险变量,分别为肱骨近端内侧柱皮质支撑、三角肌结节指数、骨折类型及术后复位情况;②构建的风险预测模型表现出良好的区分度和准确度[曲线下面积=0.874,95%置信区间(0.827,0.922)],校准曲线显示模型预测风险和实际发生风险有较好的一致性;③临床决策曲线提示风险阈值概率在0.1-0.75范围内时,模型具有较好的临床适用性;④风险概率为26%是模型风险分层的最佳阈值,外部验证组利用模型风险分层预测螺钉切出的总正确率为84%;⑤结果说明该风险预测模型准确度和外延性较好,可为指导临床治疗提供依据。

关键词：肱骨近端骨折继发性螺钉切出机器学习影响因素风险预测模型

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氧化苦参碱体外诱导膀胱癌T24细胞凋亡

第二军医大学学报 2013年第5期34卷 565-568页

作者：李顺魏学斌黄世明徐留玉黄生亮赵庆利李青山东大学附属千佛山医院泌尿外科济南250014

目的观察氧化苦参碱对膀胱癌T24细胞增殖及凋亡的影响,并初步探讨其作用机制。方法不同浓度(0.625、1.25、2.5 mg/mL)氧化苦参碱作用于膀胱癌T24细胞,采用流式细胞术、光镜及电镜观察其诱导膀胱癌T24细胞的凋亡作用。用RT-PCR检测细胞... 详细信息

目的观察氧化苦参碱对膀胱癌T24细胞增殖及凋亡的影响,并初步探讨其作用机制。方法不同浓度(0.625、1.25、2.5 mg/mL)氧化苦参碱作用于膀胱癌T24细胞,采用流式细胞术、光镜及电镜观察其诱导膀胱癌T24细胞的凋亡作用。用RT-PCR检测细胞凋亡相关基因survivin及caspase-3转录水平的改变。免疫印迹法检测survivin和caspase-3蛋白的表达情况。结果氧化苦参碱作用人膀胱癌细胞后,光镜及电镜下均见到典型的细胞凋亡形态,流式细胞术观察发现凋亡峰。同时观察到氧化苦参碱抑制survivin的转录和表达,对caspase-3有上调作用(P<0.05)。结论氧化苦参碱可能通过抑制survivin、上调caspase-3表达诱导膀胱癌T24细胞发生凋亡。

关键词：氧化苦参碱膀胱肿瘤凋亡存活素半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶

染料介导光氧化法处理的同种异体动脉体内近期生物稳定性和细胞毒性研究

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生物医学工程学杂志 2009年第2期26卷 390-393页

作者：刘文一谷志涛刘鲁祁山东大学附属千佛山医院心脏外科济南250014

观察染料介导光氧化(DMP)法处理的家兔胸主动脉用于同种异体腹主动脉置换后,在体内血流环境下的生物稳定性和细胞毒性。以经染料介导的光氧化反应处理的家兔胸主动脉为研究对象,以戊二醛(GA)处理的家兔胸主动脉以及自体腹主动脉原位移... 详细信息

观察染料介导光氧化(DMP)法处理的家兔胸主动脉用于同种异体腹主动脉置换后,在体内血流环境下的生物稳定性和细胞毒性。以经染料介导的光氧化反应处理的家兔胸主动脉为研究对象,以戊二醛(GA)处理的家兔胸主动脉以及自体腹主动脉原位移植作为对照,建立家兔胸-腹主动脉移植模型;实验动物观察饲养1个月后,取出标本观察,通过光学显微镜半定量计数观察移植血管的体内生物稳定性;通过扫描电镜半定量计数观察移植血管内皮覆盖情况,以此评价移植血管的细胞毒性。结果显示:DMP组生物稳定性指数较自体动脉移植组低,差异不具统计学意义(P>0.05),DMP组生物稳定性指数较GA组高,差异具显著统计学意义(P<0.01);DMP组内皮覆盖率较GA组高,差异具显著统计学意义(P<0.01)。表明:光氧化反应处理的家兔胸主动脉在家兔胸-腹主动脉移植的动物模型中,生物稳定性高,细胞毒性低。

关键词：染料介导光氧化同种异体动脉移植生物稳定性细胞毒性

新辅助化疗联合新辅助内分泌治疗在绝经后乳腺癌中的应用

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中国实用外科杂志 2009年第S2期29卷 5-6页

作者：李庆顾禾付荣湛张丽丽山东大学附属千佛山医院

目的评价新辅助化疗联合新辅助内分泌治疗对绝经后、ER(+)乳腺癌的近期疗效及与受体的相关性。方法40例绝经后乳腺癌,给予FEC方案新辅助化疗联合速莱方案新辅助内分泌治疗,治疗时间8周。结果40例病人,完全缓解4例(10%),部分缓解14例(35... 详细信息

目的评价新辅助化疗联合新辅助内分泌治疗对绝经后、ER(+)乳腺癌的近期疗效及与受体的相关性。方法40例绝经后乳腺癌,给予FEC方案新辅助化疗联合速莱方案新辅助内分泌治疗,治疗时间8周。结果40例病人,完全缓解4例(10%),部分缓解14例(35%),轻度缓解21例(52.5%),无变化1例(2.5%)。其中ER、PR双阳性的为27例,完全缓解3例(11.1%),部分缓解11例(40.7%),轻度缓解13例(48.1%),单独ER阳性的13例,完全缓解1例(7.7%),部分缓解3例(23.1%),轻度缓解8例(61.5%),无变化1例(7.7%),差异具有显著性(P<0.01)。40例病人经8周新辅助化疗联合新辅助内分泌治疗后,均接受手术治疗,其中5例行保乳手术,31例行乳腺癌改良根治术,4例行经典根治术治疗。术后继续相关辅助治疗。结论绝经后、ER(+)乳腺癌采用FEC方案新辅助化疗联合速莱方案新辅助内分泌治疗有效、安全、可靠,为缩小手术切除术式创造条件。

关键词：乳腺癌新辅助化疗新辅助内分泌治疗

乙肝疫苗接种：乙肝相关肝移植受者预防乙肝复发的新策略

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中华肝胆外科杂志 2015年第10期21卷 668-670页

作者：郭源王文涛李自强田根东任雷孙凯滕木俭山东大学附属千佛山医院肝胆外科 250014

目的探讨乙肝相关肝移植受者接种乙肝疫苗的有效性。方法对肝移植术后健康生存2年以上的30例乙肝相关受者进行乙肝疫苗接种。采用0、1、2、3、6个月共5个免疫方案，每次皮下注射乙肝疫苗40μg。以同期在门诊进行乙肝疫苗接种的30例健康... 详细信息

目的探讨乙肝相关肝移植受者接种乙肝疫苗的有效性。方法对肝移植术后健康生存2年以上的30例乙肝相关受者进行乙肝疫苗接种。采用0、1、2、3、6个月共5个免疫方案，每次皮下注射乙肝疫苗40μg。以同期在门诊进行乙肝疫苗接种的30例健康人作为对照。初次接种疫苗后第1、2、3、6、9、12个月检测乙肝表面抗体（Anti—HBs）滴度。结果30例肝移植受者中，6．7％（2／30）接种成功（初次接种12个月后Anti-HBs〉100IU／L），16．7％（5／30）产生部分应答（3例Anti-HBs滴度升高不足100IU／L，2例接种过程中Anti-HBs滴度超过100IU／L，之后逐渐降低，12个月后低于100IU／L）。原发病为急性肝衰竭的9例受者中有22．2％（2／9）接种成功，另有22．2％（2／9）出现部分应答；肝移植术后超过5年的9例受者中有22．2％（2／9）接种成功，另有11．1％（1／9）出现部分应答。健康对照组中有73．3％（22／30）接种成功，另有10％（3／30）产生部分应答。结论部分肝移植受者可以通过乙肝疫苗主动免疫来预防乙肝复发；乙肝相关肝移植受者乙肝疫苗接种的成功率低于健康人；急性肝衰竭和移植术后超过5年的受者乙肝疫苗接种的应答率较高。乙肝疫苗接种可以作为一种预防移植术后乙肝复发的方法。

关键词：肝移植乙型肝炎疫苗接种乙肝复发

聚蛋白多糖酶和基质金属蛋白酶在不同期骨关节炎患者血清中的表达及其意义

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山东大学学报（医学版） 2010年第4期48卷 116-119页

作者：李文张磊张成琪杜春玲王广丽闫新峰于泓宋淑香山东大学附属千佛山医院核医学科济南250014 山东大学附属千佛山医院关节中心济南250014 山东大学附属千佛山医院VIP病房济南250014 山东大学附属千佛山医院影像科济南250014

目的比较解整链蛋白金属蛋白酶(ADAMTS)4、5和基质金属蛋白酶(MMP)1、3在骨关节炎(OA)患者早期和中晚期血清中的表达,并探讨其在OA患者不同时期的作用和早期诊断意义。方法70例单关节OA患者按照MRIRecht分级标准分为早期OA组(44例)和中... 详细信息

目的比较解整链蛋白金属蛋白酶(ADAMTS)4、5和基质金属蛋白酶(MMP)1、3在骨关节炎(OA)患者早期和中晚期血清中的表达,并探讨其在OA患者不同时期的作用和早期诊断意义。方法70例单关节OA患者按照MRIRecht分级标准分为早期OA组(44例)和中晚期OA组(26例),同时设健康对照组(30例)。应用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测ADAMTS-4、ADAMTS-5、MMP-1和MMP-3在三组血清中的表达,以ELISA光密度(OD)值代表所测各项在血清中的表达水平。结果早期OA组的ADAMTS-4表达水平高于中晚期OA组;ADAMTS-5、MMP-1和MMP-3在早期OA组的表达水平均低于中晚期OA组(P均<0.05)。而正常对照组血清中仅有少量聚蛋白多糖酶和MMP-1的表达。结论聚蛋白多糖酶在OA早期和中晚期血清中均有高表达,MMP在OA中晚期血清中有高表达,ADAMTS-4有早期诊断意义。

关键词：聚蛋白多糖酶基质金属蛋白酶骨关节炎

改良腹腔镜胃镜双镜联合手术治疗固有肌层来源胃间质瘤

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中华消化外科杂志 2015年第5期14卷 417-421页

作者：董海燕王玉龙李国栋李杰庞秋萍贾欣永山东大学附属千佛山医院内镜诊疗科济南250014 山东大学附属千佛山医院普通外科中心济南250014

目的探讨改良腹腔镜胃镜双镜联合手术治疗固有肌层来源胃间质瘤的临床疗效.方法回顾性分析2011年1月至2014年1月山东大学附属千佛山医院收治的25例固有肌层来源的胃间质瘤患者的临床资料.患者采用气管插管全身麻醉;脐上缘做一0.5 cm... 详细信息

目的探讨改良腹腔镜胃镜双镜联合手术治疗固有肌层来源胃间质瘤的临床疗效.方法回顾性分析2011年1月至2014年1月山东大学附属千佛山医院收治的25例固有肌层来源的胃间质瘤患者的临床资料.患者采用气管插管全身麻醉;脐上缘做一0.5 cm的弧形切口,建立气腹,置入腹腔镜观察;再行胃镜检查并定位肿瘤;腹腔镜经脐置入腹腔,另2个穿刺套管经胃前壁刺入胃腔;腹腔镜器械在胃腔内切除肿瘤;胃镜下经口取出肿瘤,钛夹夹闭创面及胃壁上穿刺孔.患者术后置入鼻胃管,进行胃肠减压,常规应用质子泵抑制剂及抗生素治疗3d;对于病理学检查证实为中危及高危的胃间质瘤患者,在肿瘤完整切除后,应用伊马替尼辅助治疗.其余胃间质瘤患者,手术完整切除后,不行任何辅助治疗.术后1年内每3个月复查1次胃镜,1年后每6个月复查1次胃镜.术后1年内每6个月复查1次腹部CT,1年后每年复查1次腹部CT.随访时间截至2014年12月.结果 25例患者顺利完成改良腹腔镜胃镜双镜联合手术,无中转开腹.患者手术时间为（79±4） min,术中出血量为（28 ±3）mL,肿瘤直径为（2.6±0.3）cm,术后腹痛时间为（2.8±0.3）d,住院时间为（6.3±0.3）d.25例患者均未出现并发症.术后病理学检查结果证实切除的肿瘤均为胃间质瘤,核分裂象数为（3.3±0.3）个/50个高倍视野,达到R0切除.其中极低危3例,低危19例,中危3例,高危0例.3例中危胃间质瘤患者中,2例遵医嘱服药,服药期间未出现药物不良反应;另外1例由于经济原因,拒服药物治疗.25例患者随访12∽36个月,均未见肿瘤复发及转移.结论改良腹腔镜胃镜双镜联合手术治疗固有肌层来源的胃间质瘤安全、有效.

关键词：胃肠道间质肿瘤治疗腹腔镜检查胃镜检查

经肛门内镜显微手术治疗pT_1直肠癌50例临床总结

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中华肿瘤防治杂志 2013年第9期20卷 695-698页

作者：于海华刘波陈景波夏立建山东大学附属山东省千佛山医院普外科山东济南250014

目的:评估经肛门内镜显微手术(TEM)在pT1直肠癌局部切除中的临床应用价值。方法:对2006-06-2010-06山东省千佛山医院胃肠外科收治的50例pT1直肠癌TEM患者的临床资料进行回顾性分析。结果:全部患者中初始黏膜下切除12例(术前为uT0期),切... 详细信息

目的:评估经肛门内镜显微手术(TEM)在pT1直肠癌局部切除中的临床应用价值。方法:对2006-06-2010-06山东省千佛山医院胃肠外科收治的50例pT1直肠癌TEM患者的临床资料进行回顾性分析。结果:全部患者中初始黏膜下切除12例(术前为uT0期),切缘阳性4例(行扩大性全层切除后切缘均显示阴性);全层切除38例(uT1或uT2期),所获标本切缘均阴性。术中失血(15.5±10.5)mL,住院时间(4.5±3.2)d。12例患者(24.0%)出现经肛局部切除相对特异性轻度并发症;术后1个月时患者原有排便习惯与粪便性状改变症状均趋消失。随访期内局部复发2例(4.0%),患者经相应补救性处理后效果良好;未见肿瘤远处转移及死亡患者。多因素分析显示,肿瘤浸润深度肿瘤累及黏膜下全层(Sm3)和肠壁受累范围(>半周)是pT1直肠癌TEM术后复发的独立危险因素。结论:pT1期直肠癌TEM超黏膜下层切除是完全可行的,但Sm3浸润、肠壁受累超过半周及瘤径偏大(>3cm)的T1直肠癌TEM后复发风险增加;术后并发症轻,以直肠刺激症状为主,相关变化于术后1个月时趋于消散。

关键词：直肠肿瘤外科学内镜显微手术复发治疗结果