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自育与非自育淡色库蚊体内菌群多样性比较

中国血吸虫病防治杂志 2024年第1期36卷 52-58,73页

作者：类晶晶吕文祥王文倩王海防郭秀霞程鹏公茂庆刘丽娟山东省寄生虫病防治研究所、山东第一医科大学(山东省医学科学院) 山东济宁272033

目的了解自育与非自育淡色库蚊体内菌群组成与多样性差异,从而为探索淡色库蚊自育发生机制提供参考依据。方法收集25℃自育与非自育淡色库蚊成蚊,利用Illumina NovaSeq 6000测序平台对细菌16S核糖体RNA基因高变区进行测序。采用α多样... 详细信息

目的了解自育与非自育淡色库蚊体内菌群组成与多样性差异,从而为探索淡色库蚊自育发生机制提供参考依据。方法收集25℃自育与非自育淡色库蚊成蚊,利用Illumina NovaSeq 6000测序平台对细菌16S核糖体RNA基因高变区进行测序。采用α多样性指数分析菌群丰富度和多样性,采用β多样性指数分析菌群结构差异,通过线性判别分析效应大小(linear discriminant analysis effect size,LEfSe)鉴别组间在丰度上具有显著差异的菌群。结果自育与非自育淡色库蚊体内菌群隶属18个门、28个纲、70个目、113个科和170个属,优势菌门主要有变形菌门、拟杆菌门等。在属水平,沃尔巴克氏体菌属为共有优势菌属,在自育及非自育淡色库蚊中的相对丰度分别为(77.6±11.3)%和(47.5±8.5)%;粪杆菌属(0.4%±0.1%)、杜氏杆菌属(0.5%±0.0%)、马赛菌属(0.5%±0.1%)等为自育淡色库蚊特有菌属。α多样性分析显示,自育淡色库蚊体内菌群Chao1指数和ACE指数大于非自育淡色库蚊(P均>0.05),而Shannon指数(P>0.05)和Simpson指数(P<0.05)小于非自育淡色库蚊。LEfSe分析结果显示,共计48个分类单元在自育和非自育淡色库蚊间存在显著差异(P均<0.05)。结论自育与非自育淡色库蚊体内菌群多样性存在显著差异。

关键词：淡色库蚊自育 16S核糖体RNA 菌群构成 Alpha多样性 Beta多样性

2021年烟台市近海海鱼异尖线虫感染率及居民异尖线虫病防治知识知晓率调查

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中国血吸虫病防治杂志 2024年第1期36卷 74-78,110页

作者：陈瑶李丹王龙江卜灿灿李曰进王用斌许艳闫歌张本光山东省寄生虫病防治研究所、山东第一医科大学(山东省医学科学院) 山东济宁272000

目的了解2021年山东省烟台市近海海鱼异尖线虫感染率和当地居民异尖线虫病相关知识知晓情况,为制定异尖线虫病防控措施提供参考依据。方法2021年11月,于山东省烟台市顺鑫港口购买海鱼,检测海鱼异尖线虫感染情况,并分析不同鱼种、不同部... 详细信息

目的了解2021年山东省烟台市近海海鱼异尖线虫感染率和当地居民异尖线虫病相关知识知晓情况,为制定异尖线虫病防控措施提供参考依据。方法2021年11月,于山东省烟台市顺鑫港口购买海鱼,检测海鱼异尖线虫感染情况,并分析不同鱼种、不同部位异尖线虫感染率。采用Spearman秩相关分析海鱼体长和体质量与异尖线虫感染度间的相关性,对当地居民饮食习惯和异尖线虫病防治知识知晓率进行问卷调查。结果共解剖海鱼20种201尾,其中11种77尾检出异尖线虫,鱼种异尖线虫感染检出率为55.00%(11/20)、海鱼总感染率为38.31%(77/201);异尖线虫感染阳性海鱼中累计检出异尖线虫3468条,平均感染度为45.04条/尾。Spearman秩相关结果显示,鮟鱇鱼体长(rs=0.74,P生熟菜板不分比例差异有统计学意义(χ^(2)=17.89,P生食或半生食海产品习惯者比例差异有统计学意义(χ^(2)=28.27,P<0.01)。结论2021年烟台市近海海域海鱼异尖线虫感染率、感染度均较高,当地居民异尖线虫病防治知识知晓率较低;应加大对居民异尖线虫病健康教育,降低异尖线虫感染风险。

关键词：异尖线虫异尖线虫病海鱼问卷调查烟台市

2017—2022年山东省输入性疟疾流行病学特征

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2024年第2期42卷 140-146页

作者：许艳王龙江孔祥礼李曰进卜灿灿闫歌张本光王用斌山东省寄生虫病防治研究所山东第一医科大学(山东省医学科学院)济宁272033

目的了解2017—2022年山东省输入性疟疾流行病学特征,为进一步做好防止输入再传播工作提供科学依据。方法从中国疾病预防控制信息系统传染病报告信息管理系统和寄生虫病防治信息管理系统中收集2017—2022年山东省输入性疟疾疫情、病例... 详细信息

目的了解2017—2022年山东省输入性疟疾流行病学特征,为进一步做好防止输入再传播工作提供科学依据。方法从中国疾病预防控制信息系统传染病报告信息管理系统和寄生虫病防治信息管理系统中收集2017—2022年山东省输入性疟疾疫情、病例流行病学个案调查等资料,建立数据库,采用SPSS 26.0软件对疟疾病例分类、感染来源、流行病学特征、病例诊治情况等进行统计分析,率的比较采用χ2检验,时间间隔分布的比较用非参数检验,利用SaTScan v10.1软件对疟疾病例的空间聚集性进行扫描分析,利用GraphPad Prism 8.3.0软件进行绘图。结果2017—2022年,山东省共报告输入性疟疾820例,均为境外输入性病例。新冠疫情前(2017—2019年)、新冠疫情期间(2020—2022年)分别报告670例、150例。820例均为实验室确诊病例,恶性疟、卵形疟、间日疟、三日疟病例分别占69.5%(570/820)、19.0%(156/820)、7.3%(60/820)和4.1%(34/820),无混合感染和未分型病例。感染来源地以非洲为主(95.9%,786/820)。全省16个市均有病例报告,济宁、烟台、威海、青岛和济南5个市共报告511例,占62.3%(511/820)。空间扫描分析发现7个病例聚集区,其中威海环翠、烟台牟平等13个县(市、区)为一类聚集区(相对危险度=3.98,P学意义(χ2=321.959,P山东省输入性疟疾病例多、分布广,存在输入再传播的风险。

关键词：疟疾流行病学特征空间聚集性跨地区就诊山东省

刚地弓形虫感染对小鼠脑组织转录本m^(6)A甲基化修饰的影响

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2024年第1期42卷 27-35,47页

作者：解晓曼孙航代莉莎朱文菊王利磊谢环环董宏杰张俊梅王琦周贝贝赵桂华徐超尹昆山东省寄生虫病防治研究所山东第一医科大学(山东省医学科学院)济宁272033

目的分析刚地弓形虫感染对小鼠脑组织转录本的N6-甲基腺苷(m6A)甲基化修饰水平的影响。方法20只雌性C57BL/6J小鼠随机分为TgCtwh6感染组(7只)、LHG感染组(7只)和对照组(TgCtwh6感染组、LHG感染组的对照各3只)。TgCtwh6感染组、LHG感染... 详细信息

目的分析刚地弓形虫感染对小鼠脑组织转录本的N6-甲基腺苷(m6A)甲基化修饰水平的影响。方法20只雌性C57BL/6J小鼠随机分为TgCtwh6感染组(7只)、LHG感染组(7只)和对照组(TgCtwh6感染组、LHG感染组的对照各3只)。TgCtwh6感染组、LHG感染组分别灌胃接种中国Ⅰ型wh6株(TgCtwh6)和中国Ⅲ型LHG株刚地弓形虫感染小鼠脑组织悬液0.2ml(20个包囊/鼠),对照组灌胃等量的生理盐水。分别在接种后15、30和45 d,用抽签法随机抽取感染组小鼠各1只,麻醉后处死,取脑组织,于显微镜下分别记录大脑皮层区、海马区和嗅球区的包囊数。感染后45 d每组分别取3只小鼠的全脑组织,提取总RNA,制备基因组文库,进行转录组测序,筛选差异甲基化位点(DML),统计感染组和对照组的mRNA的差异m6A甲基化位点及其所在转录本;对甲基化位点所在转录本进行基因本体功能注释(GO)分析,京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析,对甲基化差异转录本进行基因集富集分析(GSEA)。选取甲基转移酶样3(METTL3)、肥胖相关蛋白(FTO)和YTH结构域3(YTHDF3)等3种m6A甲基化修饰蛋白基因,以甘油醛-3-磷酸脱氢酶基因为内参,实时荧光定量逆转录PCR(qRT-PCR)检测其相对转录水平。结果感染组小鼠均感染成功。感染后45 d,大脑皮层、海马和嗅球的包囊数分别为(5676±10)、(4773±9)、(243±10)个。感染组和对照组共检出760650个甲基化位点,其中GGACA、GGACC、GGACT、ACGAT等4种m6A模体的甲基化水平分别占16.8%(127923/760650)、4.6%(35164/760650)、3.8%(28983/760650)和0.4%(3122/760650);共检出高甲基化位点所在转录本127016条,其中GGACA、GGACC、GGACT和ACGAT所在的转录本分别为71727、27754、24556和2979条。感染组与对照组小鼠脑组织转录组中ACGAT、GGACA、GGACC、GGACT等4种m6A模体的DML位点总数为9233,其中高甲基化位点4832个,低甲基化位点4851个。GO分析结果显示,DML所在转录本显著富集于生物过程中的细胞过程、细胞组分中的细胞和分子功能中的结合等功能。DML所在转录本的KEGG富集分析结果显示,分子间相互作用网络主要富集在溶酶体、剪接体和多巴胺能突触信号通路等途径中。对生物过程的GO富集分析结果显示,DML所在的转录本中,生物过程相关的部分转录本主要富集于蛋白糖基化、神经元凋亡负调控、蛋白质的入核转运等过程。GSEA分析结果显示,对照组和两个感染组的组间差异甲基化高分富集于成纤维细胞增殖负调控通路和Hippo信号通路相关的转录本子集中,其中筛选出ENSMUST00000105393、ENSMUST00000006523、ENSMUST00000055261和ENSMUST00000038658等4个关键转录本,分别编码共刺激因子配体(ICOSL)、富含半胱氨酸肠蛋白1(CRIP1)、MOB激酶激活剂1A201(MOB1A201)和MOB1A202,与对照组相比,TgCtwh6感染组、LHG感染组的这4个基因表达均上调。qRT-PCR结果显示,TgCtwh6感染组、LHG感染组小鼠脑组织mettl3 mRNA相对表达水平分别为5.47±1.09、1.63±0.06,与对照组(1.01±0.11)比较差异均有统计学意义(t=4.05、5.03,均P学意义(t=18.95、2.85,均P学意义(t=7.67、2.99,均P生物学进程和信号通路的改变。

关键词：刚地弓形虫 m6A修饰转录本脑包囊纳米孔三代测序

2021—2022年山东省土源性线虫感染监测结果分析

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2024年第4期42卷 537-541页

作者：王龙江许艳孙慧李曰进卜灿灿吕文祥张本光孔祥礼闫歌王用斌山东省寄生虫病防治研究所山东第一医科大学(山东省医学科学院)山东济宁272033

为了解山东省人体土源性线虫感染现状,为优化防控策略提供科学依据,2021—2022年采取整群抽样方法随机抽取山东省27个县(市、区)作为监测点,各监测点按地理方位划分为东、西、南、北、中5个片区,每片区随机抽取1个乡镇的1个行政村,每行... 详细信息

为了解山东省人体土源性线虫感染现状,为优化防控策略提供科学依据,2021—2022年采取整群抽样方法随机抽取山东省27个县(市、区)作为监测点,各监测点按地理方位划分为东、西、南、北、中5个片区,每片区随机抽取1个乡镇的1个行政村,每行政村3周岁以上常住人口抽取不少于200人作为监测对象。收集监测对象的基本信息及粪便样品,用改良加藤厚涂片法(Kato‑Katz法,一粪二检)检测蠕虫卵并计数,试管滤纸培养法鉴别钩虫虫种,透明胶纸肛拭法检查3~9岁儿童蛲虫感染情况。建立数据库,利用SPSS 26.0软件进行统计分析,计算感染率、感染度,感染率间的比较采用卡方检验。2021—2022年共检测29622人,土源性线虫总感染率为0.55%(162/29622)。钩虫、蛔虫、鞭虫的感染率分别为0.02%(7/29622)、0.02%(6/29622)、0.51%(152/29622),钩虫经培养鉴定均为十二指肠钩虫。152名鞭虫感染者中,重度感染2人,中度感染6人,其余均为轻度感染;6名蛔虫感染者和7名钩虫感染者均为轻度感染。鲁南、鲁东、鲁西北、鲁中地区土源性线虫感染率分别为0.97%(118/12208)、0.84%(43/5117)、0.01%(1/7140)、0(0/5157)。男性、女性土源性线虫感染率分别为0.55%(79/14362)和0.54%(83/15260)(χ^(2)=0.005,P>0.05);各年龄组中,60~99岁组土源性线虫感染率最高,为1.11%(107/9612)(χ^(2)=86.274,P山东省土源性线虫感染呈现地区、人群分布不均衡的特征,提示今后应在土源性线虫病监测的基础上,加强重点地区的防治,做好重点人群健康宣教,持续降低人群感染率。

关键词：土源性线虫感染率监测山东省

抗病毒免疫调节因子RNF2蛋白的生物信息学分析及原核表达纯化

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中国病原生物学杂志 2024年第10期19卷 1129-1135页

作者：王琦张俊梅朱文菊谢环环解晓曼赵桂华徐超尹昆孙航董宏杰山东省寄生虫病防治研究所山东第一医科大学(山东省医学科学院)山东济宁272033

目的 RNF2是一种转录抑制因子,其N端保守的RING结构域使其能够发挥E3泛素连接酶的功能。本研究采用生物信息学工具对人源RNF2蛋白进行序列和结构分析,同时在大肠埃希菌表达系统中进行高效表达与纯化,为后续探索其生物学功能和潜在的药... 详细信息

目的 RNF2是一种转录抑制因子,其N端保守的RING结构域使其能够发挥E3泛素连接酶的功能。本研究采用生物信息学工具对人源RNF2蛋白进行序列和结构分析,同时在大肠埃希菌表达系统中进行高效表达与纯化,为后续探索其生物学功能和潜在的药物靶点奠定基础。方法利用ClustalX、Expasy、TMHMM及SignalP等软件对RNF2进行多序列比对、理化性质分析、跨膜区、信号肽及疏水性分析。通过分子克隆构建pGEX-4T-RNF2重组质粒,随后转入大肠埃希菌BL21(DE3)中进行目的蛋白的诱导表达。收集菌体后通过高压破碎释放重组蛋白,进一步使用GST亲和层析柱纯化。结果 RNF2全长共336个氨基酸,带负电,无跨膜区,无信号肽,属于亲水蛋白,且在不同物种中较为保守。成功构建了pGEX-4T-RNF2重组菌株,经IPTG诱导表达后,发现RNF2能够在BL21(DE3)中大量表达。GST层析柱纯化结果显示RNF2的挂柱效果较差,但仍能得到少量高纯度蛋白。结论使用大肠埃希菌原核表达系统成功获得性状较好的RNF2重组蛋白,为后续功能实验和药物开发奠定了基础。

关键词： RNF2 泛素化异源表达 GST亲和层析重组蛋白

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2023年山东省人体肠道蠕虫感染监测分析

中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2024年

作者：吕文祥卜灿灿李曰进王龙江王用斌孔祥礼张本光闫歌许艳山东省寄生虫病防治研究所山东第一医科大学(山东省医学科学院)

分析山东省人体肠道蠕虫感染情况，为寄生虫防治策略和措施的制定提供科学依据。按照《全国人体重点寄生虫病监测方案》要求开展调查，选取济南、青岛、潍坊、济宁、临沂、德州、聊城、滨州、菏泽等9个地市共14个调查点，每个调查点以... 详细信息

分析山东省人体肠道蠕虫感染情况，为寄生虫防治策略和措施的制定提供科学依据。按照《全国人体重点寄生虫病监测方案》要求开展调查，选取济南、青岛、潍坊、济宁、临沂、德州、聊城、滨州、菏泽等9个地市共14个调查点，每个调查点以地理方位划分东、南、西、北、中5个片区，每个片区选取1个街道的1个行政村开展监测，每个调查村选择3周岁以上常住居民至少200人。采用改良加藤厚涂片法（一粪两检）检查肠道蠕虫虫卵感染情况，每个调查村3～9岁儿童加做透明胶纸肛拭法检测蛲虫卵感染情况。采用SPSS21.0软件进行统计学分析，感染率的比较采用χ2检验。共调查14 507人，检出人体肠道蠕虫感染者45人，总感染率为0.31%（45/14 507），其中蛔虫、鞭虫、华支睾吸虫等3种肠道蠕虫的感染率分别为0.01%（2/14 507）、0.30%（43/14 507）、0.01%（2/14 507），蛲虫的感染率为0.82%（15/1 832）。临沂的肠道蠕虫感染率最高，为4.16%（42/1 010）；其次为济宁，感染率为0.10%（1/1 014）；青岛和潍坊的感染率均为0.05%（1/2 050,1/2 115）;4市感染率差异有统计学意义（χ2=196.906,P 学意义（χ2=2.536,P> 0.05）。男性和女性的肠道蠕虫感染率分别为0.28%（19/6 805）、0.36%（28/7 702）;19～40岁组人群的肠道蠕虫感染率最高，为0.40%（12/2 988）(χ2=2.837,P> 0.05)；小学和初中文化程度人群的肠道蠕虫感染率最高，均为0.41%（18/4 427,16/3 933）。不同性别、不同年龄组和不同文化程度人群的蠕虫感染率差异均无统计学意义（χ2=0.796、2.837、5.251,P>0.05）。职业为学生的人群肠道蠕虫感染率最高，为0.56%（11/1 970），不同职业人群肠道蠕虫感染率差异有统计学意义（χ2=23.847,P 山东省人体肠道蠕虫的感染率处于较低水平，但部分地区仍存在传播风险，需继续开展监测防控工作。

关键词：肠道蠕虫监测山东省

2021年山东省媒介蚊虫种群及按蚊密度监测结果分析

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中国病原生物学杂志 2024年第1期19卷 52-55页

作者：李曰进许艳王龙江卜灿灿闫歌王用斌山东省寄生虫病防治研究所山东第一医科大学(山东省医学科学院)山东济宁272033

目的了解山东省消除疟疾后蚊虫种群及传疟媒介中华按蚊密度现状,为消除疟疾后输入性疟疾再传播风险评估及输入性疟疾防控策略的制定提供依据。方法于2021年6~10月在山东省所辖16设区市监测点采用全通宵诱蚊灯法监测蚊虫种群;采用人饵帐... 详细信息

目的了解山东省消除疟疾后蚊虫种群及传疟媒介中华按蚊密度现状,为消除疟疾后输入性疟疾再传播风险评估及输入性疟疾防控策略的制定提供依据。方法于2021年6~10月在山东省所辖16设区市监测点采用全通宵诱蚊灯法监测蚊虫种群;采用人饵帐诱捕法监测中华按蚊密度。结果全通宵诱蚊灯法共捕获蚊虫43684只,其中中华按蚊393只,库蚊40305只,伊蚊1145只,其他蚊种1841只;人饵帐诱捕法共捕获中华按蚊1149只,平均密度为0.874只/(人·h)。8月上旬中华按蚊密度达到峰值,为1.903只/(人·h)。全省以济宁市微山县中华按蚊平均密度最高,为8.442只/(人·h);滨州市滨城区中华按蚊密度次之,为5.039只/(人·h)。结论山东省蚊虫种群分布以库蚊为主,中华按蚊在济宁市微山县和滨州市滨城区7~8月份活动峰度高,应加强中华按蚊活动重点区域的生态学监测。

关键词：蚊虫种群中华按蚊监测山东省

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抗弓形虫药物靶点研究进展

中国病原生物学杂志 2024年第2期19卷 237-240,247页

作者：谢环环王琦代莉莎朱文菊尹昆山东省寄生虫病防治研究所山东第一医科大学(山东省医学科学院)山东济宁272033

弓形虫是人畜共患寄生虫之一,对优生优育、食品安全、免疫缺陷人群健康、人类精神卫生和畜牧产业均造成严重危害,但目前仍缺乏高效低毒、靶点专一、机制明确的抗弓形虫药物,导致临床弓形虫的标准治疗方案落后、无有效防治措施。因此,本... 详细信息

弓形虫是人畜共患寄生虫之一,对优生优育、食品安全、免疫缺陷人群健康、人类精神卫生和畜牧产业均造成严重危害,但目前仍缺乏高效低毒、靶点专一、机制明确的抗弓形虫药物,导致临床弓形虫的标准治疗方案落后、无有效防治措施。因此,本文就近年来报道的新型抗弓形虫药物靶点及其相关化合物进行综述。

关键词：刚地弓形虫抗弓形虫药物药物靶点综述