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中药调控大鼠卵巢颗粒细胞凋亡干预早发性卵巢功能不全的机制研究

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时珍国医国药 2024年第3期35卷 607-611页

作者：张兵刘鹏飞刘金星于秀红于潇山东中医药大学第一临床医学院山东济南250014 山东中医药大学附属医院山东济南250014 济南市中医医院山东济南250012

目的探讨中药对早发性卵巢功能不全(POI)大鼠卵巢颗粒细胞凋亡的影响及其可能的作用机制。方法动情周期规律的SD大鼠随机分为空白组、模型组、补佳乐组、中药(补肾养精颗粒)低、中、高剂量组。灌胃雷公藤多苷混悬液(50mg·kg^(-1))14d建... 详细信息

目的探讨中药对早发性卵巢功能不全(POI)大鼠卵巢颗粒细胞凋亡的影响及其可能的作用机制。方法动情周期规律的SD大鼠随机分为空白组、模型组、补佳乐组、中药(补肾养精颗粒)低、中、高剂量组。灌胃雷公藤多苷混悬液(50mg·kg^(-1))14d建立POI大鼠模型,并给予不同药物灌胃治疗。干预14d后HE染色观察卵巢组织病理变化;ELISA检测血清FSH、E_(2)、AMH水平;免疫组化检测卵巢组织Bax表达水平。提取大鼠原代卵巢颗粒细胞,HE染色及FSHR染色鉴定卵巢颗粒细胞,显微镜下观察不同时间点不同组卵巢颗粒细胞的生长状态;Western blot检测各组颗粒细胞Caspase-9、Caspase-3、Bcl-2、Bax的蛋白表达。结果与空白组相比,模型组大鼠血清FSH水平升高,E_(2)、AMH水平下降(P均<0.01);各级卵泡数量减少,闭锁卵泡数增加;卵巢组织Bax表达水平上升(P<0.01)。干预后各治疗组闭锁卵泡数下降,血清FSH水平下调,E_(2)、AMH水平上调(P均<0.01),卵巢组织Bax表达水平下降(P<0.01)。经HE染色及FSHR染色鉴定机械法提取的大鼠原代卵巢颗粒细胞纯度较高,空白组颗粒细胞提取量最多,细胞贴壁生长,形态为长梭形或多角形;模型组颗粒细胞数量最少,细胞贴壁状态及细胞形态欠佳,易脱落;其余各组颗粒细胞数量较模型组有不同程度增加,细胞生长状态同空白组相似。与空白组相比,模型组颗粒细胞Caspase-9、Caspase-3、Bax的蛋白表达显著上升(P<0.01或P<0.05),Bcl-2蛋白表达水平下降(P<0.05);各治疗组的Caspase-9、Caspase-3、Bax蛋白表达水平有不同程度的下调(P<0.01或P<0.05);Bcl-2蛋白表达上调(P<0.05)。结论中药可下调血清FSH水平,上调E2、AMH水平,下调卵巢颗粒细胞中Caspase-9、Caspase-3、Bax表达,上调Bcl-2表达,抑制卵巢颗粒细胞凋亡,减少卵泡闭锁,促进卵泡发育。

关键词：中药补肾养精颗粒早发性卵巢功能不全卵巢颗粒细胞凋亡

鼻敏康合剂对变应性鼻炎大鼠IgE、AQP5表达的影响

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中成药 2023年第5期45卷 1658-1661页

作者：杜启雪王仁忠山东中医药大学山东济南250000 济南市中医医院耳鼻喉科山东济南250000 山东中医药大学附属医院耳鼻喉科山东济南250000

目的探究鼻敏康合剂对变应性鼻炎大鼠血清IgE、OVA-sIgE、AQP5表达的影响。方法60只SD大鼠随机分为对照组、模型组、氯雷他定组(0.9 mg/kg)以及鼻敏康合剂低、中、高剂量组(2.53、5.06、10.12 g/kg),每组10只。除对照组外,其余各组大鼠... 详细信息

目的探究鼻敏康合剂对变应性鼻炎大鼠血清IgE、OVA-sIgE、AQP5表达的影响。方法60只SD大鼠随机分为对照组、模型组、氯雷他定组(0.9 mg/kg)以及鼻敏康合剂低、中、高剂量组(2.53、5.06、10.12 g/kg),每组10只。除对照组外,其余各组大鼠均采用卵清蛋白(OVA)致敏法建立变应性鼻炎大鼠模型。造模结束后,各组大鼠灌胃给予相应药物,连续2周。采用叠加量化法记录各组大鼠症状积分,ELISA法检测血清IgE、OVA-sIgE、AQP5水平,免疫组化及RT-qPCR法检测鼻黏膜AQP5蛋白及mRNA表达。结果与对照组比较,模型组大鼠症状积分,血清IgE、OVA-sIgE、AQP5水平,鼻黏膜AQP5蛋白及mRNA表达升高(P0.05)。结论鼻敏康合剂可通过抑制IgE、OVA-sIgE、AQP5表达,改善鼻腔局部水液代谢,减轻鼻腔黏膜炎症,对变应性鼻炎起到治疗作用。

关键词：鼻敏康合剂变应性鼻炎 IgE OVA-sIgE AQP5

基于代谢组学及转录组学的益肾化湿颗粒改善糖尿病肾病作用机制分析

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中国实验方剂学杂志 2023年第20期29卷 109-117页

作者：申振崔涛艾珊珊李祥宇高冉冉李伟韩聪山东中医药大学第一临床医学院济南250014 济南市章丘区中医医院济南250200 济宁医学院山东济宁272067 山东中医药大学附属医院济南250014

目的:基于超高效液相色谱-串联质谱法(UHPLC-MS/MS)及高通量转录组测序技术(RNA-seq)探讨益肾化湿颗粒调节血清代谢物及肾脏信使核糖核酸(mRNA)表达来改善糖尿病肾病(DKD)的作用机制。方法:SD大鼠随机分为正常组、模型组、益肾化湿颗粒... 详细信息

目的:基于超高效液相色谱-串联质谱法(UHPLC-MS/MS)及高通量转录组测序技术(RNA-seq)探讨益肾化湿颗粒调节血清代谢物及肾脏信使核糖核酸(mRNA)表达来改善糖尿病肾病(DKD)的作用机制。方法:SD大鼠随机分为正常组、模型组、益肾化湿颗粒组,每组8只。以链脲佐菌素腹腔注射建立DKD大鼠模型,益肾化湿颗粒组给予益肾化湿颗粒5.54 g·kg^(-1)·d^(-1)灌胃,正常组与模型组给予等量生理盐水,持续6周。实验期间监测大鼠体质量、血糖,末次给药24 h后麻醉,下腔静脉取血,分离血清,检测肾功能、血脂及炎症指标,取大鼠肾组织经苏木素-伊红(HE)、马松(Masson)与过碘酸雪夫(PAS)染色观察肾脏病理变化,通过UHPLC-MS/MS与RNA-seq分析血清代谢变化及肾脏mRNA表达差异,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)、蛋白免疫印迹法(Western blot)检测肾脏组织差异mRNA及蛋白表达,探寻共性表达机制。结果:与正常组比较,模型组大鼠体质量减少,血糖、尿微量白蛋白与尿肌酐比值(UACR)、尿素氮(BUN)、胱抑素-C(Cys-C)、β_(2)-微球蛋白(β_(2)-MG)、白细胞介素-6(IL-6)、甘油三酯(TG)及总胆固醇(TC)均显著增高,总超氧化物歧化酶(T-SOD)显著降低(P<0.01);与模型组比较益肾化湿颗粒组大鼠各指标均有不同程度改善(P<0.05,P<0.01)。与正常组比较,模型组大鼠肾脏系膜基质增生、纤维组织增生及小管空泡变性;与模型组比较,益肾化湿颗粒组大鼠肾脏病理组织得到一定程度改善。共鉴定出益肾化湿颗粒作用靶代谢物14个及靶mRNA 96个,靶代谢物主要富集于鞘脂代谢、甘油磷脂代谢、苯丙氨酸、酪氨酸和色氨酸的生物合成等20条代谢通路;靶mRNA经富集得到与糖脂代谢密切相关的前20条通路中共涉及21个差异mRNA;血清差异代谢物与肾脏差异mRNA共同富集到甘油磷脂代谢、花生四烯酸代谢、嘌呤代谢、初级胆汁酸生物合成、抗坏血酸和醛酸代谢、半乳糖代谢等6条通路,其中共涉及磷脂酰乙醇胺(PE)等7个差异代谢物及腺苷酸环化酶3(ADCY3)等7个差异mRNA。经受试者工作特征(ROC)曲线验证,7个差异代谢物有较高的预测准确性,Real-time PCR及Western blot验证结果与测序结果高度一致。结论:益肾化湿颗粒能够改善DKD大鼠UACR、BUN等生化指标,纠正糖脂代谢紊乱,改善肾功能,其作用机制可能与调节PE等血清代谢物的水平及肾脏细胞质磷酸酶1(Phospho1)等mRNA的表达有关,其中甘油磷脂代谢等6条通路可能发挥重要作用。

关键词：益肾化湿颗粒糖尿病肾病超高效液相色谱-串联质谱法(UHPLC-MS/MS) 代谢组学转录组学甘油磷脂代谢信使核糖核酸(mRNA)

基于NLRP3炎症小体介导的巨噬细胞焦亡探究黄芩-黄连对动脉粥样硬化的干预机制

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中国实验方剂学杂志 2024年第7期30卷 121-130页

作者：纪凌云吴俏兰陈泽涛葛春蕾陈维达宋婷山东中医药大学济南250014 山东中医药大学附属医院济南250011 临沂市中医医院山东临沂276600

目的:探究黄芩-黄连(SRCR)对动脉粥样硬化(AS)小鼠的治疗作用及通过NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)炎症小体对斑块内巨噬细胞焦亡的影响。方法:载脂蛋白敲除(Apo E^(-/-))小鼠通过高脂饲料喂养构建AS模型,随机分为模型组、立普... 详细信息

目的:探究黄芩-黄连(SRCR)对动脉粥样硬化(AS)小鼠的治疗作用及通过NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)炎症小体对斑块内巨噬细胞焦亡的影响。方法:载脂蛋白敲除(Apo E^(-/-))小鼠通过高脂饲料喂养构建AS模型,随机分为模型组、立普妥组(5 mg·kg^(-1))、SRCR低、中、高剂量组(1.95、3.9、7.8 g·kg^(-1)),正常C57BL/6J小鼠作为正常组。给药8周后,苏木素-伊红(HE)染色观察主动脉斑块病理情况;油红O染色观察主动脉斑块中脂质含量;检测小鼠血清中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平;免疫荧光双染检测小鼠主动脉根部斑块组织中小鼠含生长因子样模体黏液样激素样受体(EMR1/F4/80)/NLRP3与F4/80/gasdermin D(GSDMD)共定位表达情况;酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清白细胞介素-1β(IL-1β)和白细胞介素-18(IL-18)水平;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、胱天蛋白酶-1(Caspase-1)、剪切(cleaved) Caspase-1、GSDMD、GSDMD蛋白N端(GSDMD-NT)、IL-1β前体(pro IL-1β)、IL-1β、IL-18蛋白表达水平;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测NLRP3、ASC、Caspase-1、GSDMD、IL-1β、IL-18 mRNA表达水平。结果:与正常组比较,模型组出现明显斑块,小鼠血清TG、TC、LDL-C、IL-1β及IL-18水平显著升高(P<0.01),HDL-C水平显著降低(P<0.01),主动脉组织中NLRP3炎症小体及焦亡相关分子表达显著升高(P<0.01);与模型组比较,SRCR各剂量组尤其是中、高剂量组,显著改善AS小鼠斑块病理情况,减少斑块脂质含量(P<0.05,P<0.01),有效改善小鼠血脂水平(P<0.05),减少主动脉根部斑块中巨噬细胞的募集(P<0.01)、NLRP3炎症小体的激活及焦亡(P<0.05),降低血清中IL-1β、IL-18的水平(P<0.01),降低主动脉组织中NLRP3、ASC、Caspase-1、cleaved Caspase-1、GSDMD、GSDMD-NT、pro IL-1β、IL-1β及IL-18的蛋白表达(P<0.05),降低主动脉组织中NLRP3、ASC、Caspase-1、GSDMD、IL-1β及IL-18的mRNA表达水平(P<0.05)。结论:SRCR对高脂饲料喂养诱导的AS小鼠具有治疗作用,其机制与抑制NLRP3炎症小体的激活,降低斑块内巨噬细胞焦亡水平有关。

关键词：黄芩-黄连动脉粥样硬化 NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)炎症小体巨噬细胞细胞焦亡作用机制

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平肝肃肺汤对儿童变异性哮喘疗效的影响

山西中医 2022年第3期38卷 23-25页

作者：郭米兰张慧敏山东中医药大学济南250014 山东中医药大学附属济南市中医医院

目的:观察平肝肃肺汤联合布地奈德雾化吸入治疗儿童变异性哮喘的疗效及对外周血细胞间黏附分子-1 (ICAM-1)、嗜酸性粒细胞(EOS)水平的影响。方法:选取变异性哮喘患儿94例,依照随机数表法分为两组。对照组予布地奈德雾化吸入治疗,治疗组... 详细信息

目的:观察平肝肃肺汤联合布地奈德雾化吸入治疗儿童变异性哮喘的疗效及对外周血细胞间黏附分子-1 (ICAM-1)、嗜酸性粒细胞(EOS)水平的影响。方法:选取变异性哮喘患儿94例,依照随机数表法分为两组。对照组予布地奈德雾化吸入治疗,治疗组在对照组治疗基础上另予平肝肃肺汤治疗。比较两组患儿中医症状评分、临床疗效、1s用力呼气容积(FEV1)、最大呼气中段流速(MMEF)、外周血EOS、ICAM-1水平及不良反应。结果:治疗后两组中医症状评分均降低(P﹤0.05),且治疗组更低(P﹤0.05);治疗组的总有效率93.62%高于对照组78.72%(P﹤0.05);两组FEV1、MMEF水平均升高,且治疗组更高(P﹤0.05);两组外周血EOS、ICAM-1水平均降低,且治疗组更低(P﹤0.05);两组不良反应发生率比较,差异无统计学意义(P﹥0.05)。结论:平肝肃肺汤联合布地奈德雾化吸入治疗儿童变异性哮喘能够改善患者临床症状及肺功能,疗效确切。

关键词：变异性哮喘儿童平肝肃肺汤布地奈德中西医结合疗法

半夏白术天麻汤下调ApoE^(-/-)小鼠TMAO代谢的作用研究

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中西医结合心脑血管病杂志 2023年第18期21卷 3336-3341页

作者：李继军荣雅琪孟宪卿姜月华济南市中医医院济南250012 山东中医药大学附属医院济南250012

目的:通过靶向超高效液相色谱-电喷雾串联质谱法(UPLC-ESI-MS/MS)检测半夏白术天麻汤对载脂蛋白E基因敲除(ApoE^(-/-))小鼠血浆氧化三甲胺(TMAO)相关代谢物及TMAO代谢途径的影响,探讨半夏白术天麻汤改善动脉硬化的药理作用机制。方法:... 详细信息

目的:通过靶向超高效液相色谱-电喷雾串联质谱法(UPLC-ESI-MS/MS)检测半夏白术天麻汤对载脂蛋白E基因敲除(ApoE^(-/-))小鼠血浆氧化三甲胺(TMAO)相关代谢物及TMAO代谢途径的影响,探讨半夏白术天麻汤改善动脉硬化的药理作用机制。方法:选取雄性ApoE^(-/-)小鼠36只,高脂高胆固醇饮食12周后,随机分为半夏白术天麻汤组[17.8 g/(kg·d)]、瑞舒伐他汀钙组[0.08 mg/(kg·d)]和ApoE^(-/-)模型组,灌胃8周,以C57BL/6J小鼠作为C57正常对照组(12只)。UPLC-ESI-MS/MS定量检测小鼠血浆TMAO及相关代谢物水平,苏木精-伊红(HE)染色观察主动脉形态,免疫组化观察CD 36、NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)的分布,酶联免疫吸附法(ELISA)测定血浆白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-18(IL-18)含量。结果:半夏白术天麻汤可降低ApoE^(-/-)小鼠血浆左旋肉碱、甜菜碱、肌酐、三甲胺、TMAO水平(P<0.05或P<0.01),改善血管形态、减少脂质空泡和胶原沉积在血管组织中,并减少CD 36、NLRP3在主动脉的分布(P<0.01),降低血浆IL-1β、IL-18含量(P<0.01)。结论:半夏白术天麻汤可减轻ApoE^(-/-)小鼠动脉粥样硬化,其作用与降低血浆TMAO相关代谢物及TMAO代谢途径相关。

关键词：动脉粥样硬化半夏白术天麻汤氧化三甲胺载脂蛋白E基因敲除实验研究

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崔文成治疗抽动障碍经验

湖南中医杂志 2023年第10期39卷 57-59页

作者：张珊珊崔文成山东中医药大学山东济南250355 山东中医药大学附属济南市中医医院山东济南250012

介绍崔文成教授治疗抽动障碍(TD)的经验。崔教授认为,本病病位主要在心,与肝密切相关,病因为饮食不节与情志失调。基本病机为肝郁化火、热极生风、阴虚风动,临床注重审因辨证,以消除抽动病因为主,采用疏肝清火、平肝潜阳、滋阴柔肝之法... 详细信息

介绍崔文成教授治疗抽动障碍(TD)的经验。崔教授认为,本病病位主要在心,与肝密切相关,病因为饮食不节与情志失调。基本病机为肝郁化火、热极生风、阴虚风动,临床注重审因辨证,以消除抽动病因为主,采用疏肝清火、平肝潜阳、滋阴柔肝之法,分别以龙胆泻肝汤、羚角钩藤汤、一贯煎合杞菊地黄丸治之,并配合情志调畅,以减少患儿紧张情绪,标本兼治,临床疗效较佳。并附验案1则,以资佐证。

关键词：抽动障碍辨证论治名医经验崔文成

隔木蝴蝶灸治疗寒湿痹阻型膝关节骨关节炎49例

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中国针灸 2022年第11期42卷 1233-1234页

作者：熊珍李艳梅万红棉陈汪俊程连顺王宇艾悦赵晴宋沂晓山东中医药大学济南250014 山东省中医药研究院中医全科济南250014 济南市中医医院

笔者采用隔木蝴蝶灸治疗49例寒湿痹阻型膝关节骨关节炎(KOA)患者,现报道如下。1临床资料49例患者均来自2020年12月至2021年6月山东省中医药研究院附属医院中医全科门诊、济南市中医医院针灸一科门诊及特色灸疗门诊,符合《骨关节炎诊疗指... 详细信息

笔者采用隔木蝴蝶灸治疗49例寒湿痹阻型膝关节骨关节炎(KOA)患者,现报道如下。1临床资料49例患者均来自2020年12月至2021年6月山东省中医药研究院附属医院中医全科门诊、济南市中医医院针灸一科门诊及特色灸疗门诊,符合《骨关节炎诊疗指南(2018年版)》中膝关节骨关节炎的诊断标准和《膝骨关节炎中医诊疗专家共识(2015年版)》中寒湿痹阻型的辨证标准,年龄40~72(57±8)岁;病程最短3个月,最长8年,平均(4.3±2.1)年。

关键词：膝关节骨关节炎寒湿痹阻型隔木蝴蝶灸针药结合

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蒲公英研究进展及质量标志物预测分析

山东中医杂志 2023年第7期42卷 773-780页

作者：孙绍欣王信林丽李健山东中医药大学山东济南250355 山东中医药大学附属医院山东济南250014 济南市中医医院山东济南250012

通过对蒲公英化学成分、药理作用及质量控制研究现状进行综述,发现蒲公英含有黄酮类、酚酸类、萜类等多种有效成分,具有抗炎、抑菌、抗氧化、抗肿瘤等药理作用,在药品和食品应用领域具有广阔的开发利用前景。基于中药质量标志物概念,从... 详细信息

通过对蒲公英化学成分、药理作用及质量控制研究现状进行综述,发现蒲公英含有黄酮类、酚酸类、萜类等多种有效成分,具有抗炎、抑菌、抗氧化、抗肿瘤等药理作用,在药品和食品应用领域具有广阔的开发利用前景。基于中药质量标志物概念,从成分特有性、传统功效、成分有效性、成分可测性和药动学等几个方面对蒲公英质量标志物进行预测分析,认为单咖啡酰酒石酸、绿原酸、咖啡酸、菊苣酸、木犀草素、木犀草苷可作为蒲公英药材的质量标志物。参考文献71篇。

关键词：蒲公英化学成分药理作用质量标志物研究进展