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中医药干预铁死亡治疗炎症性肠病的研究进展

中国实验方剂学杂志 2024年第11期30卷 245-254页

作者：商铭溶赵亚男张旭阳崔惠方赵义静刘明赵德杰山东中医药大学济南250014 山东中医药大学附属医院济南250014

炎症性肠病(IBD)主要包括溃疡性结肠炎(UC)和克罗恩病(CD),是一种常见的消化道慢性炎症性疾病,发病率逐年攀升,因其治疗周期长,治疗难度大,迁延难愈,费用高昂,备受全球关注。探索安全有效持久的治疗方案已成为全球亟待解决的问题。IBD... 详细信息

炎症性肠病(IBD)主要包括溃疡性结肠炎(UC)和克罗恩病(CD),是一种常见的消化道慢性炎症性疾病,发病率逐年攀升,因其治疗周期长,治疗难度大,迁延难愈,费用高昂,备受全球关注。探索安全有效持久的治疗方案已成为全球亟待解决的问题。IBD病机复杂,包括肠黏膜损伤、内环境紊乱、炎症反应等,近年研究发现铁死亡也是IBD的重要致病因素之一。铁死亡作为一种新的非凋亡性细胞死亡方式,主要特点表现为铁依赖性、脂质过氧化和氧化还原系统失衡,有研究表明,抑制肠上皮细胞铁死亡可以起到肠黏膜保护作用,靶向干预铁死亡或许是治疗IBD的新方向。IBD以药物治疗为主,包括皮质类固醇、氨基水杨酸盐、生物制剂和免疫调节剂等,但是易耐药、不良反应较多,而中医药具有价格低廉、耐药性低、不良反应少等独特的优势,在治疗IBD方面积累了丰富的经验。有学者证实中医药可以抑制铁死亡的发生,最新研究表明中医药一方面可以抑制肠道细胞铁依赖性脂质过氧化,另一方面可以提高肠道黏膜抗氧化、抗炎能力,从而起到治疗IBD的作用,越来越多的研究表明中医药或许通过干预铁死亡治疗IBD。该文通过探讨中医药干预铁死与中医药治疗炎症性肠病的相关性,讨论铁死亡在IBD中的可能作用机制,以期为IBD的诊疗提供依据。

关键词：炎症性肠病溃疡性结肠炎克罗恩病铁死亡中医药研究进展

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激活α7nAchR促进肥胖小鼠的脂肪稳态和米色脂肪生成及产热作用

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南方医科大学学报 2024年第3期44卷 499-506页

作者：包汉生王苏童吕穆杰王永成姜萍李晓山东中医药大学山东济南250355 山东中医药大学附属医院山东济南250014

目的观察肥胖小鼠脂肪组织形态学改变以及脂代谢、炎症等相关指标的异常表现,探索激活α7烟碱型乙酰胆碱受体(α7 nAchR)促进肥胖机体白色脂肪米色化产热的作用机制。方法取诱导成肥胖小鼠40只和10只低脂进食小鼠,分为空白组、高脂组、... 详细信息

目的观察肥胖小鼠脂肪组织形态学改变以及脂代谢、炎症等相关指标的异常表现,探索激活α7烟碱型乙酰胆碱受体(α7 nAchR)促进肥胖机体白色脂肪米色化产热的作用机制。方法取诱导成肥胖小鼠40只和10只低脂进食小鼠,分为空白组、高脂组、模型组、激动剂组、抑制剂组(10只/组)。苏木素-伊红(HE)染色观察小鼠附睾白色脂肪组织,评估细胞数量、大小及形态。ELISA检测白色脂肪组织肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素-1(IL1β)、白细胞介素10(IL10)、转化生长因子-β(TGF-β)表达水平。qRT-PCR检测白色脂肪一氧化氮合酶(iNOS)、精氨酸酶1(Arg1)mRNA。PCR检测解偶联蛋白(UCP-1)、PR结构域蛋白16(PRDM-16)、线粒体生成的关键调节因子(PGC-1α)mRNA水平。Western blot检测白色脂肪核转录因子P65(NF-κB P65)、磷酸化蛋白酪氨基酸激酶2(p-JAK2)、磷酸化传导及转录激活因子3(p-STAT3)表达水平。结果与空白组比较,高脂组体质量明显增加(P<0.01),白色脂肪组织中出现较多脂肪空泡,脂滴明显增大,iNOS mRNA及TNF-α、IL-1β水平升高(P<0.01),而Arg-1 mRNA及IL-10、TGF-β水平降低(P<0.01);而与模型组相比,药物干预的3组体质量均有所减轻(P<0.05),白色脂肪中脂滴缩小。激动剂组白色脂肪中PRDM-16、PGC-1α、UCP-1 mRNA下降最为明显。而激动剂组TNF-α、IL-1β水平降低(P<0.05,P<0.01),IL-10、TGF-β水平升高(P<0.01),M1/M2巨噬细胞比值降低。结论激活α7 nAchR后可以改善应用β3受体激动剂产生的白色脂肪组织稳态受损,促进白色脂肪中M1型巨噬细胞向M2型巨噬细胞转化减轻白色脂肪炎症反应,促进白色脂肪组织米色化,提高米色化产热效能。

关键词：肥胖白色脂肪组织 α7 nAchR 产热炎症反应

基于PI3K/Akt/HIF-1α通路探讨桂枝茯苓胶囊-散结镇痛胶囊-宫血宁胶囊联用抑制子宫腺肌病进展的作用机制

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中草药 2024年第3期55卷 842-852页

作者：王楚矗王信于敏敏王哲曹涵师伟刘志勇山东中医药大学山东济南250355 山东中医药大学附属医院山东济南250014

目的探究桂枝茯苓胶囊-散结镇痛胶囊-宫血宁胶囊联用(GSG)方案对人子宫腺肌病异位内膜衍生细胞(adenomyosis derived cells,AMDC)异常增殖的抑制作用,评价对子宫腺肌病(adenomyosis,AM)模型小鼠的改善效果,并探讨相关分子机制。方法提取... 详细信息

目的探究桂枝茯苓胶囊-散结镇痛胶囊-宫血宁胶囊联用(GSG)方案对人子宫腺肌病异位内膜衍生细胞(adenomyosis derived cells,AMDC)异常增殖的抑制作用,评价对子宫腺肌病(adenomyosis,AM)模型小鼠的改善效果,并探讨相关分子机制。方法提取AMDC原代细胞并培养,采用CCK-8法检测GSG对AMDC活力的影响;采用克隆形成实验、EdU增殖检测实验确定GSG对AMDC克隆形成和增殖能力的影响。新生ICR小鼠滴喂他莫昔芬制备AM模型,分为对照组、模型组、复方米非司酮(3.25 mg/kg)组和GSG低、中、高剂量(0.635、1.270、2.539 g/kg)组,给药干预后,采用苏木素-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色观察小鼠子宫、肝、脾和肾的形态学改变;免疫组化法检测子宫组织中磷酸化磷脂酰肌醇3-激酶(phosphorylated phosphatidylinositol 3-kinase,p-PI3K)、磷酸化蛋白激酶B(phosphorylated protein kinase B,p-Akt)和缺氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)的表达;检测血清中丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)活性和血尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)水平。结果GSG能有效抑制AMDC活力和克隆形成能力,并呈剂量相关性地抑制AMDC增殖能力(P<0.001)。子宫HE染色结果显示,模型组子宫内膜与肌层边界模糊,多处腺体深度侵入子宫肌层;GSG低剂量组边界欠清晰,有腺体侵入子宫肌层,浸润深度减轻,数量减少;复方米非司酮组和GSG中剂量组边界较清晰,偶见腺体侵入肌层;GSG高剂量组边界清晰,少见明显腺体侵入肌层。免疫组化结果表明,与对照组比较,模型组子宫组织p-PI3K、p-Akt和HIF-1α表达显著增加(P<0.01、0.001);与模型组比较,各给药组p-PI3K、p-Akt的表达显著降低(P<0.01、0.001),复方米非司酮组和GSG中、高剂量组HIF-1α的表达显著降低(P<0.05、0.01)。各组肝、脾和肾形态学均未见明显改变,血清ALT活性和BUN水平无显著性差异。结论GSG方案在体内实验中可通过抑制PI3K/Akt/HIF-1α通路阻断AM进展,所选GSG剂量在动物体内未见明显不良反应,是潜在的AM治疗方案。

关键词：桂枝茯苓胶囊-散结镇痛胶囊-宫血宁胶囊联用子宫腺肌病子宫腺肌病异位内膜衍生细胞增殖小鼠模型磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B/缺氧诱导因子-1α通路

再生障碍性贫血患者外周血全外显子组高通量基因测序分析

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中国病理生理杂志 2024年第4期40卷 729-734页

作者：王金鑫李昌年王腾魏文健史镜铂王琰徐瑞荣崔思远山东中医药大学附属医院山东济南250014 山东中医药大学山东济南250355

目的:对再生障碍性贫血(再障)患者进行外周血全外显子测序,观察基因突变的类型及突变率以探讨再障的发病机制。方法:采集19例再障患者的外周血并提取单个核细胞进行全外显子测序,对所得基因进行GO和KEGG富集分析。数据采用SPSS 22.0进... 详细信息

目的:对再生障碍性贫血(再障)患者进行外周血全外显子测序,观察基因突变的类型及突变率以探讨再障的发病机制。方法:采集19例再障患者的外周血并提取单个核细胞进行全外显子测序,对所得基因进行GO和KEGG富集分析。数据采用SPSS 22.0进行统计分析,以P<0.05为存在显著差异。结果:测得19例再障患者共有2006个基因突变,参照GeneCards及OMIM数据库及患者测序结果筛选出49个基因,绘制患者基因突变图谱,发现MUC5B基因可能与再障发病相关,其突变率达100%,其余基因如ERCC6、SYNE1和WFS1等突变率均超过40%,亦可能参与再障的形成。在GO分析中其主要与细胞运动、细胞骨架及组成、蛋白结合等功能相关。KEGG通路分析中,主要是在Hippo通路、ECM-受体相互作用通路等地方富集。结论:MUC5B基因可能是造成T细胞比例失调,进而导致再障的关键基因。此外,Hippo通路可能通过调节T细胞比例、端粒酶活性等参与再障的发病机制。

关键词：再生障碍性贫血外显子测序基因突变 Hippo信号通路

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脉络舒通丸对精索静脉曲张模型大鼠线粒体介导内源性细胞凋亡的影响

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中草药 2024年第2期55卷 499-508页

作者：贾志超李啸林吕东方杨恩华巩文娇高兆旺仲崇副山东中医药大学山东济南250014 山东中医药大学附属医院男科山东济南250014

目的探讨脉络舒通丸对精索静脉曲张模型大鼠线粒体介导的内源性细胞凋亡的影响。方法 36只雄性SD大鼠随机分为空白组、假手术组、模型组和脉络舒通丸低、中、高剂量(0.162、0.324、0.648 g/kg)组,精索静脉曲张模型制备成功7 d后,连续i... 详细信息

目的探讨脉络舒通丸对精索静脉曲张模型大鼠线粒体介导的内源性细胞凋亡的影响。方法 36只雄性SD大鼠随机分为空白组、假手术组、模型组和脉络舒通丸低、中、高剂量(0.162、0.324、0.648 g/kg)组,精索静脉曲张模型制备成功7 d后,连续ig给药4周。苏木素-伊红(HE)染色法检测各组大鼠睾丸及附睾组织病理变化;透射电镜观察各组大鼠生精细胞线粒体超微结构;免疫荧光检测各组大鼠睾丸组织中线粒体动力相关蛋白1(dynamin-related protein 1,Drp1)、B淋巴细胞瘤-2相关X蛋白(B-cell lymphoma-2 associated X protein,Bax)和细胞色素C氧化酶IV(cytochrome C oxidaseⅣ,COXⅣ)的表达;免疫组化检测各组大鼠睾丸组织中半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-9(cystein-asparate protease-9,Caspase-9)和Caspase-3的表达。结果假手术组与空白组大鼠睾丸及附睾组织病理染色结果相似,睾丸及附睾组织结构完整;与假手术组比较,模型组大鼠睾丸及附睾组织出现明显的病理性损伤;药物治疗后大鼠睾丸及附睾的病理性损伤得到不同程度的改善。假手术组与空白组大鼠睾丸线粒体形态结构相似,均可见大量线粒体广泛分布;与假手术组比较,模型组睾丸组织线粒体结构遭到严重破坏;药物治疗后线粒体仍可见不同程度的损伤,但较模型组明显改善。免疫荧光结果显示,Drp1与Bax在假手术组与空白组中荧光表达微弱,模型组较假手术组二者的荧光表达水平显著升高;Drp1与Bax在各治疗组的荧光表达趋势相似,经药物治疗后二者的荧光强度较模型组均降低。免疫组化结果显示,Caspase-9与Caspase-3在细胞间质及生精小管管壁周围分别呈褐色及棕色表达;假手术组与空白组二者均零星分布;与假手术组比较,模型组Caspase-9、Caspase-3表达增加(P<0.01);与模型组比较,各治疗组中Caspase-9、Caspase-3的表达水平明显降低(P<0.05、0.01)。结论精索静脉曲张模型大鼠睾丸及附睾组织结构损伤明显,线粒体结构遭到明显破坏,睾丸中Drp1、Bax、Caspase-9及Caspase-3表达显著升高。脉络舒通丸可能是通过对睾丸中线粒体结构的保护作用,抑制生精细胞中Caspase级联反应,从而调控线粒体介导的内源性细胞凋亡。

关键词：脉络舒通丸精索静脉曲张生精功能细胞凋亡线粒体

黄芪-白花蛇舌草调控Sp1-miR-582-3p-p27轴抑制肺腺癌增殖分子机制

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中国实验方剂学杂志 2024年

作者：孙海鹏许露凡刘学刘思远山东中医药大学附属医院山东中医药大学

目的：从细胞水平探讨特异性蛋白1（Sp1）-MicroRNA-582-3p（miR-582-3p）-细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂（p27）轴过度激活对A549肺腺癌细胞周期、增殖影响，以研究黄芪-白花蛇舌草可能调控该轴抑制A549增殖的相关机制。方法：采用慢... 详细信息

目的：从细胞水平探讨特异性蛋白1（Sp1）-MicroRNA-582-3p（miR-582-3p）-细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂（p27）轴过度激活对A549肺腺癌细胞周期、增殖影响，以研究黄芪-白花蛇舌草可能调控该轴抑制A549增殖的相关机制。方法：采用慢病毒质粒转染技术，获得shRNA-Sp1+LV-miR-582-3p mimic、shRNA-Sp1+LV-mNC、shRNA-NC+LV-miR-582-3p mimic、shRNA-NC+LV-mNC的A549四组稳转株。Real-time PCR检测Sp1对A549肺腺癌细胞miR-582-3p表达影响；活性检测-8（CCK-8）、平板克隆形成实验检测Sp1通过miR-582-3p对A549肺腺癌细胞增殖影响；流式细胞术检测Sp1通过miR-582-3p对A549肺腺癌细胞周期影响；蛋白免疫印迹法（Western blot）检测Sp1通过miR-582-3p对A549肺腺癌细胞周期蛋白的影响。CCK-8检测不同浓度（5%、10%、20%、40%、80%）黄芪-白花蛇舌草含药血清对A549细胞活力影响，并筛选出最佳浓度用于后续机制探究。上述转染技术构建oe-Sp1稳转株及对照株oe-NC，RT-PCR检测黄芪-白花蛇舌草对A549肺腺癌细胞miR-582-3p表达影响；WB检测黄芪-白花蛇舌草对A549肺腺癌细胞Sp1、细胞周期依赖性激酶特异性抑制蛋白p27表达影响。结果：与shRNA-NC+LV-mNC组比较，shRNA-Sp1+LV-mNC组miR-582-3p表达明显降低（P＜0.01）；与shRNA-Sp1+LV-mNC组对比，shRNA-Sp1+LV-miR-582-3p mimic组显著逆转miR-582-3p表达（P＜0.01），提示，Sp1对miR-582-3p具有明显调控作用。与shRNA-Sp1+LV-mNC组对比，shRNA-Sp1+LV-miR-582-3p mimic组显著逆转细胞增殖（P＜0.01），提示，miR-582-3p可部分逆转Sp1对A549肺腺癌增殖作用；与shRNA-Sp1+LV-mNC组比较，shRNA-Sp1+LV-miR-582-3p mimic组G0/G1期、S期比例显著升高，G2/M期比例明显降低（P＜0.01），提示，miR-582-3p可部分逆转Sp1对A549细胞周期影响；与shRNA-Sp1+LV-mNC组对比，shRNA-Sp1+LV-miR-582-3p mimic组显著逆转各蛋白水平，即p27的下降与细胞周期蛋白D1（Cyclin D1）、细胞周期蛋白依赖激酶4（CDK4）、细胞周期蛋白E（Cyclin E）、细胞周期蛋白依赖激酶2（CDK2）、磷酸化视网膜母细胞瘤蛋白（p-Rb）、E2F转录因子3（E2F3）的上调（P＜0.01），提示，miR-582-3p可部分逆转Sp1对A549肺腺癌细胞周期影响。与空白组比较，黄芪-白花蛇舌草含药血清明显抑制A549细胞活力，且呈浓度依赖性，故选用10%黄芪-白花蛇舌草血清干预24h进行后续机制实验。发现，与黄芪-白花蛇舌草＋oe-Vector组对比，黄芪-白花蛇舌草＋oe-Sp1组显著逆转Sp1、miR-582-3p的下调与p27的上调（P＜0.01），提示，Sp1可部分逆转黄芪-白花蛇舌草对A549肺腺癌miR-582-3p、p27水平。结论：Sp1-miR-582-3p-p27轴过度激活显著促进A549肺腺癌细胞增殖，且黄芪-白花蛇舌草对A549肺腺癌细胞增殖的抑制作用，潜在机制可能与其抑制Sp1-miR-582-3p-p27轴过度兴奋有关。

关键词：黄芪-白花蛇舌草 Sp1-miR-582-3p-p27轴 A549肺腺癌细胞周期增殖

基于“虚气留滞”理论探讨泛血管疾病的发病机制

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北京中医药大学学报 2024年第7期47卷 983-988页

作者：张思祥刘政赵友民李雨函李奕萱王颖蕊张沁雨山东中医药大学济南250013 山东中医药大学附属医院

泛血管医学是一门以动脉粥样硬化疾病为重点、以多学科整合为理念的新兴学科,强调从机体结构和功能的整体出发去探索疾病的发生发展机制。目前,泛血管疾病基本病机体系尚待完善。泛血管理念与中医学注重整体观的思想高度契合。诸气虚损... 详细信息

泛血管医学是一门以动脉粥样硬化疾病为重点、以多学科整合为理念的新兴学科,强调从机体结构和功能的整体出发去探索疾病的发生发展机制。目前,泛血管疾病基本病机体系尚待完善。泛血管理念与中医学注重整体观的思想高度契合。诸气虚损为泛血管疾病的发病之本,痰浊、血瘀、水湿等有形之邪留滞脉络为发病之标,故其病机可高度概括为“虚气留滞”,因虚而滞,阻滞脉络,因滞虚甚,损及脉道,故发为病。本文基于“虚气留滞”理论,以泛血管疾病内皮细胞功能失调为切入点,认为内皮细胞免疫功能低下为泛血管疾病的始动因素,微炎症状态广泛持续存在为泛血管疾病的病机关键。

关键词：泛血管疾病虚气留滞内皮细胞免疫功能微炎症状态

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中药调节糖尿病心肌病患者肠道菌群失调机制研究进展

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中草药 2024年第8期55卷 2792-2799页

作者：程安然崔德芝山东中医药大学第一临床医学院山东济南250014 山东中医药大学附属医院山东济南250014

糖尿病心肌病(diabetic cardiomyopathy,DCM)作为糖尿病患者最常见的并发症之一,是全球范围内造成糖尿病患者死亡的主要原因,其发病机制复杂且死亡率逐年上升。大量研究表明,肠道菌群及其代谢产物与DCM的发生发展密切相关,有望成为治疗... 详细信息

糖尿病心肌病(diabetic cardiomyopathy,DCM)作为糖尿病患者最常见的并发症之一,是全球范围内造成糖尿病患者死亡的主要原因,其发病机制复杂且死亡率逐年上升。大量研究表明,肠道菌群及其代谢产物与DCM的发生发展密切相关,有望成为治疗DCM的潜在靶点。基于中药多成分、多靶点、多通路调控疾病的特点,目前已证实其在改善DCM患者预后及生存质量方面显示出独特优势。故通过总结以肠道菌群为靶点的中药治疗DCM的机制与优势,为DCM的基础研究、临床应用及新药研发提供新思路。

关键词：肠道菌群糖尿病心肌病代谢产物心肌细胞能量代谢障碍炎症反应小檗碱白藜芦醇黄芪多糖

站桩气功对轻中度帕金森病患者上肢静止性震颤、运动功能和生活质量的影响

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中国康复医学杂志 2024年第8期39卷 1212-1214页

作者：张林林曲欣洁王青姜晓煜毕鸿雁山东中医药大学山东省济南市250355 山东中医药大学附属医院

帕金森病(Parkinson's disease,PD)是一种以黑质多巴胺能神经元变性死亡为主要病理特征的常见的中老年神经系统退行性疾病^([1])。静止性震颤是帕金森病主要的运动症状之一,常规的药物治疗只能减轻症状,并不能阻止疾病的进展^([2])。近... 详细信息

帕金森病(Parkinson's disease,PD)是一种以黑质多巴胺能神经元变性死亡为主要病理特征的常见的中老年神经系统退行性疾病^([1])。静止性震颤是帕金森病主要的运动症状之一,常规的药物治疗只能减轻症状,并不能阻止疾病的进展^([2])。近年来,运动疗法对帕金森病症状的改善受到了关注。多项研究表明^([3]),有氧运动训练和抗阻运动训练对包括震颤、平衡和步态异常在内的帕金森病运动症状的缓解有益。中国传统的气功疗法中^([4—5]),太极拳、五禽戏和八段锦等也被认为可增强帕金森病患者的平衡能力,矫正异常步态,但目前尚没有传统功法对帕金森震颤的研究。

关键词：静止性震颤运动症状帕金森病患者步态异常运动疗法八段锦抗阻运动五禽戏