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姬松茸blazeispirol类成分的结构、活性及生物合成研究进展

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中国中药杂志 2024年第5期49卷 1144-1153页

作者：丁婵彭思源孟俊华厉晓龚婕李云耀崔培梧湖南中医药大学药学院湖南长沙410208 国家中医药管理局中药药性与药效三级科研实验室湖南长沙410208 湖南中医药大学菌物药研究室湖南长沙410208 湖南中医药大学湘杏学院湖南岳阳414615

姬松茸是一种珍稀药食两用真菌,肉脆味美,其子实体与菌丝体均富含多糖、甾醇、萜类、多肽、脂质、多酚等活性成分,具有较强的抗肿瘤、降血脂、降血糖、免疫调节、优化肠道菌群、抗氧化等药理活性,是一种极具食用、药用开发前景的真菌资... 详细信息

姬松茸是一种珍稀药食两用真菌,肉脆味美,其子实体与菌丝体均富含多糖、甾醇、萜类、多肽、脂质、多酚等活性成分,具有较强的抗肿瘤、降血脂、降血糖、免疫调节、优化肠道菌群、抗氧化等药理活性,是一种极具食用、药用开发前景的真菌资源。在已报道的姬松茸化学成分中,blazeispirols为姬松茸特有的一系列具有螺环结构且有别于经典甾体的甾醇化合物,是从姬松茸菌丝体中发现的重要活性成分,具有显著的保肝活性,可作为姬松茸菌株专属的系统发育和化学分类学标志,也被视为优秀的成药性先导化合物分子。依据骨架结构特征,可将目前已发现的17个blazeispirol类化合物分为blazeispirane和problazeispirane 2种类型。为进一步挖掘姬松茸特有blazeispirol类化合物资源,该文从姬松茸blazeispirol系列化合物的发现、分离、结构、生物活性和生物合成途径等角度进行了系统综述,同时以blazeispirol A为例总结了姬松茸发酵合成blazeispirol A的相关代谢调控策略,以期为blazeispirol系列化合物的高效合成与制备、相关药物及功能性食品的研发、姬松茸等食药真菌资源及其衍生产品的品质提升等相关研究提供参考。

关键词：姬松茸 blazeispirol 甾醇生物活性生物合成

过表达TLR2分子的B淋巴细胞系模型的建立

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生物学杂志 2024年

作者：徐菁何柳周芳婷潘勤陈姗罗靓湖北中医药大学药学院药物分析教研室武汉大学泰康医学院(基础医学院)人体解剖学与组织胚胎学系武汉市蔡甸区人民医院检验科

为构建稳定表达人源TLR2分子的B淋巴细胞系模型,将编码人TLR1、TLR2和TLR6的基因分别克隆到p CDH-CMV-MCS-EF1-GFP-puro慢病毒载体上,测序正确后经293T细胞包装成完整具备感染性的病毒颗粒,转染Nalm-6细胞（TLR2-）,嘌呤霉素筛选获得稳... 详细信息

为构建稳定表达人源TLR2分子的B淋巴细胞系模型,将编码人TLR1、TLR2和TLR6的基因分别克隆到p CDH-CMV-MCS-EF1-GFP-puro慢病毒载体上,测序正确后经293T细胞包装成完整具备感染性的病毒颗粒,转染Nalm-6细胞（TLR2-）,嘌呤霉素筛选获得稳定表达TLR2分子的Nalm-6细胞（TLR2+）。利用倒置荧光显微镜观察细胞状态和绿色荧光表达情况,通过蛋白质免疫印迹法（Western Blot）检测相关蛋白表达水平,采用CCK-8以及流式细胞术检测细胞存活率和细胞增殖水平。结果显示:倒置荧光显微镜下可见成功转染慢病毒的Nalm-6细胞表达绿色荧光和嘌呤霉素抗性。Western Blot检测到TLR2在Nalm-6细胞中成功表达,且TLR2信号的激活明显增强PI3K-AKT信号轴分子的磷酸化水平。CCK-8和流式细胞术发现TLR2活化可提升细胞存活率,促进细胞增殖。研究成功构建了过表达TLR2分子的B淋巴细胞系模型,并在此基础上验证TLR2活化不仅能够增强B细胞PI3K-AKT信号通路传导,还可促细胞增殖。此模型为进一步探究TLR2通路对B细胞抗感染免疫功能的影响奠定基础。

关键词： TLR2 重组表达 B淋巴细胞 PI3K-AKT信号通路细胞增殖

桂楼复方对子宫腺肌病异位内膜细胞迁移和侵袭的影响研究

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中国全科医学 2024年第24期27卷 3007-3014页

作者：张一诺王子璐石雅馨王信高新宇张全英喻梦蝶徐丽师伟山东中医药大学中医学院山东省济南市250355 山东中医药大学第一临床医学院山东省济南市250355 山东中医药大学附属医院药学部山东省济南市250011 山东中医药大学第二附属医院妇产科山东省济南市250011 山东中医药大学附属医院妇科山东省济南市250011

背景子宫腺肌病(AM)是妇科常见的疑难病,但其具体机制尚未明确。中医药治疗AM有一定优势,前期研究显示,桂楼复方宫内缓释系统可明显降低AM模型大鼠子宫内膜细胞增殖、侵袭能力。目的探讨桂楼复方对子宫腺肌病异位内膜细胞(AMDC)迁移、... 详细信息

背景子宫腺肌病(AM)是妇科常见的疑难病,但其具体机制尚未明确。中医药治疗AM有一定优势,前期研究显示,桂楼复方宫内缓释系统可明显降低AM模型大鼠子宫内膜细胞增殖、侵袭能力。目的探讨桂楼复方对子宫腺肌病异位内膜细胞(AMDC)迁移、侵袭的影响,并研究其对Rho/ROCK信号通路的影响。方法本研究于2021年10月—2023年4月在山东中医药大学附属医院实验中心完成。使用CCK-8法检测AMDC细胞活力并筛选最佳药物浓度。设置空白组,使用桂楼复方(50、100 mg/L)处理AMDC,划痕实验检测细胞迁移能力,Transwell实验检测细胞侵袭能力,免疫印迹法Western Blotting)/实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测RhoA、RhoB、RhoC、ROCK1、ROCK2在蛋白和mRNA水平的表达情况。Rescue实验中使用激动剂U-46619(1μmol/L)和桂楼复方(100 mg/L)处理AMDC,Western Blotting法检测RhoA、RhoB、RhoC、ROCK1、ROCK2的蛋白表达改变情况。结果与空白组比较,100 mg/L桂楼复方干预后AMDC细胞存活率未明显降低,差异无统计学意义(P>0.05),是不影响细胞活性的最佳药物浓度。选取50、100 mg/L桂楼复方进行后续实验。与空白组比较,桂楼复方50 mg/L、100 mg/L组AMDC迁移、侵袭能力受到抑制(P0.05)。结论桂楼复方可有效抑制AMDC的迁移、侵袭能力,不影响细胞活性的最佳药物浓度为100 mg/L,桂楼复方可下调RhoA、RhoC、ROCK1、ROCK2的蛋白及mRNA表达水平,并可逆转U-46619对RhoA、RhoC、ROCK1、ROCK2蛋白表达水平的上调作用,从而抑制AM病局部异位病灶的持续进展,其作用可能与调控Rho/ROCK通路密切相关。

关键词：子宫腺肌病桂楼复方子宫内膜子宫腺肌病异位内膜细胞迁移侵袭 Rho/ROCK信号通路

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哈蟆油抗衰老活力生物效价检测方法的研究

世界科学技术-中医药现代化 2024年第4期 1008-1016页

作者：贾纪元姜大成张震孙云龙济宁医学院药学院长春中医药大学药学院长春中医药大学高士贤全国名老中医药专家传承工作室

目的基于哈蟆油补肾益精的功效，建立以抗衰老活性为指标的哈蟆油生物效价检测方法，并以此评价不同产地哈蟆油的质量，为完善其质量标准提供参考。方法以MRC-5细胞为研究对象，H2O2作为急性衰老模型诱导药物，通过细胞活力、β-半乳... 详细信息

目的基于哈蟆油补肾益精的功效，建立以抗衰老活性为指标的哈蟆油生物效价检测方法，并以此评价不同产地哈蟆油的质量，为完善其质量标准提供参考。方法以MRC-5细胞为研究对象，H2O2作为急性衰老模型诱导药物，通过细胞活力、β-半乳糖苷酶染色率验证哈蟆油抗衰老作用。选择Vc作为参照物，CCK-8法作为哈蟆油生物效价测定方法，以相对增殖率为参数，计算供试品抗衰老效价。结果细胞活力检测中，与模型组相比，哈蟆油组能上调细胞活力，250.0μg·mL-1效果达到最佳，上调20.01%。经哈蟆油预处理的细胞中，SA-β-gal阳性细胞的比例降低17.70%。抗衰老效价测定结果显示，不同产地哈蟆油药材抗衰老活力效价范围为218.03-1152.04 U·mg-1，极差为934.01 U·mg-1。结论建立的哈蟆油生物效价检测方法可明显区分哈蟆油质量差异，为其质量评价和控制提供一定的参考。

关键词：哈蟆油质量标准生物效价抗衰老活性

基于网络药理学探讨复方苦参注射液治疗黑色素瘤的作用机制

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Journal of Chinese Pharmaceutical Sciences 2024年第5期33卷 448-457页

作者：崔旭阳姬中杰时潘扬魏晓岑马玉宁邢梦真山东中医药大学医学院山东济南250355 山东中医药大学针灸推拿学院山东济南250355 山东中医药大学药物研究院山东济南250355

本文通过网络药理学研究复方苦参注射液对防治黑色素瘤的作用机理。运用TCMSP数据库探索复方苦参注射液中苦参和土茯苓的活性成分,通过Pubchem和Swiss Target Prediction数据库检测苦参和土茯苓的药物靶点,经Gene Cards、OMIM、TTD和CT... 详细信息

本文通过网络药理学研究复方苦参注射液对防治黑色素瘤的作用机理。运用TCMSP数据库探索复方苦参注射液中苦参和土茯苓的活性成分,通过Pubchem和Swiss Target Prediction数据库检测苦参和土茯苓的药物靶点,经Gene Cards、OMIM、TTD和CTD数据库检索与黑色素瘤相关的疾病靶点,并运用Cytoscape3.9.1建立中药-成分-疾病-靶点网络,使用String与Cytoscape建立交集靶点蛋白的相互作用网络,经Cyto-Hubba插件根据MCC算法进行拓扑分析,筛选关键靶点。最后,使用Metascape数据库对相关靶点进行GO和KEGG分析。最终在复方苦参注射液中共筛选出60个活性成分,包括槲皮素、去甲果肉皮素、白军恩等;与黑色素肿瘤相关的靶点有916个,包括AKT1、EGFR、ESR1等。此外,复方苦参注射液的抗黑色素瘤功能包括对磷酸化效应的调节和影响氧化应激反应等生物学过程,并通过调节癌症通道、内分泌通路、Th17细胞分化通道等信息通路发挥抗肿瘤效果。本研究首次报道了复方苦参注射液治疗黑色素瘤疾病的潜在作用机制,为后续实验研究提供了思路与依据。

关键词：复方苦参注射液黑色素瘤网络药理学作用机制

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蓬莪术挥发油中治疗痛经的活性成分研究

中国中药杂志 2024年第7期49卷 1872-1881页

作者：米福新倪红彭成刘菲戴鸥周勤梅刘娟熊亮成都中医药大学药学院、西南特色中药资源国家重点实验室四川成都611137 成都中医药大学医学技术学院四川成都611137 成都中医药大学西南特色药材创新药物成分研究所四川成都611137 成都中医药大学中医药创新研究院四川成都611137

研究蓬莪术Curcuma phaeocaulis根茎挥发油中治疗痛经的活性成分,采用分子蒸馏、硅胶和葡聚糖凝胶Sephadex LH-20柱色谱、制备薄层色谱及半制备高效液相色谱等方法对蓬莪术挥发油进行分离纯化,运用质谱、核磁共振等波谱学手段鉴定化合... 详细信息

研究蓬莪术Curcuma phaeocaulis根茎挥发油中治疗痛经的活性成分,采用分子蒸馏、硅胶和葡聚糖凝胶Sephadex LH-20柱色谱、制备薄层色谱及半制备高效液相色谱等方法对蓬莪术挥发油进行分离纯化,运用质谱、核磁共振等波谱学手段鉴定化合物的结构。利用原发性痛经动物模型和大鼠离体子宫平滑肌收缩模型研究蓬莪术挥发油治疗痛经的活性组分及成分。从蓬莪术挥发油高沸点组分中分离得到6个倍半萜类化合物,分别鉴定为dehydrocommiterpene A(1)、comosoneⅡ(2)、5α(H)-eudesma-3(4),7(11)-dien-9β-ol-6-one(3)、guaia-6(7)-en-11-ol(4)、莪术烯醇(5)、异莪术烯醇(6),其中化合物1为新化合物。整体动物实验表明,蓬莪术挥发油可显著降低原发性痛经动物模型大鼠子宫平滑肌中前列腺素F_(2α)(PGF_(2α))含量。离体动物实验表明,蓬莪术挥发油高沸点组分舒张子宫活性优于低沸点组分,从高沸点组分中分离出的化合物1、2、5、6具有舒张子宫平滑肌活性,其中,化合物5和6可通过抑制离体子宫外钙内流和内钙释放,从而发挥舒张子宫平滑肌活性。综上,高沸点部位是莪术油治疗痛经的活性组分,倍半萜类是莪术油治疗痛经的有效成分群。

关键词：蓬莪术挥发油分子蒸馏倍半萜分离鉴定痛经

基于UPLC-Q-TOF/MS技术的龙生蛭胶囊成分快速分析

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世界科学技术-中医药现代化 2024年

作者：赵孟依毕成浩李梦娇董政委范家玮张晋岳河南中医药大学第一附属医院心脏中心/国家区域(中医)心血管诊疗中心山西中医药大学第一临床学院山东第一医科大学药学院药物研究所&山东省医学科学院天津中医药大学中药学院山西中医药大学西内教研室

龙生蛭胶囊是我国著名中药制剂。由黄芪、水蛭、川芎、当归、红花、桃仁、赤芍、木香、石菖蒲、地龙、桑寄生以及刺五加提取物组成。临床上常用来治心脑血管疾病。然而，龙生蛭胶囊的化学成分复杂且尚未完全了解，这阻碍了其药理学研究... 详细信息

龙生蛭胶囊是我国著名中药制剂。由黄芪、水蛭、川芎、当归、红花、桃仁、赤芍、木香、石菖蒲、地龙、桑寄生以及刺五加提取物组成。临床上常用来治心脑血管疾病。然而，龙生蛭胶囊的化学成分复杂且尚未完全了解，这阻碍了其药理学研究。本研究利用超高效液相色谱（UPLC）结合四极杆飞行时间质谱（Q-TOF/MS），通过其特征碎片和中性损失来快速分析和鉴定复方中的化学成分。共初步鉴定出97种化学成分，所建立的方法能够系统、快速地分析龙生蛭中的化学成分，为药效物质研究提供依据，对龙生蛭的质量控制具有重要意义。

关键词：龙生蛭胶囊中药方剂化学成分高效液相色谱四极杆飞行时间质谱

奥拉帕尼诱导乳腺癌MCF-7细胞衰老作用及其机制

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中国实验动物学报 2024年第3期32卷 378-384页

作者：王大伟郭晶边继春王莎莎卢美超张岱州贾玉萍山东中医药大学济南250355 山东省药学科学院济南250098

目的研究奥拉帕尼(olaparib)诱导乳腺癌MCF-7细胞衰老作用的表现及其相关分子水平作用机制。方法利用实时细胞分析(real-time cell analysis, RTCA)技术实时动态检测抗增殖和抗迁移活性;应用衰老相关β-半乳糖苷酶(senescence-associa... 详细信息

目的研究奥拉帕尼(olaparib)诱导乳腺癌MCF-7细胞衰老作用的表现及其相关分子水平作用机制。方法利用实时细胞分析(real-time cell analysis, RTCA)技术实时动态检测抗增殖和抗迁移活性;应用衰老相关β-半乳糖苷酶(senescence-associated β-galactosidase, SA-β-gal)染色法观察诱导细胞衰老活性;通过qPCR分析奥拉帕尼对衰老相关基因p16、p21、C/EBP同源蛋白(C/EBP homologous protein, CHOP)、白细胞介素(interleukin, IL)-6、IL-8、纤溶酶原激活物抑制剂-1(plasminogen activator inhibitor 1,PAI-1)、磷酸酶和张力蛋白同源物(phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome 10,PTEN)、p27、视网膜母细胞瘤基因(retinoblastoma gene, RB1)、Ki67和E2F1表达的影响;根据Western Blot分析奥拉帕尼对衰老相关蛋白p21、γH2AX、胰岛素样生长因子结合蛋白3(insulin-like growth factor binding protein 3,IGFBP3)、cyclin D1、pRB和Ki67表达的影响。结果奥拉帕尼能够抑制乳腺癌MCF-7细胞增殖、迁移并诱导MCF-7细胞的衰老;奥拉帕尼作用96 h的MCF-7细胞中p16、p21、p27、CHOP、IL-6、IL-8、PAI-1、PTEN和RB1的基因表达水平显著上调(P<0.01),Ki67和E2F1的基因表达水平显著下调(P<0.01);MCF-7细胞中p21、γH2AX和IGFBP3蛋白的表达水平显著升高(P<0.01,P<0.01,P<0.05),cyclin D1、pRB和Ki67蛋白的表达水平显著降低(P<0.05,P<0.01,P<0.05)。结论奥拉帕尼能够通过抗增殖、迁移和诱导细胞衰老产生抗乳腺癌MCF-7细胞作用。

关键词：奥拉帕尼乳腺癌衰老

基于肠道微生态探讨中医药治疗非酒精性脂肪性肝病的作用机制

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临床肝胆病杂志 2024年第4期40卷 804-809页

作者：杨雪张旭仙晋谭奇纹于慧娟山东中医药大学针灸推拿学院济南250014 山东中医药大学附属医院治未病中心济南250014

非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)是一种与肥胖、胰岛素抵抗和血脂异常相关的多系统疾病,其发病机制较为复杂。肠道菌群失调与NAFLD的发病密切相关,中医药治疗可通过调节肠道菌群及其代谢产物,改善NAFLD患者的实验室指标和临床症状。本文总结... 详细信息

非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)是一种与肥胖、胰岛素抵抗和血脂异常相关的多系统疾病,其发病机制较为复杂。肠道菌群失调与NAFLD的发病密切相关,中医药治疗可通过调节肠道菌群及其代谢产物,改善NAFLD患者的实验室指标和临床症状。本文总结了NAFLD与肠道菌群的关系、肠道菌群失调参与NAFLD的发病机制,从肠道菌群角度探讨中医药治疗改善NAFLD的可能等,以期为NAFLD的治疗拓展新的思路。

关键词：非酒精性脂肪性肝病肠道菌群中医疗法