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雌激素受体α激活腺苷酸活化蛋白激酶信号通路促进成骨细胞的增殖与分化

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中国组织工程研究 2025年

作者：杨锋龙欢杨冯春张桂鑫姜涛陈庆真邵敏广州中医药大学第三附属医院广州中医药大学第三临床医学院广州中医药大学广东省第二中医院

背景：研究表明，雌激素受体α可作为上游蛋白，调节腺苷酸活化蛋白激酶的表达及磷酸化水平，激活雌激素受体α-腺苷酸活化蛋白激酶通路可促进成骨增殖分化。目的：通过成骨细胞系、分子生物学层面探讨雌激素受体α调控腺苷酸活化蛋白... 详细信息

背景：研究表明，雌激素受体α可作为上游蛋白，调节腺苷酸活化蛋白激酶的表达及磷酸化水平，激活雌激素受体α-腺苷酸活化蛋白激酶通路可促进成骨增殖分化。目的：通过成骨细胞系、分子生物学层面探讨雌激素受体α调控腺苷酸活化蛋白激酶的分子机制及对成骨细胞增殖、分化的影响。方法：(1)将传代的MC3T3-E1小鼠胚胎成骨细胞分3组：空白对照组、mock组(转染pCDNA3.1对照质粒)、雌激素受体α组(转染pCDNA3.1-雌激素受体α过表达质粒)，RT-qPCR和Western blot法检测肝激酶B1、CaMKKβ和腺苷酸活化蛋白激酶α1 mRNA、蛋白及磷酸化水平。(2)ChIP-qPCR证明雌激素受体α与肝激酶B1启动子互作；双荧光素酶实验证明雌激素受体α与肝激酶B1启动子区域互作激活其转录表达。(3)细胞分3组：mock+shNC组、雌激素受体α+shNC组、雌激素受体α+shLKB1组，采用Western blot检测细胞中肝激酶B1、磷酸化肝激酶B1、磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶α1蛋白的表达水平变化。(4)细胞分4组：mock组、雌激素受体α组、雌激素受体α+5μmol/L Compound C(腺苷酸活化蛋白激酶抑制剂)组、雌激素受体α+10μmol/L Compound C组，Western blot法检测腺苷酸活化蛋白激酶信号通路相关蛋白和成骨分化相关蛋白的表达。细胞转染24 h后给予成骨诱导14 d，检测各组细胞碱性磷酸酶染色及活性情况。成骨诱导21d采用茜素红染色检测矿化结节形成情况。(5)按分组转染及不同浓度腺苷酸活化蛋白激酶抑制剂预处理，通过CCK8检测细胞活力。结果与结论：(1)雌激素受体α能激活MC3T3-E1细胞中腺苷酸活化蛋白激酶信号通路；(2)雌激素受体α可促进肝激酶B1转录介导腺苷酸活化蛋白激酶信号通路激活；(3)雌激素受体α通过激活腺苷酸活化蛋白激酶信号通路促进MC3T3-E1细胞增殖分化，腺苷酸活化蛋白激酶抑制剂干预下腺苷酸活化蛋白激酶α1、磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶α、骨保护素、骨桥蛋白、Runx2蛋白表达下调，成骨细胞活力下降；(4)结果说明，雌激素受体α可通过肝激酶B1启动子激活腺苷酸活化蛋白激酶通路，促进成骨细胞增殖和成骨分化，起到防治骨质疏松症的作用。

关键词：绝经后骨质疏松症雌激素受体α过表达 AMPK 信号通路肝激酶B1 工程化组织构建

芪蛭降糖胶囊通过NLRP3/caspase-1/GSDMD信号通路抑制足细胞焦亡改善糖尿病肾病小鼠肾损伤的机制研究

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细胞与分子免疫学杂志 2025年

作者：苏珊珊郭兆安杨欢刘慧唐静楠姜晓宇山东省中医院肾病科

目的探究芪蛭降糖胶囊（QZJT）通过含pyrin结构域NOD样受体家族3/半胱天冬酶1/GSDMD（NLRP3/caspase-1/GSDMD）信号通路对糖尿病肾病（DN）小鼠肾损伤的影响。方法构建DN小鼠模型，给予不同剂量的QZJT治疗，以参芪降糖颗粒为阳性对照... 详细信息

目的探究芪蛭降糖胶囊（QZJT）通过含pyrin结构域NOD样受体家族3/半胱天冬酶1/GSDMD（NLRP3/caspase-1/GSDMD）信号通路对糖尿病肾病（DN）小鼠肾损伤的影响。方法构建DN小鼠模型，给予不同剂量的QZJT治疗，以参芪降糖颗粒为阳性对照，并应用核呼吸因子2（Nrf2）抑制剂ML385处理DN小鼠，通过测定空腹血糖（FBG）、24 h尿白蛋白（UAlb）、血清肌酐（SCr）、血尿素（BUN）及肾脏/体质量比值（K/B）体质量比评估小鼠肾功能损伤程度；HE及PAS染色评估肾组织的病理变化；ELISA检测血清中炎性细胞因子白细胞介素1β（IL-1β）、IL-18含量；Western blot法检测足细胞标记物及相关通路蛋白水平。结果与NC组相比，DN组的FBG、24h UAlb、SCr和BUN升高，K/B重量比值升高。与DN组相比，QZJT低剂量及高剂量给药组的FBG、24 h UAlb、SCr及BUN均降低，同时K/B重量比降低，高剂量QZJT的治疗效果与参芪降糖颗粒相当。QZJT改善DN小鼠肾组织病理学损伤，提高了足细胞标记物肾病蛋白（Nephrin）的蛋白水平，降低了NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白（ASC）、pro-caspase-1和GSDMD-N的蛋白水平。ML385处理后，小鼠的肾组织细胞肿胀和形态改变，炎性浸润面积增加，NLRP3、ASC、pro-caspase-1和GSDMD-N的蛋白水平上调，IL-1β和IL-18水平升高。结论 QZJT可能通过作用Nrf2调控NLRP3/caspase-1/GSDMD通路抑制足细胞焦亡，改善DN小鼠肾损伤。

关键词：芪蛭降糖胶囊(QZJT) 糖尿病肾病 NLRP3/caspase-1/GSDMD信号通路 Nrf2 细胞焦亡

基于PI3K/Akt通路研究鼻咽解毒胶囊对鼻咽癌细胞增殖和凋亡的影响

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中国中药杂志 2025年

作者：蔺婷陶阳阳唐迎港袁菊杜慧平邓林宇周芳亮何迎春湖南中医药大学中医药防治眼耳鼻咽喉疾病湖南省重点实验室湖南中医药大学湖南省中医药防治眼耳鼻咽喉疾病与视功能保护工程技术研究中心湖南中医药大学中医学院湖南中医药大学医学院湖南中医药大学第一附属医院湖南中医药大学中西医结合院湖南中医药大学针灸推拿学院

为探讨鼻咽解毒胶囊对鼻咽癌细胞增殖和凋亡的影响及其分子机制，采用鼻咽癌CNE1、CNE2细胞，体外实验分为对照组（30%空白血清培养基），鼻咽解毒胶囊低（10%含药血清+20%空白血清培养基）、中（20%含药血清+10%空白血清培养基）、高（... 详细信息

为探讨鼻咽解毒胶囊对鼻咽癌细胞增殖和凋亡的影响及其分子机制，采用鼻咽癌CNE1、CNE2细胞，体外实验分为对照组（30%空白血清培养基），鼻咽解毒胶囊低（10%含药血清+20%空白血清培养基）、中（20%含药血清+10%空白血清培养基）、高（30%含药血清培养基）浓度组，干预24 h后，通过细胞增殖与活性检测（CCK-8法）、克隆形成实验和EdU染色法检测鼻咽解毒胶囊对CNE1、CNE2细胞增殖的影响；流式细胞术检测鼻咽解毒胶囊对CNE1、CNE2细胞凋亡的作用；蛋白免疫印迹法（Western blot）检测鼻咽解毒胶囊对CNE1、CNE2细胞X-连锁凋亡抑制蛋白（XIAP）、生存素（survivin）、增殖细胞核抗原（PCNA）蛋白表达变化，以及PI3K/Akt通路相关蛋白的变化。结果显示，与对照组相比，鼻咽解毒胶囊中、高浓度组能够浓度依赖性地降低CNE1、CNE2细胞存活率（P<0.05，P<0.01）；EdU染色和克隆形成实验显示，鼻咽解毒胶囊中、高浓度组显著抑制CNE1、CNE2细胞增殖（P<0.05，P<0.01）；流式细胞术显示，鼻咽解毒胶囊各浓度组显著增加了CNE1、CNE2细胞的凋亡率（P<0.01），且呈浓度依赖性；Western blot显示，鼻咽解毒胶囊各浓度组XIAP、survivin、PCNA、p-PI3K、p-Akt蛋白表达量均显著下调（P<0.05，P<0.01），但PI3K和Akt蛋白的总表达变化差异无统计学意义。综上所述，鼻咽解毒胶囊能够抑制鼻咽癌细胞的增殖并诱导其凋亡，可能通过下调PI3K/Akt信号通路实现其作用。

关键词：鼻咽解毒胶囊鼻咽癌细胞凋亡细胞增殖 PI3K/Akt通路

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膜联蛋白A1在呼吸系统疾病中的研究进展

中国全科医学 2025年

作者：谭会会毛伟杨子涵浙江中医药大学第三临床学院康复医学院浙江中医药大学附属湖州市中医院呼吸与危重症科

膜联蛋白A1(ANXA1)是一种强大的抗炎蛋白，在呼吸系统疾病中的研究进展日益引起关注。研究表明，ANXA1可能通过调节炎症反应、清除氧化应激物质、影响细胞凋亡参与呼吸系统疾病的病理生理过程。但目前ANXA1参与上述疾病过程的研究缺乏... 详细信息

膜联蛋白A1(ANXA1)是一种强大的抗炎蛋白，在呼吸系统疾病中的研究进展日益引起关注。研究表明，ANXA1可能通过调节炎症反应、清除氧化应激物质、影响细胞凋亡参与呼吸系统疾病的病理生理过程。但目前ANXA1参与上述疾病过程的研究缺乏有效的整合。本文通过归纳近年来相关文献，系统、全面地总结了ANXA1对慢性阻塞性肺病（简称慢阻肺）、哮喘、肺纤维化、肺缺血再灌注损伤和肺癌的影响，探讨了ANXA1参与上述疾病发生进展的作用机制。研究表明，ANXA1通过调控多种炎症信号通路，参与抑制白细胞的迁移、黏附及中性粒细胞凋亡，发挥抗炎作用，抑制哮喘气道高反应性，减轻慢阻肺肺部炎症、改善肺纤维化。此外，ANXA1还影响肿瘤细胞的增殖、转移和侵袭。本文能够为ANXA1在呼吸系统疾病的治疗提供一定的参考，为深入研究提供借鉴。

关键词：呼吸道疾病膜联蛋白A1 炎症纤维化哮喘慢性阻塞性肺疾病

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青壮年股骨颈骨折手术治疗的研究进展

现代医学与健康研究电子杂志 2025年第1期9卷 137-141页

作者：王正欢宫智浩贾龙滨州医学院附属医院创伤骨科滨州医学院第一临床医学院山东滨州256603

青壮年股骨颈骨折多由直接或间接暴力等高能量损伤所引发,由于该部位解剖结构的复杂性,其治疗方式的选择仍是目前临床骨科领域的一项挑战。临床治疗该疾病的复位及内固定方式种类繁多,如牵引床牵引、克氏针撬拨、简易牵引器复位及空心... 详细信息

青壮年股骨颈骨折多由直接或间接暴力等高能量损伤所引发,由于该部位解剖结构的复杂性,其治疗方式的选择仍是目前临床骨科领域的一项挑战。临床治疗该疾病的复位及内固定方式种类繁多,如牵引床牵引、克氏针撬拨、简易牵引器复位及空心加压螺钉、股骨颈动力交叉钉系统内固定等。而目前临床上对于青壮年股骨颈骨折仍缺乏比较统一的治疗原则,对于手术方式和固定方法的选择仍存在一定争议。因此,现就青壮年股骨颈骨折常用的复位及内固定方式等方面进行综述,以期为更好地治疗该疾病提供临床参考。

关键词：股骨颈骨折青壮年复位方式内固定

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基于多种工具评价冠心病中医临床实践指南的方法学质量

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世界科学技术-中医药现代化 2025年

作者：于玉东闫菁菁李彬李佳于鹏真梁贝贝钟兰芳河南中医药大学第一附属医院心脏中心河南中医药大学第一临床医学院河南省中医药循证医学中心

目的基于临床指南与评估系统（AGREEII）、中国临床指南评价体系（AGREE-China）、指南科学透明适用评估工具（STAR）3种工具，系统评价国内机构公开发表的冠心病中医药临床诊疗指南的方法学质量。方法计算机系统检索中国知网（CNKI... 详细信息

目的基于临床指南与评估系统（AGREEII）、中国临床指南评价体系（AGREE-China）、指南科学透明适用评估工具（STAR）3种工具，系统评价国内机构公开发表的冠心病中医药临床诊疗指南的方法学质量。方法计算机系统检索中国知网（CNKI）、万方医学数据库（WanFangData）、中文科技期刊数据库（VIP）、中国生物医学文献数据库（CBM）与医脉通，收集国内机构发布的冠心病中医临床实践指南（含专家共识），检索时间从建库至2022年12月31日。结果共纳入21篇指南，AGREEⅡ评价出A级推荐13部，B级推荐8部；AGREE-China评价出强推荐12部，弱推荐8部，不推荐1部。STAR评价最高的是4.0星级推荐，最低的是1.5星级推荐。结论国内发布的冠心病中医药诊疗指南与专家共识数量较多，但质量参差不齐，建议今后指南制订重视循证原则，推动指南制订的标准化与规范化，提高指南的科学性和适用性。

关键词：冠心病指南评价 AGREE II AGREE-China STAR

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明代医家孙一奎论治鼻病特色探析

陕西中医药大学学报 2025年第1期48卷 33-36页

作者：张思源吴元洁施丽丽徐慧徐诚博安徽中医药大学第一临床医学院安徽合肥230001 安徽中医药大学中医学院安徽合肥230001 安徽中医药大学第二附属医院安徽合肥230001

对《孙文垣医案》《赤水玄珠》《医旨绪余》中鼻病的病例与论述进行分析,归纳出孙一奎从经气逆乱鼻鼽、鼻渊、鼻衄的因机证治特色。其论鼻鼽,追溯经旨,补叙鼻鼽内外病因;虽系火热司令,亦必先有胃肠氲浊壅遏肺经。其论鼻渊,认为病机在于... 详细信息

对《孙文垣医案》《赤水玄珠》《医旨绪余》中鼻病的病例与论述进行分析,归纳出孙一奎从经气逆乱鼻鼽、鼻渊、鼻衄的因机证治特色。其论鼻鼽,追溯经旨,补叙鼻鼽内外病因;虽系火热司令,亦必先有胃肠氲浊壅遏肺经。其论鼻渊,认为病机在于太阴阳明经气上逆于咽,颃颡不开;太阳阳明经气上逆于脑,薄于頞中;肾不纳气,津液之气循经上逆鼻窍。其论鼻衄,认为病机在于胃经血热,肺气不降;肝经气逆,脾血妄行。孙氏从经气逆乱论治鼻病的学术特色,丰富了中医鼻病因机证治理论,有助于发挥传统中医药治疗五官科疾病的优势。

关键词：孙一奎鼻鼽鼻渊鼻衄五官科

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扶正通络解毒方对慢性萎缩性胃炎“炎-癌”转化小鼠的作用及机制研究

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中药新药与临床药理 2025年

作者：杨泽虹麦紫涵陈彦彤江晓涛安金琪阮舒琪曾颖凤文艺李培武刘凤斌广州中医药大学第一附属医院广东省中医临床研究院广州中医药大学博士后科研流动站广州中医药大学第一临床医学院广州中医药大学继续教育学院梅州市中医医院广州中医药大学第一附属医院白云医院

目的探讨扶正通络解毒方（FTJF）干预慢性萎缩性胃炎（CAG）“炎-癌”转化的作用机制。方法（1）通过检索TCMSP、HERB数据库检索、筛选出FTJF方中各中药的活性成分及其对应的作用靶点；通过GeneCards、OMIM、Drugbank、TTD和DisDeNet... 详细信息

目的探讨扶正通络解毒方（FTJF）干预慢性萎缩性胃炎（CAG）“炎-癌”转化的作用机制。方法（1）通过检索TCMSP、HERB数据库检索、筛选出FTJF方中各中药的活性成分及其对应的作用靶点；通过GeneCards、OMIM、Drugbank、TTD和DisDeNet数据库检索、筛选获得CAG“炎-癌”转化相关疾病靶点；使用Venny 2.1在线平台对FTJF活性成分作用靶点与CAG“炎-癌”转化疾病靶点取交集，获得FTJF干预CAG“炎-癌”转化的潜在作用靶点。通过Cytoscape 3.9.1软件构建“药物-活性成分-靶点”网络，并筛选出核心活性成分；通过STRING数据库进行潜在作用靶点蛋白互作（PPI）网络分析，筛选核心靶点；通过DAVID数据库对核潜在作用靶点进行基因本体（GO）功能及京都基因与基因组百科全书（KEGG）通路富集分析。（2）采用N-甲基-N-亚硝基脲（MNU）化学诱导法复制CAG “炎-癌”转化小鼠模型。将C57BL/6小鼠随机分为空白组、模型组及FTJF低、中、高剂量组(生药量9.56、19.11、38.22 g·kg-1)，每组10只，灌胃给药，每日1次，持续8周。采用苏木精-伊红（HE）染色法及阿利新蓝/过碘酸雪夫（AB/PAS）染色法观察胃黏膜组织病理变化；ELISA法检测血清胃功能激素胃蛋白酶原I（PGⅠ）、胃蛋白酶原II（PGⅡ）、胃泌素17（G-17）和炎性因子白细胞介素6（IL-6）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素1β（L-1β）的水平；q-PCR法检测胃黏膜组织肿瘤蛋白p53（TP53）、髓细胞增生原癌基因（MYC）、表皮生长因子受体（EGFR）基因表达水平。结果（1）共筛选得到199种活性成分，795个作用靶点，2 074个疾病相关靶点，FTJF干预CAG“炎-癌”转化的307个潜在作用靶点。分析得到槲皮素、黄酮、芹菜素、木犀草素、熊果酸等核心活性成分；TP53、AKT1、GAPDH、MYC、EGFR、VEGFA、TNF、JUN、CASP3、INS等核心靶点；KEGG通路富集分析主要涉及癌症通路、乙型肝炎、PI3K /Akt信号通路等。（2）与空白组比较，模型组小鼠胃黏膜结构严重破坏，细胞排列紊乱，可见大量炎性细胞浸润，细胞明显空泡样变，腺腔形成大小不等的黏液湖，有分泌酸性黏液的肠化生腺体形成；部分黏膜呈锯齿样或U型管样，两个或多个腺腔单层上皮变为多层无规则排列、无管腔结构的细胞团，表现出组织异型性；血清PGⅠ水平显著降低（P＜0.001），PGⅡ、G-17、IL-6、TNF-α、IL-1β水平均显著升高（P＜0.001）；胃黏膜组织TP53 mRNA表达显著下调（P＜0.001），MYC、EGFR mRNA表达显著上调（P＜0.05，P＜0.01）。与模型组比较，FTJF各剂量组小鼠胃黏膜组织细胞形态异常情况均有所好转，炎性浸润区域减少，空泡样变、黏液湖及组织异型性减少；血清PGI水平显著升高（P＜0.05，P＜0.001），PGⅡ、IL-6、TNF-α水平均显著降低（P＜0.05，P＜0.01，P＜0.001）；胃黏膜组织TP53 mRNA表达显著上调（P＜0.05，P＜0.01），MYC、EGFR mRNA表达明显下调（P＜0.05，P＜0.01）。FTJF中、高剂量组的血清G-17、IL-1β水平显著降低（P＜0.05，P＜0.01，P＜0.001）。结论 FTJF可能通过槲皮素、黄酮、芹菜素等多种活性成分，调节胃功能激素分泌水平、减轻炎症反应、下调癌症信号通路，发挥干预CAG “炎-癌”转化的作用。

关键词：扶正通络解毒方慢性萎缩性胃炎 “炎-癌”转化胃功能激素炎症反应癌症通路小鼠

清润方含药血清通过支链α-酮酸脱氢酶调控BCAAs/mTOR通路改善HepG2细胞胰岛素抵抗的作用机制探讨

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中国实验方剂学杂志 2025年

作者：卜祥伟郝晓晖张润云张美珍王泽王皓朔王洁倪青林兰中国中医科学院广安门医院天津中医药大学第一附属医院北京中医医院顺义医院

目的：探讨清润方含药血清对HepG2细胞胰岛素抵抗的改善作用及其潜在作用机制。方法：采用1×10-? mol·L-1胰岛素诱导HepG2细胞建立胰岛素抵抗模型，利用siRNA沉默支链α-酮酸脱氢酶（BCKDH）基因，分为8组。分别为正常组，模型组(1×1... 详细信息

目的：探讨清润方含药血清对HepG2细胞胰岛素抵抗的改善作用及其潜在作用机制。方法：采用1×10-? mol·L-1胰岛素诱导HepG2细胞建立胰岛素抵抗模型，利用siRNA沉默支链α-酮酸脱氢酶（BCKDH）基因，分为8组。分别为正常组，模型组(1×10-6mol·L-1胰岛素)，二甲双胍组(1 mmol·L-1二甲双胍)，清润方高、中、低剂量（20%、10%、5%清润方含药血清）组，清润方+si-BCKDH组（10%清润方含药血清+si-BCKDH），清润方+si-NC组（10%清润方含药血清+si-NC）。葡萄糖试剂盒检测上清葡萄糖含量。糖原检测试剂盒检测糖原含量。采用超高效液相色谱-串联四极杆质谱（UHPLC-MS/MS）检测支链氨基酸（BCAAs）、支链酮酸（BCKAs）水平，实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）、蛋白免疫印迹法（Western blot）分别检测BCKDH、含DEP结构域的mTOR相互作用蛋白（DEPTOR）、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）、核糖体蛋白S6激酶1（S6K1）的mRNA转录及蛋白表达水平。结果：与正常组比较，模型组葡萄糖消耗量、糖原含量显著降低，BCAAs及BCKAs水平显著升高，BCKDH、DEPTOR表达显著下调，mTOR、S6K1表达显著上调（P<0.01）。与模型组比较，清润方各剂量组葡萄糖消耗量及糖原含量显著升高，BCAAs及BCKAs水平显著降低（P<0.01），清润方高、中剂量组BCKDH mRNA转录及蛋白表达水平均显著上升，DEPTOR mRNA转录水平均显著上升（P<0.05，P<0.01），清润方各剂量组DEPTOR蛋白表达水平均显著上升，mTOR、S6K1 mRNA转录及蛋白表达水平均明显下调（P<0.05，P<0.01）。与清润方+si-NC组比较，清润方+si-BCKDH组BCAAs及BCKAs明显升高，BCKDH mRNA转录及蛋白表达水平明显降低，DEPTOR mRNA转录及蛋白表达明显下调，mTOR、S6K1 mRNA转录及蛋白表达明显上调（P<0.05，P<0.01）。结论：清润方可能通过上调BCKDH抑制BCAAs和BCKAs，进而抑制mTOR通路激活，改善BCAAs代谢重编程介导的胰岛素抵抗。

关键词：清润方 2型糖尿病胰岛素抵抗代谢重编程支链氨基酸