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当归多糖调节骨髓造血微环境治疗再生障碍性贫血的机制

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中国组织工程研究 2025年第1期29卷 44-51页

作者：付佳琪陈修保崔兴陈泽涛山东中医药大学中医学院山东省济南市250013 山东中医药大学附属医院老年病科山东省济南市250013 山东中医药大学第二附属医院肿瘤中心山东省济南市250001

背景:如何改善造血微环境是目前再生障碍性贫血治疗的热点问题。目的:结合GEO测序分析、网络药理学与实验验证当归多糖改善骨髓造血微环境治疗再生障碍性贫血的作用机制。方法:借助GEO数据库获得了再生障碍性贫血相关差异表达基因并进... 详细信息

背景:如何改善造血微环境是目前再生障碍性贫血治疗的热点问题。目的:结合GEO测序分析、网络药理学与实验验证当归多糖改善骨髓造血微环境治疗再生障碍性贫血的作用机制。方法:借助GEO数据库获得了再生障碍性贫血相关差异表达基因并进行GO和GSEA分析。结合文献与PubChem、SwissTargetPrediction、PharmMapper数据库获取当归多糖活性成分和靶点。取交集靶点后利用STRING和Cytoscape构建蛋白相互作用网络,并进行GO和KEGG富集分析。构建再生障碍性贫血小鼠模型,利用血细胞分析仪、流式细胞术、ELISA、免疫组化、免疫荧光染色、Western blot方法验证当归多糖对再生障碍性贫血的疗效与作用机制。结果与结论:(1)共筛选出834个差异表达基因,参与细胞发育、造血、髓系细胞分化等生物学过程;(2)检索得到当归多糖相关347个靶点并筛选出77个潜在治疗基因,其中VEGFA、EGLN1、BCL2、干扰素γ、白细胞介素2、白细胞介素4、白细胞介素6等血管生成、凋亡及免疫相关因子度值显著;(3)KEGG通路富集分析治疗靶点主要富集在Th17细胞分化、NK相关细胞毒性、细胞黏附因子等干扰素γ、白细胞介素2、白细胞介素4相关信号通路;(4)动物实验表明,当归多糖能够显著改善再生障碍性贫血小鼠骨髓造血,增加外周血细胞及骨髓单个核细胞计数,提高小鼠存活率;与模型组相比,当归多糖组小鼠Th1/Th2细胞比例显著下降(P<0.01),干扰素γ水平显著降低(P<0.01),白细胞介素4水平升高(P<0.05),VEGFA表达显著升高(P<0.01),EGLN1表达显著降低(P<0.01),骨髓单个核细胞凋亡率、活性氧水平显著降低(P<0.01),Cleaved Caspase-3蛋白表达显著增高(P<0.01),Bcl-2/Bax比值显著降低(P<0.01);(5)结果表明:当归多糖能够通过调节异常T细胞亚群,促进血管生成以改善造血微环境,并抑制骨髓单个核细胞凋亡,以改善再生障碍性贫血小鼠的造血功能。

关键词：当归多糖再生障碍性贫血 Th1/Th2 骨髓造血微环境细胞凋亡

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基于miR-21/SOCS1/JAK1/STAT6信号通路探讨黄芪败酱薏仁汤对溃疡性结肠炎大鼠肠黏膜屏障的修复作用

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中国实验方剂学杂志 2025年

作者：李瑞萍王世宇魏秀楠吴尔媚孙大娟山东中医药大学第一临床医学院山东中医药大学附属医院

目的：基于miR-21/细胞因子信号转导抑制因子1（SOCS1）/Janus激酶1（JAK1）/信号转导及转录激活因子6（STAT6）通路，探讨黄芪败酱薏仁汤（HBY）修复溃疡性结肠炎（UC）大鼠肠黏膜损伤的潜在机制。方法：将60只SPF级雄性SD大鼠随机分为... 详细信息

目的：基于miR-21/细胞因子信号转导抑制因子1（SOCS1）/Janus激酶1（JAK1）/信号转导及转录激活因子6（STAT6）通路，探讨黄芪败酱薏仁汤（HBY）修复溃疡性结肠炎（UC）大鼠肠黏膜损伤的潜在机制。方法：将60只SPF级雄性SD大鼠随机分为6组，空白组、模型组、HBY低、中、高剂量组(3.68、7.35、14.5 g·kg-1)及美沙拉秦组(0.035 g·kg-1)，每组10只。除空白组外，采用3%DSS溶液建立UC动物模型，造模3d后给药，日1次，连续7d。评估疾病活动指数（DAI）、结肠长度；采用苏木素-伊红（HE）染色观察结肠组织病理变化并进行Robarts组织学指数评分（RHI）；酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测血清中促炎细胞因子白细胞介素（IL）-6、IL-18、IL-1β和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）含量；采用实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测结肠组织miR-21、SOCS1、JAK1、STAT6 mRNA表达；蛋白免疫印迹法（Western blot）检测结肠组织SOCS1、JAK1、磷酸化（p）-JAK1（p-JAK1）、STAT6、p-STAT6以及咬合蛋白（Occludin）、紧密连接蛋白1（Claudin-1）的表达。结果：与空白组比较，模型组大鼠DAI评分升高（P<0.01），结肠长度显著缩短（P<0.01），结肠组织出现严重的病理学损伤，RHI评分升高，血清IL-6、IL-1β、IL-18、TNF-α表达显著升高（P<0.01），结肠组织miR-21、JAK1、STAT6 mRNA和p-JAK1和p-STAT6蛋白表达显著升高（P<0.01），SOCS1 mRNA和蛋白、Occludin、Claudin-1的蛋白表达显著降低（P<0.01）；经HBY治疗后，大鼠DAI评分显著降低（P<0.01），结肠缩短均明显改善，结肠组织病理损伤减轻，RHI评分显著降低（P<0.01），大鼠血清促炎细胞因子IL-6、IL-1β、IL-18、TNF-α显著降低（P<0.01），结肠组织miR-21、JAK1、STAT6 mRNA表达降低（P<0.05，P<0.01），SOCS1 mRNA表达明显升高（P<0.05），SOCS1、Occludin及Claudin-1的蛋白升高（P<0.05，P<0.01），p-JAK1、p-STAT6蛋白表达降低（P<0.05，P<0.01）。结论：HBY可能是通过调控miR-21/SOCS1/JAK1/STAT6信号通路，抑制炎症反应，从而恢复UC大鼠的肠黏膜屏障功能。

关键词：溃疡性结肠炎黄芪败酱薏仁汤 miR-21/细胞因子信号转导抑制因子1(SOCS1)/Janus激酶1(JAK1)/信号转导及转录激活因子6(STAT6)通路肠黏膜屏障

黄芩汤调控肠道菌群治疗小鼠肠道急性移植物抗宿主病的机制

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中国组织工程研究 2025年第1期29卷 95-102页

作者：夏梦婷孙润洁付佳琪李素贞于漫亚崔兴山东中医药大学第一临床医学院山东中医药大学千佛山校区山东省济南市250014 山东中医药大学中医学院山东省济南市250014 山东中医药大学第二附属医院肿瘤中心山东省济南市250000

背景:肠道急性移植物抗宿主病是异基因造血干细胞移植后最凶险的并发症之一,具有较高的致死率,如何通过应用中药改善肠道炎症、调节自噬以治疗肠道急性移植物抗宿主病是当下值得研究的问题。目的:探讨黄芩汤调控肠道菌群治疗肠道急性移... 详细信息

背景:肠道急性移植物抗宿主病是异基因造血干细胞移植后最凶险的并发症之一,具有较高的致死率,如何通过应用中药改善肠道炎症、调节自噬以治疗肠道急性移植物抗宿主病是当下值得研究的问题。目的:探讨黄芩汤调控肠道菌群治疗肠道急性移植物抗宿主病的机制。方法:CB6F1小鼠经总剂量8 Gy的60Co X射线照射后通过尾静脉输入Balb/c H-2d小鼠的单个核细胞悬液(骨髓+脾)制备急性移植物抗宿主病模型,随机分为模型组及黄芩汤高、中、低剂量组。造模后分别给予不同剂量黄芩汤或等体积生理盐水连续灌胃14 d,进行临床急性移植物抗宿主病评分并记录生存时间,取小肠组织做苏木精-伊红染色行小肠黏膜病理分级评分。使用16S rDNA测序检测各组小鼠肠道菌群,行免疫荧光、免疫组化染色、PCR等检测自噬相关标志物的表达。结果与结论:(1)与模型组相比,黄芩汤中、高剂量组小鼠存活时间显著延长(P<0.01),临床急性移植物抗宿主病评分显著降低(P<0.01),小肠黏膜病理分级评分显著降低(P<0.01),小肠组织炎症因子肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β、白细胞介素6水平显著下降(P<0.01),小鼠小肠黏膜上皮结构完整性部分恢复;(2)肠道菌群研究发现,与模型组相比,黄芩汤中剂量组促炎菌株肠球菌显著减少(P<0.05),而有益菌如梭状芽孢杆菌及促自噬的红球菌显著增多(P<0.05);(3)与模型组相比,黄芩汤中剂量组的自噬标志物显著升高(P<0.05);透射电镜下,黄芩汤中剂量组自噬泡数量显著增多;(4)结果表明:黄芩汤显著降低条件性致病菌丰度和小肠组织炎症因子水平,并提高有益菌相对丰度,同时促进小肠黏膜自噬的表达,从而明显改善急性移植物抗宿主病小鼠肠道症状。

关键词：肠道急性移植物抗宿主病黄芩汤造血干细胞移植肠道菌群梭状芽孢杆菌肠球菌抗炎自噬

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靶向HMGCS1探讨对宫颈癌细胞线粒体基因表达调控的作用机制

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海南医学院学报 2025年

作者：尚丹丹张晓敏杨雯萱陈博涵刘萍周超滨州医学院附属医院妇科海南西部中心医院生殖医学科

目的：本研究旨在探讨3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A合成酶1(HMGCS1)对宫颈癌(CC)细胞线粒体基因表达的调控作用机制。方法：利用生物信息学分析、亚细胞结构分离定位法、shRNA慢病毒载体的构建及细胞转染、WesternBlot、实时荧光定量 PCR(q... 详细信息

目的：本研究旨在探讨3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A合成酶1(HMGCS1)对宫颈癌(CC)细胞线粒体基因表达的调控作用机制。方法：利用生物信息学分析、亚细胞结构分离定位法、shRNA慢病毒载体的构建及细胞转染、WesternBlot、实时荧光定量 PCR(qPCR)、RNA合成与降解动力学分析、线粒体DNA免疫沉淀-定量PCR(mtDIP-qPCR)分析，探索靶向HMGCS1调控CC细胞线粒体基因表达尚未明确的作用机制。结果：HMGCS1在CC中表达上调，预示预后不良；HMGCS1主要差异表达于线粒体中；HMGCS1的敲低导致CC细胞线粒体基因表达水平普遍下调；HMGCS1的敲低可能通过降低线粒体mRNA合成水平来抑制线粒体基因表达；HMGCS1可能通过促进CC细胞线粒体基因转录调控因子与线粒体DNA(mtDNA)的结合来保障线粒体基因的正常转录。结论：HMGCS1在CC中高表达，并与不良预后相关。下调的HMGCS1通过降低CC细胞线粒体mRNA合成水平来抑制线粒体基因表达，并且HMGCS1可通过促进CC细胞线粒体基因转录调控因子与mtDNA的结合来保障线粒体基因的正常转录。因此，靶向抑制HMGCS1调控线粒体基因表达可能是一种很有前景的CC治疗新策略。

关键词：宫颈癌 HMGCS1 线粒体基因表达调控

基于NPTX2/C1q/C3补体通路探讨“上下两济丹”改善AD-痰瘀互结小鼠认知能力的作用机制

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时珍国医国药 2025年

作者：杨硕刘芳朱玲胡镜清谭爱华黄冈市中医医院中心实验室大别山道地药材种质改良与利用湖北省重点实验室(黄冈师范学院) 黄冈市中心医院康复科天津中医药大学

目的基于神经元活性调节蛋白NPTX2调控C1q/C3补体通路研究上下两济丹改善AD-痰瘀互结病证结合模型小鼠学习认知能力的作用机制,为临床使用上下两济丹治疗AD提供相关依据。方法将30只APP/PS1双转基因雄性小鼠随机分为模型组、上下两济... 详细信息

目的基于神经元活性调节蛋白NPTX2调控C1q/C3补体通路研究上下两济丹改善AD-痰瘀互结病证结合模型小鼠学习认知能力的作用机制,为临床使用上下两济丹治疗AD提供相关依据。方法将30只APP/PS1双转基因雄性小鼠随机分为模型组、上下两济丹组和多奈哌齐组,给予冰水浴加高脂饮食建立AD-痰瘀互结病证结合动物模型;10只相同遗传背景C57BL/6J雄性小鼠为空白组,正常饮食。造模结束后,上下两济丹组和多奈哌齐组给予对应药物灌胃,空白组和模型组给予等量ddH2O,连续给药40d。采用Morris水迷宫观察小鼠认知功能,分析比色法观察小鼠证候表征(舌象)的客观变化,高尔基染色及尼氏染色观察小鼠海马区AD样病理改变,Western Blot及RT-qPCR检测NPTX2/C1q/C3补体通路相关蛋白及mRNA表达情况。结果与模型组相比,上下两济丹组小鼠游泳总路程、平台潜伏期缩短,穿越平台次数增加(P<0.05);小鼠舌色偏红润,r值增加(P<0.05);神经元树突棘密度增加(P<0.05);海马CA1区神经元数量增加(P<0.05);NPTX2、PSD95蛋白及mRNA表达量增加,C1q、C3蛋白及mRNA表达量降低(P<0.01或P<0.05)。结论上下两济丹可能通过调节NPTX2/C1q/C3补体通路,减轻神经元及突触损伤,改善AD-痰瘀互结病证结合模型小鼠AD样病理改变,提高其学习认知能力。

关键词：上下两济丹阿尔茨海默病 AD-痰瘀互结 NPTX2/C1q/C3

小胶质细胞对膝骨关节炎疼痛调节机制的研究进展

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中国免疫学杂志 2025年

作者：李汶珊杨鑫魏江艳程小雨刘冠男刘璐李彬孙敬青袁芳首都医科大学附属北京中医医院针灸中心针灸神经调控北京市重点实验室北京中医药大学临床医学院

膝骨关节炎（Knee Osteoarthritis， KOA）是一种常见的退行性关节疾病，伴随疼痛和功能障碍。近年来，越来越多的研究揭示了中枢神经系统（Central Nervous System， CNS）炎症反应在KOA疼痛中的关键作用。作为CNS的主要免疫细胞，小... 详细信息

膝骨关节炎（Knee Osteoarthritis， KOA）是一种常见的退行性关节疾病，伴随疼痛和功能障碍。近年来，越来越多的研究揭示了中枢神经系统（Central Nervous System， CNS）炎症反应在KOA疼痛中的关键作用。作为CNS的主要免疫细胞，小胶质细胞在疼痛信号的处理中起到了不可忽视的作用。本文围绕脊髓和脑内小胶质细胞的功能，综述了它们在KOA病理过程中的作用机制。脊髓小胶质细胞通过分泌促炎细胞因子、调节受体和离子通道、激活信号通路，参与了KOA疼痛的产生与维持；脑小胶质细胞通过调控炎症反应，参与KOA疼痛的认知和情感调控。此外，本文还探讨了以小胶质细胞为靶点的KOA药物和非药物治疗现状，分析了其临床应用前景，并提出了未来研究的重点方向和面临的挑战。

关键词：膝骨关节炎小胶质细胞神经炎症疼痛机制疼痛管理

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靶向线粒体代谢的抗肿瘤研究进展

中国肿瘤生物治疗杂志 2025年

作者：杨璐梁蓓蓓上海中医药大学上海健康医学院药学院上海健康医学院附属嘉定中心医院上海市分子影像学重点实验室

线粒体在肿瘤细胞中扮演多重角色，其功能变化影响肿瘤的发生、发展及治疗。它调控细胞凋亡、氧化还原平衡和信号转导，与肿瘤干细胞维持、侵袭转移能力和化疗耐药性密切相关，成为抗肿瘤药物研发的热点。线粒体因其具有独特结构和功能... 详细信息

线粒体在肿瘤细胞中扮演多重角色，其功能变化影响肿瘤的发生、发展及治疗。它调控细胞凋亡、氧化还原平衡和信号转导，与肿瘤干细胞维持、侵袭转移能力和化疗耐药性密切相关，成为抗肿瘤药物研发的热点。线粒体因其具有独特结构和功能，参与了肿瘤细胞不同类型的程序性死亡，包括焦亡、凋亡、铁死亡和铜死亡等过程；在肿瘤转移过程中，线粒体通过重新调整细胞能量代谢，使肿瘤细胞能够适应新的微环境。目前，主要的靶向线粒体的抗肿瘤药物作用机制有靶向线粒体膜电位、抑制线粒体呼吸链复合物、干扰线粒体代谢途径、调节线粒体ROS水平以及影响线粒体自噬过程的药物和治疗策略等，希望为以线粒体代谢途径为靶标的抗肿瘤治疗研究提供依据和研究方向。

关键词：线粒体代谢肿瘤程序性死亡肿瘤转移肿瘤耐药肿瘤药物治疗

益肺通络方对肺纤维化模型大鼠IL-17RA/TRAF6/ACT1信号通路及肝肾功能影响的研究

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海南医学院学报 2025年

作者：马先冯家腾周博文李泽峰刘骅漫徐飞辛玲杰贾新华山东中医药大学第一临床医学院山东中医药大学附属医院老年医学科六山东中医药大学附属医院呼吸与危重症医学科山东大学附属公共卫生临床中心/山东省公共卫生临床中心中西医结合科

目的通过博来霉素气管滴入法构建肺纤维化动物模型，探讨益肺通络方对模型大鼠IL-17RA/TRAF6/ACT1信号通路及肝肾功能的影响。方法采用博来霉素气管滴入法构建SD大鼠肺纤维化模型，随机分为5组：空白对照组、模型组、强的松组、益肺通... 详细信息

目的通过博来霉素气管滴入法构建肺纤维化动物模型，探讨益肺通络方对模型大鼠IL-17RA/TRAF6/ACT1信号通路及肝肾功能的影响。方法采用博来霉素气管滴入法构建SD大鼠肺纤维化模型，随机分为5组：空白对照组、模型组、强的松组、益肺通络方低剂量组和益肺通络方高剂量组，分别给予对应的干预，共干预14天，取大鼠血清和肺组织做检测。通过聚合酶链式反应（PolymeraseChainReaction，PCR）检测IL-17RA、TRAF6、ACT1、IL-1β、TNF-α、IL-6mRNA相对表达，通过蛋白质印迹（WesternBlotting，WB）检测IL-17RA、TRAF6、ACT1蛋白表达，通过免疫荧光检测信号分子TRAF6和ACT1表达，通过酶联免疫吸附测定法（Enzyme-LinkedImmunosorbentAssay，ELISA）检测大鼠血清细胞因子IL-1β和TNF-α含量，采用全自动生化分析仪检测大鼠的肝肾功能指标。结果免疫荧光图像显示与空白对照组相比，模型组大鼠肺组织信号分子TRAF6、ACT1的荧光强度较高，在益肺通络方干预后荧光强度显著降低。PCR结果显示与空白对照组相比，模型组大鼠显著上调IL-17RA、TRAF6、ACT1、IL-1β、TNF-α、IL-6 mRNA相对表达（P<0.05）；与模型组相比，益肺通络方组大鼠上述基因相对表达均明显减少（P<0.05）。WB检测结果显示与空白对照组相比，模型组大鼠肺组织IL-17RA、TRAF6、ACT1蛋白表达明显升高（P<0.05）；与模型组相比，益肺通络方可显著抑制上述蛋白表达（P<0.05）。ELISA显示与空白对照组相比，模型组大鼠细胞因子IL-1β、TNF-α含量明显升高（P<0.05）；与模型组相比，益肺通络方组大鼠上述细胞因子含量均明显降低（P<0.05）。全自动生化分析仪结果显示大鼠肝肾功能相关指标均在正常范围内，各组间无统计学差异（P＞0.05）。结论 1.益肺通络方可能通过调控IL-17RA/TRAF6/ACT1信号通路发挥抗肺纤维化作用。2.益肺通络方通过下调IL-17A相关细胞因子分泌发挥抗炎作用。3.益肺通络方对肝肾功能无毒副作用。

关键词：肺纤维化益肺通络方 IL-17A 实验研究

温肾通络止痛方对小鼠H型骨微血管内皮细胞/骨髓间充质干细胞共培养体系的影响

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中国组织工程研究 2025年第1期29卷 8-15页

作者：周士杰李沐哲员浬张天驰牛园园朱弈桦周勤峰郭杨马勇王礼宁南京中医药大学骨伤修复与重建新技术实验室江苏省南京市210023 南京中医药大学无锡附属医院江苏省中医退行性骨关节病临床医学创新中心江苏省无锡市214071 南京中医药大学中医学院·中西医结合学院江苏省南京市210023

背景:骨骼依赖血管与骨细胞之间的密切连接来维持完整性,骨骼处在生理低氧环境中,因此在低氧环境下研究血管生成与骨生成具有重要意义。目的:探究在低氧环境下温肾通络止痛方对H型骨微血管内皮细胞/骨髓间充质干细胞共培养体系的影响及... 详细信息

背景:骨骼依赖血管与骨细胞之间的密切连接来维持完整性,骨骼处在生理低氧环境中,因此在低氧环境下研究血管生成与骨生成具有重要意义。目的:探究在低氧环境下温肾通络止痛方对H型骨微血管内皮细胞/骨髓间充质干细胞共培养体系的影响及相关机制。方法:运用酶消化法及流式分选技术,分选小鼠H型血管特异型骨微血管内皮细胞;应用骨髓贴壁法分离获取小鼠骨髓间充质干细胞;采用Transwell小室以及缺氧培养工作站建立两种细胞低氧共培养体系,使用50,100μg/m L质量浓度温肾通络止痛方冻干粉进行干预;通过划痕迁移实验与管形成实验评估共培养体系内H型骨微血管内皮细胞的成血管功能;通过碱性磷酸酶染色与茜素红染色评估共培养体系内骨髓间充质干细胞的成骨分化能力;使用Western Blotting与q-PCR检测共培养体系内H型骨微血管内皮细胞中PDGF/PI3K/AKT信号轴相关分子的蛋白表达及mRNA表达。结果与结论:(1)与常氧组相比,低氧组H型骨微血管内皮细胞划痕迁移率及新生血管长度均显著升高(P<0.05),骨髓间充质干细胞成骨分化能力增强(P<0.05);PDGF/PI3K/AKT信号轴相关分子的蛋白、mRNA表达升高(P<0.05);(2)与低氧组相比,经不同质量浓度温肾通络止痛方干预后H型骨微血管内皮细胞划痕迁移率及新生血管长度进一步提高(P<0.05),骨髓间充质干细胞成骨分化能力更强(P<0.05),PDGF/PI3K/AKT信号轴相关分子的蛋白、mRNA表达也进一步升高(P<0.05)。结果表明:低氧条件下H型血管生成及骨生成可能与PDGF/PI3K/AKT信号轴有关,而温肾通络止痛方可能通过激活PDGF/PI3K/AKT信号轴促进“H型血管生成-骨生成”作用从而防治骨质疏松症。

关键词：温肾通络止痛方 H型骨微血管内皮细胞骨髓间充质干细胞低氧血管生成骨生成

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