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基于UPLC-Q-TOF-MS的不同月份铁皮石斛次生代谢物动态变化规律研究

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中国现代应用药学 2024年第14期41卷 1934-1942页

作者：张璐方玲余欢欢张国亮侯晓虹李振皓沈阳药科大学制药工程学院沈阳110016 浙江寿仙谷植物药研究院有限公司杭州311121 寿仙谷珍稀药材产品省级重点农业企业研究院浙江金华321200

目的探究铁皮石斛中次生代谢产物在不同月份的变化规律,为铁皮石斛资源的精细化开发提供依据。方法利用UPLC-Q-TOF-MS结合分子网络技术快速鉴定铁皮石斛中的次生代谢产物,并对连续12个月的铁皮石斛样品中酚类、黄酮等化合物的相对含... 详细信息

目的探究铁皮石斛中次生代谢产物在不同月份的变化规律,为铁皮石斛资源的精细化开发提供依据。方法利用UPLC-Q-TOF-MS结合分子网络技术快速鉴定铁皮石斛中的次生代谢产物,并对连续12个月的铁皮石斛样品中酚类、黄酮等化合物的相对含量进行比较分析。结果共鉴定出9类56种次生代谢产物,其中酚类、黄酮及萜类的相对含量均在11月达到最高。结论 11月可作为铁皮石斛的最佳采收期,该研究有助于铁皮石斛资源的精准利用。

关键词：铁皮石斛次生代谢产物动态变化规律超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱

去壁灵芝孢子粉片的含量测定与免疫调节及心脏保护功能研究

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中国现代应用药学 2024年第2期41卷 203-212页

作者：杨继鸿张国亮李丛舒骆光鑫徐靖王瑛史月姣李振皓浙江寿仙谷植物药研究院有限公司杭州311100 浙江省珍稀植物药工程技术研究中心浙江武义321200 寿仙谷珍稀药材产品省级重点农业企业研究院浙江武义321200

目的研究并评价“仙芝3号”去壁灵芝孢子粉片的免疫调节和心脏保护作用。方法首先运用UPLC-Q-TOFMS和比色法分析“仙芝3号”去壁灵芝孢子粉片的主要化学成分,考察其对斑马鱼巨噬细胞减少症模型、斑马鱼心衰模型、H_(2)O_(2)诱导的心... 详细信息

目的研究并评价“仙芝3号”去壁灵芝孢子粉片的免疫调节和心脏保护作用。方法首先运用UPLC-Q-TOFMS和比色法分析“仙芝3号”去壁灵芝孢子粉片的主要化学成分,考察其对斑马鱼巨噬细胞减少症模型、斑马鱼心衰模型、H_(2)O_(2)诱导的心肌及内皮细胞氧化应激模型、脂多糖诱导的小胶质细胞炎症模型的影响,通过巨噬细胞形成能力、巨噬细胞吞噬能力、抗神经炎症能力、心脏收缩舒张改善能力、抗心肌及内皮细胞氧化应激损伤能力等多个指标评估其免疫调节及心脏保护作用。结果 “仙芝3号”去壁灵芝孢子粉片可以提高巨噬细胞形成及吞噬能力,改善心脏收缩舒张功能,减少神经炎症并缓解心肌及内皮细胞因氧化应激而造成的损伤,从而起到免疫调节和心脏保护作用。结论 “仙芝3号”去壁灵芝孢子粉片有望用于免疫功能调节及心脏功能保护。

关键词：去壁灵芝孢子粉片免疫调节心脏保护

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赤芝道地药材形成源流考

中国现代应用药学 2020年第6期37卷 681-684页

作者：胡凌娟郑化先王晓彤徐靖王汉波李明焱高精琴李振皓浙江寿仙谷医药股份有限公司浙江金华321200 寿仙谷珍稀药材产品省级重点企业研究院浙江金华321200 金华寿仙谷药业有限公司浙江金华321200

目的对赤芝道地药材形成进行本草考证和历史文献考实。方法查阅历代本草文献结合现代研究,从基原、产地变迁、产地加工、质量评价等方面对赤芝道地药材形成进行考证。结果古代赤芝以野生品为主,到南宋时期已有栽培品的记载,浙江、安徽... 详细信息

目的对赤芝道地药材形成进行本草考证和历史文献考实。方法查阅历代本草文献结合现代研究,从基原、产地变迁、产地加工、质量评价等方面对赤芝道地药材形成进行考证。结果古代赤芝以野生品为主,到南宋时期已有栽培品的记载,浙江、安徽及周边地区赤芝的栽培历史悠久,所产赤芝品质优良。结论浙江、安徽为赤芝的道地产区,赤芝道地药材的形成与载培、采收、加工等技术的进步密切相关。

关键词：赤芝本草考证道地药材

基于结肠癌HCT116细胞三维培养模型的灵芝组分抗肿瘤活性研究

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中国现代应用药学 2023年第13期40卷 1795-1809页

作者：潘海涛陈栋杰张国亮胡凌娟王晓彤仲怿杨继鸿李振皓浙江寿仙谷植物药研究院有限公司杭州311100 杭州市余杭区伯宇智慧健康研究院杭州311100 浙江寿仙谷医药股份有限公司浙江武义321200 寿仙谷珍稀药材产品省级重点农业企业研究院浙江武义321200

目的基于结肠癌HCT116细胞的二维(2D)和三维(3D)培养模型研究灵芝组分(Ganoderma components,Gc)的抗肿瘤作用。方法采用UPLC-Q-TOF-MS鉴定3种Gc的化学组成;以Matrigel基质胶为基质材料建立体外HCT116细胞3D培养模型,评价Gc1、Gc2、Gc3... 详细信息

目的基于结肠癌HCT116细胞的二维(2D)和三维(3D)培养模型研究灵芝组分(Ganoderma components,Gc)的抗肿瘤作用。方法采用UPLC-Q-TOF-MS鉴定3种Gc的化学组成;以Matrigel基质胶为基质材料建立体外HCT116细胞3D培养模型,评价Gc1、Gc2、Gc3和5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)对2D和3D培养的HCT116细胞增殖的影响,并在HCT116细胞3D培养模型中分析Gc3对周期、凋亡、耐药、脂代谢及5-FU抗肿瘤活性的影响;采用CCK-8法检测细胞活力;Real-time PCR检测细胞mRNA表达水平;Western blotting检测细胞蛋白表达水平;采用HPLC检测细胞内5-FU含量。结果从Gc1、Gc2和Gc3中分别鉴定出76,69和17个化合物;与2D培养相比,3D培养的HCT116细胞增殖率更低,周期促进蛋白CDK2、CDK4、CDK6及脂肪酸合成蛋白FASN、SREBP1的表达显著下调,周期抑制蛋白p21和p27、脂滴分解蛋白ATGL及药物抵抗基因ITGB1、CDH1、ABCB1、ABCC1 mRNA的表达水平显著上调;Gc1、Gc2、Gc3和5-FU作用48 h可呈浓度依赖性抑制2D和3D培养的HCT116细胞增殖,且Gc3的抑制作用显著强于Gc1和Gc2;在HCT116细胞3D培养模型中,Gc3可显著降低CDK2、CDK4、Bcl-xl、ATGL、LC3B的表达水平,升高p21、p27、Bax、Cleaved caspase-3、Cleaved PARP1的表达水平,过表达LC3B或ATGL均可减弱Gc3诱导的细胞毒性;Gc3还可显著抑制ITGB1、CDH1、ABCB1、ABCC1 mRNA的表达,提高细胞内5-FU的浓度,并加强5-FU的抗肿瘤活性。结论Gc3通过抑制细胞自噬和脂滴分解而诱导3D培养的HCT116细胞凋亡,并通过抑制ITGB1、CDH1、ABCB1、ABCC1 mRNA的表达加强5-FU的抗肿瘤活性。

关键词：灵芝结肠癌三维培养脂解脂噬

基于CiteSpace的灵芝孢子粉研究知识图谱分析

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中国现代应用药学 2021年第12期38卷 1416-1425页

作者：赵建霞李振宇张国亮徐靖王瑛李明焱李振皓浙江寿仙谷植物药研究院有限公司杭州310000 浙江寿仙谷医药股份有限公司浙江武义321200 浙江省珍稀植物药工程技术研究中心浙江武义321200 寿仙谷珍稀药材产品省级重点农业企业研究院浙江武义321200

目的对灵芝孢子相关研究进行文献计量、可视化分析,探讨并综述其研究热点及发展趋势。方法在中国知网、Pubmed和Web of Science数据库检索灵芝孢子粉相关的文献,并根据文献语言的不同分为中文与英文2个部分,应用CiteSpace对文献中的国... 详细信息

目的对灵芝孢子相关研究进行文献计量、可视化分析,探讨并综述其研究热点及发展趋势。方法在中国知网、Pubmed和Web of Science数据库检索灵芝孢子粉相关的文献,并根据文献语言的不同分为中文与英文2个部分,应用CiteSpace对文献中的国家、机构、关键词和主题词、被引情况进行共现分析,绘制对应知识图谱、时间线视图,进而推断灵芝孢子粉的研究热点及趋势。对灵芝孢子主要研究热点、趋势、临床研究及物质基础等方面的研究进行总结。结果共获得相关文献1477篇,包括989篇中文文献、488篇英文文献,发文量均呈增涨趋势,且国家及机构共现分析表明发文的主要是中国与中国机构,研究热点领域为药理药效方面,主要以抗肿瘤、免疫调节、抗癫痫等药效研究为主。近5年新兴的灵芝孢子粉的研究集中在免疫检查点、肠道菌群等前沿领域。结论灵芝孢子粉在抗肿瘤、免疫调节、抗癫痫等方面的药理作用研究广泛,具有良好的应用前景,但物质基础和质量控制研究较为薄弱,有待进一步深化。

关键词： CiteSpace 知识图谱分析药理药效物质基础灵芝孢子粉

3株野生赤芝的生物学特性及灵芝酸类成分含量的测定

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菌物研究 2023年

作者：吕艳聪李玉张国亮熊辉徐靖王瑛李振皓孙慧颖吉林农业大学食药用菌教育部工程研究中心吉林农业大学吉林省菌物表型组学重点实验室浙江寿仙谷植物药研究院有限公司浙江省珍稀植物药工程技术研究中心寿仙谷珍稀药材产品省级重点农业企业研究院

赤芝是一种大型药用真菌，具有很高的药用价值和经济价值。为了充分开发利用赤芝的野生资源，对采自中国福建省和浙江省的3株野生灵芝菌株进行了基于内转录间隔区序列（ITS）的序列分析鉴定，其均为赤芝Ganoderma sichuanense。以3个野... 详细信息

赤芝是一种大型药用真菌，具有很高的药用价值和经济价值。为了充分开发利用赤芝的野生资源，对采自中国福建省和浙江省的3株野生灵芝菌株进行了基于内转录间隔区序列（ITS）的序列分析鉴定，其均为赤芝Ganoderma sichuanense。以3个野生赤芝菌株及国内主栽的1个菌株为试验材料，进行生物学特性分析、栽培试验及主要灵芝酸类成分含量测定。经生物学特性研究发现，不同来源的赤芝菌株最适生长条件有所差异，其中最适温度为30 ℃、最适碳源为淀粉、最适氮源为酵母浸粉、最适pH为5.0。本研究对野生赤芝菌株的人工代料栽培试验表明，3个野生赤芝菌株均能正常出菇及产孢。采用超高效液相色谱-四级杆飞行时间质谱法（UPLC-QTOF-MS），对供试菌株子实体中具有广泛药理作用的18种灵芝酸类成分含量进行测定，其中野生菌株S-Ⅳ中13种灵芝酸类成分及总灵芝酸的含量均高于栽培菌株。本研究成功栽培3个野生菌株，并筛选出1株灵芝酸含量高的野生菌株，为野生赤芝种质资源开发及新品种选育提供参考。

关键词：赤芝种质资源生物学特性灵芝酸

基于UPLC-QTOF-MS和多元统计分析的赤芝道地性研究

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中国现代中药 2022年第6期24卷 979-989页

作者：张国亮王晓彤王汉波赵建霞李振宇俞飞龙李振皓浙江寿仙谷植物药研究院有限公司浙江杭州310000 浙江寿仙谷医药股份有限公司浙江武义321200 寿仙谷珍稀药材产品省级重点农业企业研究院浙江武义321200 浙江省珍稀植物药工程技术研究中心浙江武义321200

目的:研究不同产地、不同栽培方式对赤芝中三萜类成分的影响,为赤芝的道地性研究提供依据。方法:采用超高效液相色谱-四级杆飞行时间质谱法(UPLC-QTOF-MS)对120批赤芝样品进行化学成分分析。将赤芝样品按照浙产/非浙产、浙产段木/非浙... 详细信息

目的:研究不同产地、不同栽培方式对赤芝中三萜类成分的影响,为赤芝的道地性研究提供依据。方法:采用超高效液相色谱-四级杆飞行时间质谱法(UPLC-QTOF-MS)对120批赤芝样品进行化学成分分析。将赤芝样品按照浙产/非浙产、浙产段木/非浙产段木、浙产段木/浙产野生、不同发育时期进行模式分类,应用正交偏最小二乘法-判别分析(OPLS-DA)对赤芝样品进行多元统计分析,用变量重要性投影(VIP)值、t检验筛选出组间差异显著的指标性成分。结果:从供试样品中鉴定出13种响应高、分离度好的灵芝酸类成分。筛选发现,浙产赤芝中灵芝酸D、灵芝烯酸D显著高于非浙产赤芝,可作为浙产赤芝的标志性成分;浙产段木赤芝中灵芝酸D、灵芝酸B、灵芝酸C1、灵芝酸G的含量显著高于非浙产段木赤芝;段木赤芝中灵芝酸A等6个成分均显著高于野生赤芝;随着赤芝子实体逐渐成熟(现蕾期→开伞期→成熟期→采摘期),多数灵芝酸含量呈现下降趋势,但部分样品采摘期(喷孢后)灵芝酸含量较成熟期(喷孢前)高,值得进一步研究。结论:浙产与非浙产赤芝成分差异较明显,且浙产段木赤芝与非浙产段木赤芝成分也存在明显差异,可能与生态环境、种植方式有关。

关键词：赤芝道地性超高效液相色谱-四级杆飞行时间质谱法正交偏最小二乘法-判别分析灵芝酸D 灵芝烯酸D

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基于网络药理学的灵芝作用机制研究

浙江农业科学 2022年第8期63卷 1837-1846页

作者：徐靖赵建霞张国亮王瑛郑化先李明焱李振皓浙江寿仙谷医药股份有限公司浙江武义321200 浙江寿仙谷植物药研究院有限公司浙江杭州310000 浙江省珍稀植物药工程技术研究中心浙江武义321200 寿仙谷珍稀药材产品省级重点农业企业研究院浙江武义321200

通过TCMSP数据库,结合化合物含量信息,从灵芝中筛选出类药性好且含量较高的化合物;通过TCMSP、TCMIP、Swiss Target Prediction、SuperPred等数据库,预测化合物相应靶点;采用STRING数据库,构建靶点蛋白质互作(PPI)网络,并筛选出核心靶点... 详细信息

通过TCMSP数据库,结合化合物含量信息,从灵芝中筛选出类药性好且含量较高的化合物;通过TCMSP、TCMIP、Swiss Target Prediction、SuperPred等数据库,预测化合物相应靶点;采用STRING数据库,构建靶点蛋白质互作(PPI)网络,并筛选出核心靶点;通过Enrichr数据库,预测核心靶点对应疾病;通过Cytoscape的ClueGo模块,对核心靶点进行基因本体分析(GO)及通路富集分析(KEGG),最终建立化合物-靶点、化合物-靶点-疾病-通路网络。根据试验结果,共筛选出60种化合物的22个核心靶点;核心靶点对应的疾病集中在肿瘤、自身免疫性疾病等;GO分析发现,核心靶点参与了88个生物过程,主要分为8个类别;KEGG分析发现,核心靶点参与了5个代谢通路,分为4个类别;化合物-靶点-疾病-通路网络显示了化合物、靶点、疾病、通路间的相互作用,如Lucialdehyde C、Ganoderic aldehyde A可通过DRD2靶点及22个相关生物功能通路,对30种疾病发挥作用。

关键词：灵芝网络药理学靶点 Cytoscape 作用机制

基于UPLC-Q-TOF-MS和多元统计分析的杭白菊道地性研究

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中国现代中药 2021年第10期23卷 1717-1726页

作者：钱华刘佳胡凌娟徐靖赵建霞潘海涛邱洁茹李振皓浙江寿仙谷医药股份有限公司浙江武义321200 浙江省珍稀植物药工程技术研究中心浙江武义321200 寿仙谷珍稀药材产品省级重点农业企业研究院浙江武义321200 浙江寿仙谷植物药研究院有限公司浙江杭州310000

目的:鉴定不同产区胎菊、朵菊的主要差异化学成分,为杭白菊的道地性研究提供依据。方法:收集不同产区的杭白菊胎菊和朵菊样品,采用超高效液相色谱-四级杆-飞行时间质谱法(UPLC-Q-TOF-MS)进行化学成分分析,综合运用数据非依赖扫描(DIA)... 详细信息

目的:鉴定不同产区胎菊、朵菊的主要差异化学成分,为杭白菊的道地性研究提供依据。方法:收集不同产区的杭白菊胎菊和朵菊样品,采用超高效液相色谱-四级杆-飞行时间质谱法(UPLC-Q-TOF-MS)进行化学成分分析,综合运用数据非依赖扫描(DIA)与数据依赖扫描(DDA),结合本地及在线数据库,鉴定主要化学成分。应用正交偏最小二乘法-判别分析(OPLS-DA)等多元统计分析方法,对胎菊与朵菊、不同产区胎菊与朵菊、道地产区(桐乡)与非道地产区胎菊与朵菊进行模式分类,以分析过程中变量重要性投影(VIP)值、t检验筛选出主要的差异化合物。结果:从供试样品中共鉴定出33个化合物。胎菊与朵菊化学轮廓差异明显,D-甘露糖、羟基芫花素、槲皮素等为主要的差异化合物;不同产区胎菊化学轮廓差异较明显,其中桐乡胎菊中鸟苷、姜糖酯B等成分含量显著高于其他产区,可作为鉴定道地产区的标志性成分;不同产区朵菊的差异相对较小,但浙江和其他省份(江苏、河南)产朵菊有一定差别,红车轴草素-7-O-β-D-葡萄糖苷为主要的差异化合物。结论:不同产区胎菊的差异较大,而朵菊的差异较小,可能的原因为杭白菊成熟后,化学成分的含量趋于稳定。

关键词：杭白菊道地性超高效液相色谱-四级杆-飞行时间质谱法多元统计分析