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人脐带间充质干细胞来源外泌体治疗SD大鼠骨质疏松性股骨骨折

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中国组织工程研究 2025年第31期29卷 6634-6641页

作者：卜宪敏梁迪张斌徐英杰丁豪吴彬田荣华济宁市第一人民医院病理科山东省济宁市272067 济宁医学院临床医学院山东省济宁市272067 济宁医学院附属医院检验科山东省济宁市272067 济宁医学院附属医院创伤骨科山东省济宁市272067

背景:人脐带间充质干细胞来源外泌体已广泛用于骨修复和重建研究,能显著促进成骨和血管生成。目的:探究人脐带间充质干细胞来源外泌体治疗骨质疏松性骨折的机制。方法:采用组织块培养法提取人脐带间充质干细胞及超速离心法提取人脐带间... 详细信息

背景:人脐带间充质干细胞来源外泌体已广泛用于骨修复和重建研究,能显著促进成骨和血管生成。目的:探究人脐带间充质干细胞来源外泌体治疗骨质疏松性骨折的机制。方法:采用组织块培养法提取人脐带间充质干细胞及超速离心法提取人脐带间充质干细胞来源外泌体并进行鉴定。30只12周龄雌性SD大鼠随机分为假手术组(6只)和去势组(24只)。去势组采用经典的去势法构建骨质疏松模型,术后12周随机选取去势组6只大鼠与假手术组6只大鼠行Micro-CT及苏木精-伊红染色进行模型验证。验证骨质疏松模型构建成功后,将去势组剩余18只大鼠随机分为3组,均构建骨质疏松性股骨骨折模型,骨折端分别注射PBS(PBS组)、1.5×10^(11)particles/mL(低浓度外泌体组)、3×10^(11)particles/mL(高浓度外泌体组)外泌体。骨折术后4周行影像学及组织学观察评估骨折愈合和骨组织血管生成情况。结果与结论:①大体标本观察:与PBS组相比,外泌体组骨折愈合速度明显增快,骨折端骨痂生成量显著增加;②X射线片评分:外泌体组显著高于PBS组,差异有显著性意义(P<0.05);③Micro-CT三维成像:与PBS组相比,外泌体组骨折愈合加快,骨痂生成量显著增加;外泌体组骨体积分数显著高于PBS组,差异有显著性意义(P<0.01);④苏木精-伊红染色和Masson染色:与PBS组相比,外泌体组有更多的骨小梁生成,有更多的新生骨组织生长;⑤免疫组织化学染色:与PBS组相比,外泌体组骨钙素与CD31的表达更加显著;高浓度外泌体组较低浓度外泌体组新生血管密度更大,骨痂生成量更多,骨折愈合增快,呈现浓度依赖性。结果表明,人脐带间充质干细胞来源外泌体可通过促进血管生成和成骨,最终促进骨质疏松性骨折修复,其机制可能与CD31和骨钙素表达增加有关。

关键词：骨质疏松性骨折人脐带间充质干细胞外泌体骨折愈合骨钙素 CD31

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肥胖症与弥漫性特发性骨肥厚症的关系

中国组织工程研究 2025年第17期29卷 3705-3712页

作者：孔鹿鸣赵弟乾白文哲李念虎山东中医药大学第一临床医学院山东省济南市250014 山东中医药大学附属医院山东省济南市250014

背景:弥漫性特发性骨肥厚症是一种以韧带、肌腱等软组织及其附着部位的钙化和骨化为主要表现的全身性非炎症疾病,主要影响50岁以上的男性。研究表明肥胖症患者中弥漫性特发性骨肥厚症的发病率更高,但二者的因果关系尚不明确。目的:旨在... 详细信息

背景:弥漫性特发性骨肥厚症是一种以韧带、肌腱等软组织及其附着部位的钙化和骨化为主要表现的全身性非炎症疾病,主要影响50岁以上的男性。研究表明肥胖症患者中弥漫性特发性骨肥厚症的发病率更高,但二者的因果关系尚不明确。目的:旨在通过孟德尔随机化分析方法,探讨肥胖症与弥漫性特发性骨肥厚症之间的因果关系。方法:研究选取全基因组关联研究数据库中的单核苷酸多态性作为工具变量,包括肥胖症和弥漫性特发性骨肥厚症相关数据。使用双向双样本孟德尔随机化分析方法评估肥胖症与弥漫性特发性骨肥厚症之间的因果关系,同时进行多效性、异质性和敏感性评价。结果与结论:孟德尔随机化分析发现肥胖症与弥漫性特发性骨肥厚症之间存在显著的正向因果关系。逆方差加权法显示“肥胖”(OR=1.111,95%CI:1.068-1.156,P=1.598×10^(-7))、“肥胖,热量过剩”(OR=1.093,95%CI:1.042-1.146,P=0.000)和“肥胖,其他/不详”(OR=1.109,95%CI:1.069-1.152,P=4.908×10^(-8))均与弥漫性特发性骨肥厚症显著相关。反向孟德尔随机化分析未发现弥漫性特发性骨肥厚症与肥胖症之间存在因果关系。多效性、异质性和敏感性检验结果验证了孟德尔随机化分析结果的可靠性。这表明肥胖症显著增加了弥漫性特发性骨肥厚症的风险,但弥漫性特发性骨肥厚症并不是肥胖症的危险因素。

关键词：弥漫性特发性骨肥厚症肥胖症代谢综合征孟德尔随机化单核苷酸多态性工具变量因果关系工程化骨组织

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骨关节炎的氧化应激相关基因和免疫浸润分析

中国组织工程研究 2025年第2期29卷 302-311页

作者：吴傲于鹏滕加文孔鹏卞泗善山东中医药大学第一临床医学院山东省济南市250000 山东中医药大学附属医院山东省济南市250000

背景:目前对于骨关节炎的发病机制尚不清楚,缺乏有效控制疾病的手段,且研究多集中在免疫领域,对氧化应激领域研究较少。目的:探索氧化应激与免疫浸润在骨关节炎中的作用,并预测相关miRNA和治疗药物。方法:从GEO数据库中获取GSE55235数据... 详细信息

背景:目前对于骨关节炎的发病机制尚不清楚,缺乏有效控制疾病的手段,且研究多集中在免疫领域,对氧化应激领域研究较少。目的:探索氧化应激与免疫浸润在骨关节炎中的作用,并预测相关miRNA和治疗药物。方法:从GEO数据库中获取GSE55235数据集(10例骨关节炎样本和10例健康对照样本)和GSE55457数据集(10例骨关节炎样本和10例健康对照样本)进行合并,获取差异表达基因,并结合氧化应激基因得到差异表达氧化应激基因。对差异表达氧化应激基因进行KEGG、GO富集分析,并使用GSEA富集分析评价骨关节炎通路和生物过程。使用STRING在线平台和Cytoscape软件建立了蛋白质相互作用网络,运行Degree算法得到关键基因,从GEO数据库中获取GSE1919作为验证数据集,对关键基因进行差异分析及受试者工作特征曲线分析,得到核心基因。此外,用CIBERSORT对免疫浸润进行评估,并探索核心基因与免疫细胞的相关性,使用TargetScan对核心基因进行miRNA预测及使用DSigDB数据库对靶点药物进行预测。结果与结论:①确定了65个差异表达氧化应激基因和5个核心基因(IL1B、CXCL8、MYC、NFKBIA、JUN);②富集分析结果显示,差异表达氧化应激基因的主要聚焦点包括氧化应激、白细胞介素17、破骨细胞分化、流体剪切应力以及动脉粥样硬化等通路;③5个核心基因的受试者工作特征曲线下面积均>0.85,说明对诊断骨关节具有良好的特异性和敏感性,且与免疫细胞密切关联;④miRNA的预测结果是hsa-miR-3937,治疗小分子药物包括二甲双胍、离子霉素和塞来昔布等。结果表明:骨关节炎中存在氧化应激与免疫浸润,且免疫浸润参与激活氧化应激。核心基因及预测的miRNA可作为诊断骨关节炎的新型标志物,预测的小分子药物可治疗骨关节炎。

关键词：骨关节炎氧化应激免疫浸润差异基因生物标志物 miRNA 药物预测

黄芪甲苷可缓解MC3T3-E1细胞氧化应激损伤并促进成骨

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中国组织工程研究 2025年第17期29卷 3529-3536页

作者：张加豪李嘉程温明韬郭艳波骆帝李刚山东中医药大学第一临床医学院山东省济南市250014 山东中医药大学附属医院山东省济南市250014

背景:氧化应激是导致骨质疏松症的主要原因之一,减少氧化应激水平与增加抗氧化防御是治疗骨质疏松症的重要研究方向。研究证实黄芪甲苷具有抗骨质疏松作用,但其作用机制尚不明确。目的:探讨黄芪甲苷对氧化应激条件下MC3T3-E1细胞成骨的... 详细信息

背景:氧化应激是导致骨质疏松症的主要原因之一,减少氧化应激水平与增加抗氧化防御是治疗骨质疏松症的重要研究方向。研究证实黄芪甲苷具有抗骨质疏松作用,但其作用机制尚不明确。目的:探讨黄芪甲苷对氧化应激条件下MC3T3-E1细胞成骨的作用。方法:将MC3T3-E1细胞分4组培养:对照组加入完全培养基,模型组加入含过氧化氢的完全培养基干预24 h后更换为完全培养基,黄芪甲苷组加入含过氧化氢、黄芪甲苷的完全培养基干预24 h后更换为含黄芪甲苷的完全培养基,抑制剂组加入含过氧化氢、黄芪甲苷、细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinases,ERK)抑制剂的完全培养基干预24 h后更换为含黄芪甲苷、ERK抑制剂的完全培养基。过氧化氢干预48 h后,通过丙二醛含量检测黄芪甲苷对MC3T3-E1细胞氧化应激的缓解作用;过氧化氢干预48 h后进行成骨诱导培养,通过碱性磷酸酶染色、茜素红染色验证MC3T3-E1细胞成骨及矿化能力,通过RT-qPCR检测成骨相关基因的表达,Western blot检测成骨相关蛋白及ERK/腺苷酸激活蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)信号通路蛋白的表达。结果与结论:(1)模型组细胞内碱性磷酸酶含量与矿化结节形成均少于对照组(P<0.05),黄芪甲苷组细胞内碱性磷酸酶含量与矿化结节形成均多于模型组(P<0.05)。(2)与对照组比较,模型组细胞内丙二醛含量增加(P<0.05),骨钙素、RUNX2、Ⅰ型胶原蛋白的mRNA与蛋白表达均降低(P<0.05),AMPK mRNA与p-AMPK蛋白表达升高(P<0.05);与模型组比较,黄芪甲苷组细胞内丙二醛含量减少(P<0.05),骨钙素、RUNX2、Ⅰ型胶原蛋白的mRNA与蛋白表达均升高(P<0.05),ERK1/2、AMPK mRNA表达升高(P<0.05),p-AMPK、p-ERK1/2蛋白表达均升高(P<0.05);ERK抑制剂可部分抑制黄芪甲苷的上述作用。(3)结果表明,黄芪甲苷可通过激活ERK/AMPK信号通路促进氧化应激条件下MC3T3-E1细胞的成骨分化。

关键词：黄芪甲苷骨质疏松症 MC3T3-E1细胞氧化应激 ERK/AMPK信号通路成骨工程化骨材料

单孔非同轴脊柱内镜下经跨棘突入路治疗游离型腰椎间盘突出症的早期疗效

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中国修复重建外科杂志 2025年

作者：李中锋刘晏东温力鹏陈博杨英王雨榕彭冉东宋恩甘肃省中医院脊柱疾病诊疗中心甘肃中医药大学研究生院临夏州人民医院骨科昆明医科大学第一附属医院运动医学科

目的探讨采用单孔非同轴脊柱内镜（uni-portal non-coaxial spinal endoscopic surgery,UNSES）经跨棘突入路（crossing midline approach,CMA）治疗游离型腰椎间盘突出症（free lumbar disc herniation,FLDH）的早期疗效。方法 2024年3月—6月，采用UNSES经CMA治疗16例FLDH患者。男9例，女7例；年龄47～62岁，平均55.1岁。病程8～30个月，平均15.6个月。病变节段：L3、4 4例，L4、5 5例，L5、S1 7例。术前疼痛视觉模拟评分（VAS）为（6.9±0.9）分，Oswestry功能障碍指数（ODI）为57.22%±4.16%。记录手术时间、术中出血量、术后住院时间以及相关并发症发生情况。术后采用VAS评分及ODI评价脊柱疼痛及功能情况，按照改良MacNab标准评价临床疗效；CT和MRI复查评价神经减压效果。结果 16例患者手术均顺利完成，无手术相关并发症发生。手术时间63～81 min，平均71.0 min；术中出血量47.3～59.0 mL，平均55.0 mL；术后住院时间3～4 d，平均3.5 d。患者均获随访，随访时间1～3个月，其中随访达2个月15例、3个月14例。术后随时间延长VAS评分及ODI均逐渐降低，手术前后各时间点间比较差异均有统计学意义（P<0.05）。术后3个月，改良MacNab疗效评价达优12例、良2例，优良率达100%。随访期间影像学复查示椎管直径和横截面积明显增加，椎管有效减压。结论采用UNSES治疗FLDH时，选择CMA进行神经减压具有减压范围广、操作空间大以及操作自由等优势，可最大限度地保留关节突，避免峡部骨折断裂，清晰显示出口神经根和行走神经根，获得较好早期疗效。

关键词：单孔非同轴脊柱内镜跨棘突入路游离型腰椎间盘突出症早期疗效

骨髓微环境中不同细胞对多发性骨髓瘤骨病外泌体环状RNA的贡献及相互作用

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中国组织工程研究 2025年

作者：于漫亚崔兴山东中医药大学第一临床学院山东中医药大学第二附属医院肿瘤中心

背景：多发性骨髓瘤骨病是多发性骨髓瘤的严重并发症，其发病机制与骨髓微环境失调密切相关。外泌体环状RNA因高稳定性、高丰度、高特异性、高保守性等特点，正逐渐成为液体活检的焦点。在多发性骨髓瘤骨病中，外泌体环状RNA的作用尚缺... 详细信息

背景：多发性骨髓瘤骨病是多发性骨髓瘤的严重并发症，其发病机制与骨髓微环境失调密切相关。外泌体环状RNA因高稳定性、高丰度、高特异性、高保守性等特点，正逐渐成为液体活检的焦点。在多发性骨髓瘤骨病中，外泌体环状RNA的作用尚缺乏相关研究。随着单细胞测序技术的发展，明确骨髓微环境中各类型细胞对多发性骨髓瘤骨病相关外泌体环状RNA的贡献及相互作用，有助于为多发性骨髓瘤骨病的诊疗提供新的生物标志物。目的：初步明确多发性骨髓瘤骨病相关外周血外泌体环状RNA的骨髓微环境来源细胞，并在单细胞水平上探究骨髓微环境中各细胞相互作用对多发性骨髓瘤骨病的影响。方法：对6例多发性骨髓瘤骨病患者和5名健康志愿者的外周血外泌体进行高通量测序，筛选差异环状RNA，并进行GO和KEGG富集分析。从GEO数据库中获取多发性骨髓瘤骨病患者的骨髓单细胞测序数据集GSE271107，对其中的4例多发性骨髓瘤骨病患者数据进行整合，完成质控和过滤后，利用Harmony法去除批次效应，UMAP进行亚群聚类，SingleR自动注释后手动矫正细胞群，CellChat对单细胞测序数据中的细胞间通讯进行推断和可视化，分析配体、受体间的相互作用。结果与结论：(1)相较于健康志愿者，多发性骨髓瘤骨病患者外周血外泌体中1 265个环状RNA表达水平显著上调；(2)GO和KEGG分析差异环状RNA的亲本基因主要富集在神经系统发育、癌症中的通路、PI3K-Akt信号通路、Hippo信号通路、致心律失常性右心室心肌病、扩张型心肌病等，这与骨髓瘤细胞的增殖、黏附、迁移、归巢，以及多发性骨髓瘤相关并发症(如多发性骨髓瘤骨病、周围神经病变、心脏事件)关系密切；(3)多发性骨髓瘤骨病相关差异环状RNA的亲本基因主要来源于骨髓微环境中的T细胞/自然杀伤细胞、B细胞和单核/巨噬细胞，通过调节多种细胞因子的分泌影响破骨细胞功能；(4)单核细胞/巨噬细胞作为破骨细胞前体细胞与骨髓瘤细胞及其他免疫细胞间均有相互作用，MIF通路是其参与的主要通路。以上结果初步明确了多发性骨髓瘤骨病相关外周血外泌体环状RNA的骨髓微环境来源细胞，并发现单核/巨噬细胞与骨髓瘤细胞及免疫细胞间的MIF通路配体-受体相互作用可能是多发性骨髓瘤骨病发生的重要因素。

关键词：多发性骨髓瘤骨病外泌体环状RNA 单细胞测序骨髓微环境破骨细胞 PI3K-Akt信号通路 Hippo信号通路工程化外泌体

“白花蛇舌草-半枝莲”治疗原发性肝癌的机制研究:基于网络药理学、分子对接及体外实验验证

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南方医科大学学报 2025年

作者：徐朦陈丽娜吴金玉刘丽丽施美周灏张国梁广西中医药大学研究生院广西中医药大学金沙洲医院肾病科广西中医药大学第一附属医院风湿科安徽中医药大学附属医院感染科

目的通过网络药理学及分子对接探究“白花蛇舌草-半枝莲”的有效成分及其作用于原发性肝癌的主要生物过程及信号通路。方法通过TCMSP、Uniport、Genecards、String等数据库以及Cytoscape软件得出最终核心基因；通过ClueGo对药物-疾病... 详细信息

目的通过网络药理学及分子对接探究“白花蛇舌草-半枝莲”的有效成分及其作用于原发性肝癌的主要生物过程及信号通路。方法通过TCMSP、Uniport、Genecards、String等数据库以及Cytoscape软件得出最终核心基因；通过ClueGo对药物-疾病共有基因做GO、KEGG富集分析；通过Pubcham、RCSB、Autoduck把药物有效成分与最终核心基因进行分子对接，得出结合能最高药物有效成分；再通过CCK-8、细胞凋亡、Western blotting实验研究此药物有效成分对HepG2的作用。结果筛选得出最终核心基因为TP53、ESR1。GO分析显示主要生物过程为BP-regulation of apoptotic signaling pathway,negative regulation of cell population proliferation;CC-membrane raft; MF-protein kinase activity等。KEGG分析显示主要信号通路为Apoptosis,Proteoglycans in cancer,PI3K-Akt signaling pathway,Hepatitis B等。分子对接结果显示，药物有效成分与最终核心基因均可以在自然条件下进行对接，其中ESR1与ursolic acid结合能最高（-4.98 kcal/mol）。CCK-8、细胞凋亡、Western blotting实验显示ursolic acid对HepG2有明显抑制作用。结论 “白花蛇舌草-半枝莲”通过多种有效成分与原发性肝癌紧密结合，继而对原发性肝癌起到治疗作用。

关键词：白花蛇舌草半枝莲原发性肝癌网络药理学分子对接

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皮肤结核23例临床、病理特征及治疗分析

中国皮肤性病学杂志 2025年第1期 69-77页

作者：陈霄霄赵小娇游霞龙剑何平李昕李爽董锡阳周权朱建建中南大学湘雅医学院附属常德医院(常德市第一人民医院)皮肤性病科中南大学湘雅医学院附属常德医院(常德市第一人民医院)感染科中南大学湘雅医学院附属常德医院(常德市第一人民医院)科教部

目的了解皮肤结核临床、病理特点及治疗情况，为皮肤结核的临床诊疗提供依据。方法纳入2022年3月—2023年9月期间本院皮肤结核共23例患者的临床资料，对患者流行病学、临床病理特征、抗结核治疗的疗效、不良反应以及治疗结束后随访情... 详细信息

目的了解皮肤结核临床、病理特点及治疗情况，为皮肤结核的临床诊疗提供依据。方法纳入2022年3月—2023年9月期间本院皮肤结核共23例患者的临床资料，对患者流行病学、临床病理特征、抗结核治疗的疗效、不良反应以及治疗结束后随访情况进行分析。结果 23例患者中以硬红斑及丘疹性坏死性结核疹多见；12例(52.17%)既往有结核密切接触史、系统结核史。皮肤结核临床表现多样，容易误诊及延迟诊断，其中丘疹性坏死性结核疹最容易误诊(100.00%)。结核相关筛查显示结核菌素试验全部阳性(100.00%)、结核杆菌γ干扰素释放试验阳性22例(95.65%)、肺部CT有19例影像学改变(82.61%),皮肤组织病理主要以上皮细胞肉芽肿形成及多核巨细胞、混合炎症细胞浸润为主，可出现中性粒细胞脓肿，坏死、嗜酸性粒细胞及血管炎改变；最后发现伴发6例肺结核、3例陈旧性肺结核。抗结核治疗方案以2HREZ+4HR及12HRE痊愈率高，疗程不够可出现皮疹及肺结核复发，药物不良反应主要是肝功能异常、皮疹、尿酸升高及白细胞减少。结论皮肤结核需要综合病史尤其是既往结核病史或接触史、皮损特征、组织病理检査、病原学检测和免疫学指标(包括抗酸染色、结核菌素试验、γ干扰素释放实验及结核杆菌聚合酶链反应等)进行确诊，早期识别诊断皮肤结核为结核病的防治起到重要作用，足量足疗程抗结核治疗有效，需要监测不良反应。

关键词：皮肤结核硬红斑临床特征组织病理治疗分析

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核因子I-C调控人根尖牙乳头干细胞的分化

中国组织工程研究 2025年第31期29卷 6667-6673页

作者：吴越朱永娜葛翔刘樊何泽禹刘茜蚌埠医科大学口腔医学院蚌埠医科大学第二附属医院口腔科安徽省蚌埠市233000

背景:体外过表达核因子I-C基因可促进人根尖牙乳头干细胞的分化,Wnt/β-catenin信号通路的激活也可促进人根尖牙乳头干细胞的分化,而且核因子I-C对间充质干细胞中Wnt/β-catenin通路具有调节作用。然而,核因子I-C能否通过激活人根尖牙... 详细信息

背景:体外过表达核因子I-C基因可促进人根尖牙乳头干细胞的分化,Wnt/β-catenin信号通路的激活也可促进人根尖牙乳头干细胞的分化,而且核因子I-C对间充质干细胞中Wnt/β-catenin通路具有调节作用。然而,核因子I-C能否通过激活人根尖牙乳头干细胞中Wnt/β-catenin通路进而影响细胞分化,目前尚未见报道。目的:探讨核因子I-C通过Wnt/β-Catenin信号通路调控人根尖牙乳头干细胞分化的作用。方法:玻片覆盖组织块法培养人根尖牙乳头干细胞,慢病毒转染过表达核因子I-C基因。①设置对照组、空载体组和过表达核因子I-C组,Western blot检测β-Catenin、LRP5和TCF7L2的表达。②设置对照组、空载体组、过表达核因子I-C组和过表达核因子I-C+DKK-1(Wnt通路抑制剂)组,细胞成骨诱导7 d后进行碱性磷酸酶染色及活性定量,细胞成骨诱导14 d后qPCR和Western blot检测Runt相关转录因子2、牙本质涎磷蛋白、骨钙素mRNA及蛋白的表达,茜素红染色观察矿化结节形成情况。结果与结论:①与对照组、空载体组相比,过表达核因子I-C组人根尖牙乳头干细胞中Wnt/β-Catenin通路相关蛋白β-Catenin、LRP5、TCF7L2表达显著升高(P<0.01);②与对照组、空载体组相比,过表达核因子I-C组人根尖牙乳头干细胞中碱性磷酸酶活性显著升高(P<0.01),Runt相关转录因子2、牙本质涎磷蛋白、骨钙素mRNA及蛋白表达均显著升高(P<0.01),矿化结节数量显著增加(P<0.01);③与过表达核因子I-C组相比,过表达核因子I-C+DKK-1组人根尖牙乳头干细胞中碱性磷酸酶活性、Runt相关转录因子2、牙本质涎磷蛋白、骨钙素mRNA及蛋白表达显著下降(P<0.05),矿化结节数量显著减少(P<0.05)。结果表明:核因子I-C能够激活人根尖牙乳头干细胞中Wnt/β-catenin信号通路,介导人根尖牙乳头干细胞的成骨/成牙分化。

关键词：人根尖牙乳头干细胞核因子I-C Wnt 信号通路分化成骨 DKK-1 工程化干细胞

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