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白藜芦醇对AA大鼠关节成纤维样滑膜细胞凋亡诱导作用及可能机制

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中国药理学通报 2020年第5期36卷 660-665页

作者：宋先兵黄焱平方安宁杨珺周文翰王家昊瞿子庭朱浩辰李娜陈晓宇安徽医学高等专科学校人体解剖教研室合肥230061 安徽医科大学临床医学院合肥230032 安徽医科大学形态学实验中心合肥230032

目的探讨白藜芦醇(resveratrol,Res)对低浓度H2O2处理的大鼠佐剂性关节炎(adjuvant arthritis,AA)成纤维样滑膜细胞(FLS)影响,及与线粒体氧化应激蛋白去乙酰化酶3(sirtuins 3,SIRT3)、锰超氧化物歧化酶(MnSOD)的关系。方法20只SD大鼠,... 详细信息

目的探讨白藜芦醇(resveratrol,Res)对低浓度H2O2处理的大鼠佐剂性关节炎(adjuvant arthritis,AA)成纤维样滑膜细胞(FLS)影响,及与线粒体氧化应激蛋白去乙酰化酶3(sirtuins 3,SIRT3)、锰超氧化物歧化酶(MnSOD)的关系。方法20只SD大鼠,随机分为正常组、模型组,模型组足趾皮下注射弗氏完全佐剂,造模后d 28处死大鼠,检测大鼠血清氧化应激指标;免疫组织化学染色检测SIRT3、MnSOD在膝关节滑膜组织中的表达;CCK-8法观察不同浓度的H2O2,以及Res处理对FLS的增殖影响;Hoechst 33258和Western blot检测Res对低浓度H2O2处理FLS的凋亡和SIRT3、MnSOD蛋白表达的影响。结果与正常组大鼠比较,AA大鼠血清呈氧化应激状态,滑膜组织中SIRT3、MnSOD表达增加;低浓度H2O2可促进FLS增殖,Res能剂量依赖性抑制低浓度H2O2处理的增殖,增加FLS凋亡;且随着Res的剂量增加,FLS中SIRT3、MnSOD蛋白表达降低。结论低浓度H2O2可促进AA大鼠FLS生长,Res处理可抑制FLS增殖,促进FLS的凋亡,机制可能与Res抗氧化应激作用有关。

关键词：成纤维样滑膜细胞细胞增殖细胞凋亡线粒体氧化应激白藜芦醇

基于Cre-loxP重组酶系统构建肺泡Ⅱ型上皮细胞特异性敲除SENP1基因小鼠

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中国组织工程研究 2025年第14期29卷 2943-2950页

作者：杨坤章容吴越雷小平谌云川康兰董文斌西南医科大学附属医院儿童医学中心新生儿科四川省出生缺陷临床医学研究中心四川省泸州市646000

背景:前期在体外成功构建了SENP1基因沉默的人肺泡上皮细胞系,在细胞水平上研究了SENP1在高氧性肺损伤中的作用。目的:基于Cre-loxP重组酶系统构建肺泡Ⅱ型上皮细胞特异性敲除SENP1基因小鼠模型。方法:将SENP1^(flox/-)小鼠自交得到SENP... 详细信息

背景:前期在体外成功构建了SENP1基因沉默的人肺泡上皮细胞系,在细胞水平上研究了SENP1在高氧性肺损伤中的作用。目的:基于Cre-loxP重组酶系统构建肺泡Ⅱ型上皮细胞特异性敲除SENP1基因小鼠模型。方法:将SENP1^(flox/-)小鼠自交得到SENP1^(flox/flox)和SENP1^(flox/-)小鼠;将Sftpc-Cre^(+/+)小鼠与野生型小鼠交配获得更多的Sftpc-Cre^(+/-)小鼠。将Sftpc-Cre^(+/+)或子代Sftpc-Cre^(+/-)小鼠与SENP1^(flox/-)或子代SENP1^(flox/flox)小鼠进行杂交,获得SENP1^(flox/-)Sftpc-Cre^(+/-)双杂合小鼠。将SENP1^(flox/-)Sftpc-Cre^(+/-)小鼠与SENP1^(flox/flox)小鼠杂交,获得SENP1^(flox/flox)Sftpc-Cre^(+/-)小鼠。剪鼠尾提取基因组DNA,行PCR扩增,扩增产物经琼脂糖凝胶电泳确定小鼠基因型。取SENP1^(flox/flox)和SENP1^(flox/flox)Sftpc-Cre^(+/-)小鼠肺组织行免疫荧光双标实验及Western blot以验证SENP1敲除效果;取SENP1^(flox/flox)和SENP1^(flox/flox)Sftpc-Cre^(+/-)小鼠心、肝、肺、肾组织行苏木精-伊红染色以观察两组小鼠各脏器的组织形态。结果与结论:琼脂糖凝胶电泳正确筛选出SENP1^(flox/flox)Sftpc-Cre^(+/-)小鼠。免疫荧光双标实验显示,与SENP1^(flox/flox)小鼠相比,SENP1^(flox/flox)Sftpc-Cre^(+/-)小鼠肺组织中SENP1的平均荧光强度降低(P形态无明显改变。该研究利用Cre-loxP重组酶系统成功构建了肺泡Ⅱ型上皮细胞特异性敲除SENP1基因小鼠,为后续研究SENP1基因在以肺泡Ⅱ型上皮细胞为主要损伤细胞的肺疾病如支气管肺发育不良、特发性肺纤维化中的作用提供了良好的工具。

关键词： SENP1 Cre-loxP重组酶系统肺泡Ⅱ型上皮细胞条件性基因敲除小鼠

正常大鼠胃黏膜中肌球蛋白轻链激酶定性和定位观察

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中国组织化学与细胞化学杂志 2013年第1期22卷 17-19页

作者：王震陈浩邢蓓蓓黄大可李响汪渊朱华庆贾雪梅安徽医科大学第一临床学院安徽合肥230032 安徽医科大学形态学中心实验室安徽合肥230032 安徽医科大学生化教研室安徽合肥230032

目的观察正常大鼠胃组织中肌球蛋白轻链激酶的表达及分布特点。方法取11只SD正常雄性大鼠,在饥饿状态下,处死后取胃组织。通过免疫组化染色,观察正常大鼠胃组织中MLCK的表达及分布。结果 MLCK在黏膜肌层、肌层和黏膜下层血管壁平滑肌均... 详细信息

目的观察正常大鼠胃组织中肌球蛋白轻链激酶的表达及分布特点。方法取11只SD正常雄性大鼠,在饥饿状态下,处死后取胃组织。通过免疫组化染色,观察正常大鼠胃组织中MLCK的表达及分布。结果 MLCK在黏膜肌层、肌层和黏膜下层血管壁平滑肌均有大量表达;在胃底腺中,MLCK主要表达于壁细胞和主细胞胞浆内。结论 MLCK不仅存在于平滑肌细胞内,还分布于胃底腺壁细胞和主细胞内,可能参与胃底腺腺细胞的分泌活动。

关键词： MLCK 免疫组织化学胃大鼠

心肌缺血晚期再灌注后的心肌损伤及其与核因子-κB的关系

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临床心血管病杂志 2007年第5期23卷 371-374页

作者：陈莉马礼坤胡章乐余华贾雪梅安徽医科大学附属安徽省立医院心内科合肥230001 安徽医科大学形态学教研室

目的:研究心肌缺血晚期再灌注后的心肌损伤现象及其与核因子(NF)-κB的关系。方法:32只家兔随机分为4组(每组8只):假手术组(S组)、持续缺血组(I组)、晚期再灌注组(I/R组)、PDTC干预组(P组),建立体内心肌缺血再灌注动物模型。S组冠状动... 详细信息

目的:研究心肌缺血晚期再灌注后的心肌损伤现象及其与核因子(NF)-κB的关系。方法:32只家兔随机分为4组(每组8只):假手术组(S组)、持续缺血组(I组)、晚期再灌注组(I/R组)、PDTC干预组(P组),建立体内心肌缺血再灌注动物模型。S组冠状动脉旷置6h,I组冠状动脉持续结扎6h,I/R组结扎冠状动脉3h后再灌注3h,P组结扎冠状动脉3h后再灌注3h,并于再灌注前10min静脉注入PDTC(200mg/kg)。6h后处死动物取心脏组织分别检测超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽还原酶(GR)含量,免疫组化指标NF-κB、IκBα,凋亡指数(AI)。结果:与S组相比,I/R组、P组和I组的SOD、GR降低,MDA、NF-κB、IκBα、AI升高;I/R组与I组相比,SOD、GR降低,MDA、NF-κB、IκBα、AI升高;P组与I/R组相比SOD、GR、IκBα升高,MDA、NF-κB、AI降低;差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:心肌缺血晚期再灌注可导致梗死边缘区心肌细胞凋亡增加,提示存在再灌注损伤现象。氧化应激增强、NF-κB的过度激活可能是导致晚期再灌注损伤的重要因素。

关键词：心肌再灌注损伤核因子-kB 吡咯烷二硫氨基甲酸酯

脓毒症患者辅助性T细胞17和CD4^＋CD25^＋调节性T细胞表达及血必净注射液的干预作用

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中国危重病急救医学 2011年第7期23卷 430-434页

作者：邵敏刘宝王锦权陶晓根周树生金魁张翠萍安徽医科大学附属省立医院ICU 合肥230001 安徽医科大学附属省立医院中心实验室合肥230001

目的观察脓毒症患者外周血辅助性T细胞17（Thl7）及CD4^＋CD25^＋调节性T细胞（Treg）的水平，并探讨其意义及血必净注射液的干预作用。方法①将64例重症监护病房（ICU）脓毒症患者按疾病严重程度分为脓毒症组（26例）、严重脓毒症组（2... 详细信息

目的观察脓毒症患者外周血辅助性T细胞17（Thl7）及CD4^＋CD25^＋调节性T细胞（Treg）的水平，并探讨其意义及血必净注射液的干预作用。方法①将64例重症监护病房（ICU）脓毒症患者按疾病严重程度分为脓毒症组（26例）、严重脓毒症组（21例）、脓毒性休克组（17例），同时选取18例健康体检者作为对照组。观察不同严重程度脓毒症患者外周血Thl7和CD4^＋CD25^＋Treg的表达及其与病情严重程度的关系。②按随机原则将64例患者分为常规治疗组（25例，给予常规集束化治疗）和血必净治疗组（39例，在常规治疗基础上加用血必净注射液50ml静脉滴注，每日2次），两组均以7d为1个疗程。入ICU当日和治疗7d用流式细胞术检测外周血Thl7及CD4^＋CD25^＋Treg表达，观察血必净注射液的干预作用。结果①健康对照组Thl7表达率为（O．84±0．29）％，CD4^＋CD25^＋Treg表达率为（O．43±0．20）％；脓毒症患者细胞表达均较健康对照组明显升高（均P〈0．05），其中Thl7表达以严重脓毒症组最高[（3．18±0．84）％]，CD4^＋CD25^＋Treg表达以脓毒性休克组最高[（3．28±0．76）％]。脓毒症患者CD4^＋CD25^＋Treg与急性生理学与慢性健康状况评分系统Ⅱ（APACHEⅡ）评分和血乳酸均呈正相关（r1＝0．519，r2＝0．451，均P＝0．01）。②与常规治疗组比较，血必净注射液能更有效降低脓毒症患者Thl7和CD4^＋CD25^＋Treg的异常表达CThl7：（1．72±0．69）％比（2．35±0．81）％，CD4^＋CD25^＋Treg：（1．78±1．00）％比（2．300．85）％，均P〈0．053，纠正免疫平衡紊乱，缩短住ICU时间[（4．7±2．6）d比（7．5±4．3）d，P＝0．0023，使脓毒症患者28d病死率有降低趋势（20．5％比28．0％，P〉0．05）。结论脓毒症患者外周血Thl7和CD4^＋CD25^＋Treg表达增加，且与病情严重程度呈正相关，提示Thl7和CD4^＋CD25^＋Treg在脓毒症发生发展的免疫机制中可能起着重要作用。血必净注射液能有效降低脓毒症患者Thl7和CD4^＋CD25^＋Treg的异常表达，有降低脓毒症患者病死率的趋势。

关键词：脓毒症免疫平衡辅助性T细胞17 CD4^+CD25^+调节性T细胞血必净注射液

丝裂霉素C对兔准分子激光上皮下角膜磨镶术后角膜haze形成的影响

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安徽医科大学学报 2006年第3期41卷 266-269页

作者：刘杰陈逖朱美玲陶黎明范伟杰汪永吴学平陈柯安徽医科大学第一附属医院眼科合肥230022 安徽医科大学形态学中心实验室合肥230022 安徽医科大学附属省立医院病理科合肥230022

目的探讨丝裂霉素C(MMC)对兔准分子激光上皮下角膜磨镶术(LASEK)后角膜雾状混浊(haze)的影响。方法对27只青紫兰兔双眼行LASEK手术,术后54眼随机分为3组,即0·02%MMC治疗组(18眼)、0·1%氟米龙治疗组(18眼)和空白对照组(18眼)。术后用... 详细信息

目的探讨丝裂霉素C(MMC)对兔准分子激光上皮下角膜磨镶术(LASEK)后角膜雾状混浊(haze)的影响。方法对27只青紫兰兔双眼行LASEK手术,术后54眼随机分为3组,即0·02%MMC治疗组(18眼)、0·1%氟米龙治疗组(18眼)和空白对照组(18眼)。术后用裂隙灯显微镜观察角膜haze的形成情况;分别于1周、1月、2月取兔眼角膜,行光镜和透射电镜检查。结果术后1周、1月、2月,丝裂霉素C组角膜haze明显轻于对照组(P0·05),三组间角膜上皮愈合时间差异无显著性(P>0·05)。结论LASEK术后MMC可抑制角膜基质成纤维细胞的增生及胶原纤维的合成,减少haze的形成,且无明显副作用,是一种有效抑制haze形成的药物。

关键词：丝裂霉素/治疗作用角膜混浊/药物疗法

恶性腹腔积液中内皮细胞的检测及其与临床疗效相关性的初步研究

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肿瘤 2015年第2期35卷 176-182页

作者：袁幸彭登付李庆胡冰安徽医科大学附属省立医院肿瘤化疗科安徽合肥230001 安徽医科大学附属省立医院中心实验室安徽合肥230001

目的：观察腹腔内灌注重组人血管内皮抑素联合5-氟尿嘧啶治疗恶性腹腔积液的临床疗效,检测治疗前后腹腔积液中内皮细胞数量的变化,探讨内皮细胞在恶性腹腔积液治疗中的应用价值。方法：39例恶性腹腔积液患者接受腹腔内重组人血管内皮抑... 详细信息

目的：观察腹腔内灌注重组人血管内皮抑素联合5-氟尿嘧啶治疗恶性腹腔积液的临床疗效,检测治疗前后腹腔积液中内皮细胞数量的变化,探讨内皮细胞在恶性腹腔积液治疗中的应用价值。方法：39例恶性腹腔积液患者接受腹腔内重组人血管内皮抑素联合5-氟尿嘧啶灌注治疗2个周期,观察临床疗效、生活质量的改善情况以及不良反应。应用流式细胞术检测治疗前后腹腔积液中内皮细胞百分率的变化。结果：39例患者的客观有效率为43.6%（17/39）,生活质量改善率为53.8%（21/39）。3～4级不良反应较少,包括白细胞减少（5.1%,2/39）、血小板减少（2.6%,1/39）、贫血（5.1%,2/39）、恶心（10.3%,4/39）和腹泻（2.6%,1/39）。临床治疗有效患者治疗前恶性腹腔积液中的内皮细胞百分率[（0.22±0.06）%]明显高于治疗后[（0.12±0.08）%],差异有统计学意义（P=0.005）;生活质量改善患者治疗前恶性腹腔积液中的内皮细胞百分率[（0.19±0.08）%]也明显高于治疗后[（0.13±0.08）%],差异有统计学意义（P=0.032）。临床治疗无效者和生活质量无改善患者治疗前后恶性腹腔积液中的内皮细胞百分率差异均无统计学意义（P=0.114,P=0.359）。结论：腹腔内灌注重组人血管内皮抑素联合5-氟尿嘧啶可以有效地控制恶性腹腔积液,并且改善患者的生活质量。恶性腹腔积液中游离的内皮细胞可能成为一种较好的疗效预测指标。

关键词：恶性腹腔积液内皮细胞重组人血管内皮抑制素

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IL-15在寻常型银屑病患者皮损中的表达

安徽医科大学学报 2006年第4期41卷 450-453页

作者：张国龙张胜权严开林吴学平范星王剑贾雪梅杨森刘建军张学军安徽医科大学皮肤病研究所安徽医科大学教育部重要遗传病基因资源与利用重点实验室安徽医科大学形态学中心实验室合肥230032

目的从mRNA及蛋白质水平研究白介素15(IL-15)在寻常型银屑病患者皮损及非皮损皮肤中的表达,探讨其在银屑病发病中的作用。方法采用RT-PCR和免疫组化法对28例寻常型银屑病患者皮损及非皮损皮肤中IL-15的表达情况进行了检测,同时以10例正... 详细信息

目的从mRNA及蛋白质水平研究白介素15(IL-15)在寻常型银屑病患者皮损及非皮损皮肤中的表达,探讨其在银屑病发病中的作用。方法采用RT-PCR和免疫组化法对28例寻常型银屑病患者皮损及非皮损皮肤中IL-15的表达情况进行了检测,同时以10例正常人皮肤作为对照。结果2种IL-15前体蛋白的mRNA在所有皮肤标本中都有表达,银屑病皮损中IL-15mRNA的表达明显高于非皮损处皮肤(P0.05)。免疫组化结果显示:IL-15低表达于非皮损和正常皮肤的基底细胞层,而在银屑病皮损处高表达,且表达范围可达表皮全层及真皮乳头层。皮损处IL-15的表达明显高于非皮损(P0.05)。结论寻常型银屑病的皮损中高表达IL-15,在疾病的发生中可能起一定的作用。

关键词：银屑病/病理学白细胞介素15 免疫组织化学逆转录聚合酶链反应

钼盐涂覆-无火焰原子吸收法测定肿瘤患者血清中微量铝的研究

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光谱学与光谱分析 1998年第1期18卷 81-84页

作者：卜海富孙昕安徽医科大学附属医院肿瘤实验室

用钼盐涂覆石墨管并以Ｋ２Ｃｒ２Ｏ７和ＴｒｉｔｏｎＸ－１００为基体改进剂，ＧＦＡＡＳ法测定肿瘤患者血清中微量铝，大幅度提高测定灵敏度和准确度。避免了沾污。特征浓度２１．１５ｐｇ／０．００４４ＡＳ。加标平均回收率１０４．... 详细信息

用钼盐涂覆石墨管并以Ｋ２Ｃｒ２Ｏ７和ＴｒｉｔｏｎＸ－１００为基体改进剂，ＧＦＡＡＳ法测定肿瘤患者血清中微量铝，大幅度提高测定灵敏度和准确度。避免了沾污。特征浓度２１．１５ｐｇ／０．００４４ＡＳ。加标平均回收率１０４．９２％。相对标准偏差小于８．１７％。

关键词：血清钼涂覆管 GFAAS 铝肿瘤患者