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敲除PAMM基因对小鼠白色和棕色脂肪组织基因表达的影响

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中国病理生理杂志 2024年第4期40卷 697-705页

作者：孙雪荣徐明锋吴洪福梁杰吴志远陈露珠和文奕李伟玲张之炜刘新光史玉仓广东医科大学广东省医学分子诊断重点实验室衰老研究所广东东莞523808 广东医科大学生理学教研室广东湛江524023 广东医科大学生理学教研室广东东莞523808 广东医科大学附属医院整形外科广东湛江524001 广东医科大学药学院广东东莞523808 广东医科大学医学技术学院广东东莞523808 广东医科大学第二临床医学院广东东莞523808

目的:巨噬细胞集落刺激因子诱导单核细胞活化的类过氧化物酶2(peroxiredoxin-like 2 activated in M-CSF stimulated monocytes,PAMM)是一种具有抗炎、抗氧化功能的蛋白,在脂肪组织中高表达,本文拟利用基因敲除小鼠,探究PAMM对白色和棕... 详细信息

目的:巨噬细胞集落刺激因子诱导单核细胞活化的类过氧化物酶2(peroxiredoxin-like 2 activated in M-CSF stimulated monocytes,PAMM)是一种具有抗炎、抗氧化功能的蛋白,在脂肪组织中高表达,本文拟利用基因敲除小鼠,探究PAMM对白色和棕色脂肪组织形态及基因表达等的影响,以期为其功能研究提供新思路。方法:利用CRISPR-Cas9等技术构建PAMM基因敲除(knockout,KO)小鼠,用野生型(wild-type,WT)小鼠作为对照。收集腹股沟皮下白色脂肪组织(inguinal adipose tissue,IAT)和背部棕色脂肪组织(brown adipose tissue,BAT),通过HE染色观察组织形态,利用RNA-seq和RT-qPCR检测相关基因的表达。结果:通过基因组PCR及测序,证明基因敲除小鼠构建正确。敲除PAMM后IAT和BAT形态无明显变化,但E2F靶点、未折叠蛋白反应等基因集在IAT或BAT中富集。比较WT和KO小鼠组织,发现33个基因的变化趋势在IAT和BAT中保持一致;而仅在IAT中出现变化的基因,分布在胞外、胞膜等部位,参与免疫和趋化反应等,与钙信号通路等相关;仅在BAT中出现变化的基因,分布在胞外基质、胞核等部位,参与葡萄糖稳态、生物节律等过程。RT-qPCR检测钙通路及生物节律相关基因,变化趋势与测序结果类似。本文还观察了敲除PAMM对IAT和BAT之间差异表达基因的影响,发现WT和KO小鼠BAT/IAT的差异基因和通路大多相同,但也有部分基因和通路发生了变化。结论:PAMM敲除对IAT和BAT的形态结构无明显影响,但显著影响了二者的基因表达及相关信号通路,还可能影响IAT和BAT之间的相互作用。

关键词：白色脂肪组织棕色脂肪组织 PAMM基因基因敲除

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难培养微小小单胞菌培养基改良

微生物学报 2024年第9期64卷 3547-3558页

作者：凌慧常宇骁李东王立坤张欢覃小铭谭亚芳毕玉晶安徽医科大学基础医学院安徽合肥230000 军事医学研究院病原微生物与生物安全全国重点实验室北京100071

【目的】改良微小小单胞菌(Parvimonas micra)培养基组分,提高活菌量,探究一套模型化的难培养细菌培养方法。【方法】选取一株微小小单胞菌,对其进行生化分析,初步筛选出可能促进微小小单胞菌生长的底物,对每种底物分别设置3个浓度并采... 详细信息

【目的】改良微小小单胞菌(Parvimonas micra)培养基组分,提高活菌量,探究一套模型化的难培养细菌培养方法。【方法】选取一株微小小单胞菌,对其进行生化分析,初步筛选出可能促进微小小单胞菌生长的底物,对每种底物分别设置3个浓度并采用单因素试验的方法进行验证,对筛选出的增菌效果明显的底物进行浓度优化,得到新的培养基。【结果】单因素试验筛选后得到增菌效果明显的底物为L-丝氨酸、L-苏氨酸、甘氨酰-L-谷氨酰胺。在本优化体系下,培养基中添加4.8g/L的L-丝氨酸后微小小单胞菌活菌量可达3.6×10^(8)CFU/mL,较胰蛋白胨大豆肉汤(tryptone soya broth,TSB)培养基+胎牛血清(fetal bovine serum,FBS)基础培养基活菌量提高了4.2倍;将改良后的培养基应用于其他微小小单胞菌菌株,培养结果显示改良后的培养基在菌种水平上有良好地促进微小小单胞菌生长的效果。【结论】本研究表明利用生化鉴定板筛选难培养细菌培养基补充剂,是一种快捷、高效的筛选手段,并为难培养细菌的扩大培养提供参考。

关键词：微小小单胞菌难培养细菌培养基改良

结核分枝杆菌耐热抗原(MTB-HAg)对γδ T细胞影响的研究进展

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细胞与分子免疫学杂志 2024年第2期40卷 186-190页

作者：魏婧袁美丽王楚彤李柏青许涛汪洪涛蚌埠医科大学检验医学院免疫学教研室安徽蚌埠233030 蚌埠医科大学慢性疾病免疫学基础与临床安徽省重点实验室安徽蚌埠233030 蚌埠医科大学检验医学院临床检验诊断学教研室安徽蚌埠233030

结核分枝杆菌耐热抗原(MTB-HAg)是从结核分枝杆菌(MTB)减毒菌株H37Ra经121℃,20 min,高温高压处理后从菌体释放到上清液中一种多肽类抗原。γδ T细胞是一类广泛分布于非淋巴组织的非常规T细胞,可分泌肿瘤坏死因子α(TNF-α)、γ干扰素(... 详细信息

结核分枝杆菌耐热抗原(MTB-HAg)是从结核分枝杆菌(MTB)减毒菌株H37Ra经121℃,20 min,高温高压处理后从菌体释放到上清液中一种多肽类抗原。γδ T细胞是一类广泛分布于非淋巴组织的非常规T细胞,可分泌肿瘤坏死因子α(TNF-α)、γ干扰素(IFN-γ)等细胞因子,在抗MTB感染的免疫应答中发挥重要作用。MTB-HAg可在体外有效刺激γδ T细胞增殖活化,使其更加高效地参与抗结核感染的过程,故MTB-HAg可作为设计新型结核疫苗或药物的潜在靶点。但由于MTB-HAg组成复杂,具体是何种成分刺激γδ T细胞发挥抗MTB感染功能还不清楚。

关键词：结核分枝杆菌耐热抗原(MTB-HAg) γδT细胞增殖综述

LINC00324对黑色素瘤细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响及分子机制

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山西医科大学学报 2024年第1期55卷 29-35页

作者：马诗淇丁毅李敏王梦慈张思宇冯树梅新疆医科大学基础医学院组织学与胚胎学教研室新疆地方病分子生物学重点实验室乌鲁木齐830011 南京医科大学基础医学院病理学教研室新疆第二医学院基础医学院解剖学教研室

目的探讨LINC00324对黑色素瘤增殖、迁移和侵袭能力的影响及分子机制。方法基于基因表达谱交互式分析平台(GEPIA)数据库分析LINC00324在黑色素瘤组织和癌旁组织中的表达水平以及对患者预后的影响。在黑色素瘤细胞株SK-MEL-2中转染LINC00... 详细信息

目的探讨LINC00324对黑色素瘤增殖、迁移和侵袭能力的影响及分子机制。方法基于基因表达谱交互式分析平台(GEPIA)数据库分析LINC00324在黑色素瘤组织和癌旁组织中的表达水平以及对患者预后的影响。在黑色素瘤细胞株SK-MEL-2中转染LINC00324过表达载体和siRNA,并标记为过表达阴性对照组(NC组)、过表达组(OE组)、沉默阴性对照组(si-NC组)和沉默组(si-LINC00324组);实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测LINC00324转染效率以及Beclin1、LC3A/B、Bcl-2的mRNA表达水平;CCK-8实验检测细胞增殖能力;划痕实验检测细胞迁移能力;Transwell实验检测细胞侵袭能力;Western blot实验检测关键蛋白表达水平。结果与癌旁组织相比,LINC00324在黑色素瘤组织中低表达(P<0.05),且低表达患者的预后较差。qRT-PCR结果显示,LINC00324的过表达载体和siRNA在黑色素瘤细胞中转染成功(P<0.01)。与NC组相比,OE组SK-MEL-2细胞增殖、迁移以及侵袭能力明显减弱(P<0.01);与si-NC组相比,si-LINC00324组SK-MEL-2细胞增殖、迁移能力提高(P<0.01)。与NC组相比,OE组细胞中Beclin1、LC3A/B、Bcl-2的mRNA水平下调(P<0.01);与si-NC组相比,si-LINC00324组细胞中Beclin1、LC3A/B、Bcl-2的mRNA水平上调(P<0.01)。Western blot结果显示,与NC组相比,OE组细胞中p62和Bcl-2的蛋白水平上调(P<0.05),LC3BⅡ蛋白水平下调(P<0.01);与si-NC组相比,si-LINC00324组细胞中p62和Bcl-2的蛋白水平下调(P<0.05),LC3BⅡ蛋白水平上调(P<0.05)。结论LINC00324在黑色素瘤组织和细胞系中低表达,可以通过上调Bcl-2抑制自噬影响黑色素瘤细胞的增殖、迁移和侵袭能力。

关键词：黑色素瘤 LINC00324 自噬 Bcl-2 细胞增殖细胞迁移细胞侵袭

GGA2在囊泡转运和相关疾病中作用的研究进展

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中国病理生理杂志 2024年第3期40卷 543-550页

作者：陶逸豪拜尔娜·木太力甫祁正芳刘昶吾田园韩洋洋新疆医科大学基础医学院生物学教研室新疆乌鲁木齐830017 新疆地方病分子生物学重点实验室新疆乌鲁木齐830017 西安交通大学医学部基础医学院人体解剖与组织胚胎学系陕西西安710061

囊泡转运(vesicle transport)是大分子及颗粒性物质在细胞器间的跨膜转运方式,参与细胞多项重要的生命活动,如激素分泌、神经递质的释放及信息传递、天然免疫等,反式高尔基体网络(trans-Golgi network,TGN)-内体(endosome)运输作为其中... 详细信息

囊泡转运(vesicle transport)是大分子及颗粒性物质在细胞器间的跨膜转运方式,参与细胞多项重要的生命活动,如激素分泌、神经递质的释放及信息传递、天然免疫等,反式高尔基体网络(trans-Golgi network,TGN)-内体(endosome)运输作为其中一条途径,参与跨膜蛋白回收和重复利用[1]。TGN-内体运输缺陷引起的蛋白平衡紊乱和细胞功能紊乱,与恶性肿瘤、神经退行性疾病及糖尿病等多种疾病联系密切[2],如胶质瘤细胞中转接蛋白(adaptor pro-tein,AP)复合物1σ3的减少可抑制肿瘤增殖、侵袭和迁移[3];高尔基体相关、含γ-衔接蛋白耳(gamma-adaptin ear,GAE)的ADP核糖基化因子(ADP-ribo-sylation factor,ARF)结合蛋白3(Golgi-associated GAE-containing ARF-binding protein 3,GGA3)功能丧失引起β-分泌酶1(β-secretase 1)轴突积聚导致阿尔茨海默病早期病变[4]。

关键词： GGA2蛋白囊泡转运癌症阿尔茨海默病糖尿病

安徽省儿童龋病预防服务选择偏好的异质性分析

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中国学校卫生 2024年第1期45卷 129-132页

作者：余红胡璐王丽常想想蒋加诚王丽丹徐文华安徽医科大学附属口腔医院护理部合肥230032 安徽医科大学卫生管理学院安徽医科大学卫生政策研究中心

目的了解安徽省儿童龋病预防服务选择偏好的异质性,为适龄儿童龋病预防服务的推广和普及提供循证参考。方法基于离散选择实验,采用多阶段抽样法,选择于2021年10月至2022年10月间在安徽省7个地市医院口腔门诊就医的家中有3~12岁儿童的78... 详细信息

目的了解安徽省儿童龋病预防服务选择偏好的异质性,为适龄儿童龋病预防服务的推广和普及提供循证参考。方法基于离散选择实验,采用多阶段抽样法,选择于2021年10月至2022年10月间在安徽省7个地市医院口腔门诊就医的家中有3~12岁儿童的785名家长进行面对面问卷调查,利用混合Logit模型评估受访者对儿童龋病预防服务的选择偏好及其异质性。结果纳入的4个离散选择实验(DCE)属性对儿童家长的选择偏好有统计学意义(P值均<0.05)。相比对照组,高中以上学历家长更偏好预防有效率70%~<80%、距服务点2~<5 km和<2 km且服务费用高的龋病预防服务(β值分别为0.38,1.66,1.64,0.00);男性家长更偏好有效率为70%~<80%、服务费用较高的预防服务(β值分别为0.35,0.01);<7岁儿童的家长更偏好预防有效率70%~<80%的服务(β=0.75);口腔健康无龋的儿童家长更偏好寒暑假接受预防服务(β=-0.28),患龋儿童的家长更偏好服务费用高的预防服务(β=0.00)(P值均<0.05)。结论不同教育程度、性别、孩子年龄和口腔健康状况的家长在儿童口腔龋病预防服务的选择偏好上具有异质性。应针对性地提供精准服务有助于提高适龄儿童龋病预防服务的参与度和覆盖率。

关键词：龋齿牙疾病预防选择行为儿童

Bmi-1基因杂合子缺失对小鼠脑老化的影响

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南京医科大学学报(自然科学版) 2024年

作者：何晓鑫高俊英郭吉超肖明南京医科大学江苏省神经退行性疾病重点实验室青岛滨海学院医学院基础医学教研室

目的：Bmi-1(B-cell specific moloney leukemia virus insertion site 1)基因在干细胞增殖和分化中的作用上已有大量文献报道，但其在老年小鼠脑中发挥作用尚不清楚。本研究旨在探讨Bmi-1在脑衰老中的病理生理作用。方法：选取17月龄的... 详细信息

目的：Bmi-1(B-cell specific moloney leukemia virus insertion site 1)基因在干细胞增殖和分化中的作用上已有大量文献报道，但其在老年小鼠脑中发挥作用尚不清楚。本研究旨在探讨Bmi-1在脑衰老中的病理生理作用。方法：选取17月龄的Bmi-1杂合子（Bmi-1+/-）小鼠和野生型（wild-type,WT）小鼠，进行行为观测和脑病理分析。结果：Bmi-1+/-小鼠较同窝WT小鼠出现了长期空间记忆功能的减弱（P <0.05），伴随着海马齿状回（dentate gyrus,DG）区域特异性的神经细胞发生减少（P <0.05），神经元数目降低（P <0.05）和灰质区体积缩小（P <0.05）。进一步研究发现，与WT小鼠相比，Bmi-1+/-小鼠DG区神经元线粒体出现膨大、肿胀，线粒体嵴减少的比例增加（P <0.05），且DG区神经元细胞质中脂褐素的数量明显增加（P <0.05）；此外，Bmi-1+/-小鼠DG区神经元线粒体能量代谢相关蛋白泛醌氧化还原酶核心亚基V2[NADH dehydrogenase(ubiquinone)flavoprotein 2,NDUFV2]和泛醌氧化还原酶核心亚基S3[NADH dehydrogenase(ubiquinone)ferrithionein 3,NDUFS3]的表达量均下调（P <0.05），三羧酸循环的重要催化酶二氢硫辛酰琥珀酰转移酶蛋白（dihydrolipoyl transacetylase,DLST）也显著下调（P <0.01）；同时Bmi-1调控的细胞周期因子中，细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂p27和肿瘤蛋白p53显著上调（P <0.05）。结论：Bmi-1基因的半剂量缺失抑制了老龄鼠脑内海马区新生神经元的产生，导致海马DG区体积的特异性缩小，长期记忆功能障碍，其机制可能与老化相关蛋白p27、p53表达异常和神经元线粒体变性有关。

关键词： Bmi-1 脑衰老线粒体细胞增殖氧化应激

安徽省医疗废物产生量的时空变化趋势及其影响因素

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环境工程学报 2024年第6期18卷 1713-1722页

作者：孙明珍杨婷孟晶晶李依依安徽医科大学卫生管理学院合肥230032

从省、市等不同层级视角,利用空间自相关模型,分析了安徽省医疗废物产生量的时空演变趋势。在此基础上,运用地理探测器模型分析了经济发展水平、人口状况、医疗卫生水平等相关因素对医疗废物产生量的影响程度及其交互作用,并进一步运用G... 详细信息

从省、市等不同层级视角,利用空间自相关模型,分析了安徽省医疗废物产生量的时空演变趋势。在此基础上,运用地理探测器模型分析了经济发展水平、人口状况、医疗卫生水平等相关因素对医疗废物产生量的影响程度及其交互作用,并进一步运用GM(1,1)模型对安徽省16个地级市未来4年的医疗废物产生量进行预测分析。结果表明,安徽省各地市的医疗废物产生量在空间上存在显著差异,但空间聚集效应不显著,常住人口、医院病床数、医疗卫生技术人员数和人均地区生产总值等因素对医疗废物的产生具有显著影响,其中常住人口的影响最为显著。未来,安徽省医疗废物产生量将呈现持续增长的趋势,在近年来各类突发性传染病疫情的背景下,各城市应注重加强医疗废物应急处置能力及其韧性水平提升。结果可以为医疗废物的有效管理提供有益借鉴。

关键词：医疗废物时空变化影响因素空间自相关模型地理探测器

外周血白细胞ANAPC1表达水平与冠心病的相关性及其诊断价值

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广西医科大学学报 2024年第1期41卷 67-77页

作者：张书铭张义炜杨英陈宁园黄玲潘尚领彭均华广西医科大学基础医学院病理生理学教研室南宁530021

目的:探讨外周血白细胞(PBLs)细胞周期末期促复合体亚基1(ANAPC1)表达与冠心病(CHD)的相关性及其诊断价值。方法:从GEO数据库检索基因表达数据集和单细胞RNA测序数据集观察ANAPC1在CHD患者PBLs和其他细胞中的表达情况。通过实时荧光定量... 详细信息

目的:探讨外周血白细胞(PBLs)细胞周期末期促复合体亚基1(ANAPC1)表达与冠心病(CHD)的相关性及其诊断价值。方法:从GEO数据库检索基因表达数据集和单细胞RNA测序数据集观察ANAPC1在CHD患者PBLs和其他细胞中的表达情况。通过实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测和比较70例CHD患者与对照人群ANAPC1的表达水平。用受试者工作特征(ROC)曲线和总ROC(SROC)曲线评价ANAPC1对CHD的诊断价值。使用CDB数据库查找ANAPC1的潜在上游转录因子,ANAPC1差异共表达基因通过基因本体论(GO)、疾病本体论(DO)和京都基因和基因组百科全书(KEGG)进行富集分析。结果:GEO数据库分析显示,ANAPC1在CHD患者PBLs中的表达水平降低(总SMD=-0.74,95%CI:-1.36~-0.13),SROC曲线下面积为0.76,灵敏度为0.73,特异度为0.67。临床标本RT-qPCR显示,ANAPC1在CHD患者PBLs中的表达水平降低,ROC曲线下面积为0.71,灵敏度为0.80,特异度为0.61。GEO数据库查找单细胞RNA测序相关数据集发现,ANAPC1在不同时期、不同细胞中的表达量均无明显差异。上游潜在转录因子预测显示,ETS1(SMD=-0.53,95%CI:-0.99~-0.06)、GATA3(SMD=-0.46,95%CI:-0.87~-0.06)可能正向调控ANAPC1的表达,IRAK1(SMD=0.42,95%CI:0.07~0.77)、ERF(SMD=0.27,95%CI:-0.03~0.51)可能负向调控ANAPC1的表达。DO富集分析提示,ANAPC1差异负相关共表达基因与动脉粥样硬化及动脉粥样硬化性心脏病等疾病相关。结论:ANAPC1在CHD患者PBLs中的表达下调与CHD发生、发展呈正相关关系,且对CHD具有一定的诊断价值。

关键词：细胞周期末期促复合体亚基1 冠心病单细胞RNA测序分析