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EGCG对小鼠糖尿病肾病的影响及对NLRP3通路的调控作用

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中国老年学杂志 2024年第17期 4306-4311页

作者：张献彩刘子宸王艳盛李永刚邢台医学高等专科学校解剖与组胚教研室

目的探究表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对小鼠糖尿病肾病(DN)的缓解作用及其对NOD样受体热蛋白结构域(NLRP)3通路的影响。方法雄性大鼠随机分为对照(Control)组、糖尿病肾病(DN)组、二甲双胍(Metformin)组、EGCG 50、100、200 mg/k... 详细信息

目的探究表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对小鼠糖尿病肾病(DN)的缓解作用及其对NOD样受体热蛋白结构域(NLRP)3通路的影响。方法雄性大鼠随机分为对照(Control)组、糖尿病肾病(DN)组、二甲双胍(Metformin)组、EGCG 50、100、200 mg/kg组，链脲佐菌素(STZ)腹腔注射诱导小鼠糖尿病肾病模型，在16 w内称量小鼠体质量变化，血糖仪检测空腹血糖水平，行口服葡萄糖耐量试验(OGTT),取尿液及血样，试剂盒检测24 h尿白蛋白、血肌酐和尿素氮水平，酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血胰岛素、8-羟基脱氧尿苷(OHdG)、单核细胞趋化蛋白(MCP)-1、白细胞介素(IL)-6、IL-1β、IL-18水平，取肾脏组织，试剂盒检测超氧化物歧化酶(SOD)含量，苏木素-伊红(HE)染色检测肾脏组织病理变化，末端脱氧核苷酸转移酶接到dUTP缺口末端标记测定法(TUNEL)染色检测肾脏组织细胞凋亡，Western印迹检测NLRP3、胱天蛋白酶(Caspase)-1、cleaved Caspase-3、B细胞淋巴瘤(Bcl)-2、Bcl-2相关X蛋白(Bax)表达。另设DN+EGCG、DN+MCC950、DN+MCC950+EGCG组，通过抑制NLRP3通路评估EGCG在NLRP3通路中的作用。结果与Control组相比，DN组空腹血糖水平明显升高，空腹胰岛素水平明显下降，血糖清除能力明显下降，24 h尿白蛋白、血肌酐和尿素氮水平明显升高，肾脏出现病理样改变，同时细胞凋亡增加，此外尿液8-OHdG水平明显升高，肾脏SOD含量明显减少，MCP-1、IL-6、IL-1β、IL-18水平明显升高，NLRP3和Caspase-1蛋白表达明显升高(P<0.05,P<0.01),经过二甲双胍或EGCG干预治疗后，上述指标均得到扭转。通过NLRP3抑制剂MCC950抑制NLRP3通路的激活，可抑制24 h尿白蛋白、血肌酐和尿素氮的产生，与EGCG联合使用抑制效果更为明显。结论 EGCG对小鼠糖尿病肾病的缓解作用部分与其对NLRP3通路的抑制作用有关。

关键词：糖尿病肾病表没食子儿茶素没食子酸酯 NOD样受体热蛋白结构域(NLRP)3 胱天蛋白酶1

基于生物信息分析去势抵抗性前列腺癌关键基因

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中国老年学杂志 2024年第11期44卷 2679-2683页

作者：朱宝安张军要张印坡漯河高等医学专科学校生物化学教研室漯河高等医学专科学校病理学教研室

目的基于生物信息分析去势抵抗性前列腺癌的关键基因，进而找到有效的诊断靶标和治疗方法。方法通过GEO数据库、Oncomine数据库联合分析发现潜在的关键基因受体型酪氨酸磷酸酶(PTPR)J;采用免疫组化检测去势敏感性前列腺癌和去势抵抗... 详细信息

目的基于生物信息分析去势抵抗性前列腺癌的关键基因，进而找到有效的诊断靶标和治疗方法。方法通过GEO数据库、Oncomine数据库联合分析发现潜在的关键基因受体型酪氨酸磷酸酶(PTPR)J;采用免疫组化检测去势敏感性前列腺癌和去势抵抗性前列腺癌患者肿瘤组织中PTPRJ表达水平；shRNA沉默去势抵抗性前列腺癌细胞系DU-145细胞中PTPRJ蛋白表达；采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)、细胞流式、Transwell检测沉默PTPRJ基因表达对DU-145细胞增殖、凋亡、迁移及侵袭的影响。结果通过GEO数据库生物信息学分析，发现577个基因出现差异性表达，可能与CRPC发生发展密切相关的74个基因表达上调，17个基因表达下调。使用Oncomine联合分析，与原位癌相比，PTPRJ在转移性前列腺患者中的表达显著增加(P高等级前列腺癌中的PTPRJ表达显著上调(P<0.05)。去势抵抗性前列腺癌肿瘤组织中PTPRJ蛋白表达显著高于去势敏感性前列腺癌(P<0.01);沉默PTPRJ可抑制DU-145细胞迁移和侵袭(P<0.01)。结论 PTPRJ在CRPC中高表达，PTPRJ能促进DU-145细胞迁移和侵袭；PTPRJ可能在CRPC发生发展过程中发挥重要作用，为CRPC的治疗提供潜在的治疗靶点。

关键词：生物信息分析前列腺癌受体型酪氨酸磷酸酶J

山楂叶总黄酮通过miR-21a-5p对血管紧张素Ⅱ诱导的心肌细胞肥大的影响

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中国临床药理学杂志 2024年第15期40卷 2182-2186页

作者：田林燕朱冉代聚平王佳佳张斌南阳医学高等专科学校内科教研室河南南阳473000 南阳医学高等专科学校临床实训室河南南阳473000 南阳医学高等专科学校第一附属医院心血管内科河南南阳473000 南阳医学高等专科学校第一附属医院病理科河南南阳473000

目的探讨山楂叶总黄酮对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的心肌肥大的影响,及其可能作用机制。方法将H9c2细胞分为对照组(正常培养),模型组(100 nmol·L^(-1)AngⅡ处理24 h),低、中、高剂量实验组(先给予100 nmol·L^(-1)AngⅡ处理24 h后,再分... 详细信息

目的探讨山楂叶总黄酮对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的心肌肥大的影响,及其可能作用机制。方法将H9c2细胞分为对照组(正常培养),模型组(100 nmol·L^(-1)AngⅡ处理24 h),低、中、高剂量实验组(先给予100 nmol·L^(-1)AngⅡ处理24 h后,再分别给予25、50、100 mg·L^(-1)的山楂叶总黄酮处理24 h),anti-miR-NC、anti-miR-21a-5p组(分别转染anti-miR-NC、anti-miR-21a-5p后,给予100 nmol·L^(-1)AngⅡ处理24 h),miR-NC+高剂量组和miR-21a-5p+高剂量组(分别转染miR-NC、miR-21a-5p mimics,再给予100 nmol·L^(-1)AngⅡ+100 mg·L^(-1)山楂叶总黄酮各处理24 h)。用CCK-8法和流式细胞术检测细胞活力和凋亡情况,用实时荧光定量聚合酶链反应法检测miR-21a-5p的表达水平,用蛋白质印迹法检测环氧化酶-2(COX2)/前列腺素E2(PGE2)的表达水平。结果对照组、模型组和高剂量实验组的细胞活力分别为1.03±0.09、0.51±0.05和0.93±0.08,凋亡率分别为(7.69±0.61)%、(23.04±1.82)%和(9.43±0.71)%,miR-21a-5p表达水平分别为1.00±0.09、2.43±0.18和1.09±0.08,COX2蛋白相对表达水平分别为0.42±0.03、0.85±0.08和0.40±0.04,PGE2蛋白相对表达水平分别为0.34±0.03、0.75±0.07和0.35±0.03,模型组的上述指标与高剂量实验组和对照组相比,在统计学上差异均有统计学意义(均P<0.05)。anti-miR-NC组、anti-miR-21a-5p组、miR-NC+高剂量组和miR-21a-5p+高剂量组的细胞活力分别为0.52±0.04、1.12±0.08、0.94±0.09和0.57±0.04,凋亡率分别为(23.04±1.82)%、(9.86±0.73)%、(9.47±0.64)%和(24.96±1.94)%,miR-21a-5p表达水平分别为1.00±0.10、0.43±0.04、1.00±0.09和2.12±0.18,COX2蛋白相对表达水平分别为0.86±0.05、0.39±0.04、0.41±0.03、0.78±0.07,PGE2蛋白相对表达水平分别为0.74±0.06、0.38±0.07、0.36±0.02、0.71±0.05,anti-miR-21a-5p组的上述指标与anti-miR-NC组比较,miR-21a-5p+高剂量组的上述指标与miR-NC+高剂量组比较,在统计学上差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论山楂叶总黄酮通过调控miR-21a-5p和COX2/PGE2通路的表达,从而抑制AngⅡ诱导的心肌肥大。

关键词：山楂叶总黄酮心肌肥大血管紧张素Ⅱ 细胞增殖凋亡

一测多评法同时测定丁公藤不同炮制品中7个活性成分含量

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药物分析杂志 2024年第3期44卷 395-404页

作者：杨海玲李雲妃刘振杰陆星宇潘忠旭安徽医学高等专科学校合肥230601 广西中医药大学南宁530001

目的:建立一测多评法同时测定丁公藤及其炮制品中7个活性成分含量,并分析炮制对其影响。方法:采用超高效液相色谱法(UPLC),以绿原酸为参照物,建立新绿原酸、东莨菪苷、东莨菪内酯、异绿原酸B、异绿原酸A和异绿原酸C的相对校正因子。分... 详细信息

目的:建立一测多评法同时测定丁公藤及其炮制品中7个活性成分含量,并分析炮制对其影响。方法:采用超高效液相色谱法(UPLC),以绿原酸为参照物,建立新绿原酸、东莨菪苷、东莨菪内酯、异绿原酸B、异绿原酸A和异绿原酸C的相对校正因子。分别采用外标一点法和一测多评法测定上述7个活性成分含量,比较计算值与实测值的差异,以验证一测多评法的准确性和和可行性。结果:新绿原酸、东莨菪苷、绿原酸、东莨菪内酯、异绿原酸B、异绿原酸A、异绿原酸C分别在0.028~1.420、0.019~0.956、0.027~1.324、0.014~0.720、0.017~0.824、0.010~0.500和0.013~0.672μg·μL^(-1)范围内呈现良好线性关系,平均加样回收率(n=6)分别为98.9%、99.0%、100.6%、101.2%、100.8%、101.7%和100.5%,RSD分别为1.1%、1.7%、1.5%、1.6%、0.55%、1.6%和1.5%。采用校正因子计算的7个活性成分含量值与外标法实测值之间无显著差异。不同丁公藤饮片中新绿原5个有机酸(新绿原酸、绿原酸、异绿原酸B、异绿原酸A、异绿原酸C)含量变化趋势基本一致,Y5(甘草汁-盐水煮品)含量最高,Y10(甘草汁-盐水晒品Ⅱ)含量最低,东莨菪苷含量以Y5含量最高(3.53 mg·g^(-1)),Y10最低(0.31 mg·g^(-1))。东莨菪内酯含量以Y7(甘草汁晒品Ⅰ)含量最高(1.48 mg·g^(-1)),Y3(甘草汁煮品Ⅱ)含量最低(0.30 mg·g^(-1))。结论:以绿原酸为参照物建立的一测多评法可用于丁公藤饮片质量评价,加热和加辅料炮制均对丁公藤的化学成分产生了一定影响。

关键词：丁公藤炮制东莨菪苷东莨菪内酯新绿原酸绿原酸异绿原酸一测多评法

银杏叶提取物基于Wnt/β-catenin信号通路对胶质瘤大鼠的干预效果

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中国老年学杂志 2024年第18期 4520-4523页

作者：司金春郭杨王雪莉张喆申汉威陈航陈玉升商丘医学高等专科学校外科教研室河南省人民医院神经外科商丘医学高等专科学校妇产科教研室

目的分析银杏叶提取物基于Wnt/β-连环蛋白（catenin）信号通路对胶质瘤大鼠的干预效果。方法选取SD大鼠60只，10只作为对照组，其余50只大鼠模型，将40只建模成功大鼠分为模型组、低、高剂量组、药物对照组各10只。观察大鼠病理组织... 详细信息

目的分析银杏叶提取物基于Wnt/β-连环蛋白（catenin）信号通路对胶质瘤大鼠的干预效果。方法选取SD大鼠60只，10只作为对照组，其余50只大鼠模型，将40只建模成功大鼠分为模型组、低、高剂量组、药物对照组各10只。观察大鼠病理组织、瘤体体积、抑瘤率、免疫功能指标、炎症因子、Wnt、β-catenin mRNA表达量、Wnt/β-catenin通路。结果与模型组相比，低、高剂量组、药物对照组瘤体体积明显缩小（P<0.05）;与低剂量组相比，高剂量组、药物对照组抑瘤率明显升高，且高剂量组瘤体体积明显低于药物对照组，抑瘤率明显高于药物对照组（P<0.05）。与对照组相比，模型组低、高剂量组、药物对照组CD4+/CD25+、Wnt、β-catenin mRNA及蛋白表达量、Wnt、β-catenin明显升高，CD8+、TNF-α、IL-2、IL-6明显降低（P<0.05）;与模型组相比，低、高剂量组、药物对照组CD4+/CD25+、Wnt、β-catenin mRNA及蛋白表达量、Wnt、β-catenin明显降低，CD8+、TNF-α、IL-2、IL-6明显升高，且高剂量组CD4+/CD25+、Wnt、β-catenin mRNA及蛋白表达量、Wnt、β-catenin明显低于药物对照组，CD8+、TNF-α、IL-2、IL-6明显高于药物对照组（P<0.05）。结论银杏叶提取物可降低胶质瘤大鼠瘤体体积，改善大鼠免疫功能，其作用机制可能与Wnt/β-catenin通路有关。

关键词：胶质瘤银杏叶提取物 Wnt/β-catenin信号通路免疫功能

高糖条件下氧化应激-AMPK-Cx43-NLRP3途径调节大鼠胃平滑肌细胞外基质重构的机制研究

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中国病理生理杂志 2024年第1期40卷 68-73页

作者：张高源宋佰慧包伊特格乐张默函延边大学医学院组织胚胎学教研室吉林延吉133000 长春医学高等专科学校吉林长春130031

目的:探讨高糖条件下通过氧化应激-AMP活化蛋白激酶(AMPK)-缝隙连接蛋白43(Cx43)-核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)通路对胃平滑肌细胞外基质重构的调节作用。方法:将体外培养的大鼠原代平滑肌细胞分为正常糖组、高糖组、高糖+... 详细信息

目的:探讨高糖条件下通过氧化应激-AMP活化蛋白激酶(AMPK)-缝隙连接蛋白43(Cx43)-核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)通路对胃平滑肌细胞外基质重构的调节作用。方法:将体外培养的大鼠原代平滑肌细胞分为正常糖组、高糖组、高糖+NLRP3抑制剂MCC950(15 nmol/L)组、高糖+Cx43半通道阻滞剂GAP19(100μmol/L)组、高糖+AMPK抑制剂Compound C(CC;10μmol/L)组和高糖+抗氧化剂α-硫辛酸(α-LA;100μmol/L)组,均培养48 h后检测。Western blot检测细胞中caspase-1、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、NLRP3、Cx43、转化生长因子β1(TGF-β1)、TGF-β3、金属蛋白酶组织抑制物1(TIMP-1)、嘌呤能P2X7受体(P2X7R)和磷酸化AMPK(pAMPK)蛋白水平;ELISA检测细胞培养液中腺苷三磷酸、白细胞介素1β、I型胶原(Col I)和ColⅢ含量。结果:与高糖组相比,高糖+MCC950组MMP-2和TGF-β3表达水平显著降低(P<0.01),TGF-β1和TIMP-1表达水平显著升高(P<0.01);高糖+GAP19组NLRP3和caspase-1表达水平显著降低(P<0.01),而P2X7R表达无显著差异;高糖+CC组NLRP3、caspase-1、P2X7R、总Cx43和胞膜Cx43蛋白水平,以及胞膜Cx43/胞浆Cx43比值均显著降低(P<0.01);高糖+α-LA组p-AMPK、caspase-1、NLRP3、P2X7R、总Cx43和胞膜Cx43蛋白水平,以及胞膜Cx43/胞浆Cx43比值均显著下降(P<0.05)。结论:高糖通过氧化应激-AMPK-Cx43-NLRP3通路调节Col I和ColⅢ含量,进而参与了胃平滑肌细胞外基质的重构。

关键词：糖尿病胃轻瘫胃平滑肌细胞外基质氧化应激-AMPK-Cx43-NLRP3信号通路

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基于铜死亡相关基因构建结肠腺癌临床预后模型并验证

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牡丹江医学院学报 2024年第3期45卷 31-42页

作者：林昕乐钱格格杨亚雯卢广涛王俊杰章雯陶香香陈麒霖赵森陈冰皖南医学院病理教研室安徽医学高等专科学校基础医学院安徽芜湖241002

目的旨在构建结肠腺癌(colonic adenocarcinoma,COAD)中铜死亡相关基因(Cuproptosis-related genes,CRGs)的预后模型,探讨CRGs在COAD中的表达与预后的关系。方法从TCGA数据库下载了正常和COAD患者的转录组和临床数据,并从GEO数据库下载... 详细信息

目的旨在构建结肠腺癌(colonic adenocarcinoma,COAD)中铜死亡相关基因(Cuproptosis-related genes,CRGs)的预后模型,探讨CRGs在COAD中的表达与预后的关系。方法从TCGA数据库下载了正常和COAD患者的转录组和临床数据,并从GEO数据库下载数据集GSE39582作为外部验证集。基于铜死亡相关基因表达量,对TCGA数据进行共识聚类以确定新的肿瘤亚型。采用单因素Cox回归分析、LASSO回归分析筛选预后基因并构建预后风险模型。并通过Kaplan-Meier生存分析、受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线下的面积(area under the curve,AUC)和一致性指数(concordance index,C-index)对模型进行评价。用GSE44001数据集对模型进行外部验证。基于风险评分及临床因素构建列线图,预测患者的生存率。并进行免疫浸润、GSEA分析、免疫检查点、药敏分析、肿瘤微环境和干细胞指数的研究,系统地阐述COAD中CRGs和免疫的相关性。结果21个CRGs在COAD组织及正常组织中差异表达。单变量Cox回归及Lasso回归分析确定了五个预后相关基因(SDHB,CCS,DLAT,FDX1,CP)并构建模型。Kaplan-Meier分析表明,高风险患者OS显著低于低风险患者(P<0.01),并在GEO队列中取得了验证(P<0.05)。风险模型的AUC值为0.734,表明预后值有统计学意义,模型具有一定的准确性。一致性分析和ROC结果表明,列线图模型有较好的预后预测准确性。这5个CRGs主要参与线粒体、免疫应答和代谢途径,是COAD预后的独立因素,并与免疫细胞浸润、免疫检查点以及肿瘤微环境和干细胞指数密切相关。结论构建了5个铜死亡相关基因的结肠腺癌预后模型,有可能作为未来临床实践中有效的预后标志物。

关键词：铜死亡结肠腺癌预后列线图免疫浸润药物敏感性

从类型化分析到区别判定:个人信息合理使用的逻辑进路

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湖北经济学院学报 2024年第3期22卷 122-128页

作者：高梅梅安徽医学高等专科学校合肥230601

我国《民法典》及《个人信息保护法》虽然确立了个人信息合理使用制度,但并没有明确区分不同类型的个人信息合理使用判定的具体标准,导致实践中认定结果差异较大。面对不断丰富的个人信息利用场景,应先按照“敏感性判断标准+场景应用标... 详细信息

我国《民法典》及《个人信息保护法》虽然确立了个人信息合理使用制度,但并没有明确区分不同类型的个人信息合理使用判定的具体标准,导致实践中认定结果差异较大。面对不断丰富的个人信息利用场景,应先按照“敏感性判断标准+场景应用标准”动态界定一般个人信息和敏感个人信息的类型,再结合“基本要素+敏感要素”进行合理使用区别判定。从类型化动态界定到合理使用区别判定的逻辑进路能够更精准地为不同场景的个人信息合理使用判定提供参考标准。

关键词：个人信息合理使用敏感个人信息类型化分析区别判定

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下调富含脯氨酸蛋白11表达对食管癌耐药细胞EC9706/DDP耐药性的影响及其机制

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吉林大学学报（医学版） 2024年第1期50卷 113-119页

作者：亢春彦张秀芝周慧聪陈洁河南医学高等专科学校病理学教研室河南郑州451191 郑州大学第二附属医院消化内科河南郑州450000

目的:探讨下调富含脯氨酸蛋白11(PRR11)表达对食管癌耐药细胞耐药性的影响,阐明其相关机制。方法:采用顺铂(DDP)浓度递增间断刺激人食管癌EC9706细胞建立DDP耐药细胞株EC9706/DDP,MTT法检测EC9706/DDP细胞药敏性,实时荧光定量PCR(RT-qP... 详细信息

目的:探讨下调富含脯氨酸蛋白11(PRR11)表达对食管癌耐药细胞耐药性的影响,阐明其相关机制。方法:采用顺铂(DDP)浓度递增间断刺激人食管癌EC9706细胞建立DDP耐药细胞株EC9706/DDP,MTT法检测EC9706/DDP细胞药敏性,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法和Western blotting法检测EC9706/DDP细胞及其亲本EC9706细胞中PRR11 mRNA和蛋白表达水平。将EC9706/DDP细胞分为对照组、sh-NC组(转染sh-NC)、sh-PRR11组(转染sh-PRR11)、sh-NC+DDP组(转染sh-NC后用4 mg·L^(-1)DDP处理)和sh-PRR11+DDP组(转染sh-PRR11后用4 mg·L^(-1)DDP处理),RT-qPCR法检测各组细胞中PRR11 mRNA表达水平,Western blotting法检测各组细胞中PRR11、磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)p110α、蛋白激酶B(AKT)、磷酸化AKT(p-AKT)、P-糖蛋白(P-gp)和多药耐药相关蛋白1(MRP1)蛋白表达水平,流式细胞术检测各组细胞凋亡率。结果:成功获得DDP耐药细胞株EC9706/DDP,耐药指数为7.23±0.86。与EC9706细胞比较,EC9706/DDP细胞中PRR11 mRNA和蛋白表达水平升高(P<0.05)。分别与对照组和sh-NC组比较,sh-PRR11组细胞中PRR11 mRNA和蛋白表达水平降低(P<0.05),细胞的DDP半数抑制浓度(IC50)降低(P<0.05)。与sh-NC组比较,sh-NC+DDP组和sh-PRR11组细胞中PI3K p110α、p-AKT、P-gp和MRP1蛋白表达水平降低(P<0.05),细胞凋亡率升高(P<0.05);分别与sh-NC+DDP组和sh-PRR11组比较,sh-PRR11+DDP组细胞中PI3Kp110α、p-AKT、P-gp和MRP1蛋白表达水平降低(P<0.05),细胞凋亡率升高(P<0.05)。结论:下调EC9706/DDP耐药细胞中PRR11基因的表达,可抑制耐药相关蛋白的表达,逆转对DDP耐药,并诱导细胞凋亡,其作用机制可能与抑制PI3K/AKT信号通路激活有关。

关键词：富含脯氨酸蛋白11 食管肿瘤顺铂耐药磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B信号通路

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