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生物信息学和机器学习策略识别骨关节炎炎性衰老生物标志物与临床验证

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四川大学学报（医学版） 2024年第2期55卷 279-289页

作者：周巧刘健朱艳汪元王桂珍齐亚军胡月迪安徽中医药大学第二附属医院老年病一科合肥230061 安徽中医药大学第一临床医学院合肥230012 安徽中医药大学第一附属医院风湿病科合肥230031

目的本研究旨在识别骨关节炎(osteoarthritis, OA)中炎性衰老生物标志物。方法 GEO(Gene Expression Omnibus)数据库获得年轻OA和老年OA微阵列基因谱,人类衰老基因组资源数据库(Human Aging Genome Resource,HAGR)获得衰老相关基因(agi... 详细信息

目的本研究旨在识别骨关节炎(osteoarthritis, OA)中炎性衰老生物标志物。方法 GEO(Gene Expression Omnibus)数据库获得年轻OA和老年OA微阵列基因谱,人类衰老基因组资源数据库(Human Aging Genome Resource,HAGR)获得衰老相关基因(aging-related genes, ARGs)。筛选获得年轻OA与老年OA的差异基因,再与ARGs取交集得到OA衰老相关基因。富集分析揭示OA衰老相关标志物的潜在机制。3种机器学习方法识别OA核心衰老标志物,受试者工作特征(receiver operating characteristic curve, ROC)曲线评估其诊断OA炎性衰老的能力。收集临床OA患者外周血单核细胞验证衰老相关分泌表型(senescence-associated secretory phenotype, SASP)因子和衰老标志物的表达。结果总共获得45个衰老相关标志物,主要参与对细胞衰老、细胞周期、炎症反应等的调控。3种机器方法筛选得出5个核心衰老标志物(FOXO3、MCL1、SIRT3、STAG1和S100A13)。纳入20例正常组,40例OA患者,包括年轻组和老年组各20例。与年轻组相比,老年组OA中C反应蛋白(C-reactive protein, CRP)、白细胞介素(interleukin, IL)-6、IL-1β上升,IL-4水平下降(P<0.01);FOXO3、MCL1、SIRT3 mRNA表达下降,STAG1和S100A13 mRNA表达上升(P<0.01)。Pearson相关性分析表明选定的标志物与红细胞沉降率(erythrocyte sedimentation rate, ESR)、IL-1β、IL-4、CRP、IL-6指标相关。5个核心衰老基因ROC曲线下面积均大于0.8,列线图预测模型中校正曲线的C-index为0.755,模型校准能力较好。结论 FOXO3、MCL1、SIRT3、STAG1和S100A13可作为OA炎性衰老的新型诊断分子标志物和潜在治疗靶点。

关键词：骨关节炎炎性衰老衰老相关分泌表型机器学习生物标志物

芒针透刺联合通督调神法针刺治疗卒中后疲劳：随机对照试验

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中国针灸 2024年第10期44卷 1114-1118+1124页

作者：李静周冰原程乐朱才丰周婷杨娅陈幸生刘睿王丽王金龙杨雨婷冯颜庆安徽中医药大学第一临床医学院安徽中医药大学第二附属医院老年病科安徽中医药大学第二附属医院脑病科阜阳市中医院康复科

目的：观察芒针透刺对卒中后疲劳（PSF）的影响，并探讨其可能的作用机制。方法：将64例PSF患者随机分为观察组（32例，脱落2例）和对照组（32例，脱落2例）。在西医基础治疗和康复运动的基础上，对照组采用通督调神法针刺治疗，穴取百... 详细信息

目的：观察芒针透刺对卒中后疲劳（PSF）的影响，并探讨其可能的作用机制。方法：将64例PSF患者随机分为观察组（32例，脱落2例）和对照组（32例，脱落2例）。在西医基础治疗和康复运动的基础上，对照组采用通督调神法针刺治疗，穴取百会、四神聪、神庭、风府及双侧风池，每次30 min；在对照组治疗基础上，观察组采用芒针透刺治疗，穴取至阳透大椎、神道透腰阳关、腰奇透腰阳关，每次30 min。两组均每日1次，每周6次，连续治疗4周。观察两组患者治疗前后疲劳严重程度量表（FSS）、匹兹堡睡眠质量指数（PSQI）、汉密尔顿焦虑量表（HAMA）、汉密尔顿抑郁量表（HAMD）和Fugl-Meyer运动功能评估量表（FMA）评分，采用ELISA法检测两组患者治疗前后血清白细胞介素（IL）-1β、IL-6、IL-10、超敏C反应蛋白（hs-CRP）、同型半胱氨酸（Hcy）含量，并评定临床疗效。结果：治疗后，两组患者FSS、PSQI、HAMA、HAMD评分及血清IL-1β、IL-6、hs-CRP、Hcy含量均较治疗前降低（P<0.05）,FMA评分及血清IL-10含量较治疗前升高（P<0.05）；观察组FSS、PSQI、HAMA、HAMD评分及血清IL-1β、IL-6、hs-CRP、Hcy含量低于对照组（P<0.05,P<0.01）,FMA评分、血清IL-10含量高于对照组（P<0.05）。观察组总有效率为83.3%(25/30)，高于对照组的73.3%(22/30,P<0.05)。结论：芒针透刺可改善PSF患者的疲劳、焦虑、抑郁、睡眠和运动功能，其机制可能与减轻炎性反应有关。

关键词：卒中后疲劳芒针透刺针刺通督调神炎性因子随机对照试验

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痹祺胶囊联合针刺治疗气滞血瘀型神经根型颈椎病的疗效评价

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中草药 2024年第14期55卷 4803-4810页

作者：张芬刘陆晨王怀泽刘豪华孙奎朱俊琛储诚煜王峰安徽中医药大学第二附属医院骨二科安徽合肥230061 安徽中医药大学第二附属医院骨一科安徽合肥230061 安徽中医药大学第一附属医院骨一科安徽合肥230031

目的评价口服痹祺胶囊联合针刺治疗对气滞血瘀型神经根型颈椎病的临床疗效。方法选取60例气滞血瘀型神经根型颈椎病患者,随机分为治疗组和对照组,两组各30例。对照组仅给予针刺治疗,1次/d,留针30 min;治疗组在针刺治疗的基础上,口服痹... 详细信息

目的评价口服痹祺胶囊联合针刺治疗对气滞血瘀型神经根型颈椎病的临床疗效。方法选取60例气滞血瘀型神经根型颈椎病患者,随机分为治疗组和对照组,两组各30例。对照组仅给予针刺治疗,1次/d,留针30 min;治疗组在针刺治疗的基础上,口服痹祺胶囊,4粒/次,2次/d;两组患者均治疗2周。观察两组的临床疗效及治疗前和治疗结束后2周、4周的疼痛视觉模拟评分(visual analogue score,VAS)、颈椎功能障碍指数(neck disability index,NDI)、中医证候积分、颈椎活动度。结果60例患者中共有3例脱落,最终纳入57例。治疗结束后2周,两组总有效率较接近(治疗组96.4%,对照组89.7%),而治疗结束后4周,治疗组总有效率(92.9%)显著优于对照组(65.5%)(P0.05),治疗结束后2周和4周两组患者的VAS评分均低于治疗前(P0.05),治疗结束后2周和4周两组患者的NDI均低于治疗前(P中医证候积分无明显差异(P>0.05),治疗结束后2周和4周两组患者的中医证候积分均低于治疗前(P中医证候积分明显低于对照组(P0.05),治疗结束后2周和4周两组患者的颈椎活动度均高于治疗前(P病临床疗效显著,改善颈椎功能更明显,疗效更加稳定持久。

关键词：痹祺胶囊气滞血瘀神经根型颈椎病针刺气滞血瘀

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医工转化背景下针灸发展新思路

针刺研究 2024年第8期49卷 885-892页

作者：周冰原朱才丰吴安琪程乐李静崔晓雅安徽中医药大学研究生院合肥230038 安徽中医药大学第二附属医院老年病三科合肥230061 安徽省中医药科学院针灸临床研究所合肥230061 安徽中医药大学第二附属医院脑病四科合肥230061 安徽中医药大学第二附属医院科研科合肥230061

随着医工转化医学在医学领域的价值日益凸显,针灸学与工程学协作创新已成为一种趋势。医工结合学科的模式和理念能够促进具有针灸特色的转化研究发展,包括证候演变规律、经络腧穴应用、治疗方式探索、效应机制研究及诊疗方式创新等方面... 详细信息

随着医工转化医学在医学领域的价值日益凸显,针灸学与工程学协作创新已成为一种趋势。医工结合学科的模式和理念能够促进具有针灸特色的转化研究发展,包括证候演变规律、经络腧穴应用、治疗方式探索、效应机制研究及诊疗方式创新等方面。本文提出了医工结合未来可能的研究思路、现有问题及面临的挑战,为临床进一步将“医工结合”理念推广应用于现代针灸学提供依据。

关键词：针灸医工转化新思路

艾灸治疗肝肾亏虚型类风湿关节炎量效关系研究及对疲劳状态的影响:随机对照试验

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中国针灸 2024年第9期44卷 1001-1008,1053页

作者：赵鸿芳赵会王淼朱艳安徽中医药大学研究生院合肥230012 安徽中医药大学第二附属医院老年病一科合肥230061

目的:在西药治疗基础上,观察不同频次艾灸对肝肾亏虚型类风湿关节炎(RA)患者疾病活动度及疲劳状态的影响。方法:将135例肝肾亏虚型RA患者随机分为高频艾灸组(45例,脱落3例)、低频艾灸组(45例,脱落2例)和西药组(45例,脱落2例,中止1例)。... 详细信息

目的:在西药治疗基础上,观察不同频次艾灸对肝肾亏虚型类风湿关节炎(RA)患者疾病活动度及疲劳状态的影响。方法:将135例肝肾亏虚型RA患者随机分为高频艾灸组(45例,脱落3例)、低频艾灸组(45例,脱落2例)和西药组(45例,脱落2例,中止1例)。西药组予来氟米特片口服,每日1次,每次20 mg。在西药组治疗基础上,高频艾灸组和低频艾灸组均予艾灸阿是穴和双侧肾俞、三阴交,每次15 min。高频艾灸组每日艾灸1次,每周5次;低频艾灸组隔日艾灸1次,每周3次。3组均连续治疗12周。于治疗前后观察3组患者28个关节疾病活动度(DAS28)评分、红细胞沉降率(ESR)、C反应蛋白(CRP)、类风湿因子(RF)、中医证候积分、双手平均握力(GS)、30 s坐立起身测试(STS)、起立-行走时间测试(TUG)、20 m步行测试(20MWT)、焦虑自评量表(SAS)评分、抑郁自评量表(SDS)评分,于治疗前后及治疗结束后1、3个月随访观察3组患者疲劳视觉模拟量表(VAS)评分、Bristol类风湿关节炎疲劳数值评定量表(BRAF-NRS)评分、Bristol类风湿关节炎疲劳多维度问卷(BRAF-MDQ)评分,于治疗后依据美国风湿病学会(ACR)20/50/70标准评定病情缓解情况。结果:治疗后,3组患者DAS28评分、ESR、CRP、RF、中医证候积分、TUG、20MWT、SAS评分、SDS评分均较治疗前降低(P中医证候积分、SAS评分、SDS评分均低于西药组及低频艾灸组(P中医证候积分、TUG、SAS评分、SDS评分均低于西药组(P病活动度,改善疲劳状态,其疗效与灸频呈正相关。

关键词：类风湿关节炎艾灸量效关系疾病活动度疲劳肝肾亏虚随机对照试验

黄芩清热除痹胶囊调控p53/p21信号通路延缓骨关节炎大鼠软骨细胞衰老的机制研究

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中国中药杂志 2024年第12期49卷 3330-3339页

作者：周巧刘健朱艳汪元王桂珍万磊黄旦郭锦晨齐亚军胡月迪安徽中医药大学第一附属医院安徽合肥230031 安徽中医药大学第二附属医院安徽合肥230061 安徽中医药大学安徽合肥230012

探讨黄芩清热除痹胶囊(HQC)调控肿瘤抑制蛋白53(tumor protein p53,p53)/细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂1A(cyclin-dependent kinase inhibitor 1A,p21)通路延缓骨关节炎(OA)大鼠软骨细胞衰老的机制。碘乙酸钠(MIA)联合外界风湿热环境刺... 详细信息

探讨黄芩清热除痹胶囊(HQC)调控肿瘤抑制蛋白53(tumor protein p53,p53)/细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂1A(cyclin-dependent kinase inhibitor 1A,p21)通路延缓骨关节炎(OA)大鼠软骨细胞衰老的机制。碘乙酸钠(MIA)联合外界风湿热环境刺激,诱导OA大鼠风湿热痹模型,分为正常(Con)组,OA模型(MIA)组,OA模型+风湿热刺激模型(MIA-M)组,MIA-M+HQC低(MIA-M+HQC-L)、中(MIA-M+HQC-M)、高(MIA-M+HQC-H)剂量组,MIA-M+氨基葡萄糖(MIA-M+GS)组,模型制备后灌胃30 d,苏木素-伊红(HE)和番红O固绿(SO)染色观察软骨病理变化,酶联免疫吸附(ELISA)法检测白细胞介素(IL)-1β和IL-6的表达,流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡和周期,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测基质降解酶13(MMP13)、聚蛋白多糖酶5(ADAMTS-5)、Ⅱ型胶原(COLⅡ)和转化生长因子-β(TGF-β)mRNA的表达,蛋白免疫印迹(WB)检测p53/p21通路、细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂2A(p16)、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2关联X蛋白(Bax)蛋白的表达。Con组大鼠关节软骨表面光滑平整,潮线光滑平整;MIA组和MIA-M组软骨层破坏明显,软骨基质减少,MIA-M组情况更严重。HQC高剂量组和MIA-M+GS组软骨表面基本完整,分层清晰。与MIA-M+HQC-H组相比,低、中剂量Mankin′s评分较高,MIA-M+GS组变化不明显。与Con组相比,MIA和MIA-M组软骨细胞G_1的比例升高,S期、G_2期比例下降,细胞凋亡率增加;与MIA-M组相比,HQC各剂量组以浓度依赖的方式抑制细胞凋亡,促进增殖;与MIA-M+HQC-H组相比,高剂量较中、低剂量作用更显著,与MIA-M+GS组相比差异无统计学意义。与Con组相比,MIA和MIA-M组IL-1β和IL-6升高,MMP13和ADAMTS-5 mRNA水平升高,p53、p21、p16和Bax蛋白升高,COLⅡ、TGF-β mRNA水平下降;与MIA-M组相比,HQC和GS药物干预后IL-1β和IL-6下降,MMP13和ADAMTS-5 mRNA、p53、p21、Bax和p16蛋白水平下降,Bcl-2升高;与MIA-M+HQC-H组相比,这些指标改善优于HQC低、中剂量组,与MIA-M+GS组差异不明显。HQC延缓MIA诱导的OA大鼠软骨细胞衰老,抑制炎症反应和细胞外基质(ECM)降解,其机制可能与抑制p53/p21通路有关。

关键词：黄芩清热除痹胶囊骨关节炎风湿热模型细胞衰老 p53/p21

新风胶囊抑制软骨细胞炎症和细胞外基质降解:基于调控miR-502-5p/TRAF2/NF-κB轴

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南方医科大学学报 2024年第1期44卷 108-118页

作者：周巧刘健万磊朱艳齐亚军胡月迪安徽中医药大学第二附属医院安徽合肥230061 安徽中医药大学第一附属医院安徽合肥230031 安徽中医药大学安徽合肥230012

目的探讨新风胶囊(XFC)对白介素(IL)-1β诱导的软骨细胞功能的影响及作用机制。方法构建IL-1β诱导的软骨细胞炎症模型;SD大鼠灌胃制备XFC含药血清。细胞增殖实验(CCK-8)和流式细胞术筛选最佳XFC含药血清浓度;双荧光素酶报告分析miR-502... 详细信息

目的探讨新风胶囊(XFC)对白介素(IL)-1β诱导的软骨细胞功能的影响及作用机制。方法构建IL-1β诱导的软骨细胞炎症模型;SD大鼠灌胃制备XFC含药血清。细胞增殖实验(CCK-8)和流式细胞术筛选最佳XFC含药血清浓度;双荧光素酶报告分析miR-502-5p和TRAF2的靶向关系。构建miR-502-5p抑制表达质粒(inhibitor)及阴性对照组,转染至软骨细胞中。分为对照组(NC),IL-1β组,XFC组,IL-1β+NC-inhibitor,IL-1β+miR-502-5pinhibitor,IL-1β+miR-502-5pinhibitor+XFC最佳含药血清组,酶联免疫吸附试验(ELASA)检测IL-1β、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、IL-4、IL-10的水平。逆转录PCR(RT-PCR)、蛋白质免疫印迹实验(WB)、免疫荧光法检测Ⅱ型胶原α1(COL2A1)、基质金属蛋白酶13(MMP13)、软骨蛋白聚糖抗体(ADAMTS5)和miR-502-5p/TRAF2/NF-κB基因的表达。结果与NC组相比,IL-1β组中软骨细胞活力下降,细胞凋亡率升高,且miR-502-5p、IL-4、IL-10和COL2A1表达下降,IL-1β、TNF-α和ADAMTS5、MMP13、TRAF2、NF-κB p65表达升高(P<0.05)。筛选得出20%XFC为最佳含药血清浓度。与IL-1β组相比,XFC含药血清干预后,软骨细胞活力升高,细胞凋亡率下降,IL-1β、TNF-α、ADAMTS5、MMP13、TRAF2、NF-κBp65表达下降,miR-502-5p、IL-4、IL-10和COL2A1表达升高(P<0.05)。与NC-inhibitor相比,转染miR-502-5p inhibitor后,IL-1β、TNF-α、ADAMTS5、MMP13、TRAF2、NF-κB p65表达升高,miR-502-5p、IL-4、IL-10和COL2A1表达下降;与miR-502-5pinhibitor相比,将miR-502-5pinhibitor转染的软骨细胞和最佳XFC含药血清共培养后,XFC含药血清能逆转miR-502-5p抑制状态对软骨细胞炎症和ECM的影响。结论XFC抑制软骨细胞炎症、细胞外基质降解,减轻IL-1β诱导的软骨细胞损伤,其机制可能是通过调节miR-502-5p/TRAF2/NF-κB轴。

关键词： miR-502-5p 骨关节炎新风胶囊炎症细胞外基质

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基于Mas/PKA/CREB通路探讨颈椎横突尖针刺法治疗后循环缺血性眩晕模型大鼠的作用机制

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北京中医药大学学报 2024年第2期47卷 288-296页

作者：欧小燕柳刚杨丽芳文林月汪生志李娜杨骏张闻东安徽中医药大学研究生院合肥230031 安徽中医药大学第二附属医院安徽中医药大学第一附属医院

目的基于Mas原癌基因(Mas)/蛋白激酶A(PKA)/环磷腺苷效应元件结合蛋白(CREB)通路探讨颈椎横突尖针刺法对后循环缺血性眩晕(PCIV)模型大鼠的作用机制。方法将32只雄性SD大鼠按照随机数字表法分为假手术组、模型组、尼莫地平组、电针组,... 详细信息

目的基于Mas原癌基因(Mas)/蛋白激酶A(PKA)/环磷腺苷效应元件结合蛋白(CREB)通路探讨颈椎横突尖针刺法对后循环缺血性眩晕(PCIV)模型大鼠的作用机制。方法将32只雄性SD大鼠按照随机数字表法分为假手术组、模型组、尼莫地平组、电针组,每组各8只。除假手术组外,其余各组大鼠均结扎右侧颈总动脉(CCA)和锁骨下动脉(SCA)建立PCIV模型,假手术组仅剥离右侧CCA和SCA。尼莫地平组大鼠灌胃尼莫地平混悬液(12 mg/kg);电针组大鼠于第2颈椎(C2)、第4颈椎(C4)、第6颈椎(C6)横突尖针刺,于双侧C2、C6进行电针治疗,20 min/次;假手术组和模型组不予任何干预措施,连续14 d。观察各组大鼠右侧前庭神经核脑血流量、脑血流量下降率及跳台躲避时间,采用TUNEL染色法观察右侧脑干前庭神经核细胞凋亡情况,蛋白质印迹法检测右侧脑干前庭神经核Mas、蛋白激酶A⁃C亚基同工型a(PKA⁃Ca)、CREB、磷酸化CREB(p⁃CREB)、B细胞淋巴瘤(Bcl)⁃2和Bcl⁃2相关X蛋白(Bax)的蛋白表达情况。结果干预前,与假手术组对比,其余3组大鼠右侧前庭神经核脑血流量下降、右侧前庭神经核脑血流下降率升高(均P<0.05),提示造模成功。干预后,与假手术组比较,模型组大鼠右侧前庭神经核脑血流量降低、右侧前庭神经核脑血流下降率升高、右侧脑干前庭神经核细胞凋亡率及Bax蛋白表达水平升高,Bcl⁃2、Mas、PKA⁃Ca、p⁃CREB/CREB蛋白表达水平降低(均P<0.05);与模型组比较,电针组和尼莫地平组大鼠右侧前庭神经核脑血流量升高、右侧前庭神经核脑血流下降率降低、跳台躲避时间缩短、右侧脑干前庭神经核细胞凋亡率及Bax蛋白表达水平降低,Bcl⁃2、Mas、PKA⁃Ca、p⁃CREB/CREB蛋白表达水平升高(均P<0.05);与尼莫地平组比较,电针组大鼠右侧前庭神经核脑血流量升高、右侧前庭神经核脑血流下降率降低、跳台躲避时间缩短、右侧脑干前庭神经核细胞凋亡率及Bax蛋白表达水平降低,Bcl⁃2、Mas、PKA⁃Ca、p⁃CREB/CREB蛋白表达水平升高(均P<0.05)。结论颈椎横突尖针刺法能够有效抑制PCIV大鼠前庭神经核的细胞凋亡,其机制可能与改善前庭神经核脑血流量、激活Mas/PKA/CREB信号通路后调控相关蛋白抑制前庭神经核细胞的凋亡相关。

关键词：颈椎横突尖针刺后循环缺血眩晕细胞凋亡 Mas原癌基因/蛋白激酶A/环磷腺苷效应元件结合蛋白通路大鼠

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足三里治疗类风湿性关节炎免疫机制研究进展

辽宁中医杂志 2024年

作者：曹洋朱艳洪玉节肖净陈静静安徽中医药大学研究生院安徽中医药大学第二附属医院老年病一科

类风湿性关节炎目前较明确的发病机制是与免疫紊乱有关，其核心治疗药物疗效有限、治疗失败是临床常见的难题。而足三里穴调节机体免疫功能效果显著，也是治疗类风湿性关节炎使用频率最高的穴位。因此，探析针灸足三里后的免疫机理，可... 详细信息

类风湿性关节炎目前较明确的发病机制是与免疫紊乱有关，其核心治疗药物疗效有限、治疗失败是临床常见的难题。而足三里穴调节机体免疫功能效果显著，也是治疗类风湿性关节炎使用频率最高的穴位。因此，探析针灸足三里后的免疫机理，可以更好地通过细胞、分子解释其发挥效应的机制，如足三里可以通过调节巨噬细胞极化、肥大细胞脱颗粒、抗体介导的体液免疫、血小板活化等改善机体免疫失衡状态，以缓解类风湿性关节炎慢性炎症、疼痛、骨破坏。这些免疫机制的揭示为临床靶点治疗提供了理论基础。

关键词：足三里类风湿性关节炎免疫