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中医风湿病学研究生培养模式探索--以安徽中医药大学第一附属医院中医风湿病团队为例

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中医药管理杂志 2022年第4期30卷 44-45页

作者：孙艳秋刘健安徽中医药大学第一附属医院安徽合肥230038

目的:以安徽中医药大学第一附属医院中医风湿病研究生培养模式为例,探索中医风湿病学研究生培养模式。方法:研究生培养遵循“建体系、创机制、育队伍、升能力、见实效”的基本思路,树立“传承精华、守正创新”的指导思想,以中医临床疗... 详细信息

目的:以安徽中医药大学第一附属医院中医风湿病研究生培养模式为例,探索中医风湿病学研究生培养模式。方法:研究生培养遵循“建体系、创机制、育队伍、升能力、见实效”的基本思路,树立“传承精华、守正创新”的指导思想,以中医临床疗效为基础,以临床工作的重点、难点为研究的切入点,以思想政治教育为重点,加强研究生理论、临床、实验、科学研究等诸多方面培养和训练。结果:在该培养模式下,研究生的临证思维、临床诊治能力、实验创新能力、实践能力等综合素质得到巨大提升,取得了诸多成果,为中医药事业输送了大量优秀人才,促进了中医药传承创新发展,为人民健康服务做出了贡献。结论:安徽中医药大学第一附属医院中医风湿病团队的研究生培养模式的相关经验与举措,可为中医风湿病学研究生的培养提供参考。

关键词：中医风湿病研究生创新培养模式

circCBLB抑制类风湿性关节炎成纤维细胞样滑膜细胞增殖促进细胞凋亡并增加抗炎细胞因子水平

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细胞与分子免疫学杂志 2024年第2期40卷 106-113页

作者：李舒万磊刘健黄传兵陈莹莹程静胡赛赛李方泽朱子衡安徽中医药大学第一附属医院风湿科安徽合肥230031

目的探讨环状RNA Cbl原癌基因B(circCBLB)/miR-486-5p功能轴对类风湿性关节炎成纤维细胞样滑膜细胞(RA-FLS)增殖、凋亡及炎症因子产生的影响。方法人RA-FLS,用100μL的10 ng/mL肿瘤坏死因子α(TNF-α)刺激RA-FLS建立模型。采用双荧光... 详细信息

目的探讨环状RNA Cbl原癌基因B(circCBLB)/miR-486-5p功能轴对类风湿性关节炎成纤维细胞样滑膜细胞(RA-FLS)增殖、凋亡及炎症因子产生的影响。方法人RA-FLS,用100μL的10 ng/mL肿瘤坏死因子α(TNF-α)刺激RA-FLS建立模型。采用双荧光素酶靶向验证circCBLB/miR-486-5p的结合关系。构建pcDNA3.1/siRNA-circCBLB、阴性对照(pcDNA3.1-NC/si-NC)和mimics-miR-486-5p,分别转染至RA-FLS。实验分为对照组、 TNF-α处理的RA-FLS、 pcDNA3.1-circCBLB组、 pcDNA3.1-NC组、 si-circCBLB组、 si-NC组、 pcDNA3.1-circCBLB联合miR-486-5p-mimics组。采用CCK-8法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞周期与细胞凋亡,平板集落形成实验检测细胞平板集落形成能力,实时定量PCR检测各组circCBLB、 miR-486-5p表达水平,ELISA检测各组细胞上清液抗炎因子白细胞介素4(IL-4)、 IL-10,促炎因子IL-6、 TNF-α水平。结果双荧光素酶报告基因结果示circCBLB与miR-486-5p的3′非翻译区(3′UTR)结合;与同一时间点模型组细胞相比,过表达组细胞活力降低,干扰组升高;与模型组相比,过表达组凋亡率升高、 S和G2期的比例升高、集落形成率降低、 miR-486-5p表达水平降低、 IL-4、 IL-10水平升高,IL-6、 TNF-α水平降低;干扰组凋亡率降低、 S和G2期的比例降低、集落形成率升高、 miR-486-5p表达水平升高、 TNF-α水平升高;pcDNA3.1-circCBLB联合miR-486-5p-mimics组在circCBLB过表达的基础上,在细胞活力、细胞凋亡率、细胞周期、集落形成能力、抗炎因子的提高、促炎因子的降低方面对circCBLB的效应产生了抵消与逆转。结论 circCBLB抑制RA-FLS活力、提高细胞凋亡率、延长细胞周期降低细胞集落能力、提高抗炎因子,降低促炎因子,miR-486-5p则与circCBLB调控能力相反,且对circCBLB的效应具有一定的抵消与逆转能力。

关键词：环状RNACbl原癌基因B(circCBLB) miR-486-5p 细胞增殖细胞凋亡炎症因子

黄芩清热除痹胶囊调控p53/p21信号通路延缓骨关节炎大鼠软骨细胞衰老的机制研究

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中国中药杂志 2024年第12期49卷 3330-3339页

作者：周巧刘健朱艳汪元王桂珍万磊黄旦郭锦晨齐亚军胡月迪安徽中医药大学第二附属医院安徽中医药大学安徽中医药大学第一附属医院

探讨黄芩清热除痹胶囊（HQC）调控肿瘤抑制蛋白53（tumor protein p53,p53）/细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂1A（cyclin-dependent kinase inhibitor 1A,p21）通路延缓骨关节炎（OA）大鼠软骨细胞衰老的机制。碘乙酸钠（MIA）联合外界风... 详细信息

探讨黄芩清热除痹胶囊（HQC）调控肿瘤抑制蛋白53（tumor protein p53,p53）/细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂1A（cyclin-dependent kinase inhibitor 1A,p21）通路延缓骨关节炎（OA）大鼠软骨细胞衰老的机制。碘乙酸钠（MIA）联合外界风湿热环境刺激，诱导OA大鼠风湿热痹模型，分为正常（Con）组，OA模型（MIA）组，OA模型+风湿热刺激模型（MIA-M）组，MIA-M+HQC低（MIA-M+HQC-L）、中（MIA-M+HQC-M）、高（MIA-M+HQC-H）剂量组，MIA-M+氨基葡萄糖（MIA-M+GS）组，模型制备后灌胃30 d,苏木素-伊红（HE）和番红O固绿（SO）染色观察软骨病理变化，酶联免疫吸附（ELISA）法检测白细胞介素（IL）-1β和IL-6的表达，流式细胞术（FCM）检测细胞凋亡和周期，实时荧光定量PCR（RT-qPCR）检测基质降解酶13（MMP13）、聚蛋白多糖酶5（ADAMTS-5）、Ⅱ型胶原（COLⅡ）和转化生长因子-β（TGF-β）mRNA的表达，蛋白免疫印迹（WB）检测p53/p21通路、细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂2A（p16）、B细胞淋巴瘤-2（Bcl-2）、Bcl-2关联X蛋白（Bax）蛋白的表达。Con组大鼠关节软骨表面光滑平整，潮线光滑平整；MIA组和MIA-M组软骨层破坏明显，软骨基质减少，MIA-M组情况更严重。HQC高剂量组和MIA-M+GS组软骨表面基本完整，分层清晰。与MIA-M+HQC-H组相比，低、中剂量Mankin′s评分较高，MIA-M+GS组变化不明显。与Con组相比，MIA和MIA-M组软骨细胞G1的比例升高，S期、G2期比例下降，细胞凋亡率增加；与MIA-M组相比，HQC各剂量组以浓度依赖的方式抑制细胞凋亡，促进增殖；与MIA-M+HQC-H组相比，高剂量较中、低剂量作用更显著，与MIA-M+GS组相比差异无统计学意义。与Con组相比，MIA和MIA-M组IL-1β和IL-6升高，MMP13和ADAMTS-5 mRNA水平升高，p53、p21、p16和Bax蛋白升高，COLⅡ、TGF-β mRNA水平下降；与MIA-M组相比，HQC和GS药物干预后IL-1β和IL-6下降，MMP13和ADAMTS-5 mRNA、p53、p21、Bax和p16蛋白水平下降，Bcl-2升高；与MIA-M+HQC-H组相比，这些指标改善优于HQC低、中剂量组，与MIA-M+GS组差异不明显。HQC延缓MIA诱导的OA大鼠软骨细胞衰老，抑制炎症反应和细胞外基质（ECM）降解，其机制可能与抑制p53/p21通路有关。

关键词：黄芩清热除痹胶囊骨关节炎风湿热模型细胞衰老 p53/p21

强直性脊柱炎患者外周血单个核细胞微小RNA的差异表达及其与免疫炎症反应的相关性

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细胞与分子免疫学杂志 2024年第2期40卷 142-147页

作者：黄旦刘健汪元曹云祥万磊张皖东方妍妍安徽中医药大学第一附属医院风湿科安徽合肥230031 安徽省中医科学院风湿病研究所安徽合肥230031

目的检测强直性脊柱炎(AS)患者外周血单个核细胞(PBMC)中微小RNA(miRNA)的表达及其与免疫炎症反应的关系。方法选取AS患者(AS组)及健康志愿者(对照组),每组15例。利用高通量测序技术筛选PBMC中miRNA表达,利用实时定量PCR检测6个差异表达... 详细信息

目的检测强直性脊柱炎(AS)患者外周血单个核细胞(PBMC)中微小RNA(miRNA)的表达及其与免疫炎症反应的关系。方法选取AS患者(AS组)及健康志愿者(对照组),每组15例。利用高通量测序技术筛选PBMC中miRNA表达,利用实时定量PCR检测6个差异表达miRNA水平,ELISA检测外周血细胞因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)、IL-17、IL-23表达,Spearman法分析差异miRNA与疾病活动、免疫炎症指标的相关性。结果与对照组相比,AS患者组共有44个miRNA差异表达,其中有22个上调,22个下调(差异倍数≥1);其中miR-1-3p、miR-133a-5p表达明显上调,miR-127-5p、miR-345-3p、miR-136-3p表达明显下调;且AS患者TNF-α、IL-1β、IL-17、IL-23表达明显升高,miR-1-3p与TNF-α、C反应蛋白(CRP)、Bath强直性脊柱炎疾病活动性指数(BASDAI)呈正相关,miR-133a-5p与TNF-α呈正相关,miR-127-5p与红细胞沉降率(ESR)、脊柱疼痛视觉模拟评分法(VAS)评分呈负相关,miR-345-3p与IL-17呈负相关,miR-136-3p与IL-17、BASDAI呈负相关。结论AS患者PBMC中miRNA异常表达,差异表达miRNA与患者疾病活动及免疫炎症指标存在相关性。

关键词：强直性脊柱炎(AS) 微小RNA(miRNA) 高通量测序细胞因子免疫炎症

参七虫草方通过ASS1/src/STAT3信号通路改善肺纤维化大鼠的炎症反应

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南方医科大学学报 2024年第4期44卷 644-651页

作者：何程陈炜张念志栾军王三凤张尤安徽中医药大学第一附属医院呼吸科安徽合肥230031

目的观察参七虫草方对肺纤维化大鼠精氨酸琥珀酸盐合成酶-1(ASS1)/src酪氨酸激酶(src)/信号转导和转化激活因子3(STAT3)通路相关因子表达的影响,探讨其治疗肺纤维化的作用机制。方法选择120只SPF级SD雄性大鼠,采用随机数字表法分为5组:... 详细信息

目的观察参七虫草方对肺纤维化大鼠精氨酸琥珀酸盐合成酶-1(ASS1)/src酪氨酸激酶(src)/信号转导和转化激活因子3(STAT3)通路相关因子表达的影响,探讨其治疗肺纤维化的作用机制。方法选择120只SPF级SD雄性大鼠,采用随机数字表法分为5组:空白组、模型组、参七虫草方组、吡非尼酮组、精氨酸脱亚胺酶(ADI)腹腔注射组(24只/组)。除空白组以外,4组均使用一次性气管内滴注博来霉素(BLM)诱导制备特发性肺纤维化的大鼠模型。造模成功后,参七虫草组予参七虫草方汤剂(0.423 g/kg)灌胃;吡非尼酮组予溶于生理盐水的吡非尼酮胶囊粉末(10 mL·kg^(-1)·d^(-1))灌胃2次;ADI腹腔注射组予以2.25 mg/(kg·d)腹腔注射,1次/3d;空白组、模型组分别以10mL/(kg·d)生理盐水灌胃;给药疗程28d。于第7、14、21、28天分4批处死大鼠,分离肺组织并计算肺指数。采用苏木素-伊红、马松染色观察大鼠肺组织的组织病理学;吉姆萨染色分析BALF中不同种类的炎症细胞;采用酶联免疫吸附测定法检测血清趋化因子配体2(CCL2)、转化生长因子β1(TGF-β1)的含量;蛋白免疫印迹法测定肺组织src、p-src^(Try529)、STAT3、p-STAT3^(Try705)的蛋白表达;采用实时荧光定量聚合酶链式反应技术检测肺组织ASS1、src、STAT3的表达水平。结果参七虫草组、吡非尼酮组和ADI腹腔注射组各时间点中性粒细胞、巨噬细胞、淋巴细胞均低于同一时间点的模型组(P一时间点的模型组(P<0.05)。结论参七虫草方可以缓解大鼠的肺纤维化程度,其机制可能通过调控ASS1/src/STAT3信号通路的活化从而缓解BLM大鼠肺纤维化的炎症反应。

关键词：参七虫草方精氨酸特发性肺纤维化 ASS1/src/STAT3信号通路炎症反应

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针灸分期综合治疗急性期贝尔面瘫疗效观察

中国针灸 2024年第1期44卷 51-56,77页

作者：陈嘉杰石海平高万里李肖伟舒玉铃王永哲蒋滨键杨骏王频安徽中医药大学针灸推拿学院合肥230031 安徽中医药大学第一附属医院推拿科安徽中医药大学第一附属医院针灸康复科

目的:比较针灸分期综合治疗与西药治疗急性期贝尔面瘫的临床疗效。方法:将60例急性期贝尔面瘫患者随机分为观察组和对照组,每组30例。对照组给予醋酸泼尼松片联合甲钴胺片口服治疗,治疗至病程第28天结束。观察组采用针灸分期综合治疗,... 详细信息

目的:比较针灸分期综合治疗与西药治疗急性期贝尔面瘫的临床疗效。方法:将60例急性期贝尔面瘫患者随机分为观察组和对照组,每组30例。对照组给予醋酸泼尼松片联合甲钴胺片口服治疗,治疗至病程第28天结束。观察组采用针灸分期综合治疗,穴取患侧牵正、翳风、四白、阳白、颊车、地仓、头维等,急性期(发病1~7 d)给予常规针刺联合透刺治疗,针刺不行手法,留针30 min;亚急性期(发病8~14 d)在急性期治疗基础上,调整部分针刺深度,并行捻转平补平泻手法,牵正、地仓连接电针,予低强度、高频率的连续波,频率100 Hz,电针刺激20 min;恢复期(发病15~28 d)在亚急性期治疗基础上加重针刺手法,四白透刺地仓、地仓透刺颊车行滞针提拉手法,配合翳风行温针灸,电针改为高强度、低频率的断续波,频率2 Hz,电针刺激30 min。针灸隔日治疗1次,至病程第28天结束。观察两组患者治疗前后H-B量表分级、Sunnybrook面神经分级系统评分、面部残疾指数(FDI)评分,采用红外热成像仪检测面部区域温度差,采用表面肌电图分析系统评估患侧肌群肌电情况,采用肌骨超声检测面神经直径,并比较两组临床疗效。结果:治疗后两组患者H-B量表分级、Sunnybrook面神经分级系统评分、FDI躯体运动功能及社会生活功能评分均较治疗前改善(P<0.01,P<0.05),,观察组均优于对照组(P<0.05)。治疗后,两组患者面部额区、眼区、颧区、口角区温度差均较治疗前降低(P<0.05),观察组各区域温度差均低于对照组(P<0.05)。治疗后,两组患者患侧额肌群、颧肌群、口轮匝肌群均方根(RMS)均值较治疗前升高(P<0.01),观察组高于对照组(P<0.05)。治疗前,两组患者患侧面神经直径大于健侧(P<0.01);治疗后,两组患者患侧面神经直径均较治疗前减小(P<0.01),观察组患侧面神经直径小于对照组(P<0.05),对照组患侧面神经直径大于健侧(P<0.05)。观察组总有效率为93.3%(28/30),高于对照组的83.3%(25/30,P<0.05)。结论:针灸分期综合治疗急性期贝尔面瘫疗效确切,验证了急性期贝尔面瘫针灸治疗的适宜性,较常规西药治疗有更好的疗效。

关键词：急性期贝尔面瘫针灸红外热成像表面肌电图肌骨超声随机对照试验

健脾滋肾方抑制系统性红斑狼疮患者的足细胞自噬:基于网络药理学和临床研究

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南方医科大学学报 2024年第3期44卷 465-473页

作者：陈君洁黄传兵李明安徽中医药大学第一临床医学院安徽合肥230000 安徽中医药大学第一附属医院风湿免疫科安徽合肥230031

目的基于网络药理学结合分子对接,通过临床验证,探讨健脾滋肾方从足细胞自噬途径治疗系统性红斑狼疮(SLE)潜在机制。方法运用TCMSP、GeneCards、OMIM及TTD数据库获取健脾滋肾方及SLE、足细胞自噬相关靶点;取三者交集得到健脾滋肾方经... 详细信息

目的基于网络药理学结合分子对接,通过临床验证,探讨健脾滋肾方从足细胞自噬途径治疗系统性红斑狼疮(SLE)潜在机制。方法运用TCMSP、GeneCards、OMIM及TTD数据库获取健脾滋肾方及SLE、足细胞自噬相关靶点;取三者交集得到健脾滋肾方经足细胞自噬途径治疗SLE的潜在作用靶点。Cytoscape3.9.1构建“复方-成分-疾病-潜在靶点”网络及蛋白质互作网络,筛选出关键活性成分和靶点,进行分子对接。并临床纳入46例SLE患者和10例健康人,将SLE患者随机分为观察组(n=22)和对照组(n=21)。对照组口服醋酸泼尼松及吗替麦考酚酯,观察组在其基础上加用健脾滋肾方,疗程均为12周。运用ELISA检测SLE组及健康人群尿液中nephrin、synaptopodin水平;使用Western blot检测外周血内p-JAK1/JAK1、pSTAT1/STAT1、LC3II/LC3I、p62蛋白水平,并观察经健脾滋肾方干预后对SLE患者足细胞相关蛋白(nephrin、synaptopodin)、自噬水平(LC3II/LC3I、p62)及p-JAK1/JAK1、p-STAT1/STAT1表达影响。结果经筛选得到健脾滋肾方经足细胞自噬途径治疗SLE的关键活性成分4种,核心靶点基因5个(STAT1、PIK3CG、MAPK1、PRKCA、CJA1);富集分析显示可能涉及AGERAGE、JAK/STAT、EGFR、PI3K/Akt等信号通路。分子对接结果显示关键活性物质和核心靶点均有较好的结合活性。其中STAT1是结合活性最好的靶蛋白。临床试验证实健脾滋肾方能够显著降低血清中p-JAK1/JAK1及p-STAT1/STAT1、LC3II/LC3I蛋白表达水平(P<0.05或P<0.01),升高p62蛋白表达水平(P<0.05),降低尿液中nephrin、synaptopodin水平(P<0.05)。结论健脾滋肾方经足细胞自噬治疗SLE具有多成分、多靶点、多通路协同作用的特点,其可能通过槲皮素、山奈酚、β-谷甾醇、异鼠李素等关键活性成分作用于STAT1靶基因,抑制JAK/STAT通路相关基因表达,调控自噬减轻SLE足细胞损伤。

关键词：系统性红斑狼疮健脾滋肾方网络药理学足细胞自噬

三七调节肾脏PI3K/Akt/mTORC1-线粒体能量代谢治疗血瘀证慢性肾衰竭大鼠的机制研究

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中国中药杂志 2024年第7期49卷 1888-1895页

作者：刘晓羽黄志敏邱少彬邱菲黄筱瑛江旖旎林爱桃张知英唐宇吴金玉广西中医药大学第一临床医学院广西南宁530200 广西中医药大学第一附属医院风湿病科广西南宁530023

观察三七对血瘀证阿霉素肾纤维化大鼠磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K)/蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白复合物1(mammalian target of rapamycin complex 1,mTORC1)信号通路及线粒体能量代谢的影响,探讨三七发挥肾保护的作用机制。将30只造模成功的阿霉素肾纤维化雄性大鼠随机分为模型组、三七低剂量组、三七中剂量组、三七高剂量组、阳性对照组(盐酸贝那普利组),每组6只;将6只清洁级SD雄性大鼠分为正常组。正常组和模型组给予生理盐水,治疗组分别给予相应的药物,给药8周后,检测各组大鼠肾功能,肾脏病理,肾组织腺嘌呤核苷三磷酸(adenosine triphosphate,ATP)含量和Na^(+)-K^(+)-ATP酶、Ca^(2+)-Mg^(2+)-ATP酶活性,肾组织中ATP5B、mTORC1、p70核糖体S6激酶(70 kDa ribosomal protein S6 kinase,P70S6K)及P85、Akt、p-Akt、SH2域肌醇磷酸酶(SH2-containing inositol phosphatase,SHIP2)蛋白表达。结果显示,与正常组相比,模型组大鼠尿素氮(urea nitrogen,BUN)、血清肌酐(serum creatinine,SCr)水平均显著升高(P<0.01);与模型组相比,三七各剂量组和阳性对照组大鼠BUN、SCr水平均呈下降趋势,其中,三七中、高剂量组与阳性对照组差异具有统计学意义(P<0.05)。与模型组相比,三七各剂量组与阳性对照组肾组织的空泡样、纤维样改变,肾小球萎缩,肾小管囊性扩张,大量炎性细胞的浸润等病理改变均有不同程度的改善。与正常组比较,模型组肾组织线粒体ATP含量、Na^(+)-K^(+)-ATP酶、Ca^(2+)-Mg2+-ATP酶活性显著降低(P<0.05);与模型组比较,三七中、高剂量组和阳性对照组肾组织线粒体ATP含量、Na^(+)-K^(+)-ATP酶、Ca^(2+)-Mg^(2+)-ATP酶活性显著升高(P<0.05)。与模型组相比,三七中、高剂量组以及阳性对照组ATP5B和SHIP2表达增加,mTORC1、P70S6K、P85、Akt和p-Akt表达降低,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01或P<0.001)。综上,三七可能通过抑制PI3K/Akt/mTORC1-线粒体能量代谢通路的活化,发挥抗纤维化机制,进而实现肾保护作用。

关键词：三七血瘀线粒体能量代谢 PI3K/Akt/mTORC1 肾纤维化

罗浮山风湿膏药在膝骨关节炎患者中的应用分析

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辽宁中医杂志 2024年

作者：刘明岭徐强刘丽娟张明英广州中医药大学第一附属医院风湿病科

目的探讨罗浮山风湿膏药治疗对膝骨关节炎（kneeosteoarthritis，KOA）患者的应用效果。方法选取我院2020年1月-2021年1月治疗的200例KOA患者，随机分为对照组和观察组各100例。对照组口服艾瑞昔布片，0.1g/次，2次/d；观察组在对照... 详细信息

目的探讨罗浮山风湿膏药治疗对膝骨关节炎（kneeosteoarthritis，KOA）患者的应用效果。方法选取我院2020年1月-2021年1月治疗的200例KOA患者，随机分为对照组和观察组各100例。对照组口服艾瑞昔布片，0.1g/次，2次/d；观察组在对照组的基础上外敷罗浮山风湿膏药，1次/d；两组患者均治疗3周。观察两组临床疗效，比较两组运动功能指标、关节疼痛情况。结果治疗后，观察组临床有效率高于对照组（P＜0.05）。治疗后，观察组膝关节（LKSS）评分和美国膝关节协会评分量表AKS功能评分显著高于对照组（P＜0.05）；且观察组视觉模拟评分法（VAS）评分在静息状态下、行走时、上下楼时均低于对照组（P＜0.05）。结论罗浮山风湿膏药联合艾瑞昔布片治疗可以显著缓解KOA患者疼痛，改善膝关节功能，促进运动功能恢复，提高临床疗效。

关键词：膝骨关节炎罗浮山风湿膏药艾瑞昔布片运动功能疼痛