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新风胶囊抑制软骨细胞炎症和细胞外基质降解:基于调控miR-502-5p/TRAF2/NF-κB轴

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南方医科大学学报 2024年第1期44卷 108-118页

作者：周巧刘健万磊朱艳齐亚军胡月迪安徽中医药大学第二附属医院安徽合肥230061 安徽中医药大学第一附属医院安徽合肥230031 安徽中医药大学安徽合肥230012

目的探讨新风胶囊(XFC)对白介素(IL)-1β诱导的软骨细胞功能的影响及作用机制。方法构建IL-1β诱导的软骨细胞炎症模型;SD大鼠灌胃制备XFC含药血清。细胞增殖实验(CCK-8)和流式细胞术筛选最佳XFC含药血清浓度;双荧光素酶报告分析miR-502... 详细信息

目的探讨新风胶囊(XFC)对白介素(IL)-1β诱导的软骨细胞功能的影响及作用机制。方法构建IL-1β诱导的软骨细胞炎症模型;SD大鼠灌胃制备XFC含药血清。细胞增殖实验(CCK-8)和流式细胞术筛选最佳XFC含药血清浓度;双荧光素酶报告分析miR-502-5p和TRAF2的靶向关系。构建miR-502-5p抑制表达质粒(inhibitor)及阴性对照组,转染至软骨细胞中。分为对照组(NC),IL-1β组,XFC组,IL-1β+NC-inhibitor,IL-1β+miR-502-5pinhibitor,IL-1β+miR-502-5pinhibitor+XFC最佳含药血清组,酶联免疫吸附试验(ELASA)检测IL-1β、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、IL-4、IL-10的水平。逆转录PCR(RT-PCR)、蛋白质免疫印迹实验(WB)、免疫荧光法检测Ⅱ型胶原α1(COL2A1)、基质金属蛋白酶13(MMP13)、软骨蛋白聚糖抗体(ADAMTS5)和miR-502-5p/TRAF2/NF-κB基因的表达。结果与NC组相比,IL-1β组中软骨细胞活力下降,细胞凋亡率升高,且miR-502-5p、IL-4、IL-10和COL2A1表达下降,IL-1β、TNF-α和ADAMTS5、MMP13、TRAF2、NF-κB p65表达升高(P<0.05)。筛选得出20%XFC为最佳含药血清浓度。与IL-1β组相比,XFC含药血清干预后,软骨细胞活力升高,细胞凋亡率下降,IL-1β、TNF-α、ADAMTS5、MMP13、TRAF2、NF-κBp65表达下降,miR-502-5p、IL-4、IL-10和COL2A1表达升高(P<0.05)。与NC-inhibitor相比,转染miR-502-5p inhibitor后,IL-1β、TNF-α、ADAMTS5、MMP13、TRAF2、NF-κB p65表达升高,miR-502-5p、IL-4、IL-10和COL2A1表达下降;与miR-502-5pinhibitor相比,将miR-502-5pinhibitor转染的软骨细胞和最佳XFC含药血清共培养后,XFC含药血清能逆转miR-502-5p抑制状态对软骨细胞炎症和ECM的影响。结论XFC抑制软骨细胞炎症、细胞外基质降解,减轻IL-1β诱导的软骨细胞损伤,其机制可能是通过调节miR-502-5p/TRAF2/NF-κB轴。

关键词： miR-502-5p 骨关节炎新风胶囊炎症细胞外基质

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肝豆灵片治疗痰瘀互结型肝豆状核变性脂代谢异常的随机对照试验及相关性分析

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中国实验方剂学杂志 2024年第12期30卷 121-128页

作者：梁丰董婷田丽伟赵晨玲郭瑞雪王琼张宇琦安徽中医药大学第一附属医院合肥230031

目的:探讨肝豆灵(GDL)对肝豆状核变性(WD)脂代谢异常的临床疗效及肝脂肪变性预测模型与WD脂代谢相关指标的相关性。方法:选取86例WD脂代谢异常患者,统计治疗前患者24 h尿铜、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、血清甘油... 详细信息

目的:探讨肝豆灵(GDL)对肝豆状核变性(WD)脂代谢异常的临床疗效及肝脂肪变性预测模型与WD脂代谢相关指标的相关性。方法:选取86例WD脂代谢异常患者,统计治疗前患者24 h尿铜、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、载脂蛋白B(ApoB)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、胆汁酸(BA)、γ-谷氨酰转移酶(GGT)、肝脂肪变性预测模型[肝脂肪变性指数(HSI)、浙江大学指数(ZJU指数)]、超声衰减系数成像(ATT)及中医证候积分,采用Pearson相关性检验分析探讨TG、TC、LDL-C、ApoB、ALT、AST、ALT/AST、BA、GGT、中医证候积分及ATT与HSI及ZJU指数的相关性。采用随机数字表法将患者分为观察组和对照组,每组各43例,观察组给予肝豆灵联合二巯丙磺钠(DMPS)治疗,对照组仅给予DMPS作为对照。经6个疗程的治疗后,观察比较治疗前后两组患者24 h尿铜、TC、TG、LDL-C、ApoB、HSI、ZJU指数、ATT、中医证候积分及临床有效率,并分析HSI、ZJU指数与血清TC、TG、LDL-C、ApoB、ALT、AST、ALT/AST、BA、GGT水平及中医证候积分、ATT的相关性。结果:Pearson相关性分析显示,WD脂代谢异常患者血清TC(r=0.811)、TG(r=0.826)、LDL-C(r=0.802)、ApoB(r=0.820)、ALT(r=0.497)、ALT/AST(r=0.826)、中医证候积分(r=0.716)、ATT(r=0.736)与HSI呈正相关(P中医证候积分(r=0.666)、ATT(r=0.684)与ZJU指数呈正相关(P临床安全性较高,具有较好的临床应用价值,肝脂肪变性预测模型可有效地反映WD脂代谢异常程度。

关键词：肝豆状核变性脂代谢异常肝豆灵片预测模型超声衰减系数成像

清肾颗粒通过调控外泌体、miR-330-3p以及CREBBP表达抑制小鼠肾纤维化

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南方医科大学学报 2024年第8期44卷 1431-1440页

作者：戴荣曹泽平刘传娇葛永程梦王伟丽陈义珍张磊王亿平安徽中医药大学第一附属医院肾内科安徽合肥230031 安徽中医药大学第一临床医学院安徽合肥230038

目的探讨清肾颗粒对腺嘌呤诱导的肾纤维化小鼠模型及尿酸刺激下NRK-49F细胞的作用及其调控外泌体、miR-330-3p和CREBBP的机制。方法动物实验:构建腺嘌呤诱导的肾纤维化小鼠模型,分为正常组、模型组和清肾颗粒组(8.0 g·kg^(-1)·d^(-1)... 详细信息

目的探讨清肾颗粒对腺嘌呤诱导的肾纤维化小鼠模型及尿酸刺激下NRK-49F细胞的作用及其调控外泌体、miR-330-3p和CREBBP的机制。方法动物实验:构建腺嘌呤诱导的肾纤维化小鼠模型,分为正常组、模型组和清肾颗粒组(8.0 g·kg^(-1)·d^(-1)),6只/组,灌胃12周。采用尾静脉注射腺相关病毒载体,实验结束后收集双侧肾组织。观察小鼠肾组织外泌体标记蛋白CD9,Hsp70,TSG101蛋白水平变化;Western blotting及免疫荧光检测小鼠肾组织Col-III、α-SMA、FN和E-cad表达变化;HE和Masson染色观察小鼠肾组织病理学变化。细胞实验:构建尿酸刺激下的NRK-49F细胞模型(尿酸400μmol/L),SD大鼠灌胃制备清肾颗粒含药血清用于细胞实验,分为正常组、模型组和清肾颗粒含药血清组。观察NRK-49F细胞中外泌体标记蛋白CD9,Hsp70,TSG101蛋白水平变化;Western blotting及免疫荧光检测NRK-49F细胞中Col-III、α-SMA、FN和E-cad表达变化;双荧光素酶报告基因检测miR-330-3p与CREBBP靶向关系;RT-qPCR和Western blotting检测NRK-49F细胞中miR-330-3p与CREBBP表达变化。结果动物实验中,Western blotting结果显示,与正常组相比,模型组CD9、Hsp70、TSG101蛋白水平升高(P一致。结论清肾颗粒通过干预外泌体,降低miR-330-3p水平,增加CREBBP表达抑制肾纤维化。

关键词：清肾颗粒外泌体 miR-330-3p 肾纤维化

健脾滋肾方抑制系统性红斑狼疮患者的足细胞自噬:基于网络药理学和临床研究

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南方医科大学学报 2024年第3期44卷 465-473页

作者：陈君洁黄传兵李明安徽中医药大学第一临床医学院安徽合肥230000 安徽中医药大学第一附属医院风湿免疫科安徽合肥230031

目的基于网络药理学结合分子对接,通过临床验证,探讨健脾滋肾方从足细胞自噬途径治疗系统性红斑狼疮(SLE)潜在机制。方法运用TCMSP、GeneCards、OMIM及TTD数据库获取健脾滋肾方及SLE、足细胞自噬相关靶点;取三者交集得到健脾滋肾方经... 详细信息

目的基于网络药理学结合分子对接,通过临床验证,探讨健脾滋肾方从足细胞自噬途径治疗系统性红斑狼疮(SLE)潜在机制。方法运用TCMSP、GeneCards、OMIM及TTD数据库获取健脾滋肾方及SLE、足细胞自噬相关靶点;取三者交集得到健脾滋肾方经足细胞自噬途径治疗SLE的潜在作用靶点。Cytoscape3.9.1构建“复方-成分-疾病-潜在靶点”网络及蛋白质互作网络,筛选出关键活性成分和靶点,进行分子对接。并临床纳入46例SLE患者和10例健康人,将SLE患者随机分为观察组(n=22)和对照组(n=21)。对照组口服醋酸泼尼松及吗替麦考酚酯,观察组在其基础上加用健脾滋肾方,疗程均为12周。运用ELISA检测SLE组及健康人群尿液中nephrin、synaptopodin水平;使用Western blot检测外周血内p-JAK1/JAK1、pSTAT1/STAT1、LC3II/LC3I、p62蛋白水平,并观察经健脾滋肾方干预后对SLE患者足细胞相关蛋白(nephrin、synaptopodin)、自噬水平(LC3II/LC3I、p62)及p-JAK1/JAK1、p-STAT1/STAT1表达影响。结果经筛选得到健脾滋肾方经足细胞自噬途径治疗SLE的关键活性成分4种,核心靶点基因5个(STAT1、PIK3CG、MAPK1、PRKCA、CJA1);富集分析显示可能涉及AGERAGE、JAK/STAT、EGFR、PI3K/Akt等信号通路。分子对接结果显示关键活性物质和核心靶点均有较好的结合活性。其中STAT1是结合活性最好的靶蛋白。临床试验证实健脾滋肾方能够显著降低血清中p-JAK1/JAK1及p-STAT1/STAT1、LC3II/LC3I蛋白表达水平(P<0.05或P<0.01),升高p62蛋白表达水平(P<0.05),降低尿液中nephrin、synaptopodin水平(P<0.05)。结论健脾滋肾方经足细胞自噬治疗SLE具有多成分、多靶点、多通路协同作用的特点,其可能通过槲皮素、山奈酚、β-谷甾醇、异鼠李素等关键活性成分作用于STAT1靶基因,抑制JAK/STAT通路相关基因表达,调控自噬减轻SLE足细胞损伤。

关键词：系统性红斑狼疮健脾滋肾方网络药理学足细胞自噬

丹蛭降糖胶囊联合达格列净治疗2型糖尿病周围血管病变的临床研究

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北京中医药大学学报 2024年第8期47卷 1119-1125页

作者：刘剑方朝晖 #倪英群赵进东陆瑞敏王奔严瑜珊安徽中医药大学第一附属医院内分泌科合肥230031 安徽中医药大学第一临床医学院

目的探讨丹蛭降糖胶囊联合达格列净对2型糖尿病周围血管病变患者的血脂谱及相关炎性指标的影响。方法将2021年4月—2023年4月就诊于安徽中医药大学第一附属医院内分泌科且符合纳入标准的2型糖尿病周围血管病变的72例患者采用随机数字表... 详细信息

目的探讨丹蛭降糖胶囊联合达格列净对2型糖尿病周围血管病变患者的血脂谱及相关炎性指标的影响。方法将2021年4月—2023年4月就诊于安徽中医药大学第一附属医院内分泌科且符合纳入标准的2型糖尿病周围血管病变的72例患者采用随机数字表法分为试验组和对照组,每组36例。对照组患者在常规治疗的基础上加用达格列净,试验组患者在对照组基础上予丹蛭降糖胶囊,连续12周。观察2组患者治疗前后糖脂代谢相关指标、超敏C反应蛋白(hs-CRP)、身体质量指数(BMI)、中医证候积分变化情况,以及临床疗效。结果治疗后,与对照组比较,试验组患者空腹血糖(FPG)、餐后2 h血糖(2 hPG)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、hs-CRP、BMI均降低,高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)升高,中医证候总积分及各单项分数均下降,临床疗效更好(均P中医证候总积分下降(均P一种联合治疗方法可在临床推广使用。

关键词：糖尿病周围血管病变丹蛭降糖胶囊血脂谱超敏C反应蛋白中医证候

黄蒲通窍胶囊改善Wilson病铜负荷大鼠的认知损害:基于抑制内质网应激介导的凋亡途径

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南方医科大学学报 2024年第3期44卷 447-454页

作者：张笑颜王谢王杰邵楠蔡标谢道俊安徽中医药大学中西医结合学院安徽合肥230012 安徽中医药大学第一临床医学院安徽合肥230012 安徽中医药大学护理学院安徽合肥230012 安徽中医药大学第一附属医院脑病中心安徽合肥230031

目的探究黄蒲通窍胶囊(HPTQ)对Wilson病(WD)铜负荷大鼠模型的神经保护作用及其可能的作用机制。方法SD大鼠随机分为6组:对照组、模型组、黄蒲通窍胶囊低剂量组(HPTQ-L,0.47 g/kg)、黄蒲通窍胶囊中剂量组(HPTQ-M,1.41 g/kg)、黄蒲通窍胶... 详细信息

目的探究黄蒲通窍胶囊(HPTQ)对Wilson病(WD)铜负荷大鼠模型的神经保护作用及其可能的作用机制。方法SD大鼠随机分为6组:对照组、模型组、黄蒲通窍胶囊低剂量组(HPTQ-L,0.47 g/kg)、黄蒲通窍胶囊中剂量组(HPTQ-M,1.41 g/kg)、黄蒲通窍胶囊高剂量组(HPTQ-H,4.23 g/kg)、青霉胺组(PCA,0.09 g/kg),10只/组。通过含铜(1 g/kg)饲料、含铜(0.185%)水喂养12周构建WD铜负荷大鼠模型,铜离子(Cu)测定试剂盒检测肝铜、24 h尿铜水平;Morris水迷宫实验评估大鼠学习记忆能力;HE染色法观察海马组织CA1区神经元形态学改变;TUNEL染色观察海马组织CA1区神经元凋亡水平;免疫荧光法检测内质网应激(ERS)标志蛋白GRP78的表达情况;RT-qPCR和Western blot法检测GRP78、CHOP、caspase-12、cleaved caspase-9、cleaved caspase-3基因和蛋白表达水平。结果与对照组比较,模型组肝铜及24 h尿铜水平明显升高(P<0.01);学习记忆能力明显减弱(P<0.01);CA1区海马神经元出现损伤;TUNEL阳性神经元数量增多(P<0.01);GRP78、CHOP、caspase-12、cleaved caspase-9、cleaved caspase-3基因和蛋白表达水平升高(P<0.01)。与模型组比较,HPTQ各组及PCA组肝铜水平降低、24 h尿铜水平升高(P<0.01);学习记忆能力改善(P<0.01,P<0.05);海马神经元损伤减轻;TUNEL阳性神经元数量减少(P<0.01);GRP78、CHOP、caspase-12、cleaved caspase-9、cleaved caspase-3基因和蛋白表达水平降低(P<0.01,P<0.05)。结论HPTQ对WD铜负荷大鼠模型具有神经保护作用,其机制可能与抑制ERS介导的凋亡途径有关。

关键词： Wilson病黄蒲通窍胶囊认知损害内质网应激凋亡

“灸刺督脉”疗法联合重复经颅磁刺激治疗卒中后疲劳：随机对照试验

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中国针灸 2024年

作者：王保国曹奕杨琪琪尹维帅孙永旗赵娜李飞安徽中医药大学第一临床医学院安徽中医药大学第二附属医院脑病科安徽中医药大学第二附属医院名医堂安徽中医药大学安徽中医药大学第二附属医院康复科

目的：观察“灸刺督脉”疗法联合重复经颅磁刺激治疗卒中后疲劳（PSF）的临床疗效。方法：将78例PSF者随机分为观察组（39例，脱落1例）和对照组（39例，脱落1例）。两组均予常规内科基础治疗。对照组采用重复经颅磁刺激治疗，每次20 mi... 详细信息

目的：观察“灸刺督脉”疗法联合重复经颅磁刺激治疗卒中后疲劳（PSF）的临床疗效。方法：将78例PSF者随机分为观察组（39例，脱落1例）和对照组（39例，脱落1例）。两组均予常规内科基础治疗。对照组采用重复经颅磁刺激治疗，每次20 min；观察组在对照组治疗基础上加用“灸刺督脉”疗法，穴取百会、大椎、神庭、风府、至阳、命门、腰阳关，其中百会采用艾灸治疗，大椎采用刺络治疗，其余腧穴予常规针刺治疗，艾灸及针刺均每次30 min。两组均每日1次，连续治疗2周。分别于治疗前后观察两组患者疲劳严重程度量表（FSS）、匹兹堡失眠质量指数（PSQI）及Fugl-Meyer运动功能评定（FMA）评分，并检测两组患者血清C反应蛋白（CRP）、白细胞介素（IL）-1β、IL-6含量。结果：治疗后，两组患者FSS、PSQI评分及血清CRP、IL-1β、IL-6含量较治疗前降低（P＜0.05），FMA评分较治疗前升高（P＜0.05）；观察组患者FSS、PSQI评分及血清CRP、IL-1β、IL-6含量低于对照组（P＜0.05），FMA评分高于对照组（P＜0.05）。治疗后观察组患者血清CRP、IL-1β、IL-6含量与FSS评分呈正相关（P＜0.01）。结论：“灸刺督脉”疗法联合重复经颅磁刺激可有效缓解PSF患者疲劳程度，改善其睡眠质量、提高肢体功能，其缓解疲劳程度的机制可能与下调血清炎性因子含量有关。

关键词：卒中后疲劳灸刺督脉针刺艾灸刺络重复经颅磁刺激疲劳严重程度量表评分血清炎性因子随机对照试验

丹蛭降糖胶囊联合达格列净对2型糖尿病周围血管病变的临床研究

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北京中医药大学学报 2024年

作者：刘剑方朝晖倪英群赵进东陆瑞敏王奔严瑜珊安徽中医药大学第一附属医院内分泌科安徽中医药大学第一临床医学院

目的探讨丹蛭降糖胶囊联合达格列净对2型糖尿病伴周围血管病变的血脂谱及相关炎性指标的影响。方法将2021年4月—2023年4月就诊于安徽中医药大学第一附属医院内分泌科且符合纳入标准的2型糖尿病周围血管病变患者采用随机数字表法分为... 详细信息

目的探讨丹蛭降糖胶囊联合达格列净对2型糖尿病伴周围血管病变的血脂谱及相关炎性指标的影响。方法将2021年4月—2023年4月就诊于安徽中医药大学第一附属医院内分泌科且符合纳入标准的2型糖尿病周围血管病变患者采用随机数字表法分为试验组和对照组，每组各36例。对照组患者在常规治疗的基础上加用达格列净，试验组患者在对照组基础上予丹蛭降糖胶囊，连续12周。观察2组患者临床疗效，以及治疗前后糖脂代谢相关指标、超敏C反应蛋白（hs-CRP）、身体质量指数（BMI）、中医证候积分变化情况。结果治疗后，与对照组比较，试验组患者总有效率更高，空腹血糖（FPG）、餐后2h血糖（2hPG）、甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、hs-CRP、BMI均降低，高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）升高，中医证候总积分及各单项分数均下降（均P＜0.05）。与治疗前比较，治疗后2组患者FPG、2hPG、TG、TC、LDL-C、hs-CRP均降低，HDL-C均升高，中医证候总积分下降（均P＜0.05）。结论丹蛭降糖胶囊联合达格列净治疗2型糖尿病伴周围血管病变，可调节血脂谱、降低炎性因子、改善患者症状，中西医结合治疗更有利于控制病情，作为一种联合治疗方法可在临床推广使用。

关键词： 2型糖尿病周围血管病变丹蛭降糖胶囊血脂谱超敏C反应蛋白中医证候

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针灸分期综合治疗急性期贝尔面瘫疗效观察

中国针灸 2024年第1期44卷 51-56,77页

作者：陈嘉杰石海平高万里李肖伟舒玉铃王永哲蒋滨键杨骏王频安徽中医药大学针灸推拿学院合肥230031 安徽中医药大学第一附属医院推拿科安徽中医药大学第一附属医院针灸康复科

目的:比较针灸分期综合治疗与西药治疗急性期贝尔面瘫的临床疗效。方法:将60例急性期贝尔面瘫患者随机分为观察组和对照组,每组30例。对照组给予醋酸泼尼松片联合甲钴胺片口服治疗,治疗至病程第28天结束。观察组采用针灸分期综合治疗,... 详细信息

目的:比较针灸分期综合治疗与西药治疗急性期贝尔面瘫的临床疗效。方法:将60例急性期贝尔面瘫患者随机分为观察组和对照组,每组30例。对照组给予醋酸泼尼松片联合甲钴胺片口服治疗,治疗至病程第28天结束。观察组采用针灸分期综合治疗,穴取患侧牵正、翳风、四白、阳白、颊车、地仓、头维等,急性期(发病1~7 d)给予常规针刺联合透刺治疗,针刺不行手法,留针30 min;亚急性期(发病8~14 d)在急性期治疗基础上,调整部分针刺深度,并行捻转平补平泻手法,牵正、地仓连接电针,予低强度、高频率的连续波,频率100 Hz,电针刺激20 min;恢复期(发病15~28 d)在亚急性期治疗基础上加重针刺手法,四白透刺地仓、地仓透刺颊车行滞针提拉手法,配合翳风行温针灸,电针改为高强度、低频率的断续波,频率2 Hz,电针刺激30 min。针灸隔日治疗1次,至病程第28天结束。观察两组患者治疗前后H-B量表分级、Sunnybrook面神经分级系统评分、面部残疾指数(FDI)评分,采用红外热成像仪检测面部区域温度差,采用表面肌电图分析系统评估患侧肌群肌电情况,采用肌骨超声检测面神经直径,并比较两组临床疗效。结果:治疗后两组患者H-B量表分级、Sunnybrook面神经分级系统评分、FDI躯体运动功能及社会生活功能评分均较治疗前改善(P<0.01,P<0.05),,观察组均优于对照组(P<0.05)。治疗后,两组患者面部额区、眼区、颧区、口角区温度差均较治疗前降低(P<0.05),观察组各区域温度差均低于对照组(P<0.05)。治疗后,两组患者患侧额肌群、颧肌群、口轮匝肌群均方根(RMS)均值较治疗前升高(P<0.01),观察组高于对照组(P<0.05)。治疗前,两组患者患侧面神经直径大于健侧(P<0.01);治疗后,两组患者患侧面神经直径均较治疗前减小(P<0.01),观察组患侧面神经直径小于对照组(P<0.05),对照组患侧面神经直径大于健侧(P<0.05)。观察组总有效率为93.3%(28/30),高于对照组的83.3%(25/30,P<0.05)。结论:针灸分期综合治疗急性期贝尔面瘫疗效确切,验证了急性期贝尔面瘫针灸治疗的适宜性,较常规西药治疗有更好的疗效。

关键词：急性期贝尔面瘫针灸红外热成像表面肌电图肌骨超声随机对照试验