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人参皂苷Rc通过调控AMPK通路介导的细胞焦亡减轻小鼠脑缺血再灌注损伤

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中国病理生理杂志 2024年第5期40卷 844-851页

作者：李良勇马莉李亚军梅灯安徽中医药大学第一附属医院安徽合肥230031 安徽中医药大学中西医结合学院安徽合肥230001

目的:探讨人参皂苷Rc对脑缺血再灌注损伤(CIRI)小鼠的保护作用,并从细胞焦亡角度阐释其作用机制。方法:将C57BL/6小鼠随机分为假手术(sham)组、大脑中动脉闭塞/再灌注(MCAO/R)组、人参皂苷Rc+MCAO/R组(Rc组)、AMP活化蛋白激酶(AMPK)激... 详细信息

目的:探讨人参皂苷Rc对脑缺血再灌注损伤(CIRI)小鼠的保护作用,并从细胞焦亡角度阐释其作用机制。方法:将C57BL/6小鼠随机分为假手术(sham)组、大脑中动脉闭塞/再灌注(MCAO/R)组、人参皂苷Rc+MCAO/R组(Rc组)、AMP活化蛋白激酶(AMPK)激动剂阿卡地新(AICAR)+MCAO/R组(agonist组)和人参皂苷Rc+MCAO/R+AMPK抑制剂Compound C组(Rc+inhibitor组)。对agonist组小鼠给予AICAR(500 mg/kg)腹腔注射,Rc+inhibitor组小鼠给予Compound C(20 mg/kg)腹腔注射;Rc组和Rc+inhibitor组小鼠造模后给予人参皂苷Rc(40 mg/kg)灌胃,每天一次,连续7 d;sham组和MCAO/R组则给予等体积的纯化水。Zea Longa评分观察小鼠神经功能缺损程度,TTC染色观察小鼠脑梗死体积,干湿重法观察小鼠脑水肿程度,HE染色观察小鼠脑组织病理形态的改变,RT-qPCR和Western blot检测小鼠脑组织AMPK、核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)、胱天蛋白酶1(caspase-1)和焦亡效应蛋白消皮素D(GSDMD)的表达,ELISA检测炎症因子白细胞介素1β(IL-1β)和IL-18的含量。结果:Rc组和agonist组小鼠神经功能缺损症状减轻,脑梗死体积减小,脑水肿和神经元病理损伤受到抑制,脑组织pAMPK/AMPK比值和AMPK mRNA表达水平升高,细胞焦亡相关蛋白NLRP3、caspase-1和GSDMD的mRNA和蛋白表达水平降低,炎症因子IL-1β和IL-18表达水平降低。Rc+inhibitor组小鼠脑组织p-AMPK/AMPK比值和AMPK mRNA表达水平较Rc组显著下降(P<0.05),NLRP3、caspase-1和GSDMD的mRNA和蛋白表达水平,以及IL-1β和IL-18表达水平显著升高(P<0.05),小鼠神经功能缺损程度评分升高,脑梗死体积增大,脑水肿和神经元病理损伤显著加重(P<0.05)。结论:人参皂苷Rc可能通过活化AMPK通路抑制NLRP3/caspase-1/GSDMD介导的细胞焦亡,从而减轻小鼠CIRI。

关键词：人参皂苷Rc 脑缺血再灌注损伤 AMP活化蛋白激酶细胞焦亡

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中医药调控肺癌辐射治疗作用机制研究进展

中国实验方剂学杂志 2024年第8期30卷 253-261页

作者：王玉张露汤磊磊于东东蒋文静吴家文陆婷婷安徽中医药大学中西医结合学院合肥230012 安徽中医药大学第一附属医院合肥230031 安徽中医药大学新安医学教育部重点实验室合肥230031 安徽省中医药科学院中医呼吸病防治研究所合肥230031

肺癌是全球范围内发病率和死亡率增长最快的癌症类型,对于人群生命健康构成巨大威胁。辐射治疗是肺癌治疗的主要方法之一,肺癌的局部控制率与辐射剂量呈明显的剂量-效应学关系,但肺为辐射剂量受限器官,肺癌组织的辐射抵抗和正常组织的... 详细信息

肺癌是全球范围内发病率和死亡率增长最快的癌症类型,对于人群生命健康构成巨大威胁。辐射治疗是肺癌治疗的主要方法之一,肺癌的局部控制率与辐射剂量呈明显的剂量-效应学关系,但肺为辐射剂量受限器官,肺癌组织的辐射抵抗和正常组织的辐射损伤限制了肺癌辐射疗效。肺癌中医病机为正气先虚,邪气内侵,渐积而成。肺癌辐射治疗后,机体正气愈虚,痰凝气滞、瘀血阻络更甚,导致肺癌组织辐射抗性产生并增强。因此,使用药物提升肺癌细胞的辐射敏感性和改善正常肺组织的辐照耐受性是显著提高肺癌患者辐射治疗临床疗效的关键问题。中医药作为辐射增敏剂,通过调节细胞周期增加辐射敏感期细胞比例、促进促凋亡基因上调及抗凋亡基因下调诱导细胞凋亡、增强辐照引起的脱氧核糖核酸(DNA)损伤和抑制损伤修复、改善血液循环及组织供氧等机制提高肿瘤细胞对辐照的敏感性,放大辐射对肿瘤组织的损伤。中医药也可作为辐射防护剂,通过抑制细胞损伤、调节细胞因子和免疫平衡、减少炎症因子和纤维化因子释放及抑制相关信号通路激活等方面发挥防治放射性肺损伤的作用。该文对近年来中医药肺癌辐射增敏及辐射防护相关研究成果进行系统梳理,旨在阐明中医药调控肺癌辐射治疗作用机制,为中医药参与肺癌辐射治疗改善肺癌患者预后提供更多的理论和实践依据。

关键词：中医药肺癌辐射增敏辐射防护放射性肺损伤

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三妙丸治疗类风湿关节炎主要活性成分及作用机制的探讨

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中国中药杂志 2024年

作者：夏仕林未怡江小慢许静李雅祝宇龙王言邓然吴虹安徽中医药大学药学院安徽中医药大学中西医结合学院

利用UHPLC-TOF-MS技术分析三妙化学成分，通过网络药理学和动物实验研究三妙丸治疗类风湿性关节炎的作用机制。利用UHPLC-TOF-MS技术检测三妙丸所含化学成分，结合DisGeNET、SwissTargetPrediction等数据库筛选类风湿性关节炎与三妙丸... 详细信息

利用UHPLC-TOF-MS技术分析三妙化学成分，通过网络药理学和动物实验研究三妙丸治疗类风湿性关节炎的作用机制。利用UHPLC-TOF-MS技术检测三妙丸所含化学成分，结合DisGeNET、SwissTargetPrediction等数据库筛选类风湿性关节炎与三妙丸化学成分的交集靶点，构建蛋白-蛋白相互作用（protein-protein interaction， PPI）网络。将关键靶点导入MATESCAPE平台进行基因本体论（Gene Ontology， GO）分析和京都基因与基因组百科全书（Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes， KEGG）通路注释，结合成分、靶点和通路，利用Cytoscape 3.8软件构建“成分-靶点-通路”网络，预测三妙丸治疗类风湿性关节炎的主要活性成分、关键靶点及通路。建立HPLC-DAD法同时测定三妙丸中小檗碱，苍术内酯-I，苍术内酯-Ⅱ，人参皂苷Ro，三七皂苷R1的含量。建立大鼠胶原诱导型（collagen-induced arthritis， CIA）模型，进行行为学实验，HE检测SMP对大鼠滑膜病理形态的影响，Western blot检测PI3K/AKT通路的变化。结果鉴定出三妙丸化学成分共126个。化学成分与疾病共有交集靶点332个，根据PPI网络结果筛选排名前十的为核心靶点，其中包括AKT1、TNF等，KEGG富集结果显示主要涉及PI3K/AKT样受体通路等20条典型通路。5种成分在各自范围内线性关系良好，RSD ≤ 2%。动物实验研究结果显示，三妙丸有效改善CIA大鼠滑膜异常增生，降低滑膜PI3K和p-AKT表达水平。综上所述，三妙丸可能通过调控PI3K/AKT通路，缓解RA病情。

关键词： UHPLC-TOF-MS 三妙丸网络药理学类风湿性关节炎液相色谱法 PI3K/AKT

基于NLRP3/GSDMD/Caspase-1通路探究小续命汤联合电针对脑缺血/再灌注损伤的改善作用

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中国实验方剂学杂志 2024年

作者：茅伟吴海洋王颖王海涛计海生张君宇李成龙安徽中医药大学安徽中医药大学第二附属医院

目的：研究旨在全面解析小续命汤（XXMD）和电针（EA）协同缓解脑缺血/再灌注（I/R）损伤的潜在机制。方法：采用改良线栓法建立大鼠脑I/R损伤模型。在建模7 d后，XXMD+EA组大鼠分别给予低剂量(15 g·kg-1)、中剂量(30 g·kg-1)和高剂量... 详细信息

目的：研究旨在全面解析小续命汤（XXMD）和电针（EA）协同缓解脑缺血/再灌注（I/R）损伤的潜在机制。方法：采用改良线栓法建立大鼠脑I/R损伤模型。在建模7 d后，XXMD+EA组大鼠分别给予低剂量(15 g·kg-1)、中剂量(30 g·kg-1)和高剂量(60 g·kg-1)的XXMD，同时每天接受20 min的EA治疗（刺激穴位GV14和GV20）。通过Zea Longa测试评分、TTC染色和TUNEL染色评估脑梗死和神经元损伤。利用实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）和蛋白免疫印迹法（Western blot）检测脑皮质缺血区NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3（NLRP3）、消皮素D（GSDMD）、胱天蛋白酶-1（Caspase-1）、白细胞介素-1β（IL-1β）和白细胞介素-18（IL-18）的表达。结果：与假手术组相比，I/R组大鼠神经功能缺损评分和梗死体积显著增加（P<0.05），皮层神经元凋亡率以及NLRP3、GSDMD、Caspase-1、IL-1β和IL-18的mRNA和蛋白表达水平也显著增加（P<0.05）。与I/R组相比，中剂量和高剂量XXMD联合EA治疗显著降低了神经功能缺损评分和梗死体积（P<0.05）。此外，皮层神经元凋亡率以及NLRP3、GSDMD、Caspase-1、IL-1β和IL-18的mRNA和蛋白表达水平也显著下降（P<0.05）。此外，这种改善作用还显示出与XXMD剂量呈依赖性的关系。结论：XXMD和EA联合使用可通过调节NLRP3/GSDMD/Caspase-1信号通路，减少神经功能缺损、缩小脑梗死范围并改善皮层神经元损伤，从而发挥脑保护作用。

关键词：电针脑缺血再灌注 NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3) 小续命汤

黄地安消胶囊抑制EndoMT干预糖尿病大血管病变的机制

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中药药理与临床 2024年

作者：陶猛单莉张魏魏良兵高家荣安徽中医药大学药学院安徽中医药大学第一附属医院

目的：研究内皮细胞内皮间质转化（EndoMT）在糖尿病大血管病变过程中的影响及黄地安消胶囊的干预作用。方法：采用高脂高糖饲料联合链脲佐菌素（STZ）诱导复制糖尿病大鼠模型。并将成功建模的大鼠分为黄地安消胶囊3、6、12 g/kg组及二... 详细信息

目的：研究内皮细胞内皮间质转化（EndoMT）在糖尿病大血管病变过程中的影响及黄地安消胶囊的干预作用。方法：采用高脂高糖饲料联合链脲佐菌素（STZ）诱导复制糖尿病大鼠模型。并将成功建模的大鼠分为黄地安消胶囊3、6、12 g/kg组及二甲双胍0.72 g/kg组，分别给予相应药物干预6 w。观察各组大鼠一般情况，每周测定大鼠空腹血糖（FBG），观察大鼠胸主动脉组织的病理学特征，并检测转化生长因子β1(TGF-β1)、Smad2、Smad3蛋白及mRNA、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、血管内皮钙粘蛋白（VE-cadherin）蛋白表达水平。结果：与正常对照组比较，模型组对照组大鼠体质量显著降低（P＜0.05或P＜ 0.01），空腹血糖（FBG）显著升高（P＜0.01），胸主动脉血管中TGF-β1、Smad2、Smad3蛋白及mRNA显著上调（P＜0.01），α-SMA蛋白表达显著上调（P＜0.01），VE-cadherin蛋白的表达显著下调（P＜0.01），血管内皮病理损伤严重；与模型对照组比较，黄地安消胶囊各剂量组给药第10 w后，大鼠体质量明显升高（P＜0.05或P＜0.01），胸主动脉血管中TGF-β1、Smad2、Smad3蛋白及mRNA表达显著下调，α-SMA蛋白表达显著下调（P＜0.01），VE-cadherin蛋白表达显著上调（P＜0.01），大鼠胸主动脉病理损伤减轻。结论：黄地安消胶囊可抑制TGF-β/Smad通路改善内皮间质转化（EndoMT）所致大血管病变，减轻大鼠病理损伤。

关键词：转化生长因子β1/Smad信号通路内皮间质转化黄地安消胶囊糖尿病大血管病变

基于神经网络的糖尿病远端对称性多发性神经病变预测模型的构建与验证

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中国循证医学杂志 2024年第3期24卷 265-271页

作者：江爱娟王璐洁李家劼林逸轩赵进东方朝晖申国明安徽中医药大学中西医结合学院合肥230012 安徽中医药大学第一附属医院合肥230031

目的利用神经网络算法,融合中西医特征数据,研究构建糖尿病并发远端对称性多发性神经病变(DSPN)预测模型。方法从2017—2022年安徽中医药大学第一附属医院糖尿病住院患者中选取4107例数据完整的病例。收集一般流行病学资料、实验室检查... 详细信息

目的利用神经网络算法,融合中西医特征数据,研究构建糖尿病并发远端对称性多发性神经病变(DSPN)预测模型。方法从2017—2022年安徽中医药大学第一附属医院糖尿病住院患者中选取4107例数据完整的病例。收集一般流行病学资料、实验室检查、中医症状及体征共49项指标,采用神经网络建立预测模型,对变量特征权重值排序,分析DSPN潜在危险因素。使用十折交叉进行验证,通过准确度、敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、AUC值衡量模型的性能。结果DSPN组的平均糖尿病病程比非DSPN组长4年左右(P中医症状及体征的比例明显更高(P<0.001)。DSPN神经网络预测模型的AUC为0.9453,准确度为87.68%、敏感度为73.9%、特异度为92.7%、阳性预测值为78.7%、阴性预测值为90.72%。结论中西医特征数据融合对DSPN早期诊断具有更大的临床价值,所建立的神经网络模型具有较高的准确率和诊断效率,可为糖尿病人群DSPN的筛查和诊断提供一种便利、实用的工具。

关键词：糖尿病神经病变神经网络算法预测模型中医特征中西医结合

基于蛋白组学探讨灵芝酸X治疗肝母细胞瘤的作用机制

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中国中药杂志 2024年

作者：叶婷高航葛洋沈瑞余鸿雁陈峰远宋航安徽中医药大学研究生院安徽中医药大学中西医结合学院蚌埠医学院安徽省转化性肿瘤研究重点实验室

基于蛋白组学探讨灵芝酸X(ganoderic acid X， GAX)对人肝母细胞瘤HepG2、HuH6细胞模型和非肥胖型糖尿病/重症联合免疫缺陷(nonobese diabetic-severe combined immune deficient， NOD-SCID)小鼠皮下移植瘤模型的作用机制，为灵芝酸X... 详细信息

基于蛋白组学探讨灵芝酸X(ganoderic acid X， GAX)对人肝母细胞瘤HepG2、HuH6细胞模型和非肥胖型糖尿病/重症联合免疫缺陷(nonobese diabetic-severe combined immune deficient， NOD-SCID)小鼠皮下移植瘤模型的作用机制，为灵芝酸X的临床应用提供依据。采用CCK-8法检测灵芝酸X对HepG2，HuH6细胞活力的影响；EdU实验检测灵芝酸X对细胞增殖的影响；划痕实验检测灵芝酸X对细胞迁移能力的影响；Hoechst 33258染色检测灵芝酸X对细胞凋亡的影响；建立NOD-SCID免疫缺陷小鼠皮下移植瘤模型，分析对照组及灵芝酸X低、中、高剂量组(5、10、20 mg·kg-1)肿瘤体积和质量；HE染色评估灵芝酸X的药物毒性。此外，收集HepG2细胞对照组和灵芝酸X高剂量组的细胞，分别进行laber-free蛋白组学分析，筛选差异蛋白并富集相关信号通路，CYTO-ID?染色检测细胞自噬情况，Western blot实验检测相关蛋白的表达量。体外结果显示，灵芝酸X呈剂量依赖性抑制HepG2、HuH6细胞增殖，迁移，诱导凋亡；体内研究显示灵芝酸X显著抑制肿瘤体积和质量，且对小鼠主要脏器(心、肝、脾、肺、肾)无明显损害；laber-free蛋白组学结果显示灵芝酸X在肝母细胞瘤治疗过程中参与多种信号通路，其中自噬途径高度富集。CYTO-ID?染色及Western blot结果显示灵芝酸X诱导细胞自噬并上调Beclin-1、ATG5、LC3-Ⅱ蛋白表达量，下调p62蛋白表达量。该研究表明，灵芝酸X通过诱导自噬进而抑制肝母细胞瘤细胞的增殖、迁移和诱导凋亡，并显著抑制肿瘤生长，是一种有希望的癌症辅助治疗药物。

关键词：灵芝酸X 肝母细胞瘤蛋白组学自噬

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足三里治疗类风湿性关节炎免疫机制研究进展

辽宁中医杂志 2024年

作者：曹洋朱艳洪玉节肖净陈静静安徽中医药大学研究生院安徽中医药大学第二附属医院老年病一科

类风湿性关节炎目前较明确的发病机制是与免疫紊乱有关，其核心治疗药物疗效有限、治疗失败是临床常见的难题。而足三里穴调节机体免疫功能效果显著，也是治疗类风湿性关节炎使用频率最高的穴位。因此，探析针灸足三里后的免疫机理，可... 详细信息

类风湿性关节炎目前较明确的发病机制是与免疫紊乱有关，其核心治疗药物疗效有限、治疗失败是临床常见的难题。而足三里穴调节机体免疫功能效果显著，也是治疗类风湿性关节炎使用频率最高的穴位。因此，探析针灸足三里后的免疫机理，可以更好地通过细胞、分子解释其发挥效应的机制，如足三里可以通过调节巨噬细胞极化、肥大细胞脱颗粒、抗体介导的体液免疫、血小板活化等改善机体免疫失衡状态，以缓解类风湿性关节炎慢性炎症、疼痛、骨破坏。这些免疫机制的揭示为临床靶点治疗提供了理论基础。

关键词：足三里类风湿性关节炎免疫

气阴两虚夹瘀型2型糖尿病患者外周血LncRNA TUG 1与血管病变标志因子的相关性

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辽宁中医杂志 2024年第5期51卷 23-25页

作者：倪英群李居一黄日龙刘光菊陈文娟余丹丹丁雷方朝晖安徽中医药大学第一附属医院安徽合肥230038 安徽中医药大学研究生院安徽合肥230031

目的分析气阴两虚夹瘀型2型糖尿病患者外周血长链非编码RNA牛磺酸调节基因1(long non-coding RNA taurine regulatory gene 1,LncRNA TUG1)与血管病变因子的相关性。方法随机选取该院内分泌科住院的气阴两虚夹瘀型2型糖尿病患者50例作... 详细信息

目的分析气阴两虚夹瘀型2型糖尿病患者外周血长链非编码RNA牛磺酸调节基因1(long non-coding RNA taurine regulatory gene 1,LncRNA TUG1)与血管病变因子的相关性。方法随机选取该院内分泌科住院的气阴两虚夹瘀型2型糖尿病患者50例作为观察组,另选取46例健康体检者作为健康对照组。检测餐后2 h血糖(2-hour postprandial blood glucose,2 h PG)、空腹血糖(fasting plasma glucose,FPG)、糖化血红蛋白(glycosylated hemoglobin,HbA1c)、内皮素(endothelin,ET)、一氧化氮(nitric oxide,NO)水平及LncRNA TUG1表达;经Pearson线性相关分析,血清LncRNA TUG1与ET、NO、HbA1c、血糖指标的相关性。结果与健康对照组比较,气阴两虚夹瘀型2型糖尿病患者LncRNA TUG1、HbA1c、FPG、2 h PG、ET水平明显升高(P<0.01),NO水平明显降低(P<0.01),差异具有统计学意义。Pearson相关性分析显示,LncRNA TUG1与NO水平呈显著负相关(P<0.01);与ET、HbA1c、FPG、2 h PG水平呈显著正相关(P<0.01)。结论气阴两虚夹瘀型2型糖尿病患者外周血LncRNA TUG1高表达,与HbA1c、ET、血糖呈正相关,与NO水平呈负相关,与血管病变标志因子关系密切,存在一定的相关性,可作为潜在预测指标。

关键词： 2型糖尿病长链非编码RNA牛磺酸调节基因1 血管病变气阴两虚夹瘀型