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蒙花苷通过抑制TLR4/NF-κB通路抑制小鼠脊髓损伤后小胶质细胞活化介导的神经炎症和神经元凋亡

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南方医科大学学报 2024年第8期44卷 1589-1598页

作者：肖林雨段婷夏勇生陈悦孙洋许轶博徐磊闫兴洲胡建国蚌埠医科大学第一附属医院康复科安徽蚌埠233004 蚌埠医科大学第一附属医院急诊内科安徽蚌埠233004 蚌埠医科大学第一附属医院炎症相关性疾病基础与转化研究安徽省重点实验室安徽蚌埠233004 蚌埠医科大学第一附属医院胃肠外科安徽蚌埠233004 蚌埠医科大学第一附属医院检验科安徽蚌埠233004 蚌埠医科大学基础医学院组织与胚胎学教研室安徽蚌埠233030

目的探讨蒙花苷(LIN)在脊髓损伤(SCI)后对激活小胶质细胞介导的炎症和神经元凋亡的神经保护作用和潜在机制。方法将50只8~10周龄C57BL/6J小鼠随机分为假手术组(Sham组)、脊髓损伤模型组(SCI组)和LIN药物治疗组(12.5、25、50 mg/kg),10只... 详细信息

目的探讨蒙花苷(LIN)在脊髓损伤(SCI)后对激活小胶质细胞介导的炎症和神经元凋亡的神经保护作用和潜在机制。方法将50只8~10周龄C57BL/6J小鼠随机分为假手术组(Sham组)、脊髓损伤模型组(SCI组)和LIN药物治疗组(12.5、25、50 mg/kg),10只/组。使用巴索小鼠评分量表(BMS)、斜板实验和脚印分析评估SCI小鼠的运动功能恢复情况;通过HE染色和LFB染色分别评估脊髓组织损伤面积和髓鞘化面积。采用Nissl染色、免疫荧光及Western blotting观察损伤脊髓组织前角运动神经元的保留情况。体外实验通过LPS诱导BV2细胞建立体外炎症模型,同时给予蒙花苷进行干预,将BV2细胞分为对照组(Con-B)、脂多糖组(LPS-B)及蒙花苷组(LIN-B)。通过免疫荧光、Western blotting、RT-qPCR及ELISA检测体内外小胶质细胞活化及炎症因子的释放情况,进一步采用Western blotting验证信号通路的改变。构建体外BV2细胞和HT22细胞共培养模型,分为Con-H组、LPS-H组以及LIN-H组。采用Western blotting检测激活小胶质细胞介导的HT22细胞凋亡情况。结果行为学检测发现,LIN组小鼠BMS评分显著提高,承受的斜板高度更高,后肢行走协调且足迹清晰(P<0.05)。组织学染色结果显示,LIN组小鼠脊髓组织损伤面积减少,髓鞘化面积增加,并且小鼠脊髓前角运动神经元的数量增加(P<0.05)。体内外实验证实,LIN显著抑制小胶质细胞的活化和炎症因子(iNOS、COX-2、TNF-α、IL-6、IL-1β)的释放,并减少了体内神经元的凋亡(P<0.05)。Western blotting显示LIN抑制小胶质细胞活化可能与抑制TLR4/NF-κB信号通路有关。体外共培养实验结果显示,LIN的干预能够减少炎症介导的神经元凋亡数量(P<0.05)。结论LIN可能通过抑制TLR4/NF-κB信号通路抑制小胶质细胞的激活,减轻神经炎症,改善SCI后的神经元凋亡,提高SCI小鼠运动能力,发挥其神经保护作用。

关键词：脊髓损伤蒙花苷神经炎症神凋亡 TLR4/NF-κB

黄蒲通窍胶囊改善Wilson病铜负荷大鼠的认知损害:基于抑制内质网应激介导的凋亡途径

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南方医科大学学报 2024年第3期44卷 447-454页

作者：张笑颜王谢王杰邵楠蔡标谢道俊安徽中医药大学中西医结合学院安徽合肥230012 安徽中医药大学第一临床医学院安徽合肥230012 安徽中医药大学护理学院安徽合肥230012 安徽中医药大学第一附属医院脑病中心安徽合肥230031

目的探究黄蒲通窍胶囊(HPTQ)对Wilson病(WD)铜负荷大鼠模型的神经保护作用及其可能的作用机制。方法SD大鼠随机分为6组:对照组、模型组、黄蒲通窍胶囊低剂量组(HPTQ-L,0.47 g/kg)、黄蒲通窍胶囊中剂量组(HPTQ-M,1.41 g/kg)、黄蒲通窍胶... 详细信息

目的探究黄蒲通窍胶囊(HPTQ)对Wilson病(WD)铜负荷大鼠模型的神经保护作用及其可能的作用机制。方法SD大鼠随机分为6组:对照组、模型组、黄蒲通窍胶囊低剂量组(HPTQ-L,0.47 g/kg)、黄蒲通窍胶囊中剂量组(HPTQ-M,1.41 g/kg)、黄蒲通窍胶囊高剂量组(HPTQ-H,4.23 g/kg)、青霉胺组(PCA,0.09 g/kg),10只/组。通过含铜(1 g/kg)饲料、含铜(0.185%)水喂养12周构建WD铜负荷大鼠模型,铜离子(Cu)测定试剂盒检测肝铜、24 h尿铜水平;Morris水迷宫实验评估大鼠学习记忆能力;HE染色法观察海马组织CA1区神经元形态学改变;TUNEL染色观察海马组织CA1区神经元凋亡水平;免疫荧光法检测内质网应激(ERS)标志蛋白GRP78的表达情况;RT-qPCR和Western blot法检测GRP78、CHOP、caspase-12、cleaved caspase-9、cleaved caspase-3基因和蛋白表达水平。结果与对照组比较,模型组肝铜及24 h尿铜水平明显升高(P<0.01);学习记忆能力明显减弱(P<0.01);CA1区海马神经元出现损伤;TUNEL阳性神经元数量增多(P<0.01);GRP78、CHOP、caspase-12、cleaved caspase-9、cleaved caspase-3基因和蛋白表达水平升高(P<0.01)。与模型组比较,HPTQ各组及PCA组肝铜水平降低、24 h尿铜水平升高(P<0.01);学习记忆能力改善(P<0.01,P<0.05);海马神经元损伤减轻;TUNEL阳性神经元数量减少(P<0.01);GRP78、CHOP、caspase-12、cleaved caspase-9、cleaved caspase-3基因和蛋白表达水平降低(P<0.01,P<0.05)。结论HPTQ对WD铜负荷大鼠模型具有神经保护作用,其机制可能与抑制ERS介导的凋亡途径有关。

关键词： Wilson病黄蒲通窍胶囊认知损害内质网应激凋亡

TMSB10促进胃癌细胞增殖及糖酵解:基于激活AMPK/mTOR信号通路

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实用医学杂志 2024年第11期40卷 1519-1525页

作者：王畏张新鑫王广辉张杰陈安然贾建光蚌埠医学院第二附属医院肿瘤外科安徽蚌埠233040 蚌埠医学院第一附属医院肿瘤外科安徽蚌埠233040 蚌埠医学院安徽蚌埠233000

目的探究胸腺素β10(thymosinβ10,TMSB10)在胃癌中的表达及促进胃癌进展的分子机制。方法收集蚌埠医学院第二附属医院70例胃癌患者病理切片,免疫组化检测TMSB10在胃腺癌中的表达,并分析其预后影响。为研究作用机制,通过转染技术、CCK8... 详细信息

目的探究胸腺素β10(thymosinβ10,TMSB10)在胃癌中的表达及促进胃癌进展的分子机制。方法收集蚌埠医学院第二附属医院70例胃癌患者病理切片,免疫组化检测TMSB10在胃腺癌中的表达,并分析其预后影响。为研究作用机制,通过转染技术、CCK8实验、EDU实验、Transwell小室实验,划痕实验,糖酵解实验,蛋白印迹实验,观察TMSB10对胃癌细胞的增殖和糖酵解的影响及机制研究。结果临床样本免疫组化显示,TMSB10在胃癌中高表达。同时,TMSB10的表达水平与肿瘤大小(P<0.05)、TNM分期(P<0.01)和远处转移具有相关性。在机制研究中,通过体外实验CCK-8、EDU实验、Transwel实验及糖酵解检测实验发现过表达TMSB10后促进胃癌细胞增殖、侵袭、迁移及糖酵解表型,反之亦然。Western blot实验结果显示过表达TMSB10可能通过上调AMPK/mTOR信号通路调节胃癌的发生。结论TMSB10通过AMPK/mTOR信号通路促进胃癌细胞增殖、侵袭、迁移及糖酵解过程。

关键词：胸腺素β10 糖酵解胃癌 AMPK/mTOR信号通路

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火针结合钩针挑刺法治疗变应性鼻炎20例

中国针灸 2024年第8期44卷 939-940,960页

作者：邓婷婷杜金鑫王栗娟卢喜学山东中医药大学中医学院济南250355 山东第一医科大学附属颈肩腰腿痛医院针灸科济南250011

目的:观察火针结合钩针挑刺法治疗变应性鼻炎(AR)的临床疗效。方法:选取20例变应性鼻炎患者,采用火针结合钩针挑刺法治疗,火针穴取至阳、大椎、风府,于至阳穴区经火针治疗后出现的异常反应点行钩针挑刺,每周1次,共治疗4周。观察患者治... 详细信息

目的:观察火针结合钩针挑刺法治疗变应性鼻炎(AR)的临床疗效。方法:选取20例变应性鼻炎患者,采用火针结合钩针挑刺法治疗,火针穴取至阳、大椎、风府,于至阳穴区经火针治疗后出现的异常反应点行钩针挑刺,每周1次,共治疗4周。观察患者治疗前后鼻症状评分(TNSS)、鼻炎伴随症状评分(TNNSS)、鼻结膜炎生活质量问卷(RQLQ)评分,并评定临床疗效。结果:治疗后,患者TNSS各项评分及总分、TNNSS评分、RQLQ评分均降低(P<0.01),总有效率为95%(19/20)。结论:火针结合钩针挑刺法能有效改善AR患者的鼻部症状,提高其生活质量。

关键词：变应性鼻炎火针钩针挑刺

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苓桂术甘汤对心梗后慢性心衰大鼠线粒体分裂-融合及Sirt3/AMPK信号通路的影响

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中国实验方剂学杂志 2024年第3期30卷 1-9页

作者：姚娟丁芮李向阳汤同娟吴婉婉魏科东徐少华王靓周鹏黄金玲安徽中医药大学中西医结合学院合肥230012 安徽中医药大学中医学院合肥230012 安徽中医药大学第一附属医院合肥230031 中药复方安徽省重点实验室合肥230012

目的:探讨苓桂术甘汤对心肌梗死(MI)后慢性心力衰竭(CHF)大鼠线粒体分裂-融合及沉默信息调节因子3(Sirt3)/单磷酸腺苷依赖的蛋白激酶(AMPK)信号通路的影响。方法:SD大鼠随机分为假手术组(生理盐水,仅穿线不结扎)、模型组(生理盐水,结扎... 详细信息

目的:探讨苓桂术甘汤对心肌梗死(MI)后慢性心力衰竭(CHF)大鼠线粒体分裂-融合及沉默信息调节因子3(Sirt3)/单磷酸腺苷依赖的蛋白激酶(AMPK)信号通路的影响。方法:SD大鼠随机分为假手术组(生理盐水,仅穿线不结扎)、模型组(生理盐水,结扎冠状动脉左前降支近心端)、苓桂术甘汤组(4.2 g·kg^(-1))、卡托普利组(0.00257 g·kg^(-1)),每组10只,连续给药28 d。彩色多普勒超声成像仪检测大鼠心功能参数变化;苏木素-伊红(HE)染色观察心脏病理学改变;免疫荧光法检测活性氧(ROS)水平;JC-1法检测线粒体膜电位;比色法检测三磷酸腺苷(ATP)水平、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、线粒体呼吸链复合物活性(Ⅰ~Ⅳ);原位末端标记法(TUNEL)染色检测心肌组织细胞凋亡率;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测Sirt3、磷酸化(p)-AMPK、磷酸化动力相关蛋白1(p-Drp1)、线粒体分裂蛋白1(Fis1)、线粒体分裂因子(MFF)、视神经萎缩蛋白1(OPA1)蛋白表达水平。结果:与假手术组比较,模型组大鼠左室舒张末期内径(LVIDd)、左室收缩末期内径(LVIDs)显著升高(P<0.01),左室短轴缩短率(LVFS)、左室射血分数(LVEF)显著降低(P<0.01);心肌组织出现炎性细胞浸润,病理损伤明显,ROS、MDA水平与心肌细胞凋亡率显著升高(P<0.01),SOD水平、ATP含量、膜电位显著降低(P<0.01);线粒体呼吸链复合物活性(Ⅰ~Ⅳ)显著降低(P<0.01);p-Drp1、Fis1、MFF蛋白水平显著上调(P<0.01),Sirt3、p-AMPK、OPA1蛋白水平显著下调(P<0.01)。与模型组比较,苓桂术甘汤组与卡托普利组LVIDd和LVIDs显著降低(P<0.01),LVEF和LVFS显著升高(P<0.01),心肌组织炎性细胞浸润与病理损伤明显减轻,ROS、MDA水平与心肌细胞凋亡率显著降低(P<0.01),SOD水平、ATP含量、膜电位显著升高(P<0.01);线粒体呼吸链复合物活性(Ⅰ~Ⅳ)显著升高(P<0.01);p-Drp1、Fis1、MFF蛋白表达显著下调(P<0.01),Sirt3、p-AMPK、OPA1蛋白表达显著上调(P<0.01)。结论:苓桂术甘汤可缓解心肌细胞氧化应激与细胞凋亡损伤,改善线粒体功能,其作用可能与线粒体分裂-融合、Sirt3/AMPK信号通路有关。

关键词：苓桂术甘汤慢性心力衰竭氧化应激细胞凋亡线粒体分裂-融合沉默信息调节因子3(Sirt3)/单磷酸腺苷依赖的蛋白激酶(AMPK)信号通路

疏肝健脾养心方对失眠模型小鼠食欲素A及其受体的干预作用

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中国实验方剂学杂志 2024年第10期30卷 54-61页

作者：王震张杰刘飞祥孙江燕高亚慧郑育新赵敏河南中医药大学第一临床医学院郑州450000 河南中医药大学第一附属医院脑病医院郑州450000

目的:探讨疏肝健脾养心方下调食欲素A(OXA)及食欲素受体1(OX1R)、食欲素受体2(OX2R)的表达对失眠模型小鼠的干预作用。方法:利用腹腔注射对氯苯丙氨酸(PCPA)建立失眠小鼠模型,50只BALB/c小鼠随机分为空白组、模型组、右佐匹克隆组(0.13... 详细信息

目的:探讨疏肝健脾养心方下调食欲素A(OXA)及食欲素受体1(OX1R)、食欲素受体2(OX2R)的表达对失眠模型小鼠的干预作用。方法:利用腹腔注射对氯苯丙氨酸(PCPA)建立失眠小鼠模型,50只BALB/c小鼠随机分为空白组、模型组、右佐匹克隆组(0.13 mg·kg^(-1))、疏肝健脾养心方低、高剂量组(8.4、33.6 g·kg^(-1)),并给予相应药物治疗14 d。监测小鼠体质量变化,分别进行Morris水迷宫、戊巴比妥钠协同睡眠实验;免疫组化(IHC)检测下丘脑OXA的表达;酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测下丘脑、血清、脾脏组织中OXA、5-羟色胺(5-HT)含量;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测下丘脑OXA及其受体OX1R、OX2R mRNA表达。结果:与空白组比较,模型组小鼠体质量显著降低(P一定的治疗作用,其机制与增加脑中5-HT的含量,抑制下丘脑中OXA及其受体的表达有关。

关键词：疏肝健脾养心方失眠食欲素A(OXA) 5-羟色胺(5-HT)

基于“短链脂肪酸-肠屏障”途径探讨中药在腹泻型肠易激综合征中的干预研究进展

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实用医学杂志 2024年第15期40卷 2177-2182页

作者：窦鑫贺昌辉梅笑潘海迪马源鑫王伟山东中医药大学第一临床医学院济南250355 山东中医药大学中医学院济南250355 山东中医药大学附属医院消化内二科济南250012

腹泻型肠易激综合征(IBS-D)是一种临床常见的功能性胃肠病,“短链脂肪酸-肠屏障”途径在IBS-D发病中起重要作用。中药单体/化合物或复方可通过多通路、多靶点调控“短链脂肪酸-肠屏障”治疗IBS-D。本文以短链脂肪酸与肠道四大屏障的关... 详细信息

腹泻型肠易激综合征(IBS-D)是一种临床常见的功能性胃肠病,“短链脂肪酸-肠屏障”途径在IBS-D发病中起重要作用。中药单体/化合物或复方可通过多通路、多靶点调控“短链脂肪酸-肠屏障”治疗IBS-D。本文以短链脂肪酸与肠道四大屏障的关系及介导IBS-D发病为切入点,对中药单体/化合物和复方靶向调控“短链脂肪酸-肠屏障”治疗IBS-D的相关文献进行了系统回顾与梳理;从“大肠主津”角度探讨“短链脂肪酸-肠屏障”导致IBS-D的理论依据,以期为建立具有中医药特色的精准治疗体系提供思路与借鉴。

关键词：短链脂肪酸-肠屏障腹泻型肠易激综合征大肠主津中药单体/化合物中药复方研究进展

黄芩清热除痹胶囊调控p53/p21信号通路延缓骨关节炎大鼠软骨细胞衰老的机制研究

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中国中药杂志 2024年第12期49卷 3330-3339页

作者：周巧刘健朱艳汪元王桂珍万磊黄旦郭锦晨齐亚军胡月迪安徽中医药大学第一附属医院安徽合肥230031 安徽中医药大学第二附属医院安徽合肥230061 安徽中医药大学安徽合肥230012

探讨黄芩清热除痹胶囊(HQC)调控肿瘤抑制蛋白53(tumor protein p53,p53)/细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂1A(cyclin-dependent kinase inhibitor 1A,p21)通路延缓骨关节炎(OA)大鼠软骨细胞衰老的机制。碘乙酸钠(MIA)联合外界风湿热环境刺... 详细信息

探讨黄芩清热除痹胶囊(HQC)调控肿瘤抑制蛋白53(tumor protein p53,p53)/细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂1A(cyclin-dependent kinase inhibitor 1A,p21)通路延缓骨关节炎(OA)大鼠软骨细胞衰老的机制。碘乙酸钠(MIA)联合外界风湿热环境刺激,诱导OA大鼠风湿热痹模型,分为正常(Con)组,OA模型(MIA)组,OA模型+风湿热刺激模型(MIA-M)组,MIA-M+HQC低(MIA-M+HQC-L)、中(MIA-M+HQC-M)、高(MIA-M+HQC-H)剂量组,MIA-M+氨基葡萄糖(MIA-M+GS)组,模型制备后灌胃30 d,苏木素-伊红(HE)和番红O固绿(SO)染色观察软骨病理变化,酶联免疫吸附(ELISA)法检测白细胞介素(IL)-1β和IL-6的表达,流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡和周期,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测基质降解酶13(MMP13)、聚蛋白多糖酶5(ADAMTS-5)、Ⅱ型胶原(COLⅡ)和转化生长因子-β(TGF-β)mRNA的表达,蛋白免疫印迹(WB)检测p53/p21通路、细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂2A(p16)、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2关联X蛋白(Bax)蛋白的表达。Con组大鼠关节软骨表面光滑平整,潮线光滑平整;MIA组和MIA-M组软骨层破坏明显,软骨基质减少,MIA-M组情况更严重。HQC高剂量组和MIA-M+GS组软骨表面基本完整,分层清晰。与MIA-M+HQC-H组相比,低、中剂量Mankin′s评分较高,MIA-M+GS组变化不明显。与Con组相比,MIA和MIA-M组软骨细胞G_1的比例升高,S期、G_2期比例下降,细胞凋亡率增加;与MIA-M组相比,HQC各剂量组以浓度依赖的方式抑制细胞凋亡,促进增殖;与MIA-M+HQC-H组相比,高剂量较中、低剂量作用更显著,与MIA-M+GS组相比差异无统计学意义。与Con组相比,MIA和MIA-M组IL-1β和IL-6升高,MMP13和ADAMTS-5 mRNA水平升高,p53、p21、p16和Bax蛋白升高,COLⅡ、TGF-β mRNA水平下降;与MIA-M组相比,HQC和GS药物干预后IL-1β和IL-6下降,MMP13和ADAMTS-5 mRNA、p53、p21、Bax和p16蛋白水平下降,Bcl-2升高;与MIA-M+HQC-H组相比,这些指标改善优于HQC低、中剂量组,与MIA-M+GS组差异不明显。HQC延缓MIA诱导的OA大鼠软骨细胞衰老,抑制炎症反应和细胞外基质(ECM)降解,其机制可能与抑制p53/p21通路有关。

关键词：黄芩清热除痹胶囊骨关节炎风湿热模型细胞衰老 p53/p21

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重骨颗粒对膝骨关节炎患者临床疗效及miR-148a-3p相对表达量的影响

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时珍国医国药 2024年第4期35卷 925-928页

作者：程丽丽束龙武尚双双陈君洁汤忠富李明黄传兵安徽中医药大学第一临床医学院安徽合肥230012 安徽中医药大学第一附属医院安徽合肥230031

目的观察重骨颗粒(CGG)对膝骨关节炎(KOA)患者临床疗效以及miR-148a-3p相对表达量的影响,探讨CGG治疗KOA可能的作用机制。方法将60例肝肾亏虚型膝骨关节炎患者按照随机数字表法分为对照组和治疗组,每组30例。对照组患者口服盐酸氨基葡... 详细信息

目的观察重骨颗粒(CGG)对膝骨关节炎(KOA)患者临床疗效以及miR-148a-3p相对表达量的影响,探讨CGG治疗KOA可能的作用机制。方法将60例肝肾亏虚型膝骨关节炎患者按照随机数字表法分为对照组和治疗组,每组30例。对照组患者口服盐酸氨基葡萄糖片,每次1粒,每日2次;治疗组口服重骨颗粒,每日1付。两组各治疗8周。观察两组患者治疗前后视觉模拟量表(VAS)评分、膝关节严重程度指数(Lequesne MG)、西安大略和麦克马斯特大学骨关节炎指数(WOMAC)、生活质量量表SF-36、汉密尔顿焦虑量表(SAS)、汉密尔顿抑郁量表(SDS)、血沉(ESR)、C反应蛋白(CRP),降钙素原(PCT);RT-PCR法检测患者外周血miR-148a-3p相对表达量;酶联免疫吸附法检测TNF-α、IL-6、TGF-β1、MMP-13表达量。结果与对照组治疗后比较,重骨颗粒组在VAS、WOMAC评分、Lequesne MG评分,SF-36中RP、MH外、SAS评分、ESR、CRP、IL-6、TNF-α、MMP-13水平明显降低,miRNA-148a-3p、TGF-β1表达量明显上升(P<0.05,P<0.01)。结论重骨颗粒治疗肝肾亏虚型KOA的临床疗效较好且安全性高,能明显改善膝关节疼痛症状及关节功能,改善患者的生活质量,其作用机制可能与提高miR-148a-3p相对表达量,改善软骨细胞外基质代谢有关。

关键词：重骨颗粒膝骨关节炎 miRNA-148a-3p 临床疗效