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大黄鱼鱼鳔低聚肽的制备及其延缓皮肤衰老的研究

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轻工学报 2025年第1期40卷 107-119页

作者：孙彦庆杜芬朱宗敏冯晓梅尚丽丽曹婉秀刘楚怡青岛黛优佳生物科技有限公司山东青岛266001 青岛海洋生物医药研究院山东青岛266073 中国海洋大学医药学院山东青岛266100

以超氧阴离子自由基清除率为指标,采用单因素试验和响应面试验筛选制备大黄鱼鱼鳔低聚肽(HSBP),并利用人皮肤永生化角质形成细胞(HaCaT细胞)建立氧化损伤模型,检测HSBP对胶原蛋白、透明质酸分泌及抗氧化酶、β-半乳糖苷酶活力的影响,评... 详细信息

以超氧阴离子自由基清除率为指标,采用单因素试验和响应面试验筛选制备大黄鱼鱼鳔低聚肽(HSBP),并利用人皮肤永生化角质形成细胞(HaCaT细胞)建立氧化损伤模型,检测HSBP对胶原蛋白、透明质酸分泌及抗氧化酶、β-半乳糖苷酶活力的影响,评价其氧化损伤修复活性;建立3D重组人表皮屏障损伤模型,分析HSBP对其组织形态学和皮肤屏障相关蛋白表达的影响,综合评价其延缓皮肤衰老的作用。结果表明:HSBP的最佳制备工艺为酶解时间4 h、酶解温度50℃、pH值7.5、菠萝蛋白酶添加量3400 U/g,在此工艺下,超氧阴离子自由基清除率为65.6%;HSBP的重均分子量为480 Da,无刺激性、无致敏性且无细胞毒性;HSBP能显著促进体外培养的氧化损伤细胞分泌透明质酸、Ⅰ型胶原蛋白和Ⅳ型胶原蛋白,同时提高超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶活性;此外,HSBP还能降低丙二醛和β-半乳糖苷酶的含量,显著提高屏障损伤模型丝聚蛋白、兜甲蛋白、谷氨酰胺转移酶Ⅰ和水通道蛋白3的表达量,有效修复屏障损伤的皮肤组织状态,并明显增加活细胞层数。因此,HSBP能有效保护氧化损伤皮肤细胞并修复皮肤屏障损伤,起到延缓皮肤衰老的作用。

关键词：大黄鱼鱼鳔低聚肽氧化损伤皮肤屏障损伤皮肤衰老

高温胁迫对膨腹海马幼苗存活率及抗氧化酶活性的影响

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动物学杂志 2025年

作者：肖文杰郭宝英赵超薛月光刘长琳姜达司仲强浙江海洋大学中国水产科学研究院黄海水产研究所青岛清源海洋生物科技有限公司青岛市黄岛区薛家岛街道办事处农业办

为探明高温胁迫对膨腹海马（Hippocampus abdominalis）幼苗的影响，对20日龄幼苗进行24 h急性高温胁迫，测定其在不同温度和时间下的存活率及抗氧化酶活性。将幼苗从18℃直接转移到22、24、25、26、27、28和30℃，每隔2 h观察死亡数和... 详细信息

为探明高温胁迫对膨腹海马（Hippocampus abdominalis）幼苗的影响，对20日龄幼苗进行24 h急性高温胁迫，测定其在不同温度和时间下的存活率及抗氧化酶活性。将幼苗从18℃直接转移到22、24、25、26、27、28和30℃，每隔2 h观察死亡数和行为状态，构建时间-温度-存活率模型。通过Probit回归分析，得出高起始致死温度（24 h-UILT50）。根据高起始致死温度结果，将幼苗从18℃直接转移到21、24和27℃，持续胁迫24 h，分别在应激0、3、6、12和24 h取样，用生化试剂盒测定不同温度和不同时间点的抗氧化酶活性。结果显示，膨腹海马幼苗的存活率随水温的升高不断降低，其高起始致死温度为27.53℃。在24 h急性高温胁迫过程中，21℃和24℃下超氧化物歧化酶（SOD）及过氧化氢酶（CAT）活性随着时间呈现先降后升的趋势；27℃下，超氧化物歧化酶和过氧化氢酶活性均呈升高趋势，24 h时显著高于对照组（18℃组）（P <0.05）。各温度组总抗氧化能力（T-AOC）的活性随时间均表现出升高-降低-升高的变化，且活性在12h时均降至最低。所有处理组丙二醛（MDA）的含量随时间均呈现升高的趋势，但24℃处理组于胁迫6 h后开始降低。实验表明，急性高温胁迫使膨腹海马幼苗抗氧化酶活性产生了显著变化，其体内抗氧化酶活性被激活用于消除高温应激产生的活性氧自由基（ROS），幼苗体内丙二醛含量显著增加，表明膨腹海马幼苗仍处于氧化应激状态。27℃处理组抗氧化酶活性变化趋势与其余温度处理组间均存在明显差异，表明膨腹海马幼苗无法适应27℃的高温。

关键词：膨腹海马高温胁迫存活率抗氧化酶丙二醛

饲料中添加大型海藻对感染GCRV草鱼肠道菌群和免疫的影响

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水生生物学报 2025年

作者：陈求朱文根安星星文哲宇陈林王耀华张松杨勇贺厚雄颜庆云肖调义许宝红湖南农业大学水产学院南方海洋科学与工程广东省实验室(珠海) 广东联鲲集团有限公司广州市联鲲生物科技有限公司

为研究饲料中添加大型海藻对感染呼肠孤病毒(GCRV)的草鱼(Ctenopharyngodon idella)肠道菌群和免疫的影响,在草鱼饲料中分别添加5%的马尾藻(Sargassum hemiphyllum)、紫杉状海门冬(Asparagopsis taxiformis)、龙须菜(Gracilaria lemaneiformis)藻粉,饲喂草鱼2个月。采用腹腔注射,构建草鱼GCRV感染模型,分析宿主肠道微生物群落和免疫响应。结果显示,饲料中添加大型海藻显著提高了健康草鱼肠道菌群的多样性,改变了特有微生物数量。有效减缓了GCRV感染1d后的草鱼肠道菌群多样性的降低,缩小了GCRV感染4—7d草鱼肠道菌群的组间差异,降低了感染后肠道菌群的紊乱。其中饲料中添加马尾藻和龙须菜组肠道中弧菌属(Vibrio)相对丰度显著降低;饲料中添加马尾藻组肠道中鲸杆菌属(Cetobacterium)相对丰度降低,而拟杆菌属(Bacteroides)相对丰度增加。共现网络分析显示,大型海藻提高了感染GCRV的草鱼肠道菌群现网络的复杂度,增强肠道菌群的稳定性。蛋白表达结果显示,感染后第1天,饲料中添加马尾藻组草鱼血清中促炎补体成分C5a含量增加,而饲料中添加龙须菜组补体成分C5a含量降低。相关性分析表明,补体蛋白C5、C5a成分及其受体(C5aR)的上调表达与肠道中致病菌群相对丰度显著正相关,而与碳水化合物和膳食纤维消化菌群负相关。综上,饲料中添加大型海藻缓解了GCRV感染对草鱼肠道菌群带来的不利影响,并调节感染草鱼的补体表达,可为从饲料开发方面防控草鱼出血病提供新思路。

关键词：草鱼出血病大型海藻 GCRV 肠道微生物补体

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低胎龄母猪繁殖效率低下的成因及解决办法

猪业科学 2025年第1期42卷 99-100页

作者：叶放宁波三生生物科技股份有限公司浙江宁波315000

1低胎龄母猪繁殖效率低下成因分析对于低胎龄母猪繁殖效率低下的成因进行深入分析,可以发现以下几个关键因素。第一,后备母猪选配不严,开配情期不够。后备母猪的生殖系统尚未完全发育成熟,这导致了其发情率和受胎率相对较低,这种生殖系... 详细信息

1低胎龄母猪繁殖效率低下成因分析对于低胎龄母猪繁殖效率低下的成因进行深入分析,可以发现以下几个关键因素。第一,后备母猪选配不严,开配情期不够。后备母猪的生殖系统尚未完全发育成熟,这导致了其发情率和受胎率相对较低,这种生殖系统的不成熟状态,使得母猪在繁殖过程中面临较大的挑战。第二,猪场在管理后备母猪方面存在不足,缺乏科学的培育方案。这种管理上的疏忽,导致后备母猪的生长发育受到影响,进而影响了其繁殖性能,见图1。

关键词：后备母猪繁殖性能发情率受胎率繁殖过程生殖系统发育成熟成因分析

祖先酶序列重构策略介导的耐热型谷氨酸脱羧酶挖掘及用于食品级γ-氨基丁酸高效合成

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生物工程学报 2025年

作者：王宇婷罗兆祎屠羽雯钟添华胡升赵伟睿吕常江产竹华黄俊梅乐和浙江科技大学生物与化学工程学院自然资源部海洋生物遗传资源重点实验室浙大宁波理工学院生物与化学工程学院浙江大学化学工程与生物工程学院

γ-氨基丁酸（γ-aminobutyrate， GABA）是一种非蛋白质氨基酸，作为新型功能性因子，在食品、医药、化工及农业等领域有着广泛的应用价值。谷氨酸脱羧酶（glutamate decarboxylase， GAD）是生物法合成GABA的限速酶，具有良好热稳定... 详细信息

γ-氨基丁酸（γ-aminobutyrate， GABA）是一种非蛋白质氨基酸，作为新型功能性因子，在食品、医药、化工及农业等领域有着广泛的应用价值。谷氨酸脱羧酶（glutamate decarboxylase， GAD）是生物法合成GABA的限速酶，具有良好热稳定性是实现其工业化应用的重要前提。为挖掘热稳定性好、催化活性高的GAD，降低GABA的制备成本，本研究以GABA工业生产菌株短促生乳杆菌（Levilactobacillus brevis）GAD氨基酸序列（LbGAD）为模板，利用FireProtASR系统获得其祖先酶蛋白序列，进一步通过“基因探矿”技术获得1个潜在的鹑鸡肠球菌（Enterococcus gallinarum）源耐热型GAD（EgGAD）。酶学性质分析显示，EgGAD的最适反应温度和pH值分别为60 ℃和pH 5.0，米氏常数(Km)为10.94 mmol/L，催化效率(kcat/Km)为2.07 L/（s·mmol）；半失活温度(T5015)为61.14 ℃，较LbGAD高4.94 ℃，在55 ℃条件下的半衰期(t1/2)为105.04 min，为LbGAD的5倍，表明EgGAD具有良好的催化活性和热稳定性。在此基础上，通过代谢工程手段于益生菌Escherichia coli Nissle 1917细胞中实现了EgGAD的可溶性表达，并研究了工程菌株催合成食品级GABA的性能。结果显示，将诱导后的E. coli Nissle（T7）/pET28a-EggadB细胞加入至含有3 mol/L l-谷氨酸（l-Glu）的200 mL纯水中(OD600为20)，在40 ℃、150 r/min且非控制pH条件下反应4 h后，GABA产量高达300.94 g/L，转化率为99.5%。本研究通过祖先酶序列重构策略介导的基因探矿技术挖掘了1个新的耐热型GAD，为生物法合成GABA提供了一个良好的功能元件，也为其他酶稳定性的改造提供了一个可供借鉴的方法。

关键词： γ-氨基丁酸谷氨酸脱羧酶祖先酶序列重构热稳定性益生菌Escherichia coli Nissle 1917

大鲵活性肽对高脂饮食诱导的肥胖小鼠肠道菌群失调及代谢产物的影响

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食品工业科技 2025年

作者：金桥陈心瑷李林格翟兴月曲敏李伟佟长青大连海洋大学食品科学与工程学院大连沅义科技有限公司大连医科大学附属第二医院临床营养科张家界(中国)金驰大鲵生物科技有限公司

探究大鲵活性肽（giant salamander active peptides，GSAP）对高脂饮食诱导的肥胖小鼠肠道菌群及代谢物的影响。对高脂饮食诱导肥胖小鼠进行30 d的GSAP灌胃处理后，采用试剂盒测定血脂生化指标，高通量测序技术分析GSAP对肠道菌群多样... 详细信息

探究大鲵活性肽（giant salamander active peptides，GSAP）对高脂饮食诱导的肥胖小鼠肠道菌群及代谢物的影响。对高脂饮食诱导肥胖小鼠进行30 d的GSAP灌胃处理后，采用试剂盒测定血脂生化指标，高通量测序技术分析GSAP对肠道菌群多样性和组成结构的影响，非靶向代谢组学技术解析GSAP对小鼠粪便代谢物的影响。大鲵活性肽中（middle-dose GSAP， M-GSAP）、高剂量组（high-dose GSAP，H-GSAP）小鼠李氏指数显著低于肥胖模型组（obesity model，OM）(P<0.05)，GSAP组各剂量组小鼠血脂指标优于OM组。高能量测序分析结果表明GSAP的干预使OM组小鼠肠道菌群向NC组恢复。GSAP导致小鼠粪便中的鹅去氧胆酸、三羟基胆甾酸、1，24-二羟基维生素D3、维生素D3、3β-羟基-5-胆汁酸、熊去氧胆酸和异脱氧胆酸等胆汁酸类代谢物和Pc（16:1e/9-hode）、Pg 44:12、1-十四酰-2-十六酰-sn-甘油-3-磷酸胆碱等油脂类代谢物含量下降。大鲵活性肽对高脂饮食诱导的肥胖小鼠肠道菌群紊乱具有恢复作用，具有作为降脂减肥功能食品成分的潜力。

关键词：大鲵活性肽肠道菌群肥胖 16S rDNA 代谢组学

基于改进第二代非支配遗传算法的甲醇/柴油双燃料船舶发动机参数多目标优化

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内燃机工程 2025年第1期46卷 17-26页

作者：赵柯洋张衡贺波庞轶星程星鑫苏玉香李又一浙江海洋大学海洋工程装备学院舟山316022 中创海洋科技股份有限公司舟山316022 中国科学院宁波材料技术与工程研究所宁波315201

利用一维发动机仿真软件GT-Power搭建了甲醇/柴油M15(即甲醇燃料所占体积比例为15%)混合燃料缸内直喷模型,选取转矩、比燃油消耗率、NOx排放量和CO排放量为优化目标,以发动机的进排气门正时角度、压缩比及空燃比为优化参数开展多目标优... 详细信息

利用一维发动机仿真软件GT-Power搭建了甲醇/柴油M15(即甲醇燃料所占体积比例为15%)混合燃料缸内直喷模型,选取转矩、比燃油消耗率、NOx排放量和CO排放量为优化目标,以发动机的进排气门正时角度、压缩比及空燃比为优化参数开展多目标优化。为实现多目标优化问题的有效求解,采用灰熵并行分析方法改进第二代非支配遗传算法(non-dominated sorting genetic algorithm-Ⅱ,NSGA-Ⅱ),并利用建立的响应面模型对仿真模型计算结果进行了仿真验证。优化结果显示:转矩提升了6.96%,比燃油消耗率降低了1.19%,NOx和CO排放量分别降低了12.37%和3.77%。

关键词：甲醇/柴油第二代非支配遗传算法灰熵并行性能优化

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玉竹多糖和糖蛋白研究进展

农产品加工 2025年第3期 110-113+120页

作者：房佳琦李伟金桥曲敏佟长青大连海洋大学食品科学与工程学院张家界(中国)金驰大鲵生物科技有限公司

玉竹是药食同源类物质，含有丰富的大分子活性物质，其中多糖和糖结合蛋白具有重要的应用价值。因多糖和糖结合蛋白具有抗氧化、抑菌、促进益生菌生长、抗肿瘤、降血糖血脂等多种活性而被广泛关注。对玉竹多糖和糖结合蛋白的制备方法、... 详细信息

玉竹是药食同源类物质，含有丰富的大分子活性物质，其中多糖和糖结合蛋白具有重要的应用价值。因多糖和糖结合蛋白具有抗氧化、抑菌、促进益生菌生长、抗肿瘤、降血糖血脂等多种活性而被广泛关注。对玉竹多糖和糖结合蛋白的制备方法、生物活性及在各领域应用等进行综述，以期为玉竹研究及应用提供一定的理论参考。

关键词：玉竹多糖糖结合蛋白制备活性

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酪蛋白源肽TPTLN助睡眠作用及其机制

食品科学 2025年第3期46卷 119-127页

作者：邓世洁刘玲黄菊冯凤琴赵敏洁杜鹃浙江海洋大学食品与药学学院浙江舟山316000 浙江大学生物系统工程与食品科学学院浙江杭州310000 杭州康源食品科技有限公司浙江杭州310003

目的:明确酪蛋白源肽TPTLN的助睡眠作用并探究其可能的作用机制。方法:将30只小鼠平均分成3组,实验组灌胃酪蛋白源肽TPTLN(剂量为5 mg/kg mb),阳性组腹腔注射地西泮(剂量为1 mg/kg mb),对照组灌胃灭菌水(剂量为5 mg/kg mb),所有实验小... 详细信息

目的:明确酪蛋白源肽TPTLN的助睡眠作用并探究其可能的作用机制。方法:将30只小鼠平均分成3组,实验组灌胃酪蛋白源肽TPTLN(剂量为5 mg/kg mb),阳性组腹腔注射地西泮(剂量为1 mg/kg mb),对照组灌胃灭菌水(剂量为5 mg/kg mb),所有实验小鼠每日称质量,连续给药7 d后进行戊巴比妥钠诱导睡眠行为学实验,评估睡眠质量,再继续给药4 d后进行解剖取样;通过酶联免疫吸附试验测定小鼠血清和脑组织中5-羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)、γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid,GABA)、5-羟基吲哚乙酸(5-hydroxyindoleacetic acid,5-HIAA)、谷氨酸(glutamate,Glu)、β-内啡肽(β-endorphin,β-EP)、皮质醇、去甲肾上腺素(noradrenaline,NE)的质量浓度以及对GABA/Glu值进行评估;实时荧光定量聚合酶链式反应分析TPTLN对下丘脑中γ-氨基丁酸A型受体α1亚单位(γ-aminobutyric acid A receptorα1,GABAA-α1)和5-羟色胺受体1A(5-hydroxytryptamine receptor 1A,5-HT1A)mRNA相对表达水平的影响。结果:相比于对照组,TPTLN在戊巴比妥钠的协同下可以提高小鼠的入睡率至100%,睡眠潜伏期显著缩短31.7%(P<0.05),睡眠时长延长1.1倍(P<0.05);血清和脑组织中GABA/Glu的比值分别提高了68.8%和19.3%,明显改善了GABA/Glu抑制/兴奋代谢失衡(P<0.001,P<0.0001),血清中GABA的质量浓度高度显著提高了49.4%(P<0.001),脑组织中5-HT的水平上升了7.6%,脑组织中皮质醇、NE的含量分别显著降低了24.3%和23.4%(P<0.05);显著上调了GABAA-α1和5-HT1A基因表达水平(P<0.01、P<0.05),分别是对照组的1.5倍和1.3倍。结论:酪蛋白源肽TPTLN具有良好的助睡眠作用,其机制可能与调控GABAA-α1、5-HT1A的水平及脑内神经递质GABA、Glu、5-HT、皮质醇、NE的含量有关。

关键词：酪蛋白肽助睡眠神经递质作用机制