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雀麦属窄穗组杂草DNA条形码方法的研究

植物检疫 2024年第4期38卷 26-33页

作者：徐瑛赵雷张吉红方亦午伏建国宁波海关技术中心浙江宁波315192 宁波检验检疫科学技术研究院南京海关动植物及食品检测中心

为建立窄穗组常见入侵杂草的DNA条形码鉴定方法,选取核基因组的ITS2、ITS,叶绿体基因组的mat K、ndh F、trn T-trn L、rpl32-trn L、rpo B-trn C和trn C-pet N等8个片段进行筛选。综合进化树、种间差异,barcoding gap等多项指标,结果表... 详细信息

为建立窄穗组常见入侵杂草的DNA条形码鉴定方法,选取核基因组的ITS2、ITS,叶绿体基因组的mat K、ndh F、trn T-trn L、rpl32-trn L、rpo B-trn C和trn C-pet N等8个片段进行筛选。综合进化树、种间差异,barcoding gap等多项指标,结果表明trn T-trn L、rpl32-trn L、trn C-pet N和rpo B-trn C序列鉴定效果相对较好,ITS2、ndh F、ITS和mat K序列分辨能力较差。基于叶绿体基因组的trn T-trn L和rpl32-trn L序列,在扩增测序的成功率、种间变异、物种鉴定能力、聚类分析等均表现较好,虽然在一些种内存在较高的种内变异,在形态鉴定的基础上可作为窄穗组DNA条形码鉴定的推荐片段。

关键词：雀麦属窄穗组杂草 DNA条形码

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杜鹃芽枯病菌PCR及实时荧光PCR检测

植物检疫 2024年第4期38卷 49-54页

作者：龚静如段维军龚婕王寅鹏崔金璐易建平上海海关动植物与食品检验检疫技术中心上海200135 宁波海关

根据GenBank中杜鹃芽枯病菌(Seifertia azaleae)及其相关种ITS序列设计特异引物SA1/SA2和探针SA-P,建立杜鹃芽枯病菌常规PCR和实时荧光PCR检测方法。引物SA1/SA2能扩增5株S. azaleae菌株DNA,得到351 bp的预期扩增产物,其他供试菌株均不... 详细信息

根据GenBank中杜鹃芽枯病菌(Seifertia azaleae)及其相关种ITS序列设计特异引物SA1/SA2和探针SA-P,建立杜鹃芽枯病菌常规PCR和实时荧光PCR检测方法。引物SA1/SA2能扩增5株S. azaleae菌株DNA,得到351 bp的预期扩增产物,其他供试菌株均不能扩增出预期产物,检测灵敏度达60 pg菌体DNA。探针SA-P对5株S. azaleae均表现为阳性扩增,其他供试菌株均为阴性扩增,检测灵敏度可达60 fg菌体DNA,比常规PCR高1000倍。对杜鹃花苞样品和叶片样品的检测结果表明常规PCR和实时荧光PCR检测方法均可用于进境杜鹃种苗中杜鹃芽枯病菌的快速检测。

关键词：杜鹃芽枯病菌检测常规PCR 实时荧光PCR

基于红外光谱PCA-LDA统计分析的麻纤维鉴别研究

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丝绸 2024年第7期61卷 102-108页

作者：蒋晶晶金肖克李伟松庄莉袁绪政祝成炎国家纺织服装产品质量检验检测中心(浙江桐乡) 浙江嘉兴314502 浙江理工大学纺织科学与工程学院(国际丝绸学院) 杭州310018

亚麻、汉麻与苎麻纤维的成分组成和物化性质高度相似,三者间的分类鉴别是纺织品检验检测领域的难点。本文对不同种类麻纤维的傅里叶变换衰减全反射红外光谱(ATR-FTIR)作主成分分析(PCA)和线性判别分析(LDA),创建麻纤维分类判别模型以鉴... 详细信息

亚麻、汉麻与苎麻纤维的成分组成和物化性质高度相似,三者间的分类鉴别是纺织品检验检测领域的难点。本文对不同种类麻纤维的傅里叶变换衰减全反射红外光谱(ATR-FTIR)作主成分分析(PCA)和线性判别分析(LDA),创建麻纤维分类判别模型以鉴别三种易混麻纤维。选取亚麻、汉麻和苎麻纤维各60组作为样品集进行脱胶清洗处理并采集ATR-FTIR光谱。光谱归一化后对800~2000 cm-1波长的光谱作主成分分析,分析结果显示:随着主成分个数增加,主成分分数依据麻纤维类别逐渐显现聚类趋势,同时前12个主成分对归一化红外光谱数据的累计贡献率超过99.5%。以训练集前12主成分数为自变量,以麻纤维种类为因变量,通过线性判别分析构建了分类判别模型(典型判别函数和分类函数)。模型验证结果显示:典型判别函数可使前12个主成分分数矩阵根据麻纤维样品类型形成良好的聚类,分类函数对训练集和测试集中所有纤维样品的分类准确率达到100%。此外,PCA-LDA分类判别模型留一交叉验证的分类准确率仍能达到99.6%。结果表明,不同类别麻纤维的ATR-FTIR光谱存在差异,基于麻纤维ATR-FTIR光谱的PCA-LDA统计分析可实现亚麻、汉麻和苎麻三种易混麻纤维的快速无损鉴别。

关键词：亚麻汉麻苎麻鉴别红外光谱主成分分析线性判别分析

苜蓿轮枝菌RPA/CRISPR-Cas12a快速检测方法的建立

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菌物学报 2024年第9期43卷 80-95页

作者：李茗乐雷荣杨藜孙夕雯杨益芬王新一范在丰段维军吴品珊中国农业大学植物保护学院农业农村部植物检疫性有害生物监测防控重点实验室北京100093 中国检验检疫科学研究院北京100176 宁波检验检疫科学技术研究院浙江宁波315012 成都海关技术中心四川成都610041 大连大学辽宁大连116622

苜蓿轮枝菌Verticillium alfalfae是我国重要的进境植物检疫对象,能够对十几种作物造成严重危害。为了快速检测苜蓿轮枝菌,本研究选用苜蓿轮枝菌的特征序列扩增区域[sequence characterized amplified region(SCAR)marker]作为目标基因... 详细信息

苜蓿轮枝菌Verticillium alfalfae是我国重要的进境植物检疫对象,能够对十几种作物造成严重危害。为了快速检测苜蓿轮枝菌,本研究选用苜蓿轮枝菌的特征序列扩增区域[sequence characterized amplified region(SCAR)marker]作为目标基因,设计了特异性引物Va-RPA-F/Va-RPA-R和CRISPR引导RNA(Va-crRNA),建立了重组酶聚合酶等温扩增技术结合CRISPR-Cas12a的快速检测方法。对该检测体系的反应时间、组分浓度等进行优化,结果显示苜蓿轮枝菌基因组DNA在39℃恒温条件下扩增30 min后,其扩增产物用基于CRISPR-Cas12a的荧光法和侧向流层析试纸条两种方法检测,可检测到10.6pg基因组DNA,其灵敏度与实时荧光定量PCR结果相当,加标回收实验结果证明本研究建立的方法可成功用于植物组织中苜蓿轮枝菌的快速检测。

关键词：苜蓿轮枝菌重组酶聚合酶等温扩增 CRISPR-Cas12a检测系统快速检测

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根结属线虫形态鉴定多歧检索表

植物检疫 2024年第5期38卷 21-25页

作者：马欣欣方亦午顾建锋宁波海关技术中心/宁波检验检疫科学技术研究院浙江宁波315100 中盛产品检测有限公司

根结属线虫为植物根系专性内寄生线虫,可侵入寄主植物根内部为害,是为害最严重的线虫类群之一。其常见的虫态为2龄幼虫,虫体小,种间形态近似,且种内差异较大。其成虫不易获得,且雄虫通常没有显著的种类鉴定特征,雌虫的会阴花纹相似度高... 详细信息

根结属线虫为植物根系专性内寄生线虫,可侵入寄主植物根内部为害,是为害最严重的线虫类群之一。其常见的虫态为2龄幼虫,虫体小,种间形态近似,且种内差异较大。其成虫不易获得,且雄虫通常没有显著的种类鉴定特征,雌虫的会阴花纹相似度高,因此形态鉴定十分困难。本文在Subbotin等发表的多歧检索表的基础上,将现已发表的根结属线虫进行了进一步整理,以便于国内农业生产或海关口岸在根结线虫检疫鉴定时参考。

关键词：根结属线虫形态学鉴定多歧检索表

中空纤维液相微萃取-气相色谱-质谱联用法测定纺织品中的芳香胺

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化学研究与应用 2024年第5期36卷 1143-1147页

作者：麦宝华郭宗宁禹伟腾深圳市检验检疫科学研究院广东深圳518010 黄埔海关技术中心广东东莞523071 深圳海关工业品检测技术中心广东深圳518067

本文结合中空纤维液相微萃取(HF-LPME)与气相色谱-质谱(GC-MS)联用技术,建立了纺织品中邻氨基苯甲醚、2-甲氧基-5-甲基苯胺、2-萘胺、4-氨基联苯、3,3’-二氯联苯胺5种芳香胺类物质的分析方法。优化后的液相微萃取条件:样品溶液pH调节为... 详细信息

本文结合中空纤维液相微萃取(HF-LPME)与气相色谱-质谱(GC-MS)联用技术,建立了纺织品中邻氨基苯甲醚、2-甲氧基-5-甲基苯胺、2-萘胺、4-氨基联苯、3,3’-二氯联苯胺5种芳香胺类物质的分析方法。优化后的液相微萃取条件:样品溶液pH调节为12,以甲苯为萃取溶剂,在室温及300 rpm搅拌速度下,萃取30min。富集倍数最高能达185倍。方法的检测线性范围0.05~10μg·mL^(-1),检出限均低于10 ng·mL^(-1),精密度(RSD,n=6)为3.8~7.9%,回收率为84.0~119.8%。

关键词：中空纤维液相微萃取气相色谱质谱偶氮染料芳香胺纺织品

乙醇/K_(2)HPO_(4)水萃取体系结合GC检测杨梅酒中农药残留

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酿酒科技 2024年第6期 130-134页

作者：余优霞谢冉阳陈英子王辉鲍盈颖宁海县食品检测中心浙江宁波315600 宁海县农业农村局浙江宁波315600

以杨梅酒中的乙醇为萃取剂,将乙醇/K_(2)HPO_(4)水作为萃取体系,利用GC检测酒中的农药残留。在盐析过程中加入适量的磷酸二氢钾,可以实现两相快速分层;在净化过程中加入适量硫酸镁,即可实现萃取液净化。16种农残在10~500 mg/L范围内线... 详细信息

以杨梅酒中的乙醇为萃取剂,将乙醇/K_(2)HPO_(4)水作为萃取体系,利用GC检测酒中的农药残留。在盐析过程中加入适量的磷酸二氢钾,可以实现两相快速分层;在净化过程中加入适量硫酸镁,即可实现萃取液净化。16种农残在10~500 mg/L范围内线性关系良好,线性关系系数均大于0.999,定量限在3.2~18.2μg/kg之间;16种农药的加标回收率在76%~118%之间,相对标准偏差为0.4%~10%。本方法测定杨梅酒中的农药残留具有快速、简单的特点,可应用于酒中农残的检测,同时也适用于枇杷酒中农药残留的测定。

关键词：杨梅酒农药残留盐析萃取 GC

基于TaqMan MGB探针的土栖棘壳孢快速检测方法

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菌物学报 2024年第9期43卷 114-123页

作者：李雪莲刘芳段维军宁波检验检疫科学技术研究院浙江宁波315012 中华人民共和国宁波海关技术中心浙江宁波315012 中国科学院微生物研究所真菌学国家重点实验室北京100101

为确保对检疫性洋葱粉色根腐病病原土栖棘壳孢Setophoma terrestris进行准确快速的检测鉴定,本研究依据土栖棘壳孢模式菌株与近缘种在ITS序列上的差异位点,建立了该病菌基于TaqMan MGB探针的实时荧光定量PCR检测方法。该方法整个反应过... 详细信息

为确保对检疫性洋葱粉色根腐病病原土栖棘壳孢Setophoma terrestris进行准确快速的检测鉴定,本研究依据土栖棘壳孢模式菌株与近缘种在ITS序列上的差异位点,建立了该病菌基于TaqMan MGB探针的实时荧光定量PCR检测方法。该方法整个反应过程仅需约1h,其最低检测限量可达1 pg/μL;优化后的反应条件下,引物终浓度为0.6μmol/L,探针终浓度为0.6μmol/L。该方法具有高度的准确性、快速性和灵敏度,不仅适用于纯培养菌株的检测,也能检测洋葱组织样品中的土栖棘壳孢,为农林业生产和海关检验检疫提供了技术手段。

关键词：外来物种生物安全植物病害检疫检测

ACQ、AIE聚合物纳米粒子发光性能及其在喷墨印花中的应用

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现代纺织技术 2024年第4期32卷 84-92页

作者：梁小琴梁梨花朱尽顺马明月嘉兴职业技术学院时尚设计学院浙江嘉兴314036 浙江理工大学纺织科学与工程学院(国际丝绸学院) 杭州310018 湖北省纤维检验局黄冈分局(湖北省纤维制品检测中心黄冈分中心) 湖北黄冈438000

为探究聚集诱导猝灭(ACQ)型和聚集诱导发光(AIE)型聚合物纳米粒子(PNPs)的发光性能,以及二者在喷墨印花中的应用效果,采用细乳液聚合技术原位包覆ACQ染料尼罗红(NR)和AIE染料四苯基乙烯(TPE),制得ACQ-PNPs和AIE-PNPs。采用重量法、动态... 详细信息

为探究聚集诱导猝灭(ACQ)型和聚集诱导发光(AIE)型聚合物纳米粒子(PNPs)的发光性能,以及二者在喷墨印花中的应用效果,采用细乳液聚合技术原位包覆ACQ染料尼罗红(NR)和AIE染料四苯基乙烯(TPE),制得ACQ-PNPs和AIE-PNPs。采用重量法、动态光散射、扫描电镜、紫外-可见分光光度法和荧光光谱法等研究了染料用量对PMMA/NR NPs和PMMA/TPE NPs的最终转化率、颗粒特征和发光性能的影响;将poly(MMA-co-20%BA)/NR NPs和poly(MMA-co-20%BA)/TPE NPs乳液配制成墨水,用于棉织物的喷墨打印,探究两类墨水在棉织物上的喷墨印花效果。结果表明:当染料质量分数低于1.5%时,NR和TPE染料对PMMA/NR NPs和PMMA/TPE NPs体系聚合反应最终转化率和纳米粒子尺寸影响均较小,PMMA/NR NPs荧光强度随NR染料质量分数的增加呈现先增加后趋于稳定的趋势,而PMMA/TPE NPs荧光强度与TPE染料近乎呈线性正相关。此外,经poly(MMA-co-20%BA)/NR和poly(MMA-co-20%BA)/TPE NPs墨水喷墨打印后的棉织物,其图案分别呈现出明亮的红色和蓝色荧光。研究表明,在合适的染料浓度范围内,采用细乳液聚合法制得的ACQ和AIE聚合物纳米粒子乳液在喷墨印花领域中均有良好的应用前景。

关键词：聚集诱导发光聚集荧光猝灭聚合物纳米粒子细乳液聚合发光性能喷墨印花