检索结果-南通市图书馆

维普期刊数据库博看期刊

基于谷氨酸消旋酶基因(murI)构建杀香鱼假单胞菌减毒活疫苗株的染色体-质粒平衡致死表达系统

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

微生物学报 2024年第3期64卷 767-779页

作者：张明明叶浩达张朝政王鹏程王克诠严小军陶震浙江海洋大学水产学院浙江舟山316022 宁波大学海洋学院浙江宁波315211

【目的】构建一种基于谷氨酸消旋酶(MurI)基因的染色体-质粒平衡致死系统,用于杀香鱼假单胞菌减毒活疫苗株(Pseudomonas plecoglossicidaΔtssD-1,PpΔtssD-1)中表达外源抗原,为开发多联活疫苗提供新的思路和方法。【方法】利用同源重... 详细信息

【目的】构建一种基于谷氨酸消旋酶(MurI)基因的染色体-质粒平衡致死系统,用于杀香鱼假单胞菌减毒活疫苗株(Pseudomonas plecoglossicidaΔtssD-1,PpΔtssD-1)中表达外源抗原,为开发多联活疫苗提供新的思路和方法。【方法】利用同源重组技术,将亲本株PpΔtssD-1中的murI基因敲除,构建murI基因缺失突变株;将广宿主穿梭质粒pBBR1MCS-2的卡那霉素抗性基因替换为murI基因,构建平衡致死质粒(即无抗性回补质粒);在平衡致死质粒的多克隆位点处插入绿色荧光蛋白以检测外源抗原是否稳定表达,对重组菌株进行生物学特性分析,包括生长曲线、质粒稳定性和外源抗原表达水平。【结果】murI基因缺失株在不含D-谷氨酸的LB培养基上无法生长;无抗性回补株在不含D-谷氨酸的LB培养基上恢复了生长能力,但生长速度低于亲本株;经鉴定外源抗原可在无抗性质粒中稳定表达,并可在荧光显微镜下观察到明显的绿色荧光信号;此外,平衡致死质粒在重组菌株中具有良好的遗传稳定性。【结论】本研究以murI为靶点构建了新型的染色体-质粒平衡致死系统,可在无抗性筛选条件下在PpΔtssD-1中表达外源抗原,为开发多联活疫苗提供了新的策略和方法。

关键词：杀香鱼假单胞菌ΔtssD-1株营养缺陷株平衡致死系统 D-谷氨酸

春季和秋季播苗的缢蛏(Sinonovacula constricta)生长模型及肥满度比较研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

海洋与湖沼 2024年第3期55卷 736-745页

作者：方增冰梅泊承赵淳朴徐继林王丹丽徐善良宁波海洋研究院浙江宁波315832 宁波大学海洋学院浙江宁波315211

春季播苗和秋季播苗是缢蛏养殖的两种播苗方式,因养殖过程的水温和饵料不同,春季和秋季播苗的缢蛏生长存在差异。为了更加直观地描述春、秋季播苗缢蛏的生长过程,选取von Bertalanffy、Gompertz、Logistic、Brody四种生长模型拟合春、... 详细信息

春季播苗和秋季播苗是缢蛏养殖的两种播苗方式,因养殖过程的水温和饵料不同,春季和秋季播苗的缢蛏生长存在差异。为了更加直观地描述春、秋季播苗缢蛏的生长过程,选取von Bertalanffy、Gompertz、Logistic、Brody四种生长模型拟合春、秋季播苗缢蛏壳长、湿重生长,分别确定春、秋季播苗缢蛏最适生长模型。同时观察了其肥满度的周年变化。研究表明:春季播苗缢蛏壳长和湿重生长的最适拟合模型是Logistic模型;秋季播苗缢蛏壳长和湿重生长的最适拟合模型则分别是Logistic模型和von Bertalanffy模型。两季节的生长特征都是壳长生长拐点时间早于湿重生长拐点,春、秋季播苗缢蛏的壳长生长拐点分别是51.95 d(壳长24.32 mm)、76.25 d(壳长29.30 mm);湿重生长拐点分别是108.09 d(湿重2.75 g)、147.98 d(湿重5.64 g)。春、秋季播苗缢蛏周年肥满度变化均出现两个峰值。结合实测生长数据,秋季播苗缢蛏在翌年5月(247 d)个体规格可达到100 ind./kg以下;而春季播苗缢蛏需要养殖327 d才能达到100 ind./kg左右,秋季播苗比春季播苗可缩短养殖时间3个月左右,既减少成本也降低了养殖风险。研究结果为缢蛏秋季播苗提供了科学理论依据,可有效缩短养殖周期,提前收获上市。

关键词：缢蛏(Sinonovacula constricta) 播苗季节生长模型生长拐点肥满度

基于CO I和16S rRNA基因序列分析与比较中国沿海7个脊尾白虾群体的遗传多样性

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国水产科学 2024年第2期31卷 165-176页

作者：袁杭洋周万铠郑泽延林国锡徐永健宁波大学海洋学院

脊尾白虾(Exopalaemoncarinicauda)作为我国沿海特有经济虾类之一,具有繁殖能力强、环境适应能力强、生长周期快等生物学优点。为探究我国沿海脊尾白虾不同地理群体的遗传变异状况,采用PCR产物纯化测序方法,分别测定了两个空间序列,包... 详细信息

脊尾白虾(Exopalaemoncarinicauda)作为我国沿海特有经济虾类之一,具有繁殖能力强、环境适应能力强、生长周期快等生物学优点。为探究我国沿海脊尾白虾不同地理群体的遗传变异状况,采用PCR产物纯化测序方法,分别测定了两个空间序列,包括小尺度序列(浙北、浙中、浙南)和大尺度序列[渤海、黄海、东海(浙江)、东海(福建)及南海],共7个野生群体总计210个脊尾白虾样品的CO I和16S rRNA基因序列。获得了长度为515 bp的CO I基因序列,其A+T含量为58.65%;获得了长度为520bp的16SrRNA基因序列,其A+T含量为62.02%。COI与16S rRNA基因序列分析结果一致,黄海群体的遗传多样性最高,南海群体的遗传多样性最低。AMOVA结果分析也一致,群体内的遗传变异大于群体间的遗传变异。两个基因序列分析的不同在于:CO I基因序列分析共检测到有63个变异位点,单倍型多样性(Hd)为0.353～0.809,核苷酸多样性Pi为0.00140～0.00497; 16S rRNA基因序列分析共检测到有41个变异位点,单倍型多样性(Hd)为0.265～0.801,核苷酸多样性(Pi)为0.00102～0.00403。结论认为,COI基因的变异更大,可以分辨更小尺度空间序列上的样本间的遗传差异。本研究结果可为脊尾白虾种质资源保护提供基础数据。

关键词：脊尾白虾 CO I 16S rRNA 遗传多样性空间序列

来源：博看期刊

美人鱼发光杆菌(Photobacterium damselae)感染对银鲳(Pampus argenteus)肠道微生物的影响

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

海洋与湖沼 2024年第1期55卷 213-222页

作者：王飞扬陈素阳解家松姜建湖郭建林张海琪浙江省淡水水产研究所浙江湖州313001 宁波大学海洋学院浙江宁波315211

银鲳(Pampus argenteus)是我国沿海重要的经济鱼类和水产养殖重要品种,近年来因过度捕捞其野生种群数量日渐减少。美人鱼发光杆菌(Photobacterium damselae,PDD)是多种水产动物发病的主要病原菌,也是银鲳养殖中的一种常见病原微生物,会... 详细信息

银鲳(Pampus argenteus)是我国沿海重要的经济鱼类和水产养殖重要品种,近年来因过度捕捞其野生种群数量日渐减少。美人鱼发光杆菌(Photobacterium damselae,PDD)是多种水产动物发病的主要病原菌,也是银鲳养殖中的一种常见病原微生物,会引起造成银鲳大规模死亡的出血病,但目前尚不清楚美人鱼发光杆菌感染后对银鲳肠道微生物的影响。通过注射使银鲳感染PDD,在24 h和72 h分别采集健康及患病银鲳的中肠和后肠进行16S rRNA基因扩增子测序,并结合Illumina Nova测序平台进行测序和数据分析,研究PDD感染后不同时间银鲳体内微生物群落组成结构的动态变化。结果表明,PDD感染后在银鲳肠道内大量增殖并占据优势,引起银鲳体内肠道微生物的动态变化。PDD的侵入及在银鲳肠道中的增殖并占据优势,导致银鲳肠道内微生物群落组成结构紊乱。PDD的过度生长与肠道微生物群落构成失调密切相关,显示了肠道微生物群落结构平衡的重要性。研究结果有助于深入探究水产动物肠道微生物的多样性、功能及相互关系,为银鲳养殖业的健康管理提供科学依据。

关键词：银鲳(Pampus argenteus) 肠道微生物美人鱼发光杆菌(Photobacterium damselae) 疾病群落结构平衡

盐碱水池塘不同饵料投喂条件下拟穴青蟹生长、营养及血清生化指标的比较

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

水产学报 2024年第4期48卷 350-365页

作者：周冬平刘磊付媛媛方伟王超越王春琳宁波大学海洋学院宁波海洋研究院

为探究盐碱水池塘养殖条件下投喂不同饵料对池塘水质及拟穴青蟹生长、营养品质及血清生化指标的影响，实验设置青柳蛤、矛尾复虾虎鱼、鹰爪虾3种生物饵料组和1种人工配合饲料组，各组设置3个重复，实验周期4个月，分析各组池塘水质变化... 详细信息

为探究盐碱水池塘养殖条件下投喂不同饵料对池塘水质及拟穴青蟹生长、营养品质及血清生化指标的影响，实验设置青柳蛤、矛尾复虾虎鱼、鹰爪虾3种生物饵料组和1种人工配合饲料组，各组设置3个重复，实验周期4个月，分析各组池塘水质变化，并采用单因素方差分析(One-Way ANOVA)方法比较各组蟹的生长、营养及血清生化指标。结果显示，各组水温、盐度与pH差异较小，而溶解氧、氨氮、亚硝酸盐氮差异较大，其中，矛尾复虾虎鱼组溶解氧从11.5降至9.2 mg/L，而氨氮、亚硝酸盐氮分别从养殖初期0.44、0.022 mg/L上升到养殖末期的0.89、0.050 mg/L。青柳蛤组的体重(334 g)、增重率(332.7%)和特定生长率(0.076%/d)显著高于其他组，人工配合饲料组存活率最高，达到66.67%，矛尾复虾虎鱼组的肥满度(0.221 g/cm3)显著高于其他组；青柳蛤组的肌肉必需氨基酸中的缬氨酸、蛋氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸含量及肝胰腺呈味氨基酸总量和鲜味氨基酸总量在各组中最高，人工配合饲料组肝胰腺必需氨基酸中的苏氨酸、亮氨酸、赖氨酸、组氨酸含量在各组中最高，鹰爪虾组的肌肉呈味氨基酸总量和鲜味氨基酸总量在各组中最高，青柳蛤组的肌肉与肝胰腺饱和脂肪酸、多不饱和脂肪酸、脂肪酸含量均为最高；青柳蛤组的总蛋白含量显著高于其他组，矛尾复虾虎鱼组的总胆固醇显著高于其他组，人工配合饲料组的谷草转氨酶、甘油三酯、葡萄糖显著高于其他组，相关性分析显示青柳蛤等生物饵料常规营养与拟穴青蟹各生长指标存在显著正相关。研究表明，青柳蛤组拟穴青蟹在生长、营养及血清蛋白质指标上具有显著优势，可以作为盐碱水池塘养殖拟穴青蟹的适口饵料。本研究将为拟穴青蟹北方盐碱水池塘养殖和推广提供数据参考。

关键词：拟穴青蟹水质生长营养血清生化指标饵料盐碱水池塘

三叶崖爬藤查耳酮异构酶基因克隆与外源诱导表达及酶活性分析

在线全文

同方期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

中草药 2024年第5期55卷 1677-1685页

作者：郦露群龚一富宋奕珩高孟雪王何瑜宁波大学海洋学院浙江省海洋生物工程重点实验室浙江宁波315832 宁波大学食品与药学学院浙江宁波315832

目的克隆三叶崖爬藤Tetrastigma hemsleyanum查耳酮异构酶(chalcone isomerase,CHI)基因,探究CHI基因对三叶崖爬藤黄酮合成途径的调控作用。方法分析三叶崖爬藤转录组,获得三叶崖爬藤CHI基因序列,并进行生物信息学分析。采用实时荧光定... 详细信息

目的克隆三叶崖爬藤Tetrastigma hemsleyanum查耳酮异构酶(chalcone isomerase,CHI)基因,探究CHI基因对三叶崖爬藤黄酮合成途径的调控作用。方法分析三叶崖爬藤转录组,获得三叶崖爬藤CHI基因序列,并进行生物信息学分析。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)测定三叶崖爬藤根、茎、块茎、老叶、幼叶及吲哚-3-乙酸(3-indoleacetic acid,IAA)、茉莉酸甲酯(methyl jasmonate,MeJA)、脱落酸(abscisic acid,ABA)、水杨酸(salicylic acid,SA)和酵母提取物(yeast extract,YE)等诱导条件下CHI基因的表达量,利用分光光度法测定黄酮含量和CHI酶活性变化,并对其进行相关性分析。结果转录组数据分析结果表明,三叶崖爬藤CHI基因全长为1096 bp(GenBank序号:OQ588006),含有1个长为714 bp的开放阅读框,编码237个氨基酸。三叶崖爬藤CHI蛋白分子式为C1148H1819N285O348S5,等电点(PI)为5.28,相对分子质量为25340,编码的氨基酸全都在膜外,不具跨膜结构,也不存在信号肽。三维空间结构分析表明,三叶崖爬藤CHI蛋白呈明显的倒置三明治状折叠结构,属于Chalcone-3超基因家族。进化树分析结果表明,三叶崖爬藤CHI蛋白序列与葡萄科植物亲缘关系最近。qRT-PCR结果表明,三叶崖爬藤CHI基因在三叶崖爬藤根、茎、块茎、老叶和幼叶等不同组织中均表达。诱导分析结果表明,5种外源诱导物质均提高了三叶崖爬藤黄酮含量,ABA诱导后CHI基因表达水平在72 h达到最高,其余诱导处理CHI基因表达量均在96 h达到最高,CHI酶活性均在96 h达到最高。相关性分析结果表明,三叶崖爬藤黄酮含量与CHI基因表达量不存在显著相关性,与CHI酶活性存在极显著正相关(R 2=0.453)。结论成功克隆了三叶崖爬藤CHI基因,该基因在三叶崖爬藤各组织中均表达。IAA、MeJA、ABA、SA和YE均促进CHI基因表达及酶活性的上升,在转录和翻译水平上调控三叶崖爬藤黄酮合成。

关键词：三叶崖爬藤查耳酮异构酶黄酮克隆外源诱导酶活性

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

不同养殖模式对中华绒螯蟹品质的影响

水生生物学报 2024年

作者：金鑫程润强张娣耿昌盛李晔宁波大学海洋学院

为探究不同养殖模式对中华绒螯蟹（Eriocheir sinensis）品质的影响,实验采集了阳澄湖地区池塘养殖模式和盘锦地区稻田养殖模式的中华绒螯蟹（分别简称池塘蟹和稻田蟹）,比较其组织系数、总可食率、游离氨基酸组成、类胡萝卜素含量、抗... 详细信息

为探究不同养殖模式对中华绒螯蟹（Eriocheir sinensis）品质的影响,实验采集了阳澄湖地区池塘养殖模式和盘锦地区稻田养殖模式的中华绒螯蟹（分别简称池塘蟹和稻田蟹）,比较其组织系数、总可食率、游离氨基酸组成、类胡萝卜素含量、抗氧化酶活性及DNA甲基化水平的差异。结果显示:稻田蟹性腺指数（GSI）、出肉率（MY）、总可食率（TEY）均高于池塘蟹,其中MY和TEY差异极显著(**P0.05）。此外,在两种养殖模式下,河蟹不同组织的DNA甲基化呈显著差异。上述结果表明,不同的养殖模式对中华绒螯蟹的总可食率、游离氨基酸含量及类胡萝卜素含量具有显著影响,从而形成不同的品质。而DNA甲基化水平的显著差异,预示着不同的养殖模式可能通过DNA甲基化的变化调控基因的表达从而实现风味的变化。

关键词：游离氨基酸类胡萝卜素抗氧化酶 DNA甲基化中华绒螯蟹

正交设计的诱导子组合对三角褐指藻岩藻黄素含量和光合生理及基因表达的影响

在线全文

同方期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

中国药学杂志 2024年第10期59卷 879-886页

作者：吴欣龚一富郦露群高小雯吕娇王何瑜宁波大学海洋学院浙江省海洋生物工程重点实验室浙江宁波315832 宁波大学食品与药学学院浙江宁波315832

目的研究光合诱导因子(PIF)、茉莉酸甲酯(MeJA)、硫酸铈铵(ACS)和乙酰水杨酸(ASA)不同浓度组合对三角褐指藻岩藻黄素含量的影响,筛选促进岩藻黄素积累的最佳诱导子组合,并研究最佳诱导子组合处理下岩藻黄素含量积累的光合生理及基因表... 详细信息

目的研究光合诱导因子(PIF)、茉莉酸甲酯(MeJA)、硫酸铈铵(ACS)和乙酰水杨酸(ASA)不同浓度组合对三角褐指藻岩藻黄素含量的影响,筛选促进岩藻黄素积累的最佳诱导子组合,并研究最佳诱导子组合处理下岩藻黄素含量积累的光合生理及基因表达变化。方法采用4因素4水平正交试验法筛选出对三角褐指藻岩藻黄素含量促进效果最佳的诱导子组合,调制叶绿素荧光(PAM)检测最佳诱导子组合处理下三角褐指藻的叶绿素荧光参数,反转录-实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测zds、lcyb、rbcL及psbA基因的表达水平。结果正交试验结果表明,MeJA是影响三角褐指藻藻细胞岩藻黄素积累最显著的因素,其次是ASA。促进三角褐指藻岩藻黄素积累的最佳诱导子组合为1μg·L^(-1)PIF+0.2 mg·L^(-1)ACS+40 mg·L^(-1)ASA。该诱导子组合处理下三角褐指藻岩藻黄素含量达到21.77 mg·g^(-1),较对照组提高了104%。光合生理研究结果表明,诱导子组合显著提高了三角褐指藻藻细胞的最大相对电子传递速率(rETRmax)值(P<0.05)。RT-qPCR分析结果表明,诱导子组合促进三角褐指藻岩藻黄素合成相关基因zds、lcyb及光合作用PSⅡ碳同化相关基因rbcL、psbA基因的表达,其中,rbcL基因的表达量最高,是对照处理组的2.0倍(P<0.01)。结论三角褐指藻岩藻黄素含量与zds基因呈显著正相关,与rETRmax、chla含量、lcyb、rbcL、psbA基因表达量呈极显著正相关,三角褐指藻可通过促进光合作用基因表达和PSⅡ相对电子传递速率来提高光合作用效率、促进岩藻黄素合成相关基因表达来促进岩藻黄素积累。

关键词：三角褐指藻岩藻黄素正交试验光合生理指标基因表达

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

水稻OsCYP22互作蛋白的筛选及验证

作物学报 2024年第6期50卷 1628-1634页

作者：张小芳朱琪华芸堰贾黎惠莹邱士优陈宇杰马涛丁沃娜宁波大学科学技术学院/宁波市农业种质资源挖掘与环境调控重点实验室浙江宁波315300 宁波大学海洋学院浙江宁波315211

为了探究水稻亲环素家族基因OsCYP22的功能,构建OsCYP22酵母双杂交诱饵载体,并利用水稻酵母双杂交cDNA文库筛选与OsCYP22相互作用蛋白。自激活试验结果表明,OsCYP22诱饵载体无自激活活性,也对酵母细胞无毒性。通过对酵母双杂交文库的筛... 详细信息

为了探究水稻亲环素家族基因OsCYP22的功能,构建OsCYP22酵母双杂交诱饵载体,并利用水稻酵母双杂交cDNA文库筛选与OsCYP22相互作用蛋白。自激活试验结果表明,OsCYP22诱饵载体无自激活活性,也对酵母细胞无毒性。通过对酵母双杂交文库的筛选,共得到38个阳性菌落,结合测序结果和生物信息学的方法筛选到20个可能与OsCYP22相互作用的蛋白。进一步对OsCYP22分别与调控植物根系生长相关基因OsCSN5和OsRUB1的全长互作验证,结果显示OsCSN5与OsCYP22在酵母中相互作用。这为深入研究OsCYP22的生物学功能提供了理论依据。

关键词：水稻 OsCYP22 酵母双杂交互作蛋白

维普期刊数据库博看期刊