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地中海弧菌117-T6的溶藻活性

水产学报 2024年第2期48卷 108-118页

作者：史含梦洪帆戴应芬徐梦雅杨锐宁波大学浙江省海洋生物工程重点实验室宁波大学海洋学院

为验证地中海弧菌117-T6(Vm 117-T6)是否具有广谱溶藻性，本实验观察了其对赤潮异湾藻、颗石藻、叉鞭金藻和东海原甲藻的溶藻作用，并对其溶藻物质的特性进行了分析。结果表明，紫菜黄斑病致病菌Vm 117-T6对赤潮异湾藻、颗石藻、叉鞭金... 详细信息

为验证地中海弧菌117-T6(Vm 117-T6)是否具有广谱溶藻性，本实验观察了其对赤潮异湾藻、颗石藻、叉鞭金藻和东海原甲藻的溶藻作用，并对其溶藻物质的特性进行了分析。结果表明，紫菜黄斑病致病菌Vm 117-T6对赤潮异湾藻、颗石藻、叉鞭金藻和东海原甲藻等微藻具有较强溶藻活性，可使藻类叶绿素含量显著降低，是一株广谱性溶藻细菌。Vm 117-T6能在40 min内使赤潮异弯藻的活动能力下降，光合作用受抑，感染120 min即可导致藻体裂解并产生白色絮状沉淀。该菌株能降解卡拉胶，不能降解果胶、纤维素和几丁质。Vm 117-T6菌体、胞内及胞外提取物均具有较强的溶藻活性，其胞外溶藻物质易溶于水、不溶于石油醚和乙酸乙酯，具较强极性；耐高温、不易被活性炭吸附、乙醇处理会降低溶藻活性。Vm 117-T6在常规与易感条件下的关键差异蛋白包括大量的ABC转运蛋白、外膜蛋白、鞭毛蛋白及少量毒素。上述结果提示，Vm 117-T6毒力效应物中含有极性的内毒素物质，且与毒力因子转运、分泌以及细胞黏附相关的蛋白可能在其毒力作用中发挥重要作用。本实验为解析该菌株溶藻机制提供了证据，为该菌的防治及应用提供了参考。

关键词：地中海弧菌117-T6 溶藻细菌溶藻赤潮异湾藻

香鱼LECT2双抗体夹心ELISA法的建立及初步应用

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农业生物技术学报 2024年第7期32卷 1703-1714页

作者：许立琼史雨红陈炯宁波大学农产品质量安全危害因子与风险防控国家重点实验室宁波大学海洋学院生物化学与分子生物学实验室宁波大学海洋学院水产生物技术教育部重点实验室

白细胞衍生趋化因子(leucocyte cell-derived chemotaxin 2, LECT2)的表达量对鱼类健康状态具有指示作用。本研究利用毕赤酵母(Pichia pastoris)表达香鱼(Plecoglossus altivelis)重组PaLECT2蛋白(recombinant PaLECT2, rPaLECT2)，分别免疫小鼠(Mus musculus)和新西兰白兔(Oryctolagus cuniculus)制备抗血清，再用Protein G亲和层析柱纯化获得抗体。以小鼠抗PaLECT2抗体作为捕获抗体以及辣根过氧化酶(horseradish peroxidase, HRP)标记的兔抗PaLECT2抗体作为检测抗体，通过条件优化建立双抗体夹心酶联免疫吸附法(double-antibody sandwich enzyme-linked immunosorbent assay, DAS-ELISA)。最后应用该方法检测嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)感染香鱼的模型和抗生素治疗的预后模型中血清PaLECT2蛋白含量。研究结果显示，小鼠和HRP-兔抗PaLECT2抗体效价分别为1∶12 800和1∶25 600。当捕获抗体浓度为8μg/mL而检测抗体稀释比例为1∶1 600时，为最佳捕获抗体包被浓度和检测抗体工作浓度。所建DAS-ELISA法的最低检测限为11.22 ng/mL，具有良好的特异性和重复性。应用本方法测得感染组中PaLECT2的含量为(412±31.5) ng/mL，极显著高于健康组(54±7.2) ng/mL (P应用于香鱼健康状况诊断和监测。

关键词：白细胞衍生趋化因子(LECT2) 双抗体夹心ELISA法(DAS-ELISA) 香鱼初步应用

大黄鱼ATG5基因的分子特征及促进病毒增殖的作用

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水产学报 2024年第2期48卷 155-165页

作者：魏祖运王珊李婉茹王胜蓝陈玉红母尹楠陈新华福建农林大学海洋学院福建省海洋生物技术重点实验室

为探究大黄鱼自噬相关基因5 (LcATG5)在病毒感染中免疫应答中的作用，本实验从大黄鱼中克隆得到了自噬相关基因ATG5 (LcATG5)，其开放阅读框(ORF)全长828个核苷酸，编码275个氨基酸的蛋白质，预测的分子量为32.3 ku，等电点为5.7。氨基... 详细信息

为探究大黄鱼自噬相关基因5 (LcATG5)在病毒感染中免疫应答中的作用，本实验从大黄鱼中克隆得到了自噬相关基因ATG5 (LcATG5)，其开放阅读框(ORF)全长828个核苷酸，编码275个氨基酸的蛋白质，预测的分子量为32.3 ku，等电点为5.7。氨基酸序列比对和系统进化分析结果显示，Lc ATG5与其他物种ATG5之间的序列一致性较高，含有1个高度保守的APG5结构域，并且与棘头梅童鱼ATG5的亲缘关系最近。荧光定量PCR结果显示，LcATG5在所检测的11个组织或器官中均有表达，在血液中表达量最高，在脾脏中表达量最低；LcATG5在来源于大黄鱼头肾组织的原代粒细胞、淋巴细胞和巨噬细胞以及细胞系LYCK细胞中也均有表达，在原代粒细胞中表达量相对较高，而在巨噬细胞中相对较低；病毒类似物poly(I:C)刺激后，这4种免疫细胞中LcATG5的表达水平都显著上调，其在LYCK细胞中变化最为显著，刺激后12 h上调了3.93倍。过表达Lc ATG5的鲤上皮瘤(epithelioma papulosum cyprini, EPC)细胞受鲤春病毒血症病毒(spring viremia of carp virus, SVCV)感染48 h后，细胞病变效应(cytopathic effects, CPE)明显高于对照组，细胞培养上清中SVCV的滴度为1013.82 TCID50/mL，高于对照组109.27 TCID50/mL，同时细胞内SVCV标志基因SVCV-G、SVCV-M和SVCV-P的表达量分别上调了13.77倍、15.72倍和11.39倍，表明Lc ATG5过表达促进了EPC细胞中SVCV病毒增殖，上述结果为深入研究自噬和自噬相关基因在鱼类病毒感染过程中的作用及机制奠定了基础。

关键词：大黄鱼自噬相关基因5 (ATG5) 免疫细胞病毒增殖

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养殖海湾淤泥质海岸沉积物微塑料污染特征

环境科学 2024年第5期45卷 3078-3087页

作者：宋可心贺金成李昌文解思琦刘宝堃黄伟冯志华江苏海洋大学江苏省海洋生物资源与环境重点实验室江苏海洋大学江苏省海洋生物产业技术联合创新中心江苏海洋大学自然资源部滨海盐沼湿地生态与资源重点实验室自然资源部第二海洋研究所海洋生态系统与生物地球化学重点实验室

微塑料污染是当前环境领域广泛关注的前沿问题,海洋环境介质微塑料污染广为报道,但深层沉积物中微塑料污染特征如何却鲜见报道.基于此,在典型养殖海域海州湾附近淤泥质海岸设置3个采样点,分析沉积物柱状样中微塑料污染特征.结果表明,该... 详细信息

微塑料污染是当前环境领域广泛关注的前沿问题,海洋环境介质微塑料污染广为报道,但深层沉积物中微塑料污染特征如何却鲜见报道.基于此,在典型养殖海域海州湾附近淤泥质海岸设置3个采样点,分析沉积物柱状样中微塑料污染特征.结果表明,该研究区域沉积物中微塑料丰度为(0.12±0.07)n·g^(-1),处于中等污染水平.沉积物柱状样中微塑料总和是表层5 cm沉积物中微塑料丰度的3.43~6.00倍.沉积物柱状样中微塑料丰度展现区域差异性,不同深度的沉积物中微塑料丰度不存在显著性差异,但随深度增加呈指数减少.沉积物含水率、深度和微塑料之间的关系表明,沉积物中微塑料丰度与沉积物物理性质有关.透明和黑色微塑料在各站位占比均最高,纤维是沉积物中最常见的微塑料形态,粒径小的微塑料占主体,微塑料材质的密度均不妨碍其出现在沉积物中.微塑料污染特征在不同深度沉积物中变化较大.

关键词：微塑料(MPs) 沉积物柱状样淤泥质海岸海州湾养殖海湾

拟穴青蟹循环水养殖系统生物滤池细菌群落变化

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广东海洋大学学报 2024年第3期44卷 55-63页

作者：周建淑史策叶央芳王春琳母昌考李荣华刘海娟吴清洋王晓朋周月越陈书健宁波大学水产生物技术教育部重点实验室/宁波大学农业农村部绿色海水养殖重点实验室(省部共建) 浙江宁波315832 广西海洋研究所有限责任公司广西北海536000

【目的】探究拟穴青蟹(Scylla paramamosain)循环水养殖系统(Recirculating aquaculture systems,RAS)生物滤池启动过程中细菌群落的演替过程,为设计适合拟穴青蟹RAS养殖的生物过滤器提供指导。【方法】在2、5、10、20、30、40、50 d检... 详细信息

【目的】探究拟穴青蟹(Scylla paramamosain)循环水养殖系统(Recirculating aquaculture systems,RAS)生物滤池启动过程中细菌群落的演替过程,为设计适合拟穴青蟹RAS养殖的生物过滤器提供指导。【方法】在2、5、10、20、30、40、50 d检测RAS养殖池的水质,采集填料生物膜和养殖池水体微生物样品,采用多种生物信息学分析方法研究生物膜微生物群落演替过程,并运用实时荧光定量PCR技术检测生物膜碳循环和氮循环功能基因拷贝数。【结果与结论】氨氮(NH4+-N)、分子氨(NH3)和亚硝态氮(NO2--N)的质量浓度总体呈先上升后下降趋势,硝态氮(NO3--N)和总氮(TN)在实验结束时(50 d)积累,总有机碳(TOC)质量浓度在前10 d保持稳定,从10 d至50 d呈先升高后下降趋势,差异显著(P生物膜细菌群落变化的影响最大。生物膜细菌群落的多样性、均匀性和丰富度在10 d达到峰值,然后达到平稳状态。基于FAPROTAX的功能预测发现生物膜大多数功能主要富集在氮循环和有机物降解这两方面,生物膜碳循环和氮循环绝对基因拷贝数随时间增加总体呈升高趋势。根据FEAST分析结果,除10 d以外,前20 d同一时期的水体细菌对生物膜的贡献较高,后30 d主要来源于生物膜本身前期细菌贡献,且贡献率随时间增加呈增长趋势,到后期趋于稳定。结果表明,拟穴青蟹RAS生物滤池启动过程中,生物膜的细菌群落结构随时间增加变化显著,功能主要富集在氮循环和有机物降解这两方面,生物膜细菌来自本身细菌的贡献率也逐渐升高,到后期趋于稳定。

关键词：拟穴青蟹循环水养殖系统生物膜细菌群落水质功能基因

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莱州湾南岸陆海交互地层间隙水有色溶解有机物的光谱特征研究

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地球科学进展 2024年第6期39卷 647-658页

作者：祝唐刘刘智丹邹立钟希煌奚嘉鸿江雪艳中国海洋大学海洋环境与生态教育部重点实验室山东青岛266100 中国海洋大学海洋化学理论与工程技术教育部重点实验室山东青岛266100

陆海交互区较高的固碳效率和较大的固碳潜力是在自然条件下长期解决气候变化和实现“碳达峰”“碳中和”的重要方案。为揭示莱州湾南岸陆海交互层中溶解有机物的来源和赋存形式,丰富对陆海交互区的碳源和碳汇的认识,于2021年11~12月采... 详细信息

陆海交互区较高的固碳效率和较大的固碳潜力是在自然条件下长期解决气候变化和实现“碳达峰”“碳中和”的重要方案。为揭示莱州湾南岸陆海交互层中溶解有机物的来源和赋存形式,丰富对陆海交互区的碳源和碳汇的认识,于2021年11~12月采集钻孔岩心间隙水,分析其有色溶解有机物的紫外可见吸收光谱和三维荧光光谱。分析结果表明,溶解有机碳与a(320)均呈现出第二次海侵后变化大、浓度高的特征,陆相间隙水溶解有机物组成和性质差别大于海相间隙水。经平行因子分析法鉴别和OpenFlour匹配的5种荧光组分中,除底层外,类腐殖质组分贡献为总荧光强度的77%。荧光指数和自生源指数表明岩心间隙水有色溶解有机物由微生物再生产活动贡献为主,埋藏越久,微生物贡献越为显著,陆相层和海相层没有明显差别。主成分分析结果表明,不同沉积阶段溶解有机物组成存在一定差别,但随着沉积过程的发生,间隙水溶解有机物组成和性质逐渐趋同。长时间尺度下腐殖质高度成熟。

关键词：莱州湾南岸陆海交互地层间隙水有色溶解有机物

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球参酶解物馏分对秀丽隐杆线虫抗衰老和抗氧化的作用

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食品科学 2024年第11期45卷 144-151页

作者：陈可欣石林凡任中阳翁武银集美大学海洋食品与生物工程学院鳗鲡现代产业技术教育部工程研究中心厦门市海洋功能食品重点实验室福建厦门361021

为探究球参酶解物馏分(Phyllophorus proteus hydrolysate fraction,PPHF)对秀丽隐杆线虫(线虫)的抗衰老和抗氧化作用,分别利用0.5、2.0 mg/mL和8.0 mg/mL PPHF喂食线虫,考察线虫生理生化指标的变化规律。结果表明,制备的PPHF呈米黄色,... 详细信息

为探究球参酶解物馏分(Phyllophorus proteus hydrolysate fraction,PPHF)对秀丽隐杆线虫(线虫)的抗衰老和抗氧化作用,分别利用0.5、2.0 mg/mL和8.0 mg/mL PPHF喂食线虫,考察线虫生理生化指标的变化规律。结果表明,制备的PPHF呈米黄色,其L*值和b*值分别81.28和15.88。PPHF中分子质量为180~1 000 Da的寡肽占比达到63.76%,谷氨酸和甘氨酸的占比分别为19.50%和15.34%。喂食0.5、2.0 mg/mL和8.0 mg/mL PPHF后,线虫的寿命在正常条件下分别延长22.43%、54.60%和78.89%,在热应激和氧化应激条件下也得到延长。喂食0.5 mg/mL PPHF可以显著提高线虫的身体长度,而喂食2.0 mg/mL PPHF才能显著提高线虫的吞咽频率。喂食0.5 mg/mL和8.0 mg/mL PPHF的线虫身体弯曲频率在培养第2天时比空白组分别提高了7.75%和43.71%。PPHF能够显著降低线虫体内活性氧含量并提高抗氧化酶活力、还原型谷胱甘肽含量和总抗氧化能力,且呈剂量依赖性。综上,PPHF可以通过提高线虫体内抗氧化能力,进而改善生理功能并延长寿命。

关键词：球参酶解秀丽隐杆线虫抗衰老抗氧化

大洋中溶解态镉与磷酸盐的相关关系及关键控制过程

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地球科学进展 2024年第2期39卷 207-219页

作者：张瀚杨一超任景玲中国海洋大学海洋化学理论与工程技术教育部重点实验室山东青岛266100

大洋中溶解态镉(Cd)与磷酸盐(PO_(4))存在相关关系,常被用来反演古海洋生产力的变化。基于国际海洋研究计划“痕量元素及同位素的海洋生物地球化学研究”(GEOTRACES)2023年公布的数据集产品IDP2021v2以及近40年发表的相关文献,综述了大... 详细信息

大洋中溶解态镉(Cd)与磷酸盐(PO_(4))存在相关关系,常被用来反演古海洋生产力的变化。基于国际海洋研究计划“痕量元素及同位素的海洋生物地球化学研究”(GEOTRACES)2023年公布的数据集产品IDP2021v2以及近40年发表的相关文献,综述了大洋Cd-PO_(4)线性相关关系的提出、不同海盆Cd-PO_(4)关系汇总以及影响其相关性因素的最新研究进展。大洋Cd-PO_(4)线性相关关系受多种因素影响,总体呈现双线性相关的特征。不同水深影响其相关关系的关键海洋生物地球化学过程不同:上层水(1500 m)则主要为水团混合。其中,起源于南大洋的南极中层水与南极深层水向北的运移对全球大洋中深层水的Cd-PO_(4)值的分布具有重要意义。

关键词：镉磷比生物地球化学过程水团混合 GEOTRACES

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短梗霉普鲁兰多糖合成和调控的研究进展

微生物学报 2024年

作者：徐澜王宇杰池振明刘光磊海洋生物多样性与进化教育部重点实验室中国海洋大学海洋生命学院

普鲁兰多糖是一种由短梗霉属真菌合成的胞外多糖。虽然普鲁兰多糖在生物技术的各个领域有着广泛的应用，但其生物合成与调控的具体机制有待进一步研究。近年来，研究人员利用分子生物学方法对普鲁兰多糖的合成与调控的分子机制进行阐明... 详细信息

普鲁兰多糖是一种由短梗霉属真菌合成的胞外多糖。虽然普鲁兰多糖在生物技术的各个领域有着广泛的应用，但其生物合成与调控的具体机制有待进一步研究。近年来，研究人员利用分子生物学方法对普鲁兰多糖的合成与调控的分子机制进行阐明，发现以跨膜蛋白AmAgs2为关键多糖合成酶的合成途径，并揭示cAMP-PKA、TORC1、HOG1和Snf1信号通路参与普鲁兰多糖合成的调控。因此，本文对近年来该领域的研究进行综述，为真菌胞外多糖合成调控的机制提供研究参考，并为高产普鲁兰多糖细胞工厂的构建提供理论支持。

关键词：短梗霉普鲁兰多糖合成途径调控机制信号通路