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微小隐孢子虫cgd8-2500的原核表达及单克隆抗体的制备

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动物医学进展 2025年第03期 87-92页

作者：刘雪芹于志海孙秋艳李秀何孟莲程光民王光锋张风荣山东畜牧兽医职业学院

为研究微小隐孢子虫cgd8-2500蛋白质相关生物学特征，通过生物信息学分析，从微小隐孢子虫基因组中筛选I型跨膜蛋白并选取功能未知、大小适中的基因cgd8-2500;对该基因的氨基酸序列预测分析，选取免疫原性且亲水性好的区域进行原核表达... 详细信息

为研究微小隐孢子虫cgd8-2500蛋白质相关生物学特征，通过生物信息学分析，从微小隐孢子虫基因组中筛选I型跨膜蛋白并选取功能未知、大小适中的基因cgd8-2500;对该基因的氨基酸序列预测分析，选取免疫原性且亲水性好的区域进行原核表达重组蛋白质；利用重组蛋白免疫Balb/c小鼠，制备针对该蛋白的单克隆抗体。结果表明，PCR成功扩增423 bp目的片段，连接T载体，酶切后连至表达载体pET-28a,并获得高纯度蛋白质，免疫Balb/c小鼠后，获得针对cgd8-2500的单克隆抗体。该研究获得了免疫用重组蛋白，进而获得针对cgd8-2500蛋白单克隆抗体，为后期研究其相关生物学特征及其功能提供了工具。

关键词：微小隐孢子虫重组蛋白cgd8-2500 单克隆抗体

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蒙山牛诱导多能干细胞的建立

畜牧兽医学报 2025年

作者：赵文轩李俊雅高晨高雪余大为中国农业科学院北京畜牧兽医研究所畜禽生物育种全国重点实验室

旨在建立稳定传代并符合多能性标准的蒙山牛诱导多能干细胞。本研究首先用酶消化法建立了成年蒙山牛公牛耳缘成纤维细胞，并进行细胞存活率、生长曲线测定。同时采用了基于DOX调控的非病毒重编程外源基因表达系统，使用在3i/LIF和NBFR... 详细信息

旨在建立稳定传代并符合多能性标准的蒙山牛诱导多能干细胞。本研究首先用酶消化法建立了成年蒙山牛公牛耳缘成纤维细胞，并进行细胞存活率、生长曲线测定。同时采用了基于DOX调控的非病毒重编程外源基因表达系统，使用在3i/LIF和NBFR培养体系诱导蒙山牛成纤维细胞重编程，并对获得的蒙山牛诱导多能干细胞进行了多能性检测。结果表明，本研究获得的蒙山牛耳缘成纤维细胞增殖正常、状态良好，蒙山牛诱导多能性干细胞克隆形态呈现边界圆滑的圆顶型、碱性磷酸酶表达呈阳性、标志多能性基因表达显著高于成纤维细胞（P 研究中报道的牛胚胎干细胞和诱导多能干细胞相似的多能性状态。这一成果为牛诱导多能性干细胞的研究和应用提供了新的方向，并有助于进一步探索其在农业生物技术领域中的潜力。为体外配子生产进而复原濒危、灭绝的牛地方品种提供了材料基础。

关键词：蒙山牛多能性体细胞重编程诱导多能干细胞

畜产品ω-3多不饱和脂肪酸生物营养强化研究应用进展

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中国科学:生命科学 2025年第03期 463-478页

作者：周龙珠李萍漾赵丽媛余雅男赵青余秦玉昌汤超华张军民中国农业科学院北京畜牧兽医研究所畜禽营养与饲养全国重点实验室

ω-3多不饱和脂肪酸(omega-3 polyunsaturated fatty acids,ω-3 PUFAs)是动物和人体的必需营养素,具有维持机体平衡,预防多种慢性和代谢性疾病的功能.然而,我国居民目前存在ω-3 PUFAs结构性缺乏的情况.随着人们对健康饮食的关注度不... 详细信息

ω-3多不饱和脂肪酸(omega-3 polyunsaturated fatty acids,ω-3 PUFAs)是动物和人体的必需营养素,具有维持机体平衡,预防多种慢性和代谢性疾病的功能.然而,我国居民目前存在ω-3 PUFAs结构性缺乏的情况.随着人们对健康饮食的关注度不断提高,增加摄入ω-3 PUFAs成为一个重要的营养目标.畜产品是人类膳食中重要的组成部分,许多研究证实,在饲料中添加富含ω-3 PUFAs的原料可以显著增加畜产品中ω-3 PUFAs的含量.因此,畜产品有望成为ω-3 PUFAs营养强化的载体,为增加ω-3 PUFAs摄入量提供一种有效途径.本文综述了ω-3 PUFAs的膳食营养参考摄入量及我国居民摄入现状,不同膳食中ω-3 PUFAs的含量,畜禽饲料中ω-3 PUFAs资源状况以及畜产品ω-3 PUFAs生物营养强化的研究现状,为进一步研究和开发畜产品的生物营养强化提供实践指导和科学依据.

关键词： ω-3多不饱和脂肪酸畜产品生物营养强化

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生物营养强化鸡蛋研究进展

中国科学:生命科学 2025年第03期55卷 489-507页

作者：余雅男马可涵杨佳韩昊洋 Dieudonné M.Dansou 赵丽媛赵青余秦玉昌汤超华张军民中国农业科学院北京畜牧兽医研究所畜禽营养与饲养全国重点实验室

鸡蛋作为一种营养全面、全球居民接受度较高的食物之一,在全球具有重要地位,同时其作为营养素的有效载体,可以通过调节蛋鸡日粮进而调控鸡蛋营养物质组成,因此,生物营养强化鸡蛋成为一种有巨大潜力的功能性食品.我国居民宏量营养素摄入... 详细信息

鸡蛋作为一种营养全面、全球居民接受度较高的食物之一,在全球具有重要地位,同时其作为营养素的有效载体,可以通过调节蛋鸡日粮进而调控鸡蛋营养物质组成,因此,生物营养强化鸡蛋成为一种有巨大潜力的功能性食品.我国居民宏量营养素摄入充足,但是部分重点地区、重点人群,如婴幼儿、育龄妇女和高龄老年人摄入的重要微量营养素仍旧缺乏,而生物营养强化鸡蛋是解决这一问题的有效途径之一.因此,本文综述了ω-3多不饱和脂肪酸(ω-3 PUFA)、维生素类(维生素A和叶酸等)、微量元素类(硒等)以及类胡萝卜素(虾青素和叶黄素)等生物营养强化鸡蛋生产的研究进展,重点围绕营养素的生物活性功能及其生产方式,以期为生物营养强化鸡蛋生产提供科学依据.

关键词：生物营养强化鸡蛋多不饱和脂肪酸维生素微量元素类胡萝卜素

青藏高原区8份老芒麦资源农艺性状与生产性能综合评价

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草业学报 2025年第2期34卷 123-132页

作者：王文虎梁国玲刘文辉王凤宇李文青海大学畜牧兽医科学院青海省畜牧兽医科学院青海西宁810016 青藏高原种质资源研究与利用实验室青海西宁810016

为了综合评价青藏高原区老芒麦资源的特点,本研究在海晏县开展了8份老芒麦资源的农艺性状与生产性能综合评价试验,分析了不同老芒麦资源的农艺性状和产量性状特征,揭示老芒麦饲草产量的影响因素,采用TOPSIS-多准则决策模型对供试老芒麦... 详细信息

为了综合评价青藏高原区老芒麦资源的特点,本研究在海晏县开展了8份老芒麦资源的农艺性状与生产性能综合评价试验,分析了不同老芒麦资源的农艺性状和产量性状特征,揭示老芒麦饲草产量的影响因素,采用TOPSIS-多准则决策模型对供试老芒麦资源的各项指标进行综合评价,以期筛选出优质的老芒麦资源。结果表明:2龄时,16-364、17-195植株较高,为108.1和109.0 cm;16-093草层高度最高、单株饲草产量最高,分别为36.8 cm,170.3 g;15-025、17-195分蘖数较多,为123和124枝·株^(-1)。3龄时,17-195植株最高、冠幅最大,分别为122.7 cm、140.8 cm;16-093草层高度最高、单株饲草产量最高,分别为51.8 cm,234.7 g;15-025分蘖数最多,为456枝·株^(-1)。结构方程表明,株高和分蘖数是影响老芒麦饲草产量的关键因子,TOPSIS-多准则决策模型综合评价结果表明,16-093饲草生产性能更高、更稳定,是适宜海北州种植的最佳老芒麦资源,可作为下一步品种选育的亲本材料。

关键词：老芒麦生产性能资源饲草综合评价

稳定表达小反刍兽疫病毒N蛋白的THP-1细胞系的建立与应用

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中国兽医科学 2025年

作者：李玲霞张旭辉令小东韩生义吴锦艳尚佑军青海大学农牧学院青海大学畜牧兽医科学院中国农业科学院兰州兽医研究所

旨在利用慢病毒载体构建一种稳定表达小反刍兽疫病毒（PPRV）N蛋白的THP-1细胞系，并验证该细胞系在PPRV激活炎症反应中的作用。首先采用PCR技术扩增N基因，进而构建慢病毒表达载体pCDH-CMV-MCS-EF1-CopGFP-T2A-Puro-N。随后将该载体与... 详细信息

旨在利用慢病毒载体构建一种稳定表达小反刍兽疫病毒（PPRV）N蛋白的THP-1细胞系，并验证该细胞系在PPRV激活炎症反应中的作用。首先采用PCR技术扩增N基因，进而构建慢病毒表达载体pCDH-CMV-MCS-EF1-CopGFP-T2A-Puro-N。随后将该载体与慢病毒包装质粒pLP1、pLP2和pLP/VSVG共同转染至HEK293T细胞，通过包装获得表达N蛋白的慢病毒。接着将慢病毒感染THP-1细胞，再使用嘌呤霉素筛选，之后利用细胞有限稀释法得到稳定表达N蛋白的THP-1细胞系，最后采用ELISA和Western-blot检测该细胞系对PPRV激活炎症反应的影响。结果表明，成功构建了THP-1-N细胞系，不仅该细胞系活力较好，而且具备稳定传代的能力。且稳定表达N蛋白的THP-1细胞可显著促进由PPRV感染所诱导的IL-1β表达，进而激活炎症反应。综上所述，成功建立了一种能够稳定表达N蛋白的THP-1细胞系，为PPRV感染及致病机制研究提供了重要的生物材料。

关键词：小反刍兽疫病毒 N蛋白慢病毒细胞系炎症小体

来源于异形曲霉的葡萄糖氧化酶催化活性和热稳定性改良

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生物工程学报 2025年第1期41卷 296-307页

作者：余尚霖周乔张宏海柏映国罗会颖杨小军姚斌西北农林科技大学动物科技学院陕西杨凌712100 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所北京100193

葡萄糖氧化酶(glucose oxidase,GOD,EC 1.***.3.4)是一种耗氧脱氢酶,可催化葡萄糖产生葡萄糖酸和过氧化氢,这种特殊的作用机制使其具有良好应用前景。但天然GOD催化活力低、热稳定性差成为制约其工业化生产应用的主要因素。本研究以目前... 详细信息

葡萄糖氧化酶(glucose oxidase,GOD,EC 1.***.3.4)是一种耗氧脱氢酶,可催化葡萄糖产生葡萄糖酸和过氧化氢,这种特殊的作用机制使其具有良好应用前景。但天然GOD催化活力低、热稳定性差成为制约其工业化生产应用的主要因素。本研究以目前报道的热稳定性好的葡萄糖氧化酶AtGOD为源序列,通过进化分析,以期获得性能优良的GOD。筛选并成功合成了6个基因进行功能验证,其中异形曲霉(Aspergillus heteromorphus)的葡萄糖氧化酶AhGODB在毕赤酵母中表达后表现出较好的热稳定性和催化活性。其最适温度为40℃,比活力为112.2 U/mg,70℃处理5 min后的剩余酶活为47%。为进一步提高其活性和热稳定性,利用定向进化结合理性设计的方法获得多个突变体。其中,突变体T72R/A153P最适温度由野生型酶的40℃提高到50℃,比活力由112.2 U/mg提高到166.1 U/mg,70℃处理30 min后的剩余酶活由野生型酶的完全失活提高到33%。综上所述,本研究获得的葡萄糖氧化酶突变体在催化活性和热稳定性上有所提升,具有一定的应用潜力。

关键词：葡萄糖氧化酶定向进化理性设计催化活性热稳定性

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复合微生物发酵饲料在母猪饲粮中的应用

饲料工业 2025年

作者：王旭颜国华杨玉增贾楠张伟涛孟宪华魏晓艳胡栋河北省农林科学院农业资源环境研究所河北省肥料技术创新中心河北省畜牧兽医研究所河北省畜牧总站

试验旨在研究饲粮中添加复合微生物发酵饲料对妊娠后期及哺乳期母猪生产性能、初乳、血清指标及饲料中氮素转化利用的影响。选取48头预产期接近、胎次相近、体质健康的妊娠后期二元母猪，随机分为4组，每组12个重复，每个重复1头母猪。... 详细信息

试验旨在研究饲粮中添加复合微生物发酵饲料对妊娠后期及哺乳期母猪生产性能、初乳、血清指标及饲料中氮素转化利用的影响。选取48头预产期接近、胎次相近、体质健康的妊娠后期二元母猪，随机分为4组，每组12个重复，每个重复1头母猪。对照组饲喂常规饲粮，试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组在常规饲粮基础上分别添加1%、3%、5%的复合微生物发酵饲料。试验从母猪妊娠第90天开始，产后第21天结束。结果表明，与对照组相比：① 试验Ⅲ组哺乳仔猪初生个体均重和21 d平均个体重分别提高25.00%和14.96%；试验Ⅱ、Ⅲ组哺乳仔猪日增重分别提高8.42%、11.88%。②试验Ⅱ组母猪初乳中乳糖含量提高26.64%，试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组母猪初乳中尿素氮含量分别下降10.74%、19.74%和17.64%，均与对照组差异显著（P所述，母猪饲粮中添加3%～5%复合微生物发酵饲料可以显著改善母猪生产性能，提升母猪初乳质量，改善血液生化指标，提高母猪免疫力，同时可以显著降低初乳和尿液中的氮元素含量，从而提高妊娠母猪对饲料中氮素的利用率，为降低氮的排放量和绿色生态养殖提供数据支撑。

关键词：妊娠后期母猪发酵饲料生产性能初乳血清指标氮素转化

鼠伤寒沙门菌greA/B基因缺失株的构建及生物学特性

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微生物学报 2025年第2期65卷 644-654页

作者：叶景芬陈世雄武绍碧杨婉潘永廖怡雯罗雪杨琦贵州大学动物科学学院贵州贵阳贵州大学动物疫病研究所贵州贵阳贵州省农业科学院畜牧兽医研究所贵州贵阳

沙门菌作为一种常见的人畜共患病原体,可导致多种食源性疾病,其中鼠伤寒沙门菌(SalmonellaTyphimurium,STM)是关键血清型之一,其研究与防控对公共卫生具有重要意义。【目的】探究greA和greB基因对鼠伤寒沙门菌生物学特性和致病性的影响... 详细信息

沙门菌作为一种常见的人畜共患病原体,可导致多种食源性疾病,其中鼠伤寒沙门菌(SalmonellaTyphimurium,STM)是关键血清型之一,其研究与防控对公共卫生具有重要意义。【目的】探究greA和greB基因对鼠伤寒沙门菌生物学特性和致病性的影响。【方法】运用Red同源重组技术构建greA和greB基因缺失株及其回补株,并对其生长特性、生物被膜形成能力、对Caco-2细胞的黏附及侵袭能力进行检测;利用小鼠模型评估了greA和greB基因缺失对STM致病性的影响。【结果】成功构建了突变株STM LT2ΔgreA和STM LT2ΔgreB;与野生株相比,greA和gre B基因的缺失均不影响其生长速度,但导致STM的生物被膜形成能力、黏附力、侵袭力均有所下降;greA和greB缺失降低了STM对小鼠肝、脾的定殖力,并使得STM的LD50分别上升了39.81倍和2.5倍。【结论】greA和greB基因的缺失均可降低鼠伤寒沙门菌的致病性,本研究结果为进一步揭示沙门菌的致病机理提供了理论基础。

关键词：鼠伤寒沙门菌转录延伸因子 greA greB 生物特性