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阿维链霉菌合成纳米硒的物理化学表征及其对枸杞病原真菌的抑菌活性

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生物工程学报 2025年

作者：张琪李亚妮周荣娟秦佳圆岳思君宁夏大学新华学院宁夏大学生命科学学院西部特色生物资源保护与利用教育部重点实验室

生物合成的纳米硒（selenium nanoparticles， SeNPs）具有独特的物理、化学和生物学特性，备受研究人员关注。为了开发将硒盐还原为SeNPs的菌种，本研究以阿维链霉菌（Streptomyces avermitilis）为研究对象，通过添加一定量的Na2SeO3... 详细信息

生物合成的纳米硒（selenium nanoparticles， SeNPs）具有独特的物理、化学和生物学特性，备受研究人员关注。为了开发将硒盐还原为SeNPs的菌种，本研究以阿维链霉菌（Streptomyces avermitilis）为研究对象，通过添加一定量的Na2SeO3，借助光学显微镜、扫描电镜（scanning electron microscope， SEM）、透射电镜（transmission electron microscope， TEM）、能量色散X射线能谱（energy dispersive spectrometer， EDS）分析、X射线衍射（X-ray diffraction， XRD）分析、傅里叶红外变换光谱（fourier transform infrared spectroscopy， FTIR）技术对菌体及合成的SeNPs进行物理化学表征分析，同时选用枸杞根腐病主要病原真菌-尖孢镰刀菌（Fusarium oxysporium）对其抗菌活性进行研究。结果表明，阿维链霉菌可将Na2SeO3转化成SeNPs，能耐受300 mmol/L 的Na2SeO3，耐受性较高；阿维链霉菌可在细胞质中合成球形SeNPs，大部分直径在100 nm左右，并以菌丝断裂的方式释放；阿维链霉菌合成的SeNPs颗粒为非晶态，表面以C、Se为主，同时存在O、N等元素，-OH、C=O、C- N、C-H等官能团与SeNPs稳定性和生物活性密切相关；阿维链霉菌所产SeNPs对F. oxysporium有显著抑制活性，25 μmol/mL处理抑菌率可达77.61%，半数效应浓度(median effective concentration， EC50)为0.556 μmol/mL。总之，阿维链霉菌可耐受高Na2SeO3胁迫，同时还可介导合成SeNPs，合成的SeNPs颗粒具有良好的稳定性和抗菌活性，在SeNPs制备和枸杞根腐病防治方面具有潜在的应用价值。

关键词：阿维链霉菌纳米硒物理化学表征尖孢镰刀菌抑菌活性

饲料油菜对滩羊瘤胃发酵、营养物质消化及肉品质的影响

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草业科学 2025年

作者：杨洁冯帆李昊高巧仙辛国省宁夏大学生命科学学院宁夏饲料工程技术研究中心西部特色生物资源保护与利用教育部重点实验室

饲料油菜（Brassica napus）是一种优质的牧草来源，具有营养价值丰富、消化性能高的特点，在畜牧业已得到广泛应用。为研究饲料油菜对滩羊营养物质消化、瘤胃发酵、肉品质的影响。本试验选取40只体重相近、健康状况良好的6月龄去势公... 详细信息

饲料油菜（Brassica napus）是一种优质的牧草来源，具有营养价值丰富、消化性能高的特点，在畜牧业已得到广泛应用。为研究饲料油菜对滩羊营养物质消化、瘤胃发酵、肉品质的影响。本试验选取40只体重相近、健康状况良好的6月龄去势公滩羊，随机分为4组，每组10只。A组为对照组，B组、C组、D组为饲料油菜与玉米秸秆不同比例混贮组。研究结果表明：1)B、C组滩羊瘤胃液中总挥发性脂肪酸（TVFA）分别为72.86 mmol·L-1和67.20 mmol·L-1，组间差异不显著但均显著高于A组和D组（P0.05），但呈上升趋势；6)D组总脂肪酸（TFA）、饱和脂肪酸（SFA）、多不饱和脂肪酸（PUFA）含量显著低于A、B、C三组（P<0.05），C、D两组PUFA/SFA组间差异不显著但显著高于A、B组（P<0.05）。以上结果表明，饲料油菜适量添加可提高滩羊瘤胃液中总挥发性脂肪酸含量、营养物质消化率及日增重，降低料重比，同时可以改善肉品质、提高鲜味氨基酸、必需氨基酸含量，然而添加量过高时，会降低肌内脂肪、不饱和脂肪酸的含量，一定程度可影响优质滩羊肉生产。综合分析发现，本研究中饲料油菜以中等添加量即饲料油菜与玉米秸秆比例为72.60:27.40时效果较好。

关键词：饲料油菜滩羊瘤胃发酵营养物质消化肉品质

细菌c-di-AMP特异性磷酸二酯酶的研究进展

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科学通报 2022年第22期67卷 2627-2637页

作者：张颖徐兆坤罗海霞郝秀静李敏宁夏大学西部特色生物资源保护与利用教育部重点实验室银川750021

c-di-AMP特异性磷酸二酯酶(c-di-AMP-specific phosphodiesterase,PDE)是一类能够将c-di-AMP水解为线性pApA或AMP的酶,对维持细菌体内c-di-AMP的代谢平衡至关重要.在不同的细菌中存在着不同结构类型的PDE,其功能既具有一定的保守性,又... 详细信息

c-di-AMP特异性磷酸二酯酶(c-di-AMP-specific phosphodiesterase,PDE)是一类能够将c-di-AMP水解为线性pApA或AMP的酶,对维持细菌体内c-di-AMP的代谢平衡至关重要.在不同的细菌中存在着不同结构类型的PDE,其功能既具有一定的保守性,又存在特异性.c-di-AMP作为第二信使分子在包括古菌、革兰氏阳性菌及支原体、衣原体、蓝细菌等部分革兰氏阴性菌等在内的原核生物中发挥多种功能.近年来研究显示,PDE通过调节细菌中cdi-AMP水平,进而调控细菌生长、生物被膜形成、细菌耐药性、细菌毒力和宿主细胞的免疫应答等生物学过程,是预防和治疗病原菌感染的重要潜在靶点,在疫苗研发及小分子药物筛选开发领域中具有极大的潜力.本文对近年来PDE分类、结构及生物学功能等方面进行综述,旨在为相关研究人员提供参考.

关键词：第二信使 c-di-AMP 磷酸二酯酶结构与功能

结核分枝杆菌CFP10、ESAT6、Ag85A和Ag85B抗原真核共表达载体的构建与表达

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生物工程学报 2014年第2期30卷 265-273页

作者：李武邓光存刘晓明王玉炯宁夏大学西部特色生物资源保护与利用教育部重点实验室宁夏银川750021

CFP10、ESAT6、Ag85A和Ag85B是结核分枝杆菌的主要免疫优势抗原。为了构建一种可同时表达这4种抗原的真核多基因共表达载体pcDNA-CFP10-ESAT6-Ag85A-Ag85B(pcDNA-CEAB),并利用HEK 293T细胞对其体外表达进行检测。采用酶切、连接的方法,... 详细信息

CFP10、ESAT6、Ag85A和Ag85B是结核分枝杆菌的主要免疫优势抗原。为了构建一种可同时表达这4种抗原的真核多基因共表达载体pcDNA-CFP10-ESAT6-Ag85A-Ag85B(pcDNA-CEAB),并利用HEK 293T细胞对其体外表达进行检测。采用酶切、连接的方法,将CFP10和ESAT6编码基因以(Gly4Ser)3蛋白Linker连接,插入至质粒pcDNA3.1(+)多克隆位点CMV启动子与加尾信号BGH pA之间,使两者融合表达,将Ag85A和Ag85B编码基因以内部核糖体进入位点(Internal ribosome entry site,IRES)序列连接,并赋予RSV启动子和加尾信号BGH pA,使两者在RSV启动子作用下独立表达。重组质粒经酶切及测序验证后转染至HEK 293T细胞中进行体外表达实验,48 h后提取总蛋白,利用CFP10、ESAT6、Ag85A和Ag85B特异性抗体进行Western blotting检测。结果显示多基因共表达载体pcDNA-CEAB在真核细胞HEK 293T中得到表达,且CFP10、ESAT6、Ag85A和Ag85B抗原能被相应的特异性抗体所识别,表明质粒pcDNA-CEAB构建正确,这为进一步研究其免疫原性和免疫保护效果奠定了基础。

关键词：结核分枝杆菌优势抗原共表达蛋白免疫印迹

ATF6/CHOP信号通路对减毒牛结核分枝杆菌感染的THP-1细胞焦亡的调控作用

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中国病理生理杂志 2022年第12期38卷 2183-2190页

作者：马伯利刘悦阳聂雪伊李梦媛杨易徐金瑞宁夏大学西部特色生物资源保护与利用教育部重点实验室宁夏银川750021

目的:探讨转录激活因子6(ATF6)/CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)信号通路对牛分枝杆菌减毒株(卡介苗,BCG)感染的THP-1细胞焦亡的调控作用。方法:在感染复数为10∶1的BCG感染THP-1细胞2、6、12、24和48 h基础上,设置si-NC组、si-NC+... 详细信息

目的:探讨转录激活因子6(ATF6)/CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)信号通路对牛分枝杆菌减毒株(卡介苗,BCG)感染的THP-1细胞焦亡的调控作用。方法:在感染复数为10∶1的BCG感染THP-1细胞2、6、12、24和48 h基础上,设置si-NC组、si-NC+BCG组、si-ATF6+BCG组及si-CHOP+BCG组。si-NC组转染干扰阴性对照24 h后正常培养;si-NC+BCG组先转染阴性对照24 h后以感染复数为10∶1的BCG感染24 h;si-ATF6+BCG组和si-CHOP+BCG组分别转染si-ATF6和si-CHOP 24 h后再用感染复数为10∶1的BCG感染24 h。采用Western blot检测cleaved ATF6、CHOP、核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)、pro-caspase-1、caspase-1 p20、含caspase募集结构域的凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、IL-1βp17、IL-18 p22及消皮素D-N端片段(GSDMD-N)蛋白表达;采用免疫荧光检测GSDMD蛋白表达;采用CCK-8法检测细胞活力。结果:Western blot结果显示,BCG感染THP-1细胞后,cleaved ATF6和CHOP蛋白的表达随感染时间延长逐渐升高,48 h达到最高,而GSDMD-N蛋白在24 h表达最高(P<0.01)。与si-NC组相比,si-NC+BCG组的cleaved ATF6、CHOP、NLRP3、pro-caspase-1、caspase-1 p20、ASC、IL-1βp17、IL-18 p22及GSDMD-N蛋白表达显著上调(P<0.01),细胞内GSDMD含量显著增加(P<0.01),细胞活力显著下降(P<0.01);与si-NC+BCG组相比,si-ATF6+BCG组上述蛋白表达显著下调(P<0.01),细胞内GSDMD含量显著下降(P<0.01),细胞活力显著上升(P<0.01);与si-NC+BCG组相比,si-CHOP+BCG组上述蛋白表达显著下调(P<0.01),细胞内GSDMD含量显著下降(P<0.01),细胞活力显著上升(P<0.01)。结论:ATF6/CHOP信号通路对BCG感染的THP-1细胞焦亡具有调控作用。

关键词： THP-1细胞卡介苗 ATF6/CHOP信号通路细胞焦亡

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纳米抗体在癌症治疗中的应用

生物工程学报 2017年第7期33卷 1085-1090页

作者：吴越郝秀静李敏宁夏大学西部特色生物资源保护与利用教育部重点实验室宁夏银川750021

骆驼科动物的体内会产生一种缺失轻链的抗体,被称为重链抗体,又叫做nanobody。这种抗体只包含一个可变区,具有高亲和力、高稳定性、强组织穿透性、高效表达等优点,同时具有低毒性和低免疫原性等特性,适用于诊断、治疗和充当多种领域的... 详细信息

骆驼科动物的体内会产生一种缺失轻链的抗体,被称为重链抗体,又叫做nanobody。这种抗体只包含一个可变区,具有高亲和力、高稳定性、强组织穿透性、高效表达等优点,同时具有低毒性和低免疫原性等特性,适用于诊断、治疗和充当多种领域的实验研究工具。文中将主要讨论nanobody在癌症治疗中的应用,为nanobody的进一步研发提供思路。

关键词：重链抗体纳米抗体癌症治疗

疏水蛋白HFBI融合标签能显著提高外源基因在植物中的表达水平

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南方医科大学学报 2015年第12期35卷 1665-1671页

作者：张西倩牟红珍马婷丁向真李志英王盛西部特色生物资源保护与利用教育部重点实验室宁夏银川750021

目的针对植物生物反应器中外源基因表达水平普遍较低的问题,探索和评价丝状真菌瑞氏木霉(Trichode rma re e s e i)编码的小分子疏水蛋白(Hydrophobin,HFBI)作为融合标签在植物生物反应器中提高系统表达量的应用潜力;分析其提高外源基... 详细信息

目的针对植物生物反应器中外源基因表达水平普遍较低的问题,探索和评价丝状真菌瑞氏木霉(Trichode rma re e s e i)编码的小分子疏水蛋白(Hydrophobin,HFBI)作为融合标签在植物生物反应器中提高系统表达量的应用潜力;分析其提高外源基因表达水平的可能机制。方法以绿色荧光蛋白(GFP)为报道基因,采用基因体外合成技术和亚克隆技术构建GFP和GFPHFBI融合植物表达载体。利用农杆菌渗滤技术接种植物本明烟(Nicotiana be nthamiana)。通过GFP荧光观察,荧光显微镜镜检,Western blot,ELISA和RT-PCR等实验手段测定报告基因GFP在植物中的表达情况,探明HFBI融合标签在植物中表达外源基因的作用效果和特点并分析其可能的作用机制。结果 HFBI融合标签对植物细胞无明显的细胞毒性;GFP-HFBI融合蛋白在植物中的积累水平显著高于对照;GFP-HFBI融合蛋白在细胞内形成致密的蛋白质颗粒。结论 HFBI融合标签能够显著提高外源基因在植物中的积累水平。推测形成的蛋白质颗粒隔绝了细胞内源性蛋白酶对目的表达产物的降解,进而提高了外源基因产物在细胞中的积累。

关键词：真菌疏水蛋白融合标签绿色荧光蛋白瑞氏木霉本明烟

宁夏回族原发性高血压人群HLA-DQB1基因多态性分析

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吉林大学学报（医学版） 2009年第6期35卷 1103-1106页

作者：徐金瑞杨易张东涛高力扬王玉炯宁夏大学西部特色生物资源保护与利用教育部重点实验室宁夏银川750021

目的:分析HLA-DQB1基因多态性在宁夏回族人群原发性高血压(EH)患者中的分布,阐明宁夏回族人群原发性高血压的易感性。方法:采用序列特异性引物聚合酶链式反应(SSP-PCR)的方法对宁夏回族66例健康个体(对照组)及84例EH患者(病例组)的HLA-D... 详细信息

目的:分析HLA-DQB1基因多态性在宁夏回族人群原发性高血压(EH)患者中的分布,阐明宁夏回族人群原发性高血压的易感性。方法:采用序列特异性引物聚合酶链式反应(SSP-PCR)的方法对宁夏回族66例健康个体(对照组)及84例EH患者(病例组)的HLA-DQB1位点进行基因分型,应用遗传学统计方法分析宁夏回族原发性高血压人群DQB1基因多态性。结果:病例组等位基因DQB1*0301、*0401、*0601、*0604/5/6/7、*0302频率显著高于对照组(P宁夏回族人群原发性高血压的易感性有关,而DQB1*0501、*0602、*0603/8、*0606、*0402、*0604/5/6/8有可能是宁夏回族人群原发性高血压的保护因子。

关键词： HLA抗原易感性高血压

宁夏汉族人群VDR基因4个SNPs位点基因多态性与2型糖尿病的关联性分析

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吉林大学学报（医学版） 2012年第5期38卷 985-989页

作者：徐金瑞纳小菲杨易宁夏大学西部特色生物资源保护与利用教育部重点实验室宁夏银川750021

目的:探讨在宁夏地区汉族人群中维生素D受体(VDR)基因4个SNPs位点基因多态性与2型糖尿病(T2DM)的关联性,旨在为T2DM的早期预防提供理论依据。方法:采用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法对宁夏汉族201例T2DM患者及210... 详细信息

目的:探讨在宁夏地区汉族人群中维生素D受体(VDR)基因4个SNPs位点基因多态性与2型糖尿病(T2DM)的关联性,旨在为T2DM的早期预防提供理论依据。方法:采用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法对宁夏汉族201例T2DM患者及210例健康对照个体VDR基因rs1544410(G>A)、rs757343(G>A)、rs731236(T>C)和rs739837(G>T)共4个SNPs位点的多态性进行检测,病例-对照组间基因型和等位基因频数的差异比较采用χ2检验,单倍型分析采用SHEsis在线分析软件。结果:T2DM组和对照组间,rs1544410、rs757343位点基因型频数分布差异具有统计学意义(P宁夏汉族T2DM患者中的频数(10.0%)高于对照组(6.1%),组间比较差异有统计学意义(P宁夏汉族人群中,VDR基因rs1544410位点等位基因G及单倍型GGCT可增加患T2DM的风险。

关键词： VDR基因糖尿病,2型宁夏汉族单核苷酸多态性