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过表达miR-451a通过靶向巨噬细胞迁移抑制因子(MIF)抑制HepG2细胞的增殖

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细胞与分子免疫学杂志 2018年第12期34卷 1091-1098页

作者：董辉王晶杨艳娟张旭俞梦楚徐广贤简鹏宁夏医科大学总医院科研设备管理中心宁夏银川750000 宁夏医科大学总医院病理科宁夏银川750000 宁夏医科大学总医院特需二病区宁夏银川750000 宁夏医科大学总医院生物芯片中心宁夏银川750000 宁夏医科大学总医院临床学院宁夏银川750000

目的探讨miR-451a对巨噬细胞迁移抑制因子(MIF)的调控及对HepG2肝癌细胞增殖的影响。方法实时定量PCR检测临床肝癌组织中miR-451a及MIF mRNA的表达,荧光素酶报告系统验证miR-451a对MIF的靶向调控关系。包装miR-451a慢病毒过表达载体,感... 详细信息

目的探讨miR-451a对巨噬细胞迁移抑制因子(MIF)的调控及对HepG2肝癌细胞增殖的影响。方法实时定量PCR检测临床肝癌组织中miR-451a及MIF mRNA的表达,荧光素酶报告系统验证miR-451a对MIF的靶向调控关系。包装miR-451a慢病毒过表达载体,感染HepG2细胞,实时定量PCR检测miR-451a和MIF mRNA表达量变化,Western blot法检测MIF蛋白水平,噻唑蓝(MTT)实验检测细胞增殖,平板克隆形成实验检测细胞克隆形成率。结果 miR-451a在肝癌组织中呈现低表达,MIF mRNA在肝癌样本中呈现高表达;荧光素酶报告系统显示,MIF 3'UTR野生型联合miR-451a模拟物共转染细胞的荧光信号强度明显弱于其他转染组,miR-451a慢病毒感染HepG2细胞,miR-451a表达显著升高,MIF表达显著降低,细胞增殖能力减弱,克隆形成能力减弱。结论 HepG2细胞过表达miR-451a通过抑制MIF的表达,抑制HepG2细胞的增殖和克隆形成。

关键词： has-miR-451a 迁移抑制因子(MIF) HepG2细胞

临床多药耐药铜绿假单胞菌基因芯片快速检测技术的研究

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中华医院感染学杂志 2016年第23期26卷 5295-5299页

作者：赵志军张旭李彩云程振娜贾伟宁夏医科大学总医院医学实验中心宁夏银川750004 宁夏医科大学总医院生物芯片中心宁夏银川750004 宁夏医科大学宁夏银川750004

目的建立一种应用基因芯片技术检测临床病原微生物铜绿假单胞菌菌种及其耐药基因的方法,并进行鉴定。方法根据生物信息学设计引物及探针,采用基因芯片技术对分离51株临床病原微生物及其耐药基因进行检测,并以PCR结果做对照来评价芯片技... 详细信息

目的建立一种应用基因芯片技术检测临床病原微生物铜绿假单胞菌菌种及其耐药基因的方法,并进行鉴定。方法根据生物信息学设计引物及探针,采用基因芯片技术对分离51株临床病原微生物及其耐药基因进行检测,并以PCR结果做对照来评价芯片技术的特异性及灵敏度。结果采用基因芯片技术共检出41株铜绿假单胞菌,病原菌阳性检出率100.0%;耐药基因检测结果显示,有11株TEM基因阳性,15株VIM-2基因阳性,8株IntⅠ基因阳性,1株IMP-1阳性,4株阴性,其中39份基因芯片检测结果与PCR结果一致,准确率为95.1%。结论基因芯片系统具有高通量、高特异性等优点,对鉴定临床多药耐药铜绿假单胞菌有很大的应用价值,尤其能够为临床快速选择合适的抗菌药物提供很好的指导依据。

关键词：基因芯片铜绿假单胞菌多药耐药高通量

银川回族人群亚甲基四氢叶酸还原酶基因多态性与高血压和同型半胱氨酸水平的相关性

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中华高血压杂志 2018年第10期26卷 947-952页

作者：田进海吴京杨萍张旭于晶晶黄琦姜敏宁夏医科大学总医院生物芯片北京国家工程研究中心宁夏分中心宁夏银川750004 宁夏医科大学临床学院宁夏医科大学总医院医学实验中心

目的探讨亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)rs1801133和rs1801131基因多态性与银川回族人群高血压和血浆同型半胱氨酸(Hcy)水平的相关性。方法选择2016年1月至2017年12月,宁夏医科大学总医院被诊断为原发性高血压的回族患者770例,回族血压正... 详细信息

目的探讨亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)rs1801133和rs1801131基因多态性与银川回族人群高血压和血浆同型半胱氨酸(Hcy)水平的相关性。方法选择2016年1月至2017年12月,宁夏医科大学总医院被诊断为原发性高血压的回族患者770例,回族血压正常对照1299人作为研究对象,平均年龄45.73岁,收集研究对象基本资料,检测Hcy、血脂、空腹血糖、尿酸等指标。应用基质辅助激光解吸附电离飞行时间质谱分析技术(MassArray system)对样本进行基因分型。结果高血压组MTHFRrs1801133的CC、CT、TT 3种基因型频率和C、T两种等位基因频率与血压正常组比较,差异有统计学意义(P0.05)。Logistic回归分析显示,在校正了性别、年龄、体质量指数(BMI)、尿酸及Hcy后MTHFRrs1801133不同基因型与高血压有相关性(TT比CC基因型:OR=3.709,95%CI2.534～5.218,P0.05)。结论 MTHFRrs1801133基因多态性与银川回族人群高血压发病有关,rs1801131与高血压发病无关。

关键词：高血压亚甲基四氢叶酸还原酶基因多态性同型半胱氨酸

中老年回汉族人群胰岛素抵抗及β细胞功能与脂代谢的关系

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中国医学科学院学报 2016年第2期38卷 192-197页

作者：李淑亚姜敏姚天宇程羽萱范雅洁刘旭颖张金玲刘兰王志忠马玉英扈学琴王盼盼于晶晶马荣黄琦宁夏医科大学研究生院银川750004 宁夏医科大学总医院暨生物芯片北京国家工程研究中心宁夏分中心银川750004 宁夏医科大学公共卫生学院流行病与卫生统计学系银川750004 宁夏医科大学总医院体检中心银川750004

目的对宁夏城市社区回汉族中老年人群的胰岛素抵抗及β细胞功能与体质量指数及血脂等影响因素进行关联性对比研究。方法选取宁夏城市地区40岁以上的社区调查者共1 000例,回汉比例1∶2。测量身高、体质量、腰围、臀围;三酰甘油(TG)、总... 详细信息

目的对宁夏城市社区回汉族中老年人群的胰岛素抵抗及β细胞功能与体质量指数及血脂等影响因素进行关联性对比研究。方法选取宁夏城市地区40岁以上的社区调查者共1 000例,回汉比例1∶2。测量身高、体质量、腰围、臀围;三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、血尿酸(BUA)、血糖、胰岛素,计算体质量指数(BMI)、腰臀比(WHR)、胰岛素抵抗指数(IR)、胰岛素敏感指数(IAI)、β细胞功能指数(HBCI)。结果回族的BMI、WHR、IAI、HBCI和糖尿病的患病比例均显著高于汉族(P宁夏地区中老年人TC、TG、BMI、WHR、BUA和IR、IAI、HBCI的分布特征及其之间的关系存在着回汉族差异。校正性别、民族、年龄因素后,BMI、WHR、TC、TG、BUA与IR、IAI显著相关,BMI、TC与HBCI显著相关,TC、BMI可能对β细胞的分泌功能影响较大,而TG、BMI则主要与胰岛素抵抗及胰岛素敏感性相关。

关键词：胰岛素抵抗指数 β细胞功能指数体质量指数腰臀比胆固醇三酰甘油

宁夏回族人群雌激素受体基因多态性及与血脂的关联性

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西安交通大学学报（医学版） 2016年第3期37卷 418-422页

作者：李淑亚杨德玉田进海于晶晶马荣黄琦张旭王嘉姜敏宁夏医科大学宁夏银川750001 宁夏医科大学总医院暨生物芯片北京国家工程研究中心宁夏分中心宁夏银川750004

目的研究雌激素受体(ERα)基因单核苷酸多态性(SNPs,rs2234693、rs9340799)在宁夏回族人群中的分布及其与血脂的关联性。方法以整群抽样的方法选取宁夏银川市社区的回族人群533例,利用基质辅助激光解吸附电离飞行时间质谱分析技术(MassA... 详细信息

目的研究雌激素受体(ERα)基因单核苷酸多态性(SNPs,rs2234693、rs9340799)在宁夏回族人群中的分布及其与血脂的关联性。方法以整群抽样的方法选取宁夏银川市社区的回族人群533例,利用基质辅助激光解吸附电离飞行时间质谱分析技术(MassARRAY system)对样本进行基因分型,观察533例回族人群的基因型,同时检测血脂并探讨两者的关系。结果 1rs2234693中各基因型在宁夏回族人群中与其在中国汉族、云南傣族和美国、欧洲、日本的人群中的分布频率无统计学差异(P>0.05);rs9340799中各基因型在宁夏回族人群中出现的频率与在欧洲人群中的频率存在着统计学差异(P0.05)。2血脂正常组和血脂异常组一般情况比较显示两组间体质量指数存在明显差异(P0.05)。结论 ERα基因多态性的分布存在着种族的差异;宁夏回族人群中rs2234693的SNPs与血脂异常的发生可能无相关性,而rs9340799中携带有GG基因型的个体发生血脂异常的风险明显增加。

关键词：雌激素受体基因单核苷酸多态性宁夏回族血脂

高三尖杉酯碱阻断mTOR信号通路抑制HT29人结直肠肿瘤细胞增殖并诱导其凋亡

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细胞与分子免疫学杂志 2018年第4期34卷 346-353页

作者：王丹妮陶文杰张旭尤沛栋穆新曹佳李晓菡王立斌宁夏医科大学临床医学院宁夏银川750004 宁夏医科大学总医院生物芯片国家工程中心宁夏分中心宁夏银川750004

目的探讨高三尖杉酯碱(HHT)对HT29人结直肠肿瘤细胞增殖和凋亡调控的分子机制。方法用(0、0.0078125、0.015625、0.03125、0.0625、0.125、0.25、0.5、1、2、4、8)μg/m L HHT分别处理HT29细胞24、48、72 h。CCK-8法检测HT29细胞的增殖... 详细信息

目的探讨高三尖杉酯碱(HHT)对HT29人结直肠肿瘤细胞增殖和凋亡调控的分子机制。方法用(0、0.0078125、0.015625、0.03125、0.0625、0.125、0.25、0.5、1、2、4、8)μg/m L HHT分别处理HT29细胞24、48、72 h。CCK-8法检测HT29细胞的增殖,集落形成实验检测细胞的集落形成能力;Hoechst33258染色观察染色质凝集情况,流式细胞术检测细胞凋亡;实时定量PCR检测BAX、Bcl2、胱天蛋白酶3(caspase-3)、caspase-9、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)、丙酮酸脱氢酶激酶(PDK1)、蛋白激酶B(AKT)、雷帕霉素靶蛋白调节相关蛋白(raptor)、雷帕霉素不敏感的伴侣蛋白(rictor)的mRNA水平;Western blot法检测BAX、Bcl2、胱天蛋白酶3前体(pro-caspase-3)、裂解型caspase-3(c-caspase-3)、pro-caspase-9、裂解型caspase-9(c-caspase-9)、多腺苷二磷酸核糖聚合酶(PARP)、裂解型PARP(c-PARP)、mTOR、raptor、rictor、PI3K、PDK1、AKT、p-AKT的蛋白水平。结果与对照组相比,HHT能抑制HT29细胞增殖,诱导细胞核破裂,染色质凝聚,凋亡小体形成;同时,HHT处理能够提高HT29细胞中BAX/Bcl2比值、caspase-3、caspase-9、raptor的mRNA水平,降低PI3K、AKT、rictor的mRNA水平;并上调HT29细胞中c-caspase-3、c-caspase-9、c-PARP、BAX、raptor蛋白水平,下调pro-caspase-3、pro-caspase-9、PARP、PI3K、PDK1、AKT、mTOR、rictor蛋白水平。结论 HHT能够通过阻断mTOR信号通路,进而抑制HT29人结直肠肿瘤细胞增殖并诱导其凋亡。

关键词：高三尖杉酯碱(HHT) 结直肠肿瘤细胞细胞凋亡哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)

过表达JNK2增强SCL-1人皮肤鳞状细胞癌细胞的增殖及抗凋亡能力

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细胞与分子免疫学杂志 2018年第11期34卷 1000-1007页

作者：刘慧旭董辉张旭陈源昊琪焦亚宁葛新红宁夏医科大学临床医学院宁夏医科大学总医院科研处科研设备管理中心生物芯片国家工程中心宁夏分中心宁夏医科大学总医院皮肤性病科宁夏银川750004

目的探讨c-Jun氨基末端激酶1(JNK1)或JNK2过表达对SCL-1人皮肤鳞状细胞癌细胞增殖和凋亡的影响及分子机制。方法将JNK1、JNK2分别与p HBAD-EF1-MCS-3FLAG-CMV-GFP载体结合,构建JNK1和JNK2的重组腺病毒表达载体,感染SCL-1细胞,优化感染条... 详细信息

目的探讨c-Jun氨基末端激酶1(JNK1)或JNK2过表达对SCL-1人皮肤鳞状细胞癌细胞增殖和凋亡的影响及分子机制。方法将JNK1、JNK2分别与p HBAD-EF1-MCS-3FLAG-CMV-GFP载体结合,构建JNK1和JNK2的重组腺病毒表达载体,感染SCL-1细胞,优化感染条件,实时荧光定量PCR和Western blot法鉴定过表达效果。CCK-8法测定SCL-1细胞的增殖活性,细胞克隆形成实验观察细胞集落形成能力,划痕实验检测细胞划痕愈合率;流式细胞术检测细胞凋亡水平,实时荧光定量PCR检测JNK1、JNK2、c-Jun mRNA水平; Western blot法检测磷酸化c-Jun的蛋白水平。结果 JNK1、JNK2过表达腺病毒载体最佳感染条件为感染复数(MOI)=100,感染48 h后,SCL-1细胞的JNK1和JNK2的表达水平显著升高。与对照组相比,过表达JNK1对SCL-1细胞的增殖和抗凋亡能力无显著影响,过表达JNK2的SCL-1细胞增殖和抗凋亡能力明显增强,且磷酸化c-Jun蛋白水平上调。结论过表达JNK2可以增强SCL-1人皮肤鳞状细胞癌细胞的增殖能力和抗凋亡能力。

关键词：皮肤鳞状细胞癌 SCL-1细胞 c-Jun氨基末端激酶1(JNK1) JNK2 细胞增殖细胞凋亡

原发性干燥综合征患者外周血环状RNA hsa_circ_0019413的表达研究

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中华风湿病学杂志 2020年第5期24卷 302-305,I0003页

作者：罗云霞田进海陈瑶赵丽娟周艳曹佳王立斌竺红西藏自治区昌都市人民医院内二科 854000 宁夏医科大学总医院生物芯片中心银川750004 宁夏医科大学临床医学院银川750004 宁夏医科大学总医院风湿科银川750004

目的探讨pSS患者外周血中环状RNA(circRNA)hsa_circ_0019413的表达,以及在pSS疾病发生发展中的作用。方法对4例pSS患者和4名健康对照者的外周血的circRNA变化进行微阵列筛选。以实时定量反转录-PCR(qPCR)验证30例pSS患者和30例对照者外... 详细信息

目的探讨pSS患者外周血中环状RNA(circRNA)hsa_circ_0019413的表达,以及在pSS疾病发生发展中的作用。方法对4例pSS患者和4名健康对照者的外周血的circRNA变化进行微阵列筛选。以实时定量反转录-PCR(qPCR)验证30例pSS患者和30例对照者外周血中circRNA hsa_circ_0019413的表达差异。建立受试者工作特征曲线(ROC曲线),对外周血中circRNA hsa_circ_0019413的潜在诊断价值进行了分析,并将circRNA hsa_circ_0019413的表达水平与pSS患者临床指标进行相关性分析。结果①通过微阵列分析,在2组之间差异表达437个circRNA[差异倍数(FC)≥2.0,P生物标志物。

关键词：干燥综合征环状RNA hsa_circ_0019413 诊断

环状RNA hsa_circ_0018574在结直肠癌组织中的表达及其对结直肠癌细胞增殖的影响

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肿瘤防治研究 2022年第12期49卷 1258-1264页

作者：马锐田进海马荣万巧凤刘河涛王立斌宁夏医科大学基础医学院银川750004 宁夏医科大学总医院生物芯片工程研究中心银川750004

目的探讨hsa_circ_0018574在结直肠癌组织和人结肠癌HT29细胞系中的表达,以及其对结直肠肿瘤细胞增殖和凋亡的影响。方法使用circPrimer1.2软件绘制circRNA序列结构示意图,用人circRNA芯片筛选在结直肠癌组织和癌旁组织中差异表达的circ... 详细信息

目的探讨hsa_circ_0018574在结直肠癌组织和人结肠癌HT29细胞系中的表达,以及其对结直肠肿瘤细胞增殖和凋亡的影响。方法使用circPrimer1.2软件绘制circRNA序列结构示意图,用人circRNA芯片筛选在结直肠癌组织和癌旁组织中差异表达的circRNA,提取组织样本RNA,RT-qPCR检测hsa_circ_0018574在人结直肠肿瘤组织中的表达。将si-circ_0018574转染至人结肠癌HT29细胞,分别采用克隆集落形成实验、流式细胞仪、Western blot法检测CDK2、CDK4、CDK6以及cyclinD1和cyclinE周期蛋白表达。结果hsa_circ_0018574在人结直肠肿瘤组织中的表达明显高于癌旁组织(P<0.01)。si-circ_0018574能够明显抑制人结肠癌HT29细胞增殖,减少克隆形成以及降低细胞集落的形成能力(P<0.01),诱导肿瘤细胞凋亡(P<0.01)。CDK2、CDK4、CDK6以及cyclinD1和cyc l inE周期蛋白表达降低。结论hsa_circ_0018574在结直肠肿瘤中高表达,沉默circ_0018574能够显著抑制人结肠癌HT29细胞增殖,减少细胞分裂,诱导细胞凋亡。

关键词： circRNA 结直肠癌细胞周期增殖凋亡