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尿石素C对人急性髓系白血病HL-60细胞增殖、凋亡和自噬的影响及其机制

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吉林大学学报（医学版） 2024年第4期50卷 908-916页

作者：于国兴张鑫杜恒玮崔冰洁高娜刘翠兰杜静滨州医学院附属医院血液内科山东滨州256603 滨州医学院附属医院医学研究中心山东滨州256603 滨州医学院附属医院妇科山东滨州256603

目的:探讨尿石素C(UC)对急性髓系白血病(AML)HL-60细胞增殖、凋亡和自噬的影响,阐明其相关作用机制。方法:HL-60细胞分为不同浓度(0、20、40、60、80及100μmol·L^(-1))尿石素A(UA)、尿石素B(UB)和UC组,采用CCK-8法检测各组细胞增殖活... 详细信息

目的:探讨尿石素C(UC)对急性髓系白血病(AML)HL-60细胞增殖、凋亡和自噬的影响,阐明其相关作用机制。方法:HL-60细胞分为不同浓度(0、20、40、60、80及100μmol·L^(-1))尿石素A(UA)、尿石素B(UB)和UC组,采用CCK-8法检测各组细胞增殖活性,光学显微镜观察不同浓度UC组细胞形态表现;HL-60细胞分为不同浓度(0、20、40及80μmol·L^(-1))UC组和3-甲基腺嘌呤(3-MA)联合不同浓度(0、20、40及80μmol·L^(-1))UC组,采用CCK-8法检测各组细胞增殖活性。HL-60细胞分为对照组和不同浓度(20、40及80μmol·L^(-1))UC组,采用活/死细胞染色法检测各组死细胞率,流式细胞术检测各组细胞凋亡率,细胞自噬染色检测试剂盒[单丹磺酰戊二胺(MDC)法]检测各组细胞自噬情况,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测各组细胞中苄氯素1(Beclin 1)、自噬相关蛋白9(ATG9)和自噬相关蛋白7(ATG7)mRNA表达水平,Western blotting法检测各组细胞中含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Caspase-3)、活化的Caspase-3(Cleaved Caspase-3)、微管相关蛋白1轻链3(LC-3)、细胞外信号调节激酶(ERK)、磷酸化ERK(p-ERK)、AMP依赖的蛋白激酶(AMPK)和磷酸化AMPK(p-AMPK)蛋白表达水平。结果:CCK-8法,培养24、48和72 h,分别与0μmol·L^(-1) UA、UB和UC组比较,不同浓度UA、UB和UC组细胞增殖活性均降低(P<0.05或P<0.01),且呈浓度和时间依赖性;48 h时,与UA和UB比较,UC半数抑制浓度(IC50)最低。细胞形态表现,与对照组比较,随着UC浓度升高,细胞间连接和细胞数量减少,细胞碎片增加。CCK-8法,与40和80μmol·L^(-1) UC组比较,3-MA联合40和80μmol·L^(-1) UC组细胞增殖活性升高(P<0.05或P<0.01)。活/死细胞染色,与对照组比较,40和80μmol·L^(-1) UC组死细胞率升高(P<0.01)。流式细胞术,与对照组比较,80μmol·L^(-1) UC组细胞凋亡率升高(P<0.01)。MDC法,与对照组比较,随着UC浓度升高,不同浓度UC组细胞绿色荧光逐渐增强。RT-qPCR法,与对照组比较,80μmol·L^(-1) UC组细胞中Beclin 1、ATG9和ATG7 mRNA表达水平升高(P<0.01)。Western blotting法,与对照组比较,20、40和80μmol·L^(-1) UC组细胞中Cleaved Caspase-3蛋白表达水平升高(P<0.01),80μmol·L^(-1) UC组细胞中膜型LC3/胞浆型LC3(LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ)比值升高(P<0.05),40和80μmol·L^(-1) UC组细胞中p-AMPK/AMPK及p-ERK/ERK比值升高(P<0.01)。结论:UC可抑制人AML HL-60细胞增殖,诱导其细胞凋亡和自噬,并可提高细胞中ERK和AMPK蛋白磷酸化水平。

关键词：尿石素C 白血病细胞细胞增殖细胞凋亡细胞自噬

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成人免疫性血小板减少性紫癜合并肝血管瘤1例报告并文献复习

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中国普通外科杂志 2024年第1期33卷 44-51页

作者：吴嘉兴邓维沛赵东康蒋建晖张俊艳姚红兵桂林医学院第二附属医院肝胆胰外科广西桂林541199 桂林医学院第二附属医院血液内科广西桂林541199

背景与目的:成人免疫性血小板减少性紫癜(ITP)合并肝血管瘤临床罕见,容易误诊误治。笔者报告的1例成人ITP合并肝血管瘤患者的诊治经过,以期为临床提供参考和借鉴。方法:回顾性分析桂林医学院第二附属医院收治的1例成人ITP合并肝血管瘤... 详细信息

背景与目的:成人免疫性血小板减少性紫癜(ITP)合并肝血管瘤临床罕见,容易误诊误治。笔者报告的1例成人ITP合并肝血管瘤患者的诊治经过,以期为临床提供参考和借鉴。方法:回顾性分析桂林医学院第二附属医院收治的1例成人ITP合并肝血管瘤患者的临床资料,并结合文献总结该病的临床诊治特点。结果:患者为46岁女性,因“全身皮肤黏膜出血1个月余,血小板减少1 d”入住血液内科。血细胞分析血小板计数4.0×10^(9)/L,凝血功能正常,骨髓穿刺活检提示巨核细胞相对增多,血小板少见,高度疑似ITP。经激素等治疗后皮肤黏膜出血好转,血小板升高至59×10^(9)/L。上腹部增强CT提示右肝巨大血管瘤,转至肝胆胰外科行肝血管瘤切除,术后术区渗血明显,阴道流血,血小板逐步降低至3.0×10^(9)/L,右侧胸腔大量积液,但凝血功能正常。经止血、输血、调节免疫、抗感染、胸腔穿刺引流处理后逐步恢复。术后第13天患者血小板升高至220×10^(9)/L。随访32个月,患者皮肤黏膜不再出血,血小板计数维持在正常范围。结论:成人ITP,需警惕合并肝血管瘤,处理血管瘤可使患者获得良好的远期效果,但需做好围术期管理以使患者顺利恢复。

关键词：肝肿瘤血管瘤紫癜,血小板减少性 Kasabach-Merritt综合征肝切除术

LncRNA SNHG3/miR-339-5p/PPIB轴对结直肠癌细胞恶性生物学行为的影响

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中国老年学杂志 2024年第16期 4044-4049页

作者：李萍张月晓符皓时军利李炳庆承德医学院附属医院消化内科承德医学院附属医院营养科

目的探讨长链非编码RNA(LncRNA)小核仁RNA宿主基因(SNHG)3/miR-339-5p/肽酰脯氨基顺反异构酶(PPI)B轴对结直肠癌(CRC)细胞恶性生物学行为的影响。方法以SW620细胞为实验对象，分为：SW620组(未处理的SW620细胞)、si-NC组、si-SNHG3组... 详细信息

目的探讨长链非编码RNA(LncRNA)小核仁RNA宿主基因(SNHG)3/miR-339-5p/肽酰脯氨基顺反异构酶(PPI)B轴对结直肠癌(CRC)细胞恶性生物学行为的影响。方法以SW620细胞为实验对象，分为：SW620组(未处理的SW620细胞)、si-NC组、si-SNHG3组、si-SNHG3+NC inhibitor组、si-SNHG3+miR-339-5p inhibitor组、si-SNHG3+pcDNA组、si-SNHG3+pcDNA PPIB组。荧光原位杂交实验和双荧光素酶报告基因检测LncRNA SNHG3、miR-339-5p、PPIB三者的靶向关系；实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测LncRNA SNHG3、miR-339-5p、PPIB表达；CCK-8检测SW620细胞活性；Transwell试验检测SW620细胞迁移、侵袭；Western印迹检测E-钙黏蛋白(cadherin)、波形蛋白(vimentin)、锌指转录因子(Snail)表达。结果与NC组相比，CRC组LncRNA SNHG3、PPIB相对表达量显著升高，miR-339-5p相对表达量显著下降(P<0.05);与NCM460组相比，SW620组LncRNA SNHG3、PPIB相对表达量显著上升，miR-339-5p相对表达量显著下降(P<0.05);LncRNA SNHG3与miR-339-5p存在靶向关系，miR-339-5p与PPIB存在靶向关系；下调LncRNA SNHG3显著降低SW620细胞增殖、迁移、侵袭能力及vimentin、Snail蛋白表达，显著升高E-cadherin蛋白表达(P<0.05),而下调miR-339-5p和上调PPIB均显著升高了SW620细胞增殖、迁移、侵袭能力及vimentin、Snail蛋白表达，显著降低E-cadherin蛋白表达(P<0.05)。结论敲低LncRNA SNHG3可能通过调节miR-339-5p/PPIB轴调控CRC细胞增殖、侵袭等恶性生物学行为。

关键词：长链非编码RNA(LncRNA)小核仁RNA宿主基因(SNHG3)/miR-339-5p/肽酰脯氨基顺反异构酶(PPI)B轴结直肠癌增殖迁移侵袭

传统法与改良法培养腹膜透析相关性腹膜炎病原菌阳性率的比较及耐药性分析

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中华肾脏病杂志 2024年第4期40卷 300-304页

作者：陈春苗许志辉王菲菲云晓滢李冰海南医学院第二附属医院肾内科海口570216

该研究为回顾性队列研究。收集2021年1月1日至2022年12月31日在海南医学院第二附属医院肾内科确诊为腹膜透析相关性腹膜炎(peritoneal dialysis-associated peritonitis,PDAP)患者腹膜透析透出液样本,根据腹膜炎发生时间不同分为传统法... 详细信息

该研究为回顾性队列研究。收集2021年1月1日至2022年12月31日在海南医学院第二附属医院肾内科确诊为腹膜透析相关性腹膜炎(peritoneal dialysis-associated peritonitis,PDAP)患者腹膜透析透出液样本,根据腹膜炎发生时间不同分为传统法组(2021年)和改良法组(2022年)。传统法组仅采用传统法进行病原菌培养,改良法组同时采用传统法和改良法进行病原菌培养。分析病原菌培养阳性率、培养阳性时间、病原菌谱及耐药情况。结果显示,共223例(324例次)PDAP患者被纳入该研究,传统法组115例(168例次),改良法组108例(156例次)。改良法病原菌培养阳性率显著高于传统法[84.62%(132/156)比69.23%(108/156),χ^(2)=18.903,P<0.001],病原菌培养阳性时间短于传统法[69.0(58.0,90.9)h比79.5(65.6,90.2)h,Z=2.061,P=0.039]。传统法组共培养病原菌120株,其中革兰阳性(G+)菌69株(57.50%),革兰阴性(G-)菌46株(38.33%),真菌5株(4.17%);G+菌中常见菌株为表皮葡萄球菌(17株,14.17%)和唾液链球菌(10株,8.33%)。改良法组共培养病原菌134株,其中G+菌106株(79.10%),G-菌24株(17.91%),真菌4株(2.99%);G+菌中常见菌株为唾液链球菌(20株,14.93%)和表皮葡萄球菌(15株,11.19%)。G+菌对苯唑西林的耐药率最高(50/85,58.82%),G-菌对氨苄西林的耐药率最高(21/35,60.00%),真菌仅对氟康唑耐药(1/9,11.11%)。提示改良法可提高腹膜透析透出液病原菌培养阳性率,缩短培养时间;G+球菌为本中心PDAP的主要致病菌;苯唑西林和氨苄西林不宜作为本中心治疗PDAP的首选用药。

关键词：腹膜透析腹膜炎抗药性细菌病原菌培养方法

帕金森病胃肠动力障碍发病机制和治疗的研究进展

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吉林大学学报（医学版） 2024年第1期50卷 280-287页

作者：张灿陈艳滨州医学院附属医院消化内科山东滨州256603

帕金森病(PD)患者胃肠动力障碍发生在疾病的早期阶段,甚至在运动症状出现前阶段。胃肠动力障碍是胃肠功能障碍中的一种,不仅影响药物的吸收,使PD患者的病程恶化,而且严重影响患者的生活质量。因此,寻找新的治疗靶点以减轻PD诱导的胃肠... 详细信息

帕金森病(PD)患者胃肠动力障碍发生在疾病的早期阶段,甚至在运动症状出现前阶段。胃肠动力障碍是胃肠功能障碍中的一种,不仅影响药物的吸收,使PD患者的病程恶化,而且严重影响患者的生活质量。因此,寻找新的治疗靶点以减轻PD诱导的胃肠道动力障碍,对改善PD患者的病程进展和生活质量至关重要。胃肠动力功能高度依赖于肠道健康和调控胃肠运动的中枢神经。健康的肠道与肠道屏障的完整性、肠道菌群、神经炎症及负责胃肠道收缩和舒张肠道神经元的正常功能有密切关联,而PD患者的肠道功能均受到一定程度的损害。现对肠道神经系统、中枢神经系统和肠道微生物等在PD患者胃肠动力障碍发生发展过程中的影响进行综述,并总结目前可用的治疗方法及其局限性,旨在为PD患者胃肠动力障碍的治疗提供新的思路。

关键词：帕金森病胃肠动力障碍肠神经系统肠道微生物

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线粒体裂变因子对OGD/R诱导的PC12细胞线粒体凋亡通路的影响

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华中科技大学学报（医学版） 2024年第2期53卷 168-174,189页

作者：钱旭东李国芸卜一王红梅张硕窦志杰承德医学院附属医院神经内科承德067000 承德医学院附属医院呼吸内科承德067000

目的探究线粒体裂变因子(mitochondrial fission factor,MFF)在氧糖剥夺/复氧(oxygen glucose deprivation/re-oxygenation,OGD/R)处理的PC12细胞中的表达及其对线粒体凋亡通路的影响。方法选用PC12细胞系构建体外缺血性神经元损伤模型。利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和蛋白质免疫印迹(Western blot)实验明确MFF mRNA和蛋白在不同处理时间点的表达情况。通过RNA干扰技术沉默MFF基因表达,利用qRT-PCR、Western blot检测MFF mRNA和蛋白的表达情况;CCK-8检测沉默MFF对OGD/R处理的PC12细胞活力的影响;JC-1和试剂盒检测线粒体膜电位、腺苷三磷酸(adenosine triphosphate,ATP)和活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平变化;Western blot检测细胞色素C(cytochrome C,Cyt-C)、Bax和Bcl2的表达;酶联免疫吸附法(ELISA)检测Caspase-3和Caspase-9的活性变化。结果MFF在体外OGD/R诱导的PC12细胞中的mRNA和蛋白含量明显升高。MFF沉默增强了OGD/R损伤后PC12细胞的活力,降低了细胞凋亡率,并促进Bcl2和抑制Bax蛋白的表达。敲低MFF明显提高了OGD/R处理后PC12细胞的线粒体膜电位,促进ATP合成,降低ROS含量,抑制线粒体细胞色素C释放和Caspase-3和Caspase-9的活性。结论沉默MFF基因显著提高了OGD/R处理后PC12细胞的存活率,改善了线粒体功能。

关键词：线粒体凋亡氧糖剥夺/复氧模型 PC12细胞线粒体裂变因子

探头式共聚焦激光显微内镜量化指标诊断幽门螺杆菌相关萎缩性胃炎的临床研究

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中华消化内镜杂志 2024年第6期41卷 465-471页

作者：陈佳颖吴迪党彤汤泊夫刘琳贾语婧李志伟包头医学院第二附属医院消化内科包头014030 包头医学院第一附属医院重症医学科包头014010

目的量化探头式共聚焦激光显微内镜(probe-based confocal laser endomicroscopy,pCLE)诊断幽门螺杆菌相关萎缩性胃炎(***-associated chronic atrophic gastritis,HpCAG)的诊断指标,并评价诊断效能。方法研究分为2个阶段:第1阶段前瞻性纳入2021年11月至2022年9月在包头医学院第二附属医院行胃镜检查及内镜下活检并行13C呼气试验的患者作为研究对象,离线视频采用Image J图像分析软件测量pCLE视野中的毛细血管直径(capillary diameter,CD)、细胞间距(cells spacing,CS)、腺体间距(gland spacing,GS)、腺体面积(gland area,GA)这4个指标,通过分析受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线下面积,建立pCLE下量化指标诊断HpCAG的标准;第2阶段回顾性纳入2021年10月至2022年10月间在包头医学院第二附属医院行pCLE检查及13C呼气试验的病例,剔除与第1阶段数据重合的病例,试验采用单盲法,内镜医师和病理医师对彼此的诊断结果不知情,pCLE的诊断根据第1阶段获得的标准进行,统计分析pCLE诊断与组织病理学+13C呼气试验结果的一致性。结果第1阶段招募到35例患者共计191块标本入组,根据内镜活检病理结果及13C呼气试验结果将患者及胃黏膜标本分为4组,即幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,HP)阳性萎缩性胃炎组(n=59)、HP阳性非萎缩性胃炎组(n=52)、HP阴性萎缩性胃炎组(n=40)、HP阴性非萎缩性胃炎组(n=40)。ROC曲线分析结果显示:在HP阳性患者中,GS区分慢性萎缩性胃炎与非萎缩性胃炎胃黏膜的最佳临界值为29.68μm,在4个参数中ROC曲线下面积最大;在HP阴性患者中,GS区分慢性萎缩性胃炎与非萎缩性胃炎胃黏膜的最佳临界值为23.57μm,在4个参数中ROC曲线下面积最大;在非萎缩性胃炎患者中,GS区分HP阳性与HP阴性胃黏膜的最佳临界值为20.57μm,在4个参数中ROC曲线下面积最大;在慢性萎缩性胃炎患者中,CD、CS、GS、GA区分HP阳性与HP阴性胃黏膜的最佳临界值分别为13.23μm、1.38μm、34.03μm、6066.5μm^(2),ROC曲线下面积分别为0.608、0.888、0.849、0.900。最终选择GS区分HpCAG与非HpCAG胃黏膜,最佳临界值为31.71μm,但考虑到难以通过图像下方的标尺测量31.71μm的距离,故将临界值改为30μm,因此将GS>30μm作为pCLE下HpCAG的诊断标准,此时诊断的敏感度和特异度分别为91.5%和76.0%。第2阶段观察了80例患者的224块标本:pCLE(GS>30μm)诊断HpCAG的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值和准确率分别为96.5%(164/170)、88.9%(48/54)、96.5%(164/170)、88.9%(48/54)和94.6%(212/224),与组织病理学+13C呼气试验的诊断一致性极好(Kappa=0.854)。结论pCLE下可以实现胃黏膜微观结构的定量监测,量化后的指标有助于提高HpCAG诊断的准确率。

关键词：胃炎,萎缩性幽门螺杆菌相关萎缩性胃炎探头式共聚焦激光显微内镜量化标准

石蒜碱通过抑制NLRP3炎性小体的激活改善心肌梗死后心力衰竭大鼠的心肌纤维化

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中国老年学杂志 2024年第10期44卷 2490-2496页

作者：赵勇陈佳显张远生海南医学院第二附属医院内科海南海口570203 海南医学院第二附属医院心内科海南海口570203

目的探讨石蒜碱(LYC)对心肌梗死(MI)后心力衰竭大鼠的心功能及心肌组织炎症反应与纤维化的影响及相关作用机制。方法采用冠状动脉前降支结扎法建立大鼠MI模型,按随机数字表法分为假手术(Sham)组、石蒜碱(LYC)组、心肌梗死(MI)组和心肌... 详细信息

目的探讨石蒜碱(LYC)对心肌梗死(MI)后心力衰竭大鼠的心功能及心肌组织炎症反应与纤维化的影响及相关作用机制。方法采用冠状动脉前降支结扎法建立大鼠MI模型,按随机数字表法分为假手术(Sham)组、石蒜碱(LYC)组、心肌梗死(MI)组和心肌梗死石蒜碱组(MI+LYC)各15只;各组大鼠饲养28 d时,应用超声心动图评估心功能;经腹主动脉采血,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组血清脑钠肽(BNP)浓度;麻醉状态下处死大鼠,取心脏组织,应用苏木素-伊红(HE)与Masson染色观察各组心肌损伤与胶原纤维沉积水平;Western印迹检测各组心肌组织中纤维化标记分子、Ⅰ型胶原蛋白(ColⅠ)、Ⅲ型胶原蛋白(ColⅢ)、转化生子因子(TGF)-β和α-平滑肌肌动蛋白(SMA)蛋白表达;实时荧光-聚合酶链反应(RT-PCR)与Western印迹检测各组心肌组织中炎症因子白细胞介素(IL)-1β和IL-18和核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白(NLRP)3炎症小体相关分子NLRP3、斑点样蛋白(ASC)、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(Caspase)-1、消皮素(GSDM)D mRNA与蛋白表达。结果与Sham组相比,MI组与MI+LYC组心功能明显降低(P0.05);与MI组相比,MI+LYC组上述指标变化趋势均明显降低(P<0.05)。结论LYC可通过抑制NLRP3炎症小体的激活改善MI引起的心肌功能障碍与炎症反应和心肌纤维化。

关键词：石蒜碱核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白(NLRP)3炎性小体心肌梗死心力衰竭心肌纤维化

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中华老年心脑血管病杂志 2024年第6期26卷 628-631页

作者：张驰窦志杰崔琮李军周健承德医学院附属医院神经内科 067000 承德医学院附属医院全科医疗科 067000 解放军91236部队医院内科

目的探讨血清中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)、生长分化因子15(GDF-15)联合检测在老年H型高血压患者肾损伤中的诊断价值。方法选取2021年4月至2022年6月承德医学院附属医院神经内科及全科医疗科收治的H型高血压患者177例,依据... 详细信息

目的探讨血清中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)、生长分化因子15(GDF-15)联合检测在老年H型高血压患者肾损伤中的诊断价值。方法选取2021年4月至2022年6月承德医学院附属医院神经内科及全科医疗科收治的H型高血压患者177例,依据估算肾小球滤过率分为肾功能损伤组81例和肾功能正常组96例。收集2组患者一般资料、实验室检查指标,受试者工作特征曲线(ROC)分析血清NGAL、GDF-15联合检测对老年H型高血压患者肾损伤的诊断价值,Pearson相关性分析血清NGAL、GDF-15水平与老年H型高血压患者肾损伤的相关性。结果肾功能损伤组收缩压水平高于肾功能正常组[(148.53±14.62)mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa)vs(138.75±13.36)mm Hg,P0.05);肾功能损伤组肌酐、尿素、β_2微球蛋白(β_2-MG)、胱抑素C(Cys C)、尿微量白蛋白(MA)、NGAL及GDF-15水平高于肾功能正常组(P<0.01);ROC曲线分析显示,NGAL、GDF-15联合检测显著高于NGAL、GDF-15单独检测(P<0.01)。Pearson相关性分析显示,血清NGAL、GDF-15水平与肌酐、尿素、β_2-MG、Cys C、MA水平均呈正相关(P<0.01)。结论老年H型高血压患者出现肾损伤后血清NGAL、GDF-15水平升高,血清NGAL、GDF-15联合检测在老年H型高血压患者肾损伤诊断中具有较高的诊断价值。

关键词：高血压生长分化因子15 急性肾损伤诊断中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白