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脱细胞异体神经移植物联合电针对坐骨神经损伤大鼠脊神经节的保护作用及机制

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解剖学报 2024年第2期55卷 143-149页

作者：周泽宇马蕴涵李佳瑞胡余梦袁博张银娟于晓敏付秀美承德医学院基础医学院人体解剖学教研室河北承德067000 承德医学院中医系针灸推拿教研室河北承德067000 承德医学院教务处河北承德067000 河北省神经损伤与修复重点实验室河北承德067000

目的探讨脱细胞异体神经移植物(ANA)联合电针对坐骨神经损伤(SNI)大鼠脊神经节的保护作用及机制。方法选取50只雄性SD大鼠,10只制备ANA;40只随机分为正常组、模型组、ANA组和联合组,每组10只。分离右侧坐骨神经,于梨状肌下缘5 mm处去除1... 详细信息

目的探讨脱细胞异体神经移植物(ANA)联合电针对坐骨神经损伤(SNI)大鼠脊神经节的保护作用及机制。方法选取50只雄性SD大鼠,10只制备ANA;40只随机分为正常组、模型组、ANA组和联合组,每组10只。分离右侧坐骨神经,于梨状肌下缘5 mm处去除10 mm制备SNI模型。ANA组将制备好的ANA连接在损伤神经的两断端处。联合组于ANA连接术后2 d采用电子针疗仪电针“环跳穴”和“阳陵泉穴”,15 min/d,7 d为1个疗程,共4个疗程。电生理检测各组大鼠坐骨神经传导速度,评估受损轴突再生情况;尼氏染色观察脊神经节中神经元的形态结构;Western blotting和免疫荧光法检测脊神经节中神经生长因子(NGF)和脑源性神经营养因子(BDNF)的表达。结果与正常组比较,模型组大鼠坐骨神经传导速度明显降低(P<0.01);神经节神经元中的尼氏体因肿胀、溶解导致结构不完整,数量显著减少(P<0.01);NGF和BDNF蛋白表达量明显降低(P<0.01)。与模型组比较,ANA组和联合组大鼠坐骨神经传导速度明显增加(P<0.01);神经节神经元中尼氏体损伤减弱,数量明显增加(P<0.01);NGF和BDNF蛋白表达量显著升高(P<0.01)。与ANA组比较,联合组大鼠坐骨神经传导速度显著增加(P<0.01);神经节神经元中尼氏体形态较规则,数量明显增加(P<0.01);NGF蛋白表达量显著升高(P<0.01)。结论ANA联合电针可提高大鼠坐骨神经传导速度,改善神经节中神经元的形态结构,发挥对脊神经节神经元的保护作用,其机制可能与提高神经元中NGF和BDNF蛋白的表达,尤其是NGF蛋白的表达相关。

关键词：脱细胞异体神经移植物电针脊神经节神经生长因子脑源性神经营养因子坐骨神经损伤免疫印迹法大鼠

全球气候治理机制的合法性基础、问题与应对策略

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青海社会科学 2024年第1期 30-37页

作者：张丽华刘殿金吉林大学行政学院长春财经学院教务处

合法性是国际机制创建和维持的根本前提。全球气候治理机制作为当前最受瞩目的国际机制之一,国际社会特定的权力结构、利益偏好和观念认知构成其合法性的现实基础。与其他国际机制一样,全球气候治理机制也不断地演化和变迁,气候政治中... 详细信息

合法性是国际机制创建和维持的根本前提。全球气候治理机制作为当前最受瞩目的国际机制之一,国际社会特定的权力结构、利益偏好和观念认知构成其合法性的现实基础。与其他国际机制一样,全球气候治理机制也不断地演化和变迁,气候政治中的权力转移与领导力缺失、负外部性与国家利益之争、不确定性与话语权困境等问题对其合法性有着不可忽视的影响。为强化全球气候治理机制的合法性基础和治理成效,应重塑中美欧大国领导格局,积极推动责任共担,不断强化国家间的共同利益和统一的气候行动,并以“共同的人类身份”凝聚全球共识和身份认同,促进全球气候治理真正从全球共识走向集体行动。

关键词：全球气候治理机制合法性国家利益身份认同

甘草酸对高糖诱导的肾小球系膜细胞炎性因子及纤维化因子的影响

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解放军医学杂志 2024年第2期49卷 214-219页

作者：李媛王珍曹雪侯绍章宁夏医科大学基础医学院宁夏银川750004 宁夏医科大学护理学院宁夏银川750004

目的探讨甘草酸(GA)对高糖诱导的肾小球系膜细胞(SV40 MES13)炎性因子及纤维化因子的影响。方法将培养的小鼠肾小球系膜细胞(SV40 MES13)分为对照(NG)组(5.6 mmol/L葡萄糖)、高糖(HG)组(30 mmol/L葡萄糖)及HG+GA组(30 mmol/L葡萄糖+200... 详细信息

目的探讨甘草酸(GA)对高糖诱导的肾小球系膜细胞(SV40 MES13)炎性因子及纤维化因子的影响。方法将培养的小鼠肾小球系膜细胞(SV40 MES13)分为对照(NG)组(5.6 mmol/L葡萄糖)、高糖(HG)组(30 mmol/L葡萄糖)及HG+GA组(30 mmol/L葡萄糖+200μmol/L GA)。采用Western blotting检测各组细胞炎性因子白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、IL-6、IL-8及纤维化因子α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)蛋白表达水平,免疫荧光检测各组IL-1β、TNF-α、α-SMA在细胞内的荧光表达强度,酶联免疫吸附实验(ELISA)检测各组细胞培养上清中IL-1β、TNF-α、IL-6及IL-8的表达水平。结果Western blotting检测结果显示,与NG组比较,HG组IL-1β、TNF-α、IL-6、IL-8及α-SMA蛋白的表达水平明显升高(P<0.01);与HG组比较,HG+GA组IL-1β、TNF-α、IL-6、IL-8和α-SMA蛋白表达量降低(P<0.05)。细胞免疫荧光结果显示,与NG组比较,HG组细胞内IL-1β、TNF-α和α-SMA因子的荧光强度明显增强(P<0.05);与HG组相比,HG+GA组细胞内IL-1β、TNF-α和α-SMA因子荧光强度明显降低(P<0.05)。ELISA检测结果显示,与NG组比较,HG组细胞培养上清中IL-1β、IL-6、TNF-α和IL-8蛋白表达水平升高(P<0.01);与HG组比较,HG+GA组IL-1β、IL-6、TNF-α、IL-8表达水平明显降低(P<0.05)。结论甘草酸对高糖诱导的肾小球系膜细胞的炎性因子及纤维化因子的表达均具有不同程度的抑制作用,可能在糖尿病肾病的预防方面发挥重要作用。

关键词：糖尿病肾病高糖甘草酸肾小球系膜细胞炎性因子纤维化

海马G蛋白偶联雌激素受体1参与癫痫调控的转录组学研究

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中国药理学通报 2024年第4期40卷 709-715页

作者：左娣郝世杰杨盼李苗任晓璠丁娜马文倩王盼盼王诗雨戎伟芳刘昆梅宁夏医科大学颅脑疾病重点实验室宁夏银川750004 宁夏医科大学临床医学院宁夏银川750004 宁夏医科大学口腔医学院宁夏银川750004 上海交通大学基础医学院上海200025

目的本研究分别将野生型(WT)、Gper1敲低(Gper1-KD)大鼠海马组织进行转录组测序,探讨G蛋白偶联雌激素受体1(G-protein coupled estrogen receptor 1,GPER1)影响癫痫发病可能的信号通路和分子机制。方法海马组织进行RNA提取和cDNA文库构... 详细信息

目的本研究分别将野生型(WT)、Gper1敲低(Gper1-KD)大鼠海马组织进行转录组测序,探讨G蛋白偶联雌激素受体1(G-protein coupled estrogen receptor 1,GPER1)影响癫痫发病可能的信号通路和分子机制。方法海马组织进行RNA提取和cDNA文库构建,与NCBI数据库大鼠基因组及基因注释比对,通过FPKM值,筛选组别间差异表达基因(DEGs)。将DEGs进行GO富集、KEGG富集分析,构建蛋白互作网络,利用RT-qPCR法对关键DEGs进行验证。结果Gper1-KD组与WT组相比,筛选(Fold change>2且FDR<0.01)后,检测到DEGs 2253个,其中上调基因1380个,下调基因873个;GO结果显示,DEGs主要分布在淋巴细胞趋化性、细胞分泌、巨噬细胞趋化性、中性粒细胞趋化性、血管生成正向调控等生物过程;KEGG结果显示,DEGs相关分子信号通路主要有癌症信号通路、PI3K-Akt通路、癌症蛋白聚糖相关信号通路、细胞黏附相关通路、MAPK信号通路等;RT-qPCR结果表明,Mapk12、Pdpk1、Foxo3、Camk2d、Pik3cg等基因表达水平差异具有显著性。结论MAPK、TNF信号通路在GPER1影响癫痫发生中可能起关键作用,GABA能神经元和Pik3cg在GPER1影响癫痫易感性方面可能发挥重要作用。

关键词： GPER1 癫痫 DEGs GO富集 KEGG富集蛋白互作网络

基于OPPM理论的全过程“双高计划”绩效评价指标体系构建研究

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职业技术教育 2024年第27期 66-73页

作者：沈璐徐爱亲丽水职业技术学院教务处

“双高计划”绩效评价是“双高计划”建设的重要指挥棒。在分析绩效评价内涵、逻辑和实践困境的基础上，从OPPM理论的全过程视角出发，运用德尔菲法、九级标度法和层次分析法确定绩效评价指标体系权重，围绕“双高计划”决策目标构建一... 详细信息

“双高计划”绩效评价是“双高计划”建设的重要指挥棒。在分析绩效评价内涵、逻辑和实践困境的基础上，从OPPM理论的全过程视角出发，运用德尔菲法、九级标度法和层次分析法确定绩效评价指标体系权重，围绕“双高计划”决策目标构建一级指标6个、二级指标19个、三级指标67个的绩效评价体系，并提出定性与定量、过程与结果、内部与外部、全面与重点有机结合的绩效评价方式。

关键词： OPPM理论 “双高计划” 绩效评价高职院校

铜绿假单胞菌中PA0847二鸟苷酸环化酶活性受非催化位点Y700调控

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微生物学报 2024年第7期64卷 2337-2351页

作者：肖王鑫杨婷婷黄卫东袁文肃张燕林志天津大学生命科学学院天津300072 宁夏医科大学基础医学院宁夏银川750003

【目的】鉴定铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)中PA0847胞内结构域及其突变体的二鸟苷酸环化酶活性,并初步探究其催化机制。【方法】利用刚果红平板染色法验证PA0847胞内域的二鸟苷酸环化酶活性;采用PCR技术构建PA0847 PAS-GGDEF... 详细信息

【目的】鉴定铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)中PA0847胞内结构域及其突变体的二鸟苷酸环化酶活性,并初步探究其催化机制。【方法】利用刚果红平板染色法验证PA0847胞内域的二鸟苷酸环化酶活性;采用PCR技术构建PA0847 PAS-GGDEF结构域及其单点突变体,并经过表达纯化获得相应蛋白;经凝胶分子筛层析分析蛋白在溶液中的聚集状态;通过体外酶促反应鉴定蛋白的二鸟苷酸环化酶活性,基于噻唑橙荧光染色检测蛋白酶促反应后环鸟苷二磷酸(cyclic diguanylate monophosphate,c-di-GMP)的生成量,并筛选与二鸟苷酸环化酶活性密切相关的氨基酸残基;联用结构预测和分子对接获得PA0847 PAS-GGDEF二聚体以及结合三磷酸鸟苷(guanosine triphosphate,GTP)的复合物结构模型。【结果】PA0847 PAS-GGDEF主要以二聚体形式发挥催化活性,PAS结构域促进二聚体形成,有效提高二鸟苷酸环化酶活性;突变筛选发现,在低蛋白浓度(0.6 mg/m L)下,非催化位点突变体Y700A活性较野生型显著提高;凝胶分子筛层析表明,其高活性可能与Y700A突变促进GGDEF(Gly-Gly-Asp-Glu-Phe)结构域二聚化有关;结构模型分析显示,PA0847 PAS-GGDEF与GTP结合位点保守,其中K722的氨基侧链在结合GTP的磷酸基团中发挥着重要作用,而Y700芳香环侧链与K722所在的α螺旋有疏水互作,因此Y700A突变可能改变了K722所在螺旋的空间取向,进而促进K722与底物GTP的结合以及GGDEF二聚化。【结论】铜绿假单胞菌PA0847的非催化位点Y700可间接调控二鸟苷酸环化酶活性。

关键词：铜绿假单胞菌 PA0847 环鸟苷二磷酸(c-di-GMP) 三磷酸鸟苷

以器官系统进行基础医学课程整合与临床医学课程整合实践研究

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沈阳医学院学报 2024年第5期26卷 532-536页

作者：周家华胡中华王晓婷张量张忠沈阳医学院教务处辽宁沈阳110034

目的:比较以器官系统进行基础医学课程整合与临床医学课程整合的教学模式与以学科为基础的传统教学模式的教学效果,为培养医学人才提供理论参考。方法:制定基础医学课程整合与临床医学整合课程方案,以基础医学课程整合与临床医学课程整... 详细信息

目的:比较以器官系统进行基础医学课程整合与临床医学课程整合的教学模式与以学科为基础的传统教学模式的教学效果,为培养医学人才提供理论参考。方法:制定基础医学课程整合与临床医学整合课程方案,以基础医学课程整合与临床医学课程整合、临床医学课程整合、以学科为基础的3种教学模式下培养的参加医师资格考试的应届临床医学专业学生为研究对象,对学生的基础医学综合、临床医学综合以及医师资格考试成绩进行分析,实现对基础医学课程整合与临床医学课程整合教学模式实施效果进行初步评价。结果:以器官系统进行基础医学课程整合与临床医学课程整合的教学模式、临床医学课程整合的教学模式、以学科为基础的教学模式3者相比较,学生学习成绩并无明显差异。结论:以器官系统为基础的整合教学模式对学生短期内学习成绩并无明显影响。

关键词：基础医学课程整合教学临床医学课程整合教学器官系统学生成绩

羧胺三唑通过下调细胞因子和抗菌肽S100A7的表达改善实验性银屑病

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药学学报 2024年

作者：刘婧雯杨梅朱蕾中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院

应用咪喹莫特 (imiquimod， IMQ) 诱导的银屑病小鼠模型以及五联因子 (a mixture of five proinflammatory cytokines， M5) 诱导的银屑病角质形成细胞模型，评价羧胺三唑 (carboxyamidotriazole， CAI) 对银屑病的治疗效果和可能机制... 详细信息

应用咪喹莫特 (imiquimod， IMQ) 诱导的银屑病小鼠模型以及五联因子 (a mixture of five proinflammatory cytokines， M5) 诱导的银屑病角质形成细胞模型，评价羧胺三唑 (carboxyamidotriazole， CAI) 对银屑病的治疗效果和可能机制。银屑病皮损面积和疾病严重程度 (psoriasis area and severity index， PASI) 评分评估小鼠皮损严重程度，苏木素-伊红 (hematoxylin-eosin staining， HE) 染色观察皮肤病理学变化，酶联免疫吸附法 (enzyme-linked immunosorbent assay， ELISA) 检测皮肤中细胞因子水平，转录组测序分析差异表达基因，实时荧光定量PCR (real-time quantitative PCR， qPCR) 检测mRNA表达。动物实验经中国医学科学院基础医学研究所实验动物管理与伦理委员批准 (批准号: ACUC-A02-2022-115)。结果显示，与IMQ组相比， CAI显著改善小鼠银屑病样皮损，降低PASI评分，减轻皮损病理变化和评分，减少皮损处促炎细胞因子水平，转录组分析结果显示CAI可能通过调节角质形成细胞及其介导的表皮角化而发挥作用， qPCR验证发现CAI能够下调差异表达基因S100a7; 进一步使用M5刺激HaCaT细胞构建银屑病角质形成细胞模型， CAI能够抑制M5诱导的S100a7以及细胞因子的mRNA水平。综上， CAI可能对银屑病具有良好治疗作用，其作用机制与调节角质形成细胞功能以及减少细胞因子和S100a7表达有关。

关键词：羧胺三唑银屑病咪喹莫特 HaCaT细胞细胞因子 S100A7

基于RXRA/TNF-α/GLUT4通路探讨大黄糖络丸改善2型糖尿病骨骼肌胰岛素抵抗的分子机制

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中药药理与临床 2024年

作者：赵思晨梁永林朱向东白敏张禄璐安冬裴晓丽宁夏医科大学甘肃中医药大学基础医学院

目的：基于网络药理学和分子对接技术预测大黄糖络丸改善2型糖尿病骨骼肌胰岛素抵抗（T2DM-IRSM）的分子机制并进行动物实验验证。方法：采用网络药理学和分子对接技术预测大黄糖络丸干预2型糖尿病骨骼肌胰岛素抵抗的可能靶点，并采用... 详细信息

目的：基于网络药理学和分子对接技术预测大黄糖络丸改善2型糖尿病骨骼肌胰岛素抵抗（T2DM-IRSM）的分子机制并进行动物实验验证。方法：采用网络药理学和分子对接技术预测大黄糖络丸干预2型糖尿病骨骼肌胰岛素抵抗的可能靶点，并采用分子生物学技术验证相关靶点。选取30只SPF级9周龄雄性ZDF（fa/fa）大鼠纳入实验，适应性喂养1周后采用5008饲料诱导3周复制模型，成模后随机分为模型对照组，罗格列酮0.36 mg/kg组和大黄糖络丸2.16、1.08、0.54 g/kg组，另选6只9周龄SPF级雄性ZDF（fa/+）大鼠作为正常对照组。连续干预12周。双周测定大鼠体质量和空腹血糖（FBG），结束后全自动生化分析仪测定血清葡萄糖（GLU），Elisa检测血清空腹胰岛素（FINS）并计算稳态模型胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）和胰岛素敏感指数（ISI）。采用HE染色法观察骨骼肌病理形态变化。结果：网络药理学预测结果中PPI网络互作分析发现肿瘤坏死因子（TNF）、葡萄糖转运蛋白4型（SLC2A4，又称GLUT4）、类视黄醇X受体α（RXRA）是“药物-疾病”交集靶点中的关键靶点，槲皮素、汉黄芩素、豆甾醇、（2R）-7-羟基-5-甲氧基-2-苯基苯并二氢吡喃-4-酮等为药物的关键活性成分。GO富集分析结果中生物过程（BP）包括腺苷酸环化酶激活肾上腺素能受体信号通路、肾上腺素能受体信号通路、化学信号介导的全身动脉血压调节等；细胞组成（CC）包括膜筏、膜微区、膜区等；分子功能（MF）包括G蛋白偶联胺受体活性、核受体活性、配体激活的转录因子活性等。KEGG富集分析涉及的关键通路包括脂肪细胞因子信号通路、唾液分泌、心肌细胞中的肾上腺素能信号、cGMP-PKG信号通路、化学致癌-受体活化等。分子对接结果表明槲皮素、汉黄芩素、豆甾醇、（2R）-7-羟基-5-甲氧基-2-苯基苯并二氢吡喃-4-酮和TNF-α、GLUT4、RXRA靶点均能较好结合，以上靶点均主要富集于RXRA/TNF-α /GLUT4通路。动物实验结果显示，与正常对照组比较，模型对照组大鼠体质量、血清葡萄糖、空腹血糖、血清空腹胰岛素和稳态模型胰岛素抵抗指数显著升高（P<0.05），胰岛素敏感指数显著降低（P<0.05）。骨骼肌细胞成角萎缩，少量坏死，肌细胞排列紊乱疏松，结缔组织大量增生、炎性细胞浸润、空泡样脂滴；骨骼肌组织中GLUT4、RXRA mRNA和GLUT4、RXRA蛋白表达显著降低（P<0.05），TNF-α mRNA和蛋白表达显著升高（P<0.05）。与模型对照组比较，各给药组大鼠体质量、血清葡萄糖、空腹血糖、血清空腹胰岛素和稳态模型胰岛素抵抗指数显著降低（P<0.05），胰岛素敏感指数显著升高（P<0.05）；各给药组大鼠骨骼肌组织病理损伤均有改善；骨骼肌组织GLUT4、RXRA mRNA和蛋白表达显著升高（P<0.05），TNF-α mRNA和蛋白表达显著降低（P<0.05），尤以大黄糖络丸2.16 g/kg组干预效果最为显著。结论：大黄糖络丸能够显著改善2型糖尿病骨骼肌胰岛素抵抗，其发挥作用的具体机制与有效调控RXRA /TNF-α/GLUT4通路关键分子在骨骼肌组织中的异常响应有关。

关键词：大黄糖络丸 2型糖尿病骨骼肌胰岛素抵抗类视黄醇X受体α/肿瘤坏死因子α/葡萄糖转运蛋白4型信号通路网络药理学