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食品中贝类过敏原的质谱定量分析方法研究

核农学报 2025年第2期39卷 329-338页

作者：杨沛洁孟俊宏赵晗林浩鹏关文强王凤玲杨术鹏李熠天津商业大学生物技术与食品科学学院天津市食品生物技术重点实验室天津300134 中国农业科学院农产品加工研究所北京100193

鉴于贝类是重要的过敏食物,为健全食品中贝类过敏原的定量分析方法、精准识别与检测食品中的贝类过敏原,本研究基于靶向蛋白质谱定量分析技术,开发了预制食品中蛤蜊过敏原的定量分析方法:样品经蛋白质的提取和酶解后,通过液相串联高分... 详细信息

鉴于贝类是重要的过敏食物,为健全食品中贝类过敏原的定量分析方法、精准识别与检测食品中的贝类过敏原,本研究基于靶向蛋白质谱定量分析技术,开发了预制食品中蛤蜊过敏原的定量分析方法:样品经蛋白质的提取和酶解后,通过液相串联高分辨质谱和Peaks软件进行数据采集与分析;针对蛤蜊中的原肌球蛋白,经系统考察其酶解后肽段的特异性、质谱信号丰度、热稳定性等,筛选出ITELSEELAVVGNNCK作为最佳定量肽段;针对筛选出的肽段,采用液相串联三重四极杆质谱构建蛤蜊过敏原的定量分析方法,并进行系统的方法验证。结果表明,该方法具有良好的特异性、灵敏度[定量限(LOQ)为10 mg·kg^(-1)]、准确度(回收率为78%~105.3%)和精密度(日内和日间变异系数均开发的方法可为食品中贝类过敏原的风险监测提供技术和方法支撑。

关键词：过敏原贝类蛤蜊定量分析质谱分析

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DNA-蛋白质相互作用研究方法进展

生物工程学报 2025年

作者：王梦贞于畅雷宇金红星申杰孙际宾河北工业大学化工学院中国科学院天津工业生物技术研究所中国科学院大学国家合成生物技术创新中心

DNA与蛋白质的相互作用是细胞生命活动的重要机制，是DNA复制和转录调控的基础，对细胞的生长发育和环境适应至关重要。这种相互作用本质上是通过蛋白质的DNA结合结构域特异性识别和结合DNA序列实现的。深入研究和理解这些相互作用不仅... 详细信息

DNA与蛋白质的相互作用是细胞生命活动的重要机制，是DNA复制和转录调控的基础，对细胞的生长发育和环境适应至关重要。这种相互作用本质上是通过蛋白质的DNA结合结构域特异性识别和结合DNA序列实现的。深入研究和理解这些相互作用不仅有助于揭示生物学机制，也对疾病研究、药物开发、工业菌种设计与改造等具有重要的指导意义。本文综述了传统的DNA-蛋白质相互作用研究方法和近年来发展的新方法，分析其技术原理、优势、局限性和应用案例，也进一步探讨了相关新技术可能的改进方向和潜在应用场景，能够帮助研究人员全面、快速地了解不同DNA-蛋白质相互作用研究方法的特点、挑战和未来的发展方向，并为相关方法的进一步创新、融合提供参考。

关键词： DNA 蛋白质相互作用研究方法新进展

CRISPR/Cas基因编辑和表达调控工具箱在放线菌中的应用

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生物工程学报 2025年

作者：丁金艳亓慧王猛张玥天津科技大学生物工程学院中国科学院天津工业生物技术研究所天津农学院食品科学与生物工程学院

放线菌是一类具有强大次级代谢能力的微生物，对放线菌菌株进行理性改造，对提升其天然产物的生产能力具有重要意义。CRISPR/Cas系统因具有高效性、易操作性和良好的靶向精确性，已成为放线菌基因改造和功能研究的重要工具。本文从工作... 详细信息

放线菌是一类具有强大次级代谢能力的微生物，对放线菌菌株进行理性改造，对提升其天然产物的生产能力具有重要意义。CRISPR/Cas系统因具有高效性、易操作性和良好的靶向精确性，已成为放线菌基因改造和功能研究的重要工具。本文从工作原理、系统构建、适用场景等角度对放线菌中的各类CRISPR/Cas基因编辑及表达调控工具进行了汇总和比较，包括基于DNA双链断裂的CRISPR/Cas系统，CRISPR干扰系统，CRISPR激活系统，以及CRISPR碱基编辑系统。同时，本文还总结了这些工具在放线菌天然产物生物合成方面的应用情况。CRISPR/Cas工具箱在放线菌中的开发和应用，极大地推动了放线菌微生物学和天然产物相关的研究。

关键词： CRISPR/Cas系统放线菌 CRISPR干扰 CRISPR激活碱基编辑

黑色素在长沙臭豆腐加工上色中的应用及机理探究

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食品工业科技 2025年

作者：陈焱婷杜菁赵士敏许岗杨硕林亲录周文化王青云中南林业科技大学食品科学与工程学院湖南福来格生物技术有限公司湖南华硕众邦食品股份有限公司

长沙臭豆腐传统上色工艺存在易氧化褪色和加速不锈钢设备腐蚀等问题。为探讨长沙臭豆腐上色新途径，本文以酶法合成黑色素为上色原料，研究了溶解黑色素所用pH调节剂、不同pH及添加辅助因子对长沙臭豆腐坯料上色效果的影响，同时，对上... 详细信息

长沙臭豆腐传统上色工艺存在易氧化褪色和加速不锈钢设备腐蚀等问题。为探讨长沙臭豆腐上色新途径，本文以酶法合成黑色素为上色原料，研究了溶解黑色素所用pH调节剂、不同pH及添加辅助因子对长沙臭豆腐坯料上色效果的影响，同时，对上色后臭豆腐生坯和油炸后臭豆腐分别进行了颜色稳定性研究和感官评价，并通过分子对接模拟和粒度测定探讨了上色机理。结果表明，溶解黑色素适宜的pH调节剂为碳酸钠，且随着pH升高上色效果显著增强，在pH 10.0时达到墨黑色上色效果；以25 g/L的麦芽糖醇或山梨糖醇作为上色辅助因子时，可在pH8.5时达到墨黑色的上色效果。黑色素上色后的臭豆腐生坯在空气、清水和卤水中均能保持颜色稳定，而传统工艺制作的长沙臭豆腐生坯在空气中8 h后褪色为灰白色；油炸后黑色素上色臭豆腐能保持正常的块型、色泽和风味。黑色素主要通过氢键、cation-π相互作用与豆腐中的7S和11S蛋白形成稳定复合物，辅助因子山梨糖醇、麦芽糖醇和吐温80均能显著减小溶液中黑色素的粒度，且粒度随pH升高呈现降低趋势。相关研究结果为开发可替代以硫酸亚铁为主要着色剂的长沙臭豆腐传统上色工艺提供了新思路和理论依据。

关键词：黑色素上色臭豆腐稳定性上色机理

猪瘟弱毒标记疫苗候选株RecC-M1垂直传播可能性评价

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动物医学进展 2025年第1期46卷 1-8页

作者：许翰坤曹统王作欢张鹏超蓝胜芝吴桃芬杨香林李肖梁方维焕浙江大学动物预防医学研究所浙江杭州310058 浙江诗华诺倍威生物技术有限公司浙江杭州310058 正大集团正大猪业(余姚)有限公司浙江宁波315460

为探究猪瘟病毒(CSFV)弱毒标记疫苗候选株RecC-M1在猪群中的垂直传播能力,采用二次免疫方案,以5.0×10^(3.5)TCID_(50)的RecC-M1经颈部肌肉注射接种12头后备母猪,另从试验猪场随机挑选20头按常规免疫程序以750 RID剂量给后备母猪接种猪... 详细信息

为探究猪瘟病毒(CSFV)弱毒标记疫苗候选株RecC-M1在猪群中的垂直传播能力,采用二次免疫方案,以5.0×10^(3.5)TCID_(50)的RecC-M1经颈部肌肉注射接种12头后备母猪,另从试验猪场随机挑选20头按常规免疫程序以750 RID剂量给后备母猪接种猪瘟弱毒C株疫苗作为对照。接种后观察试验母猪临床症状并记录其产仔情况;首免后3、5、7、14 d采集母猪鼻拭子和肛拭子样品,并于母猪妊娠中期和分娩当日进行尾静脉采血,qPCR检测各组猪的病毒血症及排毒情况,ELISA检测猪血清中分别针对BVDV1和CSFV相应抗原的抗体水平;所有接种RecC-M1的母猪在生产当天留取2头新生仔猪(共24头)并在其吮吸初乳前安乐死后剖检,观察主要脏器大体病变情况,采集扁桃体、淋巴结、脾脏和膀胱组织用于组织病理学观察,血液样品用于猪瘟病毒抗体和核酸检测。结果表明,所有母猪免疫后均未出现临床症状,接种后2周内的拭子样品中未检测到病毒核酸,妊娠中期和分娩时血清中的RecC-M1 E2和BVDV1-E rns特异性抗体均维持在较高水平,RecC-M1接种母猪的胎均仔数、死胎数和弱仔数与对照组无显著差异。对RecC-M1接种母猪所产24头新生仔猪的剖检发现,扁桃体、淋巴结、脾脏、肾脏和膀胱均未见出血、肿大等病变;组织学结果显示,扁桃体、淋巴结、脾脏和肾脏的组织结构正常,均未见有出血性变化;仔猪血样和组织样品均无病毒核酸检出,亦未见抗体阳性。结果表明,CSFV弱毒标记疫苗候选株RecC-M1对母猪及仔猪都是安全的,不发生病毒的垂直传播,为该疫苗后选株的产业化开发奠定了基础。

关键词：猪瘟弱毒标记疫苗垂直传播

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滇黄精多糖对肥胖小鼠脂代谢紊乱及脑功能损伤的改善作用

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食品科学 2025年第1期46卷 64-73页

作者：许云聪闫巧娟朱春华杨绍青李后江江正强中国农业大学食品科学与营养工程学院食品生物工程重点实验室(中国轻工业联合会)北京100083 中国农业大学工学院北京100083 怒江昂可达生物科技开发有限公司云南怒江673100 北京捷安特技术服务有限公司北京101403

为研究滇黄精多糖(Polygonatum kingianum polysaccharides,PKP)对肥胖小鼠脂代谢紊乱及脑功能损伤的作用效果,采用酶法辅助提取的PKP干预肥胖小鼠12周,观察小鼠体质量和血脂变化以及肝脏和脂肪组织的病理形态变化,并通过行为学检测小... 详细信息

为研究滇黄精多糖(Polygonatum kingianum polysaccharides,PKP)对肥胖小鼠脂代谢紊乱及脑功能损伤的作用效果,采用酶法辅助提取的PKP干预肥胖小鼠12周,观察小鼠体质量和血脂变化以及肝脏和脂肪组织的病理形态变化,并通过行为学检测小鼠自主活动性和焦虑样行为变化,进一步检测肝脏、脂肪、血清和脑组织炎症水平及脑组织病理形态变化。结果表明:PKP(1500 mg/kg)减少高脂饮食诱导肥胖小鼠的体质量增量29.6%,有效改善血脂水平异常及肝脏和脂肪的组织形态,并促进肝脏过氧化物酶体增殖物激活受体α(46.0%)和脂肪解偶联蛋白1表达(59.0%),同时明显增加肥胖小鼠的自主活动性并改善焦虑行为;肝脏和脂肪F4/80表达水平分别减少55.0%和67.2%,血清中促炎因子白细胞介素1β、白细胞介素6和肿瘤坏死因子α水平分别减少22.9%、44.6%和7.8%,而抗炎因子白细胞介素10水平增加27.1%;大脑海马和皮层区离子钙结合衔接分子1表达水平分别减少16.0%和28.6%,改善了海马和皮层区域结构损伤。PKP有效改善了肥胖小鼠脂代谢紊乱及脑功能损伤,为其作为抗肥胖及改善肥胖诱导脑损伤的功能性食品配料提供了科学依据。

关键词：滇黄精多糖肥胖焦虑行为脑损伤

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基于山西老陈醋传统工艺固态发酵体系时空异质性分析解析主要风味物质形成规律

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食品科学 2025年第2期46卷 164-170页

作者：申瑾周景丽郎繁繁闫裕峰王利夏瑶瑶李杰张峰王晨苑郑宇食醋发酵科学与工程山西省重点实验室山西太原030400 山西紫林醋业股份有限公司山西太原030040 天津市微生物代谢与发酵过程控制技术工程中心天津300457 天津科技大学生物工程学院天津300457

以山西老陈醋固态发酵过程为研究对象,采用宏基因组学和顶空固相微萃取-气相色谱-质谱联用技术,分别对不同空间发酵过程的醋醅理化特征、风味物质和微生物群落组成进行分析。结果表明:不同空间位置醋醅的水分、温度均具有显著性差异,发... 详细信息

以山西老陈醋固态发酵过程为研究对象,采用宏基因组学和顶空固相微萃取-气相色谱-质谱联用技术,分别对不同空间发酵过程的醋醅理化特征、风味物质和微生物群落组成进行分析。结果表明:不同空间位置醋醅的水分、温度均具有显著性差异,发酵过程共检测到93种挥发性风味物质,总挥发性物质含量依次为上层>中层>下层。上、中、下层总酸均与Proteus、Salinicoccus、Staphylococcus、Klebsiella显著负相关(P生物生长代谢,下层水分显著影响Proteus、Salinicoccus、Saccharomyces、Staphylococcus、Klebsiella生长代谢(P生物生长代谢促进了亚油酸乙酯、油酸乙酯等酯类化合物的生成,中、下层的发酵条件则抑制了部分酯类物质的生成。本研究从时空异质的角度解析了山西老陈醋发酵特性,阐明了风味物质形成规律,有助于全面阐明山西老陈醋酿造机理。

关键词：醋醅宏基因组学微生物理化因子挥发性风味相关性分析

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一种鳄嘴花源多肽的改造及体外抗炎活性研究

天然产物研究与开发 2025年

作者：朱方莉何炳蔚曲丽萍上海贝泰妮生物科技有限公司云南贝泰妮生物科技集团股份有限公司云南云科特色植物提取实验室有限公司

探究鳄嘴花(Clinacanthus nutans （Burm. f.） Lindau)中的抗炎活性多肽以及其可能的分子机制。通过碱溶酸沉与超滤技术提取蛋白，筛选出具有抗炎活性的两个组分后，利用液相色谱-质谱联用技术，共鉴定出116条多肽序列。进一步通过活... 详细信息

探究鳄嘴花(Clinacanthus nutans （Burm. f.） Lindau)中的抗炎活性多肽以及其可能的分子机制。通过碱溶酸沉与超滤技术提取蛋白，筛选出具有抗炎活性的两个组分后，利用液相色谱-质谱联用技术，共鉴定出116条多肽序列。进一步通过活性评分网站和多肽毒性预测筛选出无毒且评分大于0.8的25条多肽。将其与丝裂原活化蛋白激酶（mitogen-activated protein kinase，MAPK）靶点进行分子对接，筛选出3条优于MAPK抑制剂西替利嗪的多肽序列。采用固相合成法合成这3条多肽后，测试其对脂多糖诱导的RAW 264.7细胞炎症的抑制作用，最终发现了具有优异抗炎潜力的多肽序列WDDC。为了避免与人源蛋白重复并提高稳定性，引入了甘氨酸和乙酰基，改造后的多肽命名为Ac-WDDCG。结果显示，Ac-WDDCG能够显著抑制人脐静脉内皮细胞（human umbilical vein endothelial cells，HUVEC）中Nod样受体蛋白3（Nod-like receptor family，NLRP3）信号通路相关基因[Toll样受体4（toll-like receptor 4，TLR4）、NLRP3和核因子-κB（nuclear factor-kappa B，NF-κB）]的mRNA表达（P ＜0.05），显著降低RAW 264.7细胞炎症模型中下游炎症因子[肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-alpha，TNF-α）、白细胞介素-6（interleukin-6，IL-6）和NO]的分泌水平（P ＜0.01），并减少了CuSO4诱导的斑马鱼中性粒细胞迁移（P ＜0.05）。提示Ac-WDDCG具有较好的抗炎活性，其机制可能与抑制NLRP3信号通路有关。

关键词：鳄嘴花多肽丝裂原活化蛋白激酶 Nod样受体蛋白3信号通路炎症因子

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联合波束分解和球面角度分解的绕射波成像

石油地球物理勘探 2025年

作者：李才吕丁友张德龙肖广锐王玉秀于卓中海石油(中国)有限公司天津分公司中国石油大学(北京) 斯伦贝谢科技服务(北京)有限公司

断层、盐丘、溶洞、裂缝等非均质体作为现阶段构造、岩性勘探的重要目标，在地震波场中多表现为极其复杂的绕射波响应特征，高分辨率的绕射波成像对油气勘探开发具有重要意义。文中构建了一种基于波束分解和球面角度分解的绕射波成像分... 详细信息

断层、盐丘、溶洞、裂缝等非均质体作为现阶段构造、岩性勘探的重要目标，在地震波场中多表现为极其复杂的绕射波响应特征，高分辨率的绕射波成像对油气勘探开发具有重要意义。文中构建了一种基于波束分解和球面角度分解的绕射波成像分离与强化流程，可以在成像后进行，可适用于不同的偏移算法，且避免了偏移前分离绕射波由于数据量大带来的庞大计算量。首先，对偏移数据进行从大到小不同尺度子束的串联计算，再经过多轮次迭代得到初步分离的绕射波场；然后，基于球面角度分解，形成指定地层倾角范围的道集，即DIP (Dip Image Partitions)道集；最后计算DIP的振幅包络属性和相似度并应用于初步分离的绕射波场，进而得到高分辨率的绕射波成像体。该流程首次应用于渤海湾中生界潜山内幕成像，提高了潜山内幕小尺度地质不连续体的识别精度。

关键词：绕射波分离波束分解球面角度分解倾角分解道集相似度计算绕射波成像强化