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脊椎蛋白2对BMSCs成骨分化及卵巢去势小鼠骨代谢的作用研究

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中国修复重建外科杂志 2024年

作者：柳鑫石博文蔡成阔王昊天贾鹏天津市天津医院骨科

目的探讨脊椎蛋白2(R-spondin 2,Rspo2)对BMSCs成骨分化及卵巢去势小鼠骨密度及骨矿含量的影响。方法取7只4周龄雌性C57BL/6小鼠长骨骨髓，采用全骨髓培养法分离培养BMSCs并传代，经流式细胞仪鉴定细胞表型后，取第3代细胞与10、20、4... 详细信息

目的探讨脊椎蛋白2(R-spondin 2,Rspo2)对BMSCs成骨分化及卵巢去势小鼠骨密度及骨矿含量的影响。方法取7只4周龄雌性C57BL/6小鼠长骨骨髓，采用全骨髓培养法分离培养BMSCs并传代，经流式细胞仪鉴定细胞表型后，取第3代细胞与10、20、40、80和100 nmol/L Rspo2共培养，采用细胞计数试剂盒8(cell counting kit 8,CCK-8)检测细胞增殖，评价Rspo2对BMSCs活性影响并筛选Rspo2干预浓度；与不同筛选浓度Rspo2培养后更换为成骨诱导培养基诱导培养后，行ALP及实时荧光定量PCR(real time fluorescence quantitative PCR,RT-qPCR)检测RUNX家族转录因子2(RUNX family transcription factor 2,Runx2)、Ⅰ型胶原（collagen typeⅠalpha 1, Col1）、骨钙素（osteocalcin,OCN），评价Rspo2对BMSCs成骨能力的影响；以上检测均以正常培养BMSCs作为对照。另取18只10周龄雌性C57BL/6小鼠，随机分为假手术组、卵巢去势（ovariectomy,OVX）组和OVX+Rspo2组，每组6只。假手术组仅行双侧背部切开缝合，其余两组通过双侧OVX建立骨质疏松模型。术后OVX+Rspo2组每周腹腔注射Rspo2(1 mg/kg)，其余两组接受相同剂量生理盐水。干预12周后，3组称重小鼠体质量及子宫质量，评估OVX模型制备是否成功；取胫骨行HE染色观察胫骨骨量变化、免疫组织化学染色观察骨组织中Runx2蛋白表达水平；ELISA法检测血清中ALP、OCN、骨生成Ⅰ型前胶原氨基端肽（type I procollagen amino-terminal peptide,PINP）和骨吸收β胶原降解产物（β-isomerized Ctelopeptide,β-CTX）表达水平；Micro-CT检测胫骨骨矿含量和骨微结构变化，并对骨小梁厚度（trabeculae thickness,***）、骨小梁数量（trabeculae number,Tb.N）、骨小梁分离度（trabeculae separation,***）和骨体积分数（bone volume fraction,BV/TV）进行三维组织形态计量分析。结果 CCK-8检测示80 nmol/L以下浓度的Rspo2不会产生细胞毒性（P>0.05），且20 nmol/L Rspo2组细胞活力明显高于对照组。基于上述结果，选择10、20和40 nmol/L Rspo2进行后续实验。ALP染色示，各浓度Rspo2组阳性细胞面积明显大于对照组，其中20 nm/L Rspo2组最高，组间差异均有统计学意义（P<0.05）;RT-qPCR检测成骨相关基因Runx2、Col1和OCN mRNA表达水平提高，除40 nmol/L Rspo2组Runx2外，各组相关指标与对照组比较差异均有统计学意义（P<0.05）。动物实验中各组小鼠术后均存活至实验完成，且干预12周后小鼠体质量及子宫质量结果示OVX模型制备成功。组织学及免疫组织化学染色示，OVX组小鼠骨小梁疏松程度、连接性以及Runx2表达均低于假手术组，而OVX+Rspo2组经Rspo2处理后均较OVX组逆转，差异有统计学意义（P<0.05）。ELISA检测示OVX组小鼠血清中骨代谢标记物与对照组相比，ALP表达升高、PINP表达下降（P<0.05）;Rspo2干预后，PINP表达逆转显著增高，与对照组及OVX组差异均有统计学意义（P<0.05）。OVX组骨吸收标记物β-CTX高于假手术组（P<0.05）,OVX+Rspo2组较OVX组明显下降（P<0.05）。Micro-CT检测示，与假手术组相比，OXV组***、Tb.N和BV/TV降低，而***增高；经Rspo2干预后，除***外OVX+Rspo2组上述指标均得到改善（P<0.05）。结论 Rspo2能够促进BMSCs向成骨细胞分化，改善小鼠由于雌激素缺乏导致的骨质疏松，促进骨形成。

关键词： Rspo2 BMSCs 骨质疏松骨形成小鼠

股骨转子下骨折髓内钉固定术后骨不连的危险因素及治疗方法研究进展

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中华创伤杂志 2024年第7期40卷 654-659页

作者：李鹏飞贾健马信龙天津市天津医院创伤骨科天津300211

股骨转子下骨折因其解剖及生物力学的特殊性,骨折复位及固定困难。髓内钉固定是其治疗的“金标准”,但术后骨不连是其常见并发症,会造成肢体疼痛和活动能力下降,需二次手术治疗,对患者的生活质量产生极大影响。目前,髓内钉固定术后骨不... 详细信息

股骨转子下骨折因其解剖及生物力学的特殊性,骨折复位及固定困难。髓内钉固定是其治疗的“金标准”,但术后骨不连是其常见并发症,会造成肢体疼痛和活动能力下降,需二次手术治疗,对患者的生活质量产生极大影响。目前,髓内钉固定术后骨不连危险因素的研究较多,但相关性较强的危险因素仍不明确,后续治疗方案多样且未统一,进一步明确危险因素亦有助于治疗方案的选择。为此,笔者就股骨转子下骨折髓内钉固定术后骨不连危险因素及治疗方法的研究进展进行综述,为临床治疗提供参考。

关键词：股骨骨折骨折固定术,髓内骨折,不愈合危险因素

X线诊断股骨颈骨折闭合复位后轴向旋转移位的实验研究

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中华骨科杂志 2024年第2期44卷 105-113页

作者：马信龙马剑雄卢斌李飞柏豪豪王颖田爱现孙磊王岩董本超靳洪震李岩陈佳晖天津市天津医院骨科研究所天津300211

目的通过制作股骨颈骨折复位后轴向旋转移位模型并依据X线投照探讨评估股骨颈骨折旋转移位的最佳指标。方法取6具干燥成人完整股骨标本,男2具、女4具。设计并制作股骨近端正侧位和斜位X线投照卡具和支架。对股骨标本进行股骨颈骨折造模... 详细信息

目的通过制作股骨颈骨折复位后轴向旋转移位模型并依据X线投照探讨评估股骨颈骨折旋转移位的最佳指标。方法取6具干燥成人完整股骨标本,男2具、女4具。设计并制作股骨近端正侧位和斜位X线投照卡具和支架。对股骨标本进行股骨颈骨折造模,根据Pauwells分型制作成Pauwells 30°、50°和70°模型(各2具),手法复位并残留旋前20°、40°和60°轴向旋转移位。对每种骨折模型进行不同角度(足侧40°、足侧20°、垂直0°、头侧20°、头侧40°)的投照,测量模型的骨小梁夹角和Garden对线指数,观察内斜位和外斜位X线片骨折线的影像特点。结果股骨颈骨折复位后存在旋前20°和40°轴向旋转移位时,在不同投照体位下旋转移位组的骨小梁夹角与解剖复位组相比差异较小。残留旋转移位为60°时,在Pauwells 30°和50°骨折模型中大部分投照角度下骨小梁模糊不清,未能测量出骨小梁夹角;Pauwells 70°骨折模型中旋转移位组的骨小梁夹角与解剖复位组相比差异较大。正位X线片中,当Pauwells 70°组旋前移位为60°时,Garden对线指数显示复位不满意(150°,142°);而Pauwells 30°组和Pauwells 50°组的所有旋转移位模型正位X线片的Garden对线指数>155°,达到可接受的复位。侧位X线片中,所有旋转移位模型的Garden对线指数>180°,均未达到可接受的复位,且在相同旋转移位下Pauwells角越大Garden对线指数越大。内斜位投照时,当投照角度偏向足侧时,股骨头与股骨干部分影像重叠,无法判断复位质量,而偏头侧投照时股骨颈显影逐渐变长,在偏头侧40°投照时股骨颈最长,可清晰观察到骨折线以及股骨近端解剖结构。外斜位投照时骨小梁走行显示不清。结论应用骨小梁夹角评估股骨颈骨折复位后股骨头的轴向旋转移位存在局限性。Pauwells 70°股骨颈骨折残留旋前移位为60°时,正位X线片Garden对线指数才能发现股骨头的轴向旋转移位。侧位X线片的Garden对线指数对判断股骨头轴向旋转移位的可靠性更好。

关键词：股骨颈骨折骨科闭合复位旋转 X线透视检查

骨盆髋臼骨折微创螺钉内固定的解剖研究及临床应用

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中华骨科杂志 2024年第5期44卷 336-344页

作者：贾健天津市天津医院创伤骨科骨盆病区天津300211

闭合复位经皮螺钉固定微创治疗具有明显的生物学和生物力学优势,可独立用于骨盆髋臼骨折的手术治疗,也可作为开放复位内固定的补充手段。骨盆髋臼骨性螺钉通道(osseous fixation pathway,OFP)是实现骨盆髋臼骨折微创治疗的解剖基础。骨... 详细信息

闭合复位经皮螺钉固定微创治疗具有明显的生物学和生物力学优势,可独立用于骨盆髋臼骨折的手术治疗,也可作为开放复位内固定的补充手段。骨盆髋臼骨性螺钉通道(osseous fixation pathway,OFP)是实现骨盆髋臼骨折微创治疗的解剖基础。骨盆髋臼OFP由前方、中部及后方通道三部分组成。骨盆前方OFP包括耻骨上支通道(也称髋臼前柱通道)和耻骨下支通道。耻骨上支通道主要用于治疗髋臼横形、"T"型、前柱骨折及多数耻骨上支骨折,耻骨下支通道主要用于治疗耻骨下支骨折。骨盆中部OFP包括髂前下棘至髂骨后方的LC-Ⅱ通道、臀中肌柱通道及髂嵴通道。LC-Ⅱ通道用于治疗骨盆新月样骨折、髂骨翼骨折及某些髋臼高位前柱骨折;臀中肌柱通道主要用于治疗某些髂骨骨折或髋臼骨折;髂嵴通道常用于治疗单纯髂骨翼骨折或累及髂嵴的髋臼骨折。骨盆后方OFP包括髋臼后柱通道、骶髂通道和骶骨通道。髋臼后柱通道用于治疗累及后柱的髋臼骨折。骶髂通道主要适用于:骨盆旋转或垂直不稳定型损伤;骶髂关节脱位或骨折脱位;污染相对轻微的骨盆后环开放性损伤;老年骶骨(不全)骨折;耻骨联合钢板内固定术后,骶骨骨折端残存间隙;某些创伤性脊柱骨盆分离;与髂腰内固定协同,治疗骨盆骨折伴腰骶结合部损伤等。骶骨通道主要适用于:双侧骶髂关节脱位及某些骨盆新月样骨折;双侧骶骨骨折;累及DenisⅢ区的骶骨骨折;骨质疏松性骶骨不全骨折等。目前骨盆髋臼骨折的微创治疗依然面临极大挑战,充分认识螺钉通道形态、深刻理解术中影像表现、努力提高骨折复位质量、不断积累手术操作经验,是实现骨盆髋臼骨折微创、精准治疗的有效途径。

关键词：骨盆髋臼骨折最小侵入性外科手术教育,医学,继续骨性螺钉通道

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健康人椎旁肌退变的影像学参数及其影响因素

中国修复重建外科杂志 2024年第7期38卷 880-888页

作者：王伟李危石天津市天津医院骨科天津300211 北京大学第三医院骨科北京100191

目的测量健康人椎旁肌影像学参数,阐明椎旁肌特点及变化规律,探究椎旁肌退变的影响因素。方法2020年2月—11月前瞻性招募82名健康志愿者,男36名,女46名;年龄21~75岁,平均48.0岁。身高150~183 cm,平均165.6 cm;体质量43~100 kg,平均65.4 ... 详细信息

目的测量健康人椎旁肌影像学参数,阐明椎旁肌特点及变化规律,探究椎旁肌退变的影响因素。方法2020年2月—11月前瞻性招募82名健康志愿者,男36名,女46名;年龄21~75岁,平均48.0岁。身高150~183 cm,平均165.6 cm;体质量43~100 kg,平均65.4 kg;身体质量指数(body mass index,BMI)16.7~32.4 kg/m^(2),平均23.7 kg/m^(2)。采用MRI测量L_(3)、L_(4)、L_(5)3个层面椎旁肌(多裂肌、竖脊肌和腰大肌)影像学参数,包括相对总横截面积(relative total cross-sectional area,rtCSA)、相对脂肪横截面积(relative fatty cross-sectional area,rfCSA)、相对信号强度(relative signal intensity,rSI)及脂肪浸润比(fatty infiltration,FI)。比较不同性别以及不同测量层面椎旁肌参数差异;通过Pearson或Spearman相关分析探究椎旁肌参数与年龄、身高、体质量、BMI之间的关系。结果从L_(3)至L_(5)层面,多裂肌、腰大肌rtCSA、rfCSA及竖脊肌rfCSA逐渐增加,竖脊肌rtCSA逐渐减小;各椎旁肌的FI、rSI均逐渐增加。L_(4)、L_(5)层面各椎旁肌各参数与L_(3)层面比较差异均有统计学意义(P<0.05);而L_(4)层面与L_(5)层面比较,多裂肌rtCSA、rfCSA,竖脊肌rtCSA、FI、rSI,以及腰大肌rtCSA、rfCSA、FI差异有统计学意义(P<0.05)。女性各腰椎层面多裂肌rfCSA和FI、竖脊肌FI、腰大肌FI高于男性,腰大肌rtCSA低于男性(P<0.05)。年龄与各椎旁肌rtCSA成负相关(P<0.05),与各椎旁肌FI及多裂肌和竖脊肌rfCSA、rSI成正相关(P<0.05)。身高与各椎旁肌rfCSA、FI成负相关(P<0.05)。结论沿脊柱轴线从头端至尾端,椎旁肌退变程度逐渐增加;椎旁肌退变和年龄、身高、性别相关,体质量、BMI和椎旁肌退变关系需要进一步研究。

关键词：多裂肌竖脊肌腰大肌椎旁肌退变健康人

髋臼上方水平钢板结合排筏螺钉内固定治疗合并臼顶压缩老年髋臼骨折的疗效

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中华创伤杂志 2024年第3期40卷 221-228页

作者：刘兆杰贾健戚浩天孙玉玺李刚田维王宏川白树财李鹏飞天津市天津医院创伤骨科天津300211

目的比较髋臼上方水平钢板结合排筏螺钉与单纯螺钉内固定治疗合并臼顶压缩老年髋臼骨折的疗效。方法采用回顾性队列研究分析2013年5月至2023年1月天津市天津医院收治的20例合并臼顶压缩老年髋臼骨折患者的临床资料,其中男5例,女15例;年... 详细信息

目的比较髋臼上方水平钢板结合排筏螺钉与单纯螺钉内固定治疗合并臼顶压缩老年髋臼骨折的疗效。方法采用回顾性队列研究分析2013年5月至2023年1月天津市天津医院收治的20例合并臼顶压缩老年髋臼骨折患者的临床资料,其中男5例,女15例;年龄61~84岁[(72.2±7.3)岁]。根据Letournel&Judet分型:前柱骨折13例,前柱伴后方横行骨折5例,双柱骨折2例。患者均行前方入路切开复位内固定治疗,其中11例采用髋臼上方水平钢板结合排筏螺钉固定(钢板+排筏螺钉组),9例采用单纯螺钉固定(单纯螺钉组)。比较两组手术时间、术中出血量、术中透视次数;术后3 d采用Matta影像学标准评估骨折复位质量;术后3个月及末次随访时采用Merle D′Aubigné‑Postel评分系统评价患侧髋关节功能并比较末次随访时优良率;观察术后并发症发生情况。结果患者均获随访6~18个月[(13.1±3.1)个月]。两组手术时间、术中出血量及术中透视次数比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。术后3 d Matta影像学标准:钢板+排筏螺钉组解剖复位6例,满意复位5例,单纯螺钉组分别为5例和4例(P>0.05)。术后3个月及末次随访时,钢板+排筏螺钉组Merle D′Aubigné‑Postel评分分别为(14.0±2.4)分、(15.8±2.2)分,均高于单纯螺钉组的(11.0±2.6)分、(13.0±3.1)分(P<0.01),且两组末次随访时均较术后3个月进一步提高(P<0.01)。末次随访时,钢板+排筏螺钉组Merle D′Aubigné‑Postel评分优3例,良6例,可1例,差1例,优良率为81.8%;单纯螺钉组良3例,可2例,差4例,优良率为33.3%(P<0.05)。钢板+排筏螺钉组1例、单纯螺钉组5例术后出现臼顶压缩骨折再移位且并发创伤性髋关节炎(P<0.05)。结论对于合并臼顶压缩的老年髋臼骨折,髋臼上方水平钢板结合排筏样螺钉较单纯螺钉内固定治疗可有效促进髋关节功能恢复、减少术后臼顶压缩骨折再移位及创伤性关节炎的发生。

关键词：髋臼骨折,压缩性老年人骨折固定术,内

泰勒外固定器与髓内钉治疗胫骨中下段骨折的临床效果比较

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中华骨与关节外科杂志 2024年第9期17卷 806-814页

作者：张洪亮万春友刘金伟张宁宁刘钊天津市天津医院创伤骨科天津300211

目的:比较泰勒外固定器与髓内钉治疗胫骨中下段骨折的临床效果。方法:回顾性分析天津市天津医院2016年8月至2019年12月收治的79例胫骨中下段骨折患者的临床资料,其中采用泰勒外固定器行外固定治疗的患者作为外固定组(41例),采用髓内钉... 详细信息

目的:比较泰勒外固定器与髓内钉治疗胫骨中下段骨折的临床效果。方法:回顾性分析天津市天津医院2016年8月至2019年12月收治的79例胫骨中下段骨折患者的临床资料,其中采用泰勒外固定器行外固定治疗的患者作为外固定组(41例),采用髓内钉行内固定治疗的患者作为髓内钉组(38例)。比较两组患者的手术指标和骨折愈合时间。术后6周、3个月、6个月、1年随访时,观察骨折愈合情况、膝关节(屈曲)活动度及踝关节(背伸+跖屈)活动度、膝关节及踝关节疼痛情况、患肢功能恢复情况,以及术后1年时两组患者并发症发生情况。结果:外固定组患者手术时间和骨折愈合时间短于髓内钉组,术中出血量少于髓内钉组,差异均有统计学意义(P均0.05)。术后6周,外固定组患者膝关节活动度大于髓内钉组,差异有统计学意义(P0.05)。术后6周、3个月、6个月,外固定组患者踝关节活动度均小于髓内钉组,差异均有统计学意义(P均0.05)。术后6周、3个月、6个月、1年,外固定组患者膝关节VAS评分中位数均低于髓内钉组,差异均有统计学意义(P均0.05)。术后3个月、6个月,外固定组患者AOFAS评分低于髓内钉组,差异均有统计学意义(P均0.05)。术后1年,两组患者AOFAS评分优良率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。术后6个月,外固定组患者满意度低于髓内钉组,差异有统计学意义(P0.05)。两组患者并发症总发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:应用泰勒外固定器和髓内钉治疗胫骨中下段骨折,均能取得较为理想的临床效果。相比之下,采用泰勒外固定器治疗的手术时间短、术中出血量少、骨折愈合快、术后膝关节疼痛轻,治疗胫骨中下段骨折效果更佳。

关键词：胫骨骨折外固定器髓内钉固定骨折固定

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形状记忆材料在骨科的应用研究进展

中华骨科杂志 2024年第15期44卷 1048-1055页

作者：王颖马剑雄柏豪豪马信龙天津市天津医院(天津大学天津医院)骨科研究所天津市骨科生物力学与医学工程重点实验室天津300050

形状记忆材料是一种具有形状记忆效应的智能材料,能够在外界刺激下记忆并恢复其原始形状,制备方法包括合金记忆材料的热处理法和激光烧结法,以及聚合物类和复合材料类形状记忆材料的热塑法。形状记忆材料在骨科领域,如骨折治疗、骨组织... 详细信息

形状记忆材料是一种具有形状记忆效应的智能材料,能够在外界刺激下记忆并恢复其原始形状,制备方法包括合金记忆材料的热处理法和激光烧结法,以及聚合物类和复合材料类形状记忆材料的热塑法。形状记忆材料在骨科领域,如骨折治疗、骨组织工程修复、脊柱矫形及关节置换等方面展现出了巨大的应用价值。形状记忆材料具有优良的生物力学性能,在骨折治疗中提供持续有效的压力、支撑力以及抗扭转力,还具有降低骨折内固定应力遮挡的优势。因环境因素变化对周围骨组织产生的持续应力作用为脊柱畸形矫正提供了持续的矫形力,在关节置换方面提高了假体的耐久性。形状记忆材料具有良好的生物相容性和可诱导细胞增殖的性能,可制作具有自拟合功能的组织工程支架,在精准填充骨缺损部位时向自体骨施加机械力,刺激骨细胞的增殖与分化,引导骨再生,加速骨修复。此外,形状记忆材料可被用于药物传递释放的载体,通过控制温度、应力等环境因素控制药物的释放,实现药物的靶向治疗。形状记忆材料伴随着4D打印技术的发展,在骨科个性化诊疗、个性化定制方面有广阔的应用前景。

关键词：材料科学矫形外科学综述

米非司酮通过调节miR-492/KLF5/Nrf1轴对子宫内膜癌细胞增殖及侵袭的影响

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中国老年学杂志 2024年第17期 4262-4266页

作者：宫晓锦胡同秀杨玉婕于飞天津市天津医院天津市静海区医院沧州市人民医院

目的探究米非司酮(RU486L)通过调节miR-492/Krüppel样因子(KLF)5/核呼吸因子(Nrf)1轴对子宫内膜癌细胞增殖及侵袭的影响。方法按照数字随机法将细胞分为HEC-1A组(DMEM培养基+浓度为0μm/ml的RU486培养)、RU486 L组(DMEM培养基+浓度... 详细信息

目的探究米非司酮(RU486L)通过调节miR-492/Krüppel样因子(KLF)5/核呼吸因子(Nrf)1轴对子宫内膜癌细胞增殖及侵袭的影响。方法按照数字随机法将细胞分为HEC-1A组(DMEM培养基+浓度为0μm/ml的RU486培养)、RU486 L组(DMEM培养基+浓度为10μm/ml的RU486培养)、RU486 M组(DMEM培养基+浓度为20μm/ml的RU486培养)、RU486 H组(DMEM培养基+浓度为40μm/ml的RU486培养)。取对数生长的HEC-1A细胞培养后分别将si-miR-492、si-NC、miR-492 mimics转染至HEC-1A细胞，将细胞分为si-miR-492组、si-NC组和miR-492 mimics组。检测细胞中miR-492表达[反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)法];检测细胞增殖能力(MTT法);检测细胞侵袭能力(Transwell法);检测细胞中KLF5和Nrf1蛋白表达(Western印迹法);双荧光素酶报告基因验证miR-492和KLF5、Nrf1的靶向关系。结果与hEEC细胞相比，HEC-1A细胞miR-492表达明显升高(P0.05);细胞转染Nrf1-WT发现，miR-492组比miR-NC组显著高(P0.05)。与RU486 H组比较，miR-492组细胞增殖、侵袭、KLF5、Nrf1显著升高(P<0.05)。结论 miR-492/KLF5/Nrf1轴可通过抑制miR-492/KLF5/Nrf1轴抑制子宫内膜癌细胞的增殖和侵袭。

关键词：米非司酮(RU486L) miR-492/Krüppel样因子(KLF)5/核呼吸因子(Nrf)1轴子宫内膜癌增殖侵袭