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1-溴丙烷吸入暴露引起雄性F344大鼠海马区蛋白质组的磷酸化改变

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1-溴丙烷吸入暴露引起雄性F344大鼠海马区蛋白质组的磷酸化改变

中国毒理学会第四届中青年学者科技论坛

作者：黄振烈曾丽海殷霄市原学市原佐保子常杰张灵逸黄汉林广东省职业病防治院广东省职业病防治重点实验室日本名古屋大学医学部环境劳动卫生学教研室日本三重大学地区创新研究院

目的 1-溴丙烷(1-BP)作为臭氧层破坏溶剂的替代溶剂在国内外被大量生产和使用,职业接触人数众多,神经中毒病例层出不穷,中毒机制尚未阐明。在前期研究的基础上,本实验分析了1-BP吸入暴露引起雄性F344大鼠海马区蛋白质组的磷酸化改变,探...

目的 1-溴丙烷(1-BP)作为臭氧层破坏溶剂的替代溶剂在国内外被大量生产和使用,职业接触人数众多,神经中毒病例层出不穷,中毒机制尚未阐明。在前期研究的基础上,本实验分析了1-BP吸入暴露引起雄性F344大鼠海马区蛋白质组的磷酸化改变,探讨1-BP神经毒性分子机制和发展生物标志物,了解关键蛋白质的磷酸化改变在1-BP神经毒性中的作用。方法 72只无特定病原体雄性F344大鼠随机分为2批(每批36只),每批动物随机分为阴性对照组、400 ppm和1000 ppm暴露组,每组12只。暴露组每天动式吸入染毒8小时,阴性对照组给予正常空气,第一批大鼠连续染毒7天;第二批连续染毒28天。每批大鼠染毒结束后每组部分动物(n=9)麻醉解剖海马区,提取海马蛋白质,Pro-Q Diamond和SYPRO Ruby染色法定性磷酸化蛋白质,双向荧光差异凝胶电泳法(2D-DIGE)定量磷酸化蛋白质,基质辅助激光解吸电离飞行时间串联质谱(MALDI-TOF-TOF/MS)鉴定差异表达(P物(n=3)解剖海马区后甲醛固定用于免疫组化分析。Mn-Phos-tag SDS-PAGE法确认关键磷酸化蛋白质的表达。蛋白质印迹(western blotting)检测Bax和cytochrome c凋亡信号相关蛋白的表达水平。TUNEL法检测1-BP暴露引起大鼠海马区凋亡信号的改变。体外细胞培养法检测1-BP对人类星形胶质细胞(HA)凋亡信号的影响。结果 Pro-Q Diamond染色法结合2D-DICE辨认出26个统计学显著性差异表达(P生物过程包括刺激反应、代谢、凋亡信号等。其中9个磷酸化蛋白质的表达与1-BP暴露呈现剂量-反应关系和剂量-时间依赖关系,包括GRP78,14-3-3θ,PSMC3,ST13,PURA,GNB2,APOE,PEA15和ATP5H。Mn-Phos-tag SDS-PAGE确认了磷酸化14-3-3θ蛋白的差异表达。Western blotting发现1-BP暴露引起Bax蛋白在线粒体内高表达,但是在细胞浆中低表达;相反,1-BP暴露引起cytochrome c蛋白在细胞浆中高表达而在线粒体中低表达。进一步的TUNEL法发现1-BP暴露在1000 ppm引起海马区TUNEL阳性细胞增加;1-BP还可以引起HA细胞凋亡率的显著性提高(P标志物。

关键词：

纤维接枝制备蛋白质印迹聚丙烯酰胺水凝胶的吸附性能

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纤维接枝制备蛋白质印迹聚丙烯酰胺水凝胶的吸附性能

中国化学会第15届反应性高分子学术讨论会

作者：赵孔银魏俊富张环赵义平陈莉中空纤维膜材料与膜过程国家重点实验室培育基地天津工业大学材料科学与工程学院天津工业大学环境与化工学院

＜正＞蛋白质印迹聚合物由于在医学诊断、生物分离及药物传递等领域的潜在应用前景而成为当前研究的热点。近年来人们越来越多地用聚合物水凝胶来进行蛋白质印迹的研究。以丙烯酰胺为功能单体可以制备选择性较好的蛋白质印迹聚合物。郭... 详细信息

＜正＞蛋白质印迹聚合物由于在医学诊断、生物分离及药物传递等领域的潜在应用前景而成为当前研究的热点。近年来人们越来越多地用聚合物水凝胶来进行蛋白质印迹的研究。以丙烯酰胺为功能单体可以制备选择性较好的蛋白质印迹聚合物。郭天瑛等以大孔交联壳聚糖为载体,使丙烯酰胺和牛血红蛋白扩散到载体的孔穴中,制备的印迹壳聚糖微球比非印迹壳聚糖微球和聚丙烯酰胺凝胶微球对牛血红蛋白具有更高的结合量。陈朗星等以丙烯酰胺为功能单体,将聚苯乙烯载体表面用"引发-转移-终止剂"修饰后,采用光接枝方法制备了牛血红蛋白的分子印迹聚合物微球。

关键词：纤维接枝蛋白质印迹聚丙烯酰胺水凝胶吸附性能聚合物微球

螺旋水链和环状配合物主体:金属离子配位场取向与水链手性的关系

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螺旋水链和环状配合物主体:金属离子配位场取向与水链手性的关系

中国化学会第26届学术年会无机与配位化学分会场

作者：俱战锋张杰中国科学院福建物质结构研究所结构化学国家重点实验室中国科学院福建物质结构研究所结构化学国家重点实验室

＜正＞金属离子以及它们的配位构型可以对氢键作用产生不同的影响,在生物化学研究领域具有非常重要的意义。1水对生命体与整个生物和化学体系都至关重要,但是人们对水及其与周围环境的作

关键词：配位化合物氢键联吡啶鎓盐螺旋水链

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一羟基芘对血清白蛋白构象变化的光谱学研究

一羟基芘对血清白蛋白构象变化的光谱学研究

第八届全国分析毒理学大会暨中国毒理学会分析毒理专业委员会第五届会员代表大会

作者：张静陈薇晓朱亚先张勇近海海洋环境科学国家重点实验室(厦门大学) 厦门大学环境与生态学院厦门大学化学化工学院化学系漳州职业技术学院

1-羟基芘是典型四环多环芳烃(PAHs)-芘(Pyr)的代谢产物,通常被认为是PAHs体内暴露总量的标志物[1]。血清白蛋白(SA)是血浆中含量最丰富的蛋白,也是血清中的运输蛋白,具有重要的生理功能,与体内内、外源性物质具有广普结合能力,影响这些... 详细信息

1-羟基芘是典型四环多环芳烃(PAHs)-芘(Pyr)的代谢产物,通常被认为是PAHs体内暴露总量的标志物[1]。血清白蛋白(SA)是血浆中含量最丰富的蛋白,也是血清中的运输蛋白,具有重要的生理功能,与体内内、外源性物质具有广普结合能力,影响这些物质在血液中的含量、膜渗透、体内分布、代谢和毒性[2],SA的构形又直接决定着其上述生理功能、稳定性及运输能力等[3]。研究1-OHP对BSA构型的影响可以更好的阐明蛋白质结构与功能的关系,也对了解PAHs在体内的赋存时间和毒性作用强度,阐明其含量、代谢、分布、转运和致毒机制有重要意义。三维荧光光谱法可以提供复杂体系中更完整详细的光谱信息,成为研究溶液中蛋白质-小分子相互作用中蛋白质构形变化的一项有力工具[4],本文利用三维荧光光谱法,辅助同步荧光光谱法及紫外光谱法,综合研究了研究1-OHP对模式蛋白牛血清白蛋白(BSA)构形变化的影响。1.三维荧光光谱图1表示pH=7.4的Tris-HCl体系(含0.05 mol LNaCl)中BSA及1-OHP存在下混合体系的三维荧光光谱图及三维等高线图。如图1所示,1-OHP加入后,BSA-1-OHP体系的三维荧光光谱图发生变化,具体参数见表1。结果表明,1-OHP加入后,水拉曼峰(λex=λem)增强,表明BSA-1-OHP复合物形成,且发生了聚集现象,使生物大分子的尺寸增大,导致散射效应增强[5]。而BSA的三维荧光光谱中荧光峰为λex/λem为(282 nm,341 nm),可以看出,该实验条件下,BSA仅表现出色氨酸残基的荧光,且已知在BSA中色氨酸残基处在分子表面或分子内部的疏水域。由图一,加入HPCD后,色氨酸残基的荧光峰强度明显下降,由11620 to 5923,并发生了3 nm的红移,表明1-OHP的加入使色氨酸等残基的光强猝灭,且所处的微环境极性更强。从而说明1-OHP很可能作用于处于BSA分子的内部疏水域的色氨酸残基,致使蛋白质二级结构破坏后,内部的色氨酸残基暴露于亲水环境中,所处微环境极性增大,同时荧光强度明显降低[5]。接着考察了紫外可见光谱及同步荧光光谱来进一步验证上述推断。2.同步荧光法蛋白质中氨基酸残基的最大发射波长与它所处的环境的极性有关,通过最大发射波长的改变可以判断蛋白质构象的变化。在同步荧光光谱中,△λ=15 nm,60 nm时显示的分别反应BSA酪氨酸和色氨酸残基的荧光光谱信息[6]。如图3.4所示,实验结果表明,随着1-OHP加入,△λ=15 nm的峰基本没有发生位移;而Δλ=60 nm时,其荧光峰发生约3 nm红移,说明1-OHP的加入使BSA的色氨酸残基生色团的疏水结构疏松,周围环境极性增加,推测1-OHP可能与色氨酸残基结合。3.紫外光谱紫外吸收光谱可以给出复合物的信息及BSA结构变化的信息。BSA有两个吸收峰,在200-230 nm,主要是BSA骨架的吸收峰,260-300 nm范围处,主要是其氨基酸残基的吸收峰(色氨酸,络氨酸,苯丙氨酸残基)[7]。如图3.5所示,随着1-OHP加入,体系中200-230 nm吸收峰不断增强,且280 nm处的吸收峰不断增强,表明1-OHP和BSA形成了基态复合物,致使BSA骨架被破坏,BSA疏水域中的色氨酸等残基暴露于外部环境中。综上,本文利用三维荧光光谱法结合同步荧光光谱法及紫外可见分光光度法考察了1-OHP对BSA构象变化的影响,结果表明,1-OHP可以与BSA形成复合物,并使BSA构形发生变化,致使BSA骨架破坏,内部疏水域中的色氨酸等残基暴露于极性的亲水环境中。为研究小分子与蛋白质相互作用中蛋白构象变化提供了方法参考。

关键词：一羟基芘(1-OHP) 牛血清白蛋白(BSA) 构象变化三维荧光光谱

MicroRNAs特性及其在毒理学中的应用

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职业卫生与应急救援 2012年第4期30卷 186-189页

作者：梅洋冯楠楠孙品夏昭林复旦大学公共卫生学院劳动卫生与毒理学教研室教育部公共卫生安全重点实验室上海200032

MicroRNAs(miRNAs)是一类22 nt左右的小分子非编码单链RNA,它通过与靶mRNA互补结合,调控mRNA翻译,在细胞的生长、分化、发育、代谢和凋亡等活动中发挥作用。研究表明,miRNAs的表达调控着各种肿瘤和环境疾病的发生发展,是一个很好的生物... 详细信息

MicroRNAs(miRNAs)是一类22 nt左右的小分子非编码单链RNA,它通过与靶mRNA互补结合,调控mRNA翻译,在细胞的生长、分化、发育、代谢和凋亡等活动中发挥作用。研究表明,miRNAs的表达调控着各种肿瘤和环境疾病的发生发展,是一个很好的生物标志,因此miRNAs在毒理学的研究中将会发挥重要作用。

关键词： microRNAs 肿瘤环境疾病毒理学

厦门湾海水-沉积物系统PCDD/Fs的多相分配及颗粒垂直通量研究

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厦门湾海水-沉积物系统PCDD/Fs的多相分配及颗粒垂直通量研究

中国海洋湖沼学会第十次全国会员代表大会暨学术研讨会

作者：蔡明刚洪清泉纪凯献何建华高树基梁俊华林静厦门大学海洋与地球学院近海海洋环境科学国家重点实验室台湾阳明大学环境与职业健康科学研究所国家海洋局第三海洋研究所

于2011年12月采集厦门湾海水、沉积物样品,开展海水-沉积物系统多氯代二苯并二噁英/呋喃（Polychlorinated dibenzo-p-dioxins and diben zofurans,PCDD/Fs）的多相分配及颗粒垂直通量研究。首次获得PCDD/Fs在厦门湾海水中悬浮颗粒态、...

于2011年12月采集厦门湾海水、沉积物样品,开展海水-沉积物系统多氯代二苯并二噁英/呋喃（Polychlorinated dibenzo-p-dioxins and diben zofurans,PCDD/Fs）的多相分配及颗粒垂直通量研究。首次获得PCDD/Fs在厦门湾海水中悬浮颗粒态、胶体态和自由溶解态的含量、水平与垂直分布,沉积物中PCDD/Fs的时空分布,PCDD/Fs的来源和海水-沉积物系统颗粒态PCDD/Fs的垂直通量等特征,提升了对海洋环境中PCDD/Fs的多相分配和颗粒垂直通量过程的认识。取得了以下成果:厦门湾水体17种2,3,7,8-PCDD/Fs总含量（ΣPCDD/Fs）为35.389-283.933pg/L,平均为145.156pg/L,其中PCDDs含量为34.929-282.554pg/L,占ΣPCDD/Fs的98.6%-99.6%。总体上,厦门湾水体PCDD/Fs含量处于较高水平。水体中PCDD/Fs的毒性当量（采用WHO 2005年的毒性当量因子计算）为0.084-0.422pgTEQ/L（平均为0.250pgTEQ/L）,超过美国EPA规定的水质标准（0.14pgTEQ/L）。其中,对毒性当量贡献最大的为1,2,3,7,8-P5CDD,其次为O8CDD和1,2,3,4,6,7,8-H7CDD。表层水体中PCDD/Fs浓度随离九龙江口距离的增大而减小,表明九龙江水体输入是研究区域PCDD/Fs的输入途径。垂直水体中PCDD/Fs呈现上层水体和底层水体含量较高而中层水体含量较低的分布,主要与载带PCDD/Fs的悬浮颗粒物在水体中的迁移有关。上层水体由于载带大量颗粒物的九龙江水体输入而有较高的PCDD/Fs含量,底层水体则主要由于沉积物的再悬浮作用从沉积物释放颗粒态PCDD/Fs。水体中PCDD/Fs在悬浮颗粒态-胶体态-自由溶解态的三相间主要以悬浮颗粒态存在,占98.4%-99.7%,PCDD/Fs在颗粒物与表观溶解态间的分配接近平衡。PCDD/Fs在三相间的分配是温度、盐度、pH、Chl-a、DOC、SPM、POC/SPM等因素共同作用的结果。其中,POC/SPM、Chl-a、pH和DOC主要控制胶体态和自由溶解态间的分配,SPM主要控制颗粒态的含量与分配。厦门湾沉积物PCDD/Fs的含量为1129.656-3806.936pg/gd.w.,平均含量为1809.188pg/gd.w.,总毒性当量为1.60-6.65pg TEQ/g,平均为2.49pg TEQ/g,其毒性当量主要由五至八氯代的PCDDs贡献。根据Hemming等（2003）提出的风险评价标准,厦门湾表层沉积物的PCDD/Fs含量对生物没有毒性风险。沉积物中PCDD/Fs含量与沉积物中的细颗粒（粘土、粉砂）和TOC含量存在正相关关系,说明沉积物中PCDD/Fs主要受细颗粒和TOC吸附作用控制。表层沉积物中PCDD/Fs的分布与水体中颗粒态PCDD/Fs的分布相似,从河端至海端逐渐降低,说明九龙江水体载带的颗粒态PCDD/Fs往外海迁移过程中的沉降和埋藏是沉积物中PCDD/Fs的主要来源。对柱状沉积物的研究表明,在百年时间尺度上,PCDD/Fs呈现波动变化,其中最大值出现在1970年代。海水和沉积物中PCDD/Fs的同系物组成相似,均以O8CDD为主,其次为H7CDD,另有少量O8CDF和H7CDF。结合1,2,3,6,7,8-H6CDD与1,2,3,4,7,8-H6CDD的比值,判断厦门湾PCDD/F的主要来源是污水污泥的输入,PCP（五氯酚）杂质的输入有限。百年时间尺度上,PCDD/Fs的同系物组成几乎不变,说明近100年内,PCDD/Fs几乎不发生降解。对海水-沉积物界面颗粒PCDD/Fs的垂直通量估算结果为,表层水体颗粒PCDD/Fs垂直沉降通量为9878.86-65148.84ng/m2a,平均32625.96ng/m2a。水柱的PCDD/Fs垂直沉降通量为4002.80-12962.85ng/m2a。沉积物对PCDD/Fs的埋藏通量为2057.17-157176.23ng/m2a,沉积物再悬浮作用向水体释放的PCDD/Fs通量为3026.29-8375.26ng/m2a。在扩散作用和降解作用可以忽略的条件下,九龙江河口沉积区和外海区水体中颗粒PCDD/Fs在下沉过程中大部分通过水平输送输入到邻近海域,而在西港与九龙江水体交汇的快速沉积区,周围海域水体中PCDD/Fs在此快速沉积并发生埋藏。在河口区,尤其是沉积速率较慢的区域,沉积物再悬浮通量不能忽略,证明了河口区沉积物为PCDD/Fs的"二次污染源"。

关键词：

五氯酚群落水平水生态风险评价和健康风险评价研究

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口岸卫生控制 2015年第2期20卷 31-35页

作者：佟玉洁聂云丁侃天津职业大学天津300410 中海油实验中心渤海实验中心天津300452

本研究通过案例提出群落水平水生态风险评价方法,以初步筛选出对环境有高风险的污染物。首先依据逸度模型预测出五氯酚在水体的浓度为0.092μg/L,选择代表食物链关系的多物种以表示群落水平的生物效应,包括:初级生产者(藻类)、初级消费... 详细信息

本研究通过案例提出群落水平水生态风险评价方法,以初步筛选出对环境有高风险的污染物。首先依据逸度模型预测出五氯酚在水体的浓度为0.092μg/L,选择代表食物链关系的多物种以表示群落水平的生物效应,包括:初级生产者(藻类)、初级消费者(浮游动物)和捕食者(鱼),应用欧盟评价因子风险评价方法计算风险商值为1.642,表明五氯酚对水生生态系统的风险值为高风险。流行病学资料表明五氯酚对人体正常的内分泌功能有着一定的影响,应用健康风险度法评价五氯酚对人群的健康风险,人群超额危风险度分别为2.30×10-7/a,此风险是可接受的。

关键词：生态风险评价健康风险评价水生生态系统五氯酚

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蚯蚓与植物协同对沙壤土中铬移除的影响特征

扬州大学学报（农业与生命科学版） 2022年第6期43卷 51-59页

作者：刘学方韦杰张军王浩羽宋言孙进宇居静赵海涛封克扬州市职业大学资源与环境工程学院江苏扬州225009 扬州大学农业农村部耕地质量监测与评价重点实验室江苏扬州225127 地理信息采集加工及应用教育部协同创新中心江苏扬州225009 江苏省种植养殖业安全环境技术及装备工程研究中心江苏扬州225009

采用控制试验探究蚯蚓(赤子爱胜蚓、威廉环毛蚓)与植物(黑麦草、玉米)协同对铬污染(15、50 mg·kg^(-1))土壤中铬的移除特征。结果表明:(1)蚯蚓吞食过腹后土壤中稳定态铬(残渣态、可氧化态)含量显著降低,活性态铬(酸可提取态、可还原态... 详细信息

采用控制试验探究蚯蚓(赤子爱胜蚓、威廉环毛蚓)与植物(黑麦草、玉米)协同对铬污染(15、50 mg·kg^(-1))土壤中铬的移除特征。结果表明:(1)蚯蚓吞食过腹后土壤中稳定态铬(残渣态、可氧化态)含量显著降低,活性态铬(酸可提取态、可还原态)含量显著增加。(2)吞食铬污染土壤后蚯蚓肠道细菌主要为厚壁菌门(Firmicutes)、变形菌门(Proteobacteria)和放线菌门(Actinobacteriota),蚯蚓体的丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性显著增加,谷胱甘肽S-转移酶(GST)和线粒体活性氧酶(ROS)活性显著降低;高铬浓度(50 mg·kg^(-1))土壤使蚯蚓体MDA含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性增加量更大。(3)黑麦草移除土壤铬能力显著优于玉米,赤子爱胜蚓与黑麦草协同后低铬浓度(15 mg·kg^(-1))和高铬浓度土壤中铬的移除率分别达到88.4%和79.5%。综上,蚯蚓能有效提升土壤中铬生物有效性,赤子爱胜蚓与黑麦草协同最有利于移除土壤中的铬。

关键词：蚯蚓黑麦草玉米土壤铬移除

焦化工人尿中多种多环芳烃单羟基代谢物的调查

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环境与健康杂志 2010年第8期27卷 686-689页

作者：岳强范瑞芳于志强盛国英傅家谟中国科学院广州地球化学研究所有机地球化学国家重点实验室广东广州510640 韶关学院英东生物工程学院广东韶关512005 华南师范大学生命科学学院广东广州510631

目的了解焦化工人多种多环芳烃（PAHs）的内暴露水平。方法于2006年11月采集我国南方某焦化厂工人及对照人群尿样。尿液经过酶解、固相萃取（SPE）富集和净化后，采用高效液相色谱．荧光检测方法检测多环芳烃羟基代谢物（HO—PAHs）。... 详细信息

目的了解焦化工人多种多环芳烃（PAHs）的内暴露水平。方法于2006年11月采集我国南方某焦化厂工人及对照人群尿样。尿液经过酶解、固相萃取（SPE）富集和净化后，采用高效液相色谱．荧光检测方法检测多环芳烃羟基代谢物（HO—PAHs）。结果在尿样中共检测出8种多环芳烃羟基代谢物。除两组人群4．羟基菲浓度中位数接近外，工人组其余HO—PAHs水平均为对照组1倍以上；其中工人组尿中1-羟基芘（1-OHP）浓度是对照组的7倍。吸烟会对受试人群萘和芴的内暴露水平产生显著影响。工人组尿中1-OHP浓度与2-羟基萘（2-HON）、2-羟基芴（2-HOHu）、9-羟基菲（***）、EHOPhe和***均存在显著的相关性，吸烟和非吸烟工人r值范围分别在0．638—0．998和0．805～0．990之间，但在对照组中，1-OHP与其他尿HO—PAHs的相关性低于工人组，r值在0．436—0．993之间，且1-OHP与2-HON的浓度相关性无统计学意义（r值为0．346）。结论在职业高暴露环境下，1-OHP能很好地指示PAHs内暴露水平；仅用1-OHP并不一定能反映一般人群实际PAHs的暴露水平。

关键词：多环芳烃生物标志物高效液相色谱焦化工人尿液