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TNF-α通过ERK1/2-Runx2信号通路调控SHED成骨分化能力的实验研究

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上海口腔医学 2024年第2期33卷 135-140页

作者：王静徐娜任慧迪天津市口腔医院儿童口腔科南开大学医学院天津300041 天津市口腔功能重建重点实验室天津300041

目的:探讨肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)对人脱落乳牙牙髓干细胞(stem cells from human exfoliated deciduous teeth,SHED)骨分化能力的影响,分析ERK1/2-Runx2信号通路在该调控过程中的变化。方法:从6~8岁健康儿童正常乳恒牙替换即将脱落的乳切牙中分离和培养SHED,取第三代细胞,分为对照组(成骨诱导剂培养)、观察组(成骨诱导剂和TNF-α共培养)和激动剂组(成骨诱导剂、TNF-α和ERK通路激动剂共培养)。采用茜素红染色评价成骨分化功能,采用Western印迹检测SHED细胞中Osterix、OPN、ERK1/2、pERK1/2和Runx2的蛋白表达水平,应用qRT-PCR检测Osterix、OPN、ERK1/2、pERK1/2和Runx2 mRNA的表达。采用SPSS 26.0软件包对数据进行统计学分析。结果:3组细胞成骨分化能力比较结果显示,3组细胞中均可见红棕色矿化结节。3组组间相比,对照组矿化结节最多,激动剂组次之,观察组最少。与对照组相比,观察组和激动剂组的Osterix、OPN蛋白和mRNA表达水平显著下降,而激动剂组Osterix、OPN蛋白和mRNA表达水平显著高于观察组;3组细胞的ERK1/2蛋白和mRNA表达水平无显著差异,而观察组和激动剂组pERK1/2和Runx2的蛋白和mRNA表达水平显著高于对照组,激动剂组的蛋白及mRNA表达水平显著高于观察组。结论:TNF-α对SHED成骨分化具有抑制作用,该作用可能与抑制ERK1/2-Runx2信号通路有关。

关键词：肿瘤坏死因子α 人脱落乳牙牙髓干细胞成骨分化 ERK1/2-Runx2信号通路

不同剂量人生长激素对卵巢去势大鼠牙周膜干细胞成骨分化的影响

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中国老年学杂志 2024年第5期44卷 1253-1257页

作者：张曦萌魏沣韩效愈天津市口腔医院河西分诊部天津河西300061

目的分析不同剂量人生长激素对卵巢去势大鼠牙周膜干细胞成骨分化能力的影响。方法选取20只雌性SD大鼠,分为正常组、卵巢去势组各10只,正常组不做任何处理,卵巢去势组摘除双侧卵巢,分析两组体质量、血清钙(Ca^(2+))、雌二醇(E2)水平... 详细信息

目的分析不同剂量人生长激素对卵巢去势大鼠牙周膜干细胞成骨分化能力的影响。方法选取20只雌性SD大鼠,分为正常组、卵巢去势组各10只,正常组不做任何处理,卵巢去势组摘除双侧卵巢,分析两组体质量、血清钙(Ca^(2+))、雌二醇(E2)水平、股骨骨密度(BMD)及股骨组织变化。分离卵巢去势组牙周膜干细胞,分为空白组、人生长激素组,空白组细胞常规培养,人生长激素组分为10、50、100、150、200μg/L 5个干预剂量亚组,分别在细胞培养液中加入10、50、100、150、200μg/L人生长激素培养。测定细胞增殖能力、成骨分化能力、碱性磷酸酶(ALP)活性、成骨基因表达量及细胞外调节蛋白激酶(ERK)1/2、Runt相关转录因子(Runx)2信号通路蛋白表达量。结果人生长激素组24、48、72 h细胞增殖率高于空白组,且随着人生长激素组浓度增加,24、48、72 h细胞增殖率逐渐升高,有统计学差异(P<0.05)。空白组仅有少量矿化结节,人生长激素组矿化结节增多,且随着浓度增加矿化结节逐渐增多。人生长激素组骨钙素(OCN)、骨桥蛋白(OPN)基因表达量、ALP活性高于空白组,且随着人生长激素组浓度增加,OCN、OPN基因表达量、ALP活性逐渐升高,有统计学差异(P<0.05)。人生长激素组ERK1/2、p-ERK1/2、Runx2蛋白表达量高于空白组,且随着人生长激素组浓度增加ERK1/2、p-ERK1/2、Runx2蛋白表达量逐渐升高,有统计学差异(P<0.05)。结论人生长激素可促进卵巢去势大鼠牙周膜干细胞增殖、成骨分化,其可能经ERK1/2-Runx2信号通路,调控成骨相关基因发挥作用,且呈剂量依赖,高剂量作用最为显著。

关键词：人生长激素卵巢去势牙周膜干细胞成骨分化

Compound 3k治疗骨关节炎:调控氧化应激通路改善软骨细胞糖酵解的作用机制

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中国组织工程研究 2025年第2期29卷 363-370页

作者：郭素蓉曹士盛穆星彤杨青张娟天津医科大学口腔医学院天津市300041 天津医科大学口腔医院口腔修复科天津市300041

背景:骨关节炎现已被认为是一种代谢性疾病,既往研究表明糖酵解在骨关节炎的发生发展中起重要作用。Compound 3k作为一种新型糖酵解小分子抑制剂,具有抗炎及抗肿瘤等功效,因此可靶向糖酵解,有望为骨关节炎治疗提供新的思路。目的:基于... 详细信息

背景:骨关节炎现已被认为是一种代谢性疾病,既往研究表明糖酵解在骨关节炎的发生发展中起重要作用。Compound 3k作为一种新型糖酵解小分子抑制剂,具有抗炎及抗肿瘤等功效,因此可靶向糖酵解,有望为骨关节炎治疗提供新的思路。目的:基于缺氧诱导因子1α/活性氧的氧化应激通路探究Compound 3k在糖酵解过度活跃所导致的骨关节炎中的作用机制。方法:取对数生长期的ATDC5成软骨细胞,用10 ng/mL白细胞介素1β作用24 h诱导骨关节炎体外细胞模型,以CCK-8法检测不同浓度(0.25,0.5,1,2.5,5,10,15μmol/L)Compound 3k的细胞毒性,选出合适浓度进行后续实验。将软骨细胞随机分为对照组、模型组、治疗组,模型组以10 ng/mL的白细胞介素1β诱导,治疗组以Compound 3k预刺激2 h后与白细胞介素1β共培养,用CCK-8法检测各组细胞增殖情况;用ELISA试剂盒检测各组细胞炎症水平;用试剂盒检测各组细胞活性氧、细胞外乳酸脱氢酶及葡萄糖含量;qRT-PCR及Western blot检测相关炎症因子白细胞介素6、肿瘤坏死因子α及糖酵解相关基因葡萄糖转运蛋白1、甘油醛3-磷酸脱氢酶、单羧酸转运蛋白1和缺氧诱导因子1α的表达水平。结果与结论:①与对照组相比,模型组细胞增殖活性下降、糖酵解水平活跃,表现为细胞外乳酸脱氢酶含量增加(P<0.001),葡萄糖含量减少(P<0.001),相关炎症因子白细胞介素6(P<0.0001)及肿瘤坏死因子α(P<0.001),糖酵解相关基因葡萄糖转运蛋白1(P<0.001)、甘油醛3-磷酸脱氢酶(P<0.001)、单羧酸转运蛋白1(P<0.001)及缺氧诱导因子1α(P<0.001)的表达水平均上调,并伴随氧化应激,活性氧过量产生。②与模型组相比,Compound 3k的治疗有效提高细胞增殖活性,抑制过度活跃的糖酵解水平的同时,抑制了骨关节炎软骨细胞炎症(P<0.001)及糖酵解相关基因的表达(P<0.001),且抑制氧化应激,缺氧诱导因子1α的表达水平下调(P<0.0001),活性氧水平下降。③上述结果证实,Compound 3k抑制了白细胞介素1β诱导的软骨细胞炎症,其机制可能与糖酵解及缺氧诱导因子1α/活性氧介导的氧化应激有关。

关键词：骨关节炎糖酵解 Compound 3k 氧化应激 HIF-1α/ROS ATDC5细胞葡萄糖代谢白细胞介素1β 小分子药物

共载吲哚菁绿和Nrf2-siRNA的多功能纳米粒子对抗口腔鳞状细胞癌的体外作用研究

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口腔医学研究 2024年第5期40卷 422-428页

作者：付凯钰常云汉史恩宇史澍睿天津市口腔医院儿童口腔科、南开大学医学院天津300041 天津市口腔功能重建重点实验室天津300041 天津医科大学口腔医院综合科天津300070 天津市口腔软硬组织修复再生重点实验室天津300070

目的:构建共载吲哚菁绿(indo cyanine green,ICG)和核因子E2相关因子2(nuclear factor erythroid 2-related factor 2,Nrf2)-短干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)的多功能纳米载药粒子,并探究其联合光热疗法与抗氧化抑制作用增效的光动力疗法协同对抗口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)的体外作用与机制。方法:利用超声乳化法和静电力吸附作用制备基于聚氨基酯/聚乳酸-羟基乙酸共聚物且共载ICG和Nrf2-siRNA的纳米粒子PPI-siRNA。表征PPI-siRNA纳米粒子的形貌、粒径大小和分布、表面电位及其载药情况;评价PPI-siRNA纳米粒子对ICG和Nrf2-siRNA的胞内递送以及Nrf2-siRNA逃逸溶酶体吞噬的性能;通过检测舌鳞状细胞癌细胞SCC-25随激光照射的升温效应、热休克蛋白60表达和活性氧生成水平考察PPI-siRNA纳米粒子的光热和光动力性能;考察细胞内Nrf2及其调控的下游基因谷氨酸-半胱氨酸连接酶修饰亚基和谷氨酸-半胱氨酸连接酶的表达水平,从而探究Nrf2-siRNA助力光动力效应的作用机制;运用噻唑蓝比色法考察PPI-siRNA联合激光照射对SCC-25的细胞毒性作用。结果:PPI-siRNA纳米粒子呈形貌规则的球状结构,粒径约为180 nm,并成功共载ICG与Nrf2-siRNA;PPI-siRNA纳米粒子可以高效递送ICG和Nrf2-siRNA入胞,且可以确保Nrf2-siRNA逃逸溶酶体吞噬,从而发挥基因沉默作用;PPI-siRNA纳米粒子具备良好的光热和光动力性能,Nrf2-siRNA可以通过下调抗氧化蛋白和基因的表达显著提升光学疗法的抗肿瘤效率。结论:PPI-siRNA纳米粒子可以联合光热疗法与基因沉默作用增效的光动力疗法并有效抑制SCC-25的体外生长,在OSCC的临床治疗方面具有广阔的应用前景。

关键词：口腔鳞状细胞癌纳米粒子光热/光动力疗法基因沉默抗氧化抑制效应

骨形成肽1和聚多巴胺复合涂层修饰提高聚醚醚酮表面活性

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中国组织工程研究 2025年第16期29卷 3318-3325页

作者：秦敬杰郭子歌李睿马士卿卢瑞杰李梦君天津市黄河医院口腔科天津市300110 天津医科大学口腔医院修复科天津市300070 石嘴山市第二人民医院口腔科宁夏回族自治区石嘴山市753000 天津医科大学第二医院口腔科天津市300211

背景:聚醚醚酮具有与人体皮质骨相近的弹性模量及良好的射线透射性、化学稳定性和生物相容性等优点,有望应用于口腔种植领域,然而其具有生物惰性,难以与周围组织形成骨结合,因此如何提高聚醚醚酮的表面活性是目前的主要问题。目的:分析... 详细信息

背景:聚醚醚酮具有与人体皮质骨相近的弹性模量及良好的射线透射性、化学稳定性和生物相容性等优点,有望应用于口腔种植领域,然而其具有生物惰性,难以与周围组织形成骨结合,因此如何提高聚醚醚酮的表面活性是目前的主要问题。目的:分析聚醚醚酮表面骨形成肽1和聚多巴胺复合涂层的促成骨和成血管作用。方法:将聚醚醚酮片浸泡于多巴胺溶液中24 h,制备聚醚醚酮-聚多巴胺材料;将聚醚醚酮-聚多巴胺材料浸泡于骨形成肽1溶液中24 h,制备聚醚醚酮-聚多巴胺-骨形成肽1材料,表征材料的微观形貌、亲水性与元素组成。将骨髓间充质干细胞分别接种于聚醚醚酮、聚醚醚酮-聚多巴胺、聚醚醚酮-聚多巴胺-骨形成肽1材料表面,通过活死细胞染色和细胞骨架染色评估细胞活性与黏附状态,茜素红和骨钙素免疫荧光染色检测细胞成骨分化能力。将人脐静脉内皮细胞分别接种于3组材料表面,通过活死细胞染色和细胞骨架/血管内皮生长因子免疫荧光染色评估细胞活性及成血管水平。结果与结论:①扫描电镜下可见聚醚醚酮材料表面光滑,聚醚醚酮-聚多巴胺材料表面出现凹凸不平的沉积物,聚醚醚酮-聚多巴胺-骨形成肽1材料表面有小颗粒突起;接触角测试结果显示,聚醚醚酮-聚多巴胺-骨形成肽1材料的亲水性优于其他两种材料;X射线光电子能谱测试结果显示,骨形成肽1成功修饰于聚醚醚酮材料表面;②活死细胞染色和细胞骨架染色显示,相较于其他两种材料,聚醚醚酮-聚多巴胺-骨形成肽1材料可提高骨髓间充质干细胞的活性与黏附;茜素红和骨钙素免疫荧光染色显示,相较于其他两种材料,聚醚醚酮-聚多巴胺-骨形成肽1材料可促进骨髓间充质干细胞的成骨分化;③活死细胞染色和免疫荧光染色显示,相较于其他两种材料,聚醚醚酮-聚多巴胺-骨形成肽1材料可提高人脐静脉内皮细胞的活性与黏附及血管内皮生长因子蛋白的表达;④结果表明,骨形成肽1和聚多巴胺复合涂层可提高聚醚醚酮表面的促成骨和成血管活性。

关键词：聚醚醚酮表面改性聚多巴胺涂层骨形成肽1 成骨分化成血管

不同垂直骨面型下颌第一磨牙横向位置差异的CBCT研究

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口腔医学研究 2024年第6期40卷 544-549页

作者：李放张锡忠合肥市口腔医院正畸二科、安徽医科大学合肥口腔临床学院安徽合肥230041 天津市口腔医院正畸科天津300041

目的:使用锥形束CT(cone beam CT,CBCT)测量不同垂直骨面型下颌第一磨牙生理牙槽骨厚度,评估横向磨牙位置。方法:选取2023年1~10月在合肥市口腔医院正畸二科就诊患者50例,分为高角组、均角组及低角组,术前拍摄CBCT,数据导入配套三维软... 详细信息

目的:使用锥形束CT(cone beam CT,CBCT)测量不同垂直骨面型下颌第一磨牙生理牙槽骨厚度,评估横向磨牙位置。方法:选取2023年1~10月在合肥市口腔医院正畸二科就诊患者50例,分为高角组、均角组及低角组,术前拍摄CBCT,数据导入配套三维软件进行4个部位不同深度牙槽骨厚度的测量分析。结果:高角患者下颌第一磨牙的骨厚度最小。下颌第一磨牙舌侧骨厚度高于颊侧。下颌第一磨牙釉牙骨质界根方4 mm处近中舌侧牙槽骨厚度高于远中舌侧,近中颊侧牙槽骨厚度与远中颊侧比较差异无统计学意义。下颌第一磨牙釉牙骨质界根方8 mm处远中颊侧牙槽骨厚度高于近中颊侧,近中舌侧的牙槽骨厚度与远中舌侧比较差异无统计学意义。下颌第一磨牙同一测量位点釉牙骨质界根方8 mm的牙槽骨厚度高于根方4 mm的牙槽骨厚度。结论:不同的垂直骨面型、测量部位、测量深度、牙齿解剖形态都会反映出下颌第一磨牙在牙槽骨中横向位置的差异。

关键词：下颌第一磨牙牙槽骨厚度垂直骨面型锥形束CT

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光生物疗法影响正畸牙根吸收的研究进展

口腔医学研究 2024年第8期40卷 665-669页

作者：张家习张锡忠天津市口腔医院正畸科南开大学医学院天津300041 天津市口腔功能重建重点实验室天津300041

牙根吸收是正畸治疗中最危险的并发症之一,轻度的牙根吸收可在停止加力后自行修复,而对于严重的牙根吸收尚无行之有效的应对手段。光生物疗法作为一种新的物理治疗手段,与传统方法相比,具有设备体积小、无创性、波长范围广、作用范围局... 详细信息

牙根吸收是正畸治疗中最危险的并发症之一,轻度的牙根吸收可在停止加力后自行修复,而对于严重的牙根吸收尚无行之有效的应对手段。光生物疗法作为一种新的物理治疗手段,与传统方法相比,具有设备体积小、无创性、波长范围广、作用范围局限、生物安全性高等优点,其波长范围覆盖了线粒体吸收波长的范围。组织或细胞接受红光或近红外光照射后生物活性改变,上调抗炎相关因子表达,促进细胞三磷酸腺苷生成、加速局部血液微循环、促进软硬组织的修复,抑制或修复牙根吸收。光生物疗法的疗效取决于其波长、能量密度、功率密度、照射频率四个要素,遵循“Arndlt-Schulz”定律,即“双向剂量效应”,生物疗效具有参数相关性,因而难以确定最佳使用参数。但光生物疗法独特的优势,使其在正畸领域有着巨大的应用潜力。

关键词：光生物疗法低水平激光牙根吸收 RANKL/RANK/OPG轴参数相关性

下颌第二磨牙牙冠延长术后疗效观察及其风险因素分析

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口腔医学研究 2024年第2期40卷 130-135页

作者：贾彦于寰张研石雪王志涛张正天津市口腔医院南开大学医学院天津300041 天津市口腔功能重建重点实验室天津300041

目的:观察下颌第二磨牙牙冠延长术后治疗效果,确定其风险因素;探讨风险因素个数对其疗效的影响。方法:纳入2019~2021年于天津市口腔医院接受牙冠延长术的下颌第二磨牙314颗。6周复查时,按照拟定标准将其分为效果良好组和效果欠佳组。筛... 详细信息

目的:观察下颌第二磨牙牙冠延长术后治疗效果,确定其风险因素;探讨风险因素个数对其疗效的影响。方法:纳入2019~2021年于天津市口腔医院接受牙冠延长术的下颌第二磨牙314颗。6周复查时,按照拟定标准将其分为效果良好组和效果欠佳组。筛选影响两组患牙疗效的风险因素,并分析其数量与治疗效果的相关性。结果:314颗患牙中,成功者占88.54%,失败者为11.46%。龈缘-断端距离(P<0.01)、术前断端-嵴顶距离(P=0.032)及牙根形态(P=0.006)是影响术后疗效的风险因素。随着风险因素数量的增加,手术失败率呈线性增长的趋势,风险因素达到3个时,失败风险明显增高(P<0.01)。两者之间呈正相关(P<0.01)。结论:龈缘-断端距离、术前断端-嵴顶距离及牙根形态是影响冠延长疗效的风险因素,其数量与手术失败率之间呈正相关,风险因素达到3个时,失败风险明显增高,需谨慎选择适应证。

关键词：下颌第二磨牙牙冠延长术治疗效果风险因素

以口腔损害为首发表现的儿童色素性扁平苔藓1例

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中华皮肤科杂志 2024年第1期57卷 64-65页

作者：陈立新高西波王莹秦蓓李钦峰天津市儿童医院皮肤科天津300074

患儿男,10岁,因口唇红斑,全身多发斑丘疹3个月余于2020年8月就诊.患儿3个月余前无明显诱因口唇出现暗红斑,无明显痒痛等不适症状,未予重视;后躯干出现紫灰色斑疹、斑丘疹,左手中指指甲变薄,出现纵裂,自行外用药物(具体不详)治疗,未见好... 详细信息

患儿男,10岁,因口唇红斑,全身多发斑丘疹3个月余于2020年8月就诊.患儿3个月余前无明显诱因口唇出现暗红斑,无明显痒痛等不适症状,未予重视;后躯干出现紫灰色斑疹、斑丘疹,左手中指指甲变薄,出现纵裂,自行外用药物(具体不详)治疗,未见好转遂就诊.患儿为第1胎第1产,足月顺产,既往体健,按序接种疫苗,否认输血史.否认家族遗传病史,双亲否认类似病史.

关键词：斑丘疹左手中指足月顺产家族遗传病史输血史暗红斑外用药物首发表现