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核糖体蛋白S6激酶1抑制剂对气道上皮干/祖细胞增殖及分化功能的影响

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天津医药 2019年第5期47卷 449-453页

作者：李敏敏李宽孙昕吴琦陈怀永天津医科大学海河临床学院 300070 天津大学海河医院

目的研究mTOR信号通路下游元件核糖体蛋白S6激酶1(S6K1)抑制剂PF-4708671对气道干/祖细胞增殖与分化功能的影响。方法准备10只C57BL/6小鼠,采用流式细胞分选技术将气道干细胞(vClub)和气道祖细胞(Club)从小鼠气道分选出来;采用类器官培... 详细信息

目的研究mTOR信号通路下游元件核糖体蛋白S6激酶1(S6K1)抑制剂PF-4708671对气道干/祖细胞增殖与分化功能的影响。方法准备10只C57BL/6小鼠,采用流式细胞分选技术将气道干细胞(vClub)和气道祖细胞(Club)从小鼠气道分选出来;采用类器官培养技术分别把vClub细胞、Club细胞和成纤维细胞(M Lg)混合培养。细胞设0、 4、 20、 100nmol/LPF-4708671处理组,培养第8天时显微镜下观察克隆生长情况,统计克隆形成数量;第10天时荧光定量PCR检测S6K1激酶基因R ps6kb1、Club细胞标志物细胞色素氧化酶(Cyp2f)、纤2 毛细胞标志物乙酰化微管蛋白(Ac)和t 叉头框转录因子J1(Foxj),杯1 状细胞标志物氯化物通道钙活化家族成员3(Clca)叉3 头框转录因子a3(Foxa3)的mRNA表达情况。结果不同浓度的PF-4708671对vClub细胞克隆数量无明显影响(P> 0.05),而 4、 20、100nmol/LPF-4708671浓度组Club细胞克隆数量均较0nmol/L组减少(P 0.05)。结论 mTOR/S6K1信号通路对小鼠气道干/祖细胞的增殖功能呈正调控作用,对其分化功能影响甚微。

关键词： mTOR/S6K1信号通路气道干细胞细胞增殖细胞分化

肺结核患者支气管肺泡灌洗液中致病菌的分布特征和影响因素

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中国慢性病预防与控制 2020年第5期28卷 368-371页

作者：李越武俊平吴琦叶静耿蓓张丽霞陈怀永天津医科大学海河临床学院天津300350 天津大学海河医院基础医学部天津医科大学总医院呼吸科

目的探究肺结核患者支气管肺泡灌洗液(BALF)中致病菌的分布特征和影响因素,为肺结核患者防治感染提供依据。方法选取天津市海河医院2012年6月至2019年6月收治的2575例肺结核患者为研究对象,依据BALF培养结果分为有致病菌生长组(248例)... 详细信息

目的探究肺结核患者支气管肺泡灌洗液(BALF)中致病菌的分布特征和影响因素,为肺结核患者防治感染提供依据。方法选取天津市海河医院2012年6月至2019年6月收治的2575例肺结核患者为研究对象,依据BALF培养结果分为有致病菌生长组(248例)和无致病菌生长组(2327例),比较分析两组患者的性别、年龄、体质指数、吸烟、饮酒、治疗情况、临床症状以及基础疾病等临床资料。采用SPSS 22.0统计软件进行χ^2检验,致病菌生长的影响因素采用多因素logistic回归分析。结果共检出病原菌248株,病原菌生长率为9.6%,其中革兰阴性菌187株(75.4%),革兰阳性菌28株(11.3%),真菌33株(13.3%)。多因素logistic回归分析显示,年龄≥42岁(OR=1.736,95%CI:1.262~2.387)和合并糖尿病(OR=1.451,95%CI:1.040~2.024)与肺结核患者BALF中有致病菌生长高风险相关。结论在实际工作中应重点关注年龄≥42岁和合并糖尿病的肺结核患者,采取针对性的措施预防肺部感染。

关键词：肺结核支气管肺泡灌洗液致病菌分布特征影响因素

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黄芩苷对结核分枝杆菌抑菌作用的研究

临床检验杂志 2017年第4期35卷 291-292页

作者：肖红侠张喜霞邵世峰张立张丽霞天津医科大学海河临床学院天津300050

目的探索黄芩苷对结核分枝杆菌的体外抑制作用。方法采用改良罗氏药敏绝对浓度法对107株结核分枝杆菌进行黄芩苷的体外抑菌试验。结果 107株结核分枝杆菌的体外抑菌试验结果表明,黄芩苷对结核分枝杆菌有明确的抑制作用,最低抑菌浓度(MIC... 详细信息

目的探索黄芩苷对结核分枝杆菌的体外抑制作用。方法采用改良罗氏药敏绝对浓度法对107株结核分枝杆菌进行黄芩苷的体外抑菌试验。结果 107株结核分枝杆菌的体外抑菌试验结果表明,黄芩苷对结核分枝杆菌有明确的抑制作用,最低抑菌浓度(MIC)值为0.75~12 mg/mL之间,MIC为12 mg/mL的菌株占8.41%,6 mg/mL的菌株占46.73%,3 mg/mL的菌株占37.38%,1.5 mg/mL的菌株占6.54%,0.75 mg/mL的菌株占0.93%,MIC_(50)和MIC_(90)均为6 mg/mL。结论 6 mg/mL黄芩苷具有较强的体外抗结核分枝杆菌作用。

关键词：黄芩苷结核分枝杆菌最小抑菌浓度

气道类器官研究哮喘中Lkb1调控上皮再生的机制

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天津医药 2024年第1期52卷 11-15页

作者：徐桂颖李玉李雪刘怡萌陈怀永天津医科大学海河临床学院 300350 天津大学海河医院天津市呼吸疾病研究所

目的通过气道类器官培养研究哮喘中肝激酶B1(Lkb1)调控上皮再生的机制。方法取Lkb1~(f/f)(对照组,10只)和Scgb1a1~(CreER);Lkb1~(f/f)小鼠(Lkb1敲除组,9只),采用雾化吸入鸡卵清蛋白(OVA)的方法建立过敏性哮喘模型,收集支气管肺泡灌洗... 详细信息

目的通过气道类器官培养研究哮喘中肝激酶B1(Lkb1)调控上皮再生的机制。方法取Lkb1~(f/f)(对照组,10只)和Scgb1a1~(CreER);Lkb1~(f/f)小鼠(Lkb1敲除组,9只),采用雾化吸入鸡卵清蛋白(OVA)的方法建立过敏性哮喘模型,收集支气管肺泡灌洗液(BALF)和肺组织,统计BALF中炎性细胞数量,肺组织切片免疫荧光染色比较钙激活氯离子通道蛋白3(CLCA3)阳性细胞数量。通过流式细胞术分选出Club细胞进行类器官培养,统计类器官的平均直径和类器官形成率,回收细胞通过实时荧光定量PCR(RT-PCR)技术检测高脚杯细胞标志物CLCA3、纤毛细胞标志物叉头框蛋白J1(FOXJ1)和Club细胞中腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)的表达水平。结果与对照组相比,Lkb1敲除组BALF中巨噬细胞、嗜酸性粒细胞、中性粒细胞和淋巴细胞数量变化差异无统计学意义;Lkb1敲除后CLCA3阳性细胞数量减少;类器官培养结果显示敲除Lkb1后Club细胞来源的类器官平均直径减小,类器官形成率降低,纤毛细胞分化标志物FOXJ1 m RNA表达水平降低,缺失Lkb1后Club细胞表达AMPKα水平降低,且Club细胞增殖受到抑制,激活Lkb1的下游信号通路AMPK可以减弱Lkb1缺失对Club细胞再生功能的影响。结论 Lkb1通过AMPK通路促进气道祖细胞增殖。

关键词：肝激酶B1 气道祖细胞腺苷酸活化蛋白激酶类器官培养哮喘细胞增殖

葡萄糖-6-磷酸脱氢酶抑制剂对小鼠气道Club细胞增殖的影响

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天津医药 2021年第4期49卷 359-363页

作者：耿蓓李宽吴琦李双艳陈怀永天津医科大学海河临床学院 300350 天津大学海河医院天津医科大学总医院呼吸科天津市呼吸疾病研究所

目的探讨葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)抑制剂6-氨基烟酰胺(6-AN)对小鼠气道Club细胞增殖的影响。方法C57BL/6小鼠随机分为对照组和哮喘组,哮喘组小鼠采用腹腔注射与雾化吸入鸡卵清蛋白(OVA)的方法建立哮喘模型。造模成功后取肺组织,进行... 详细信息

目的探讨葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)抑制剂6-氨基烟酰胺(6-AN)对小鼠气道Club细胞增殖的影响。方法C57BL/6小鼠随机分为对照组和哮喘组,哮喘组小鼠采用腹腔注射与雾化吸入鸡卵清蛋白(OVA)的方法建立哮喘模型。造模成功后取肺组织,进行免疫荧光染色,统计小鼠气道中Ki67^(+)CCSP^(+)细胞占CCSP^(+)细胞的比例。利用流式细胞术分选出Club细胞后,用荧光定量PCR法测定glucose-6-phosphate dehydrogenase X-linked(G6pdx)mRNA的表达情况。利用类器官培养法培养Club细胞,设0、10μmol/L 6-AN组,统计第8天克隆的平均直径和克隆形成数量。结果与对照组相比,哮喘组气道Ki67^(+)CCSP^(+)细胞占CCSP^(+)细胞百分比显著升高(P<0.01)。哮喘组Club细胞G6pdx mRNA表达较对照组显著上调(P<0.01)。10μmol/L 6-AN组Club细胞的克隆平均直径和克隆形成数量较0μmol/L 6-AN组均显著降低(P<0.01)。结论G6PD抑制剂6-AN可抑制小鼠气道Club细胞增殖功能。

关键词：哮喘磷酸戊糖途径 6-氨基烟酰胺细胞增殖 Club细胞

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肺干/祖细胞代谢与呼吸系统疾病研究进展

生命科学 2021年第4期33卷 527-533页

作者：赵付孝囡王建海陈怀永天津医科大学海河临床学院天津市肺脏再生医学重点实验室天津300350

呼吸系统疾病的全球死亡率居高不下,多种疾病至今仍缺乏根治手段。其中,肺癌、哮喘、特发性肺纤维化和慢性阻塞性肺疾病等难治性疾病都与肺干/祖细胞的调节和功能异常密切相关。在呼吸系统中,不同区域分布着不同类型的肺干/祖细胞。肺干... 详细信息

呼吸系统疾病的全球死亡率居高不下,多种疾病至今仍缺乏根治手段。其中,肺癌、哮喘、特发性肺纤维化和慢性阻塞性肺疾病等难治性疾病都与肺干/祖细胞的调节和功能异常密切相关。在呼吸系统中,不同区域分布着不同类型的肺干/祖细胞。肺干/祖细胞具有自我更新、增殖与分化功能,肺部的损伤修复离不开肺干/祖细胞的这些功能。因此,负责肺脏再生的肺干/祖细胞受到越来越多的关注。研究表明,肺干/祖细胞的功能与糖酵解、脂质合成、磷酸戊糖途径、氨基酸代谢和氧化磷酸化等主要代谢途径密切相关,其代谢发生改变可能与肺脏衰老和多种呼吸系统疾病有关。该文对正常、衰老和疾病状态下的肺干/祖细胞的代谢调控进行了综述。

关键词：肺干/祖细胞代谢调控肺癌哮喘肺纤维化慢性阻塞性肺疾病

CT半定量评估继发型肺结核肺结构异常对氧合功能变化的影响

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中华医学杂志 2015年第29期95卷 2368-2371页

作者：张洁于洪志吴琦于铁链李志媛王琪天津医科大学海河临床学院放射科天津市呼吸疾病研究所 300350 天津医科大学总医院放射科

目的应用CT半定量评分探讨继发型肺结核患者肺结构异常和氧合功能变化的关系.方法搜集2014年1-8月天津医科大学海河临床学院继发型肺结核住院患者资料110例,所有患者均行CT和血气分析检查,对肺内病变整体和不同病变分别进行回顾性分... 详细信息

目的应用CT半定量评分探讨继发型肺结核患者肺结构异常和氧合功能变化的关系.方法搜集2014年1-8月天津医科大学海河临床学院继发型肺结核住院患者资料110例,所有患者均行CT和血气分析检查,对肺内病变整体和不同病变分别进行回顾性分析及半定量评分,将不同病变评分相加得到该患者分类评分总和,对这些评分与血气分析结果的相关性进行评估,对氧合指数（PaO2/FiO2）＜300 mmHg（组1）和PaO2/FiO2≥300 mmHg（组2）患者的病变评分进行比较.结果肺内病变整体评分和分类评分总和两种方法均与PaO2/FiO2存在相关性,病变整体评分方法简便易行.结节及树芽征、实变、支气管病变、空洞评分与PaO2/FiO2存在相关性,磨玻璃密度影与PaO2/FiO2无相关性.结节及树芽征在继发型肺结核中常见,分别为87.3％（96/110）和70％（77/110）,实变以小叶性为主83.6％（92/110）,支气管管壁增厚和扩张发生率较高,分别为87.3％（96/110）和75.5％（83/110）,空洞以薄壁为主53.6％（59/110）.组1病变整体评分和支气管病变、实变、空洞评分明显大于组2.结论 CT半定量评分可以量化肺结构异常,敏感地反映氧合功能变化,支气管病变在继发型肺结核发病过程中起着重要作用.

关键词：体层摄影术,X线计算机结核,肺氧合血红蛋白

血行播散性肺结核合并颅内结核的临床特点分析

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天津医药 2023年

作者：邵红霞吴涓涓于洪志吴琦武俊平天津市呼吸疾病研究所天津医科大学海河临床学院国家中医药管理局中医药防治传染病重点研究室天津大学海河医院天津医科大学总医院

目的分析血行播散性肺结核合并颅内结核的临床特点,以提高临床医生的诊断意识。方法选取341例血行播散性肺结核患者,其中83例合并颅内结核。收集并分析患者的性别、年龄、既往史、临床表现;痰抗酸杆菌涂片、痰结核分枝杆菌培养、痰结... 详细信息

目的分析血行播散性肺结核合并颅内结核的临床特点,以提高临床医生的诊断意识。方法选取341例血行播散性肺结核患者,其中83例合并颅内结核。收集并分析患者的性别、年龄、既往史、临床表现;痰抗酸杆菌涂片、痰结核分枝杆菌培养、痰结核分枝杆菌/利福平耐药实时荧光定量核酸扩增技术(X-pert);颅内压,脑脊液常规、生化,脑脊液抗酸杆菌涂片、结核分枝杆菌培养、Xpert;血常规、丙氨酸转氨酶、天冬氨酸转氨酶、碱性磷酸酶、白蛋白、C反应蛋白、红细胞沉降率、结核抗体、结核感染T细胞检测(T-SPOT));胸部CT平扫、头颅CT平扫及增强扫描、头颅MRI平扫及增强扫描检查结果。结果 83例合并颅内结核患者的症状以发热(74例)、头痛(53例)为主,11例合并糖尿病,9例使用激素/免疫抑制剂,4例合并妊娠/分娩/流产,6例合并腹腔结核,6例合并骨关节结核,2例生殖系统结核,1例淋巴结结核,1例泌尿系统结核,1例口腔黏膜结核。49例血钠降低(<135 mmol/L),平均血钠为131.0(126.2,135.8)mmol/L。44例患者的脑脊液蛋白质≥1 g/L,37例患者的脑脊液葡萄糖水平<2.2 mmol/L,25例患者的脑脊液腺苷脱氨酶(ADA)≥6 U/L。83例患者均行胸CT检查,64例显示粟粒性结节,33例表现为单纯急性血行播散性肺结核,21例表现为单纯亚急性和慢性血行播散性肺结核,29例合并继发性肺结核。34例患者行头颅CT检查,其中梗死灶10例,结核瘤4例,脑积水1例。51例行头颅MRI检查,其中脑基底部脑膜强化10例,脑梗死灶7例,结核瘤4例。结论充分评估血行播散性肺结核患者的年龄、症状、头胸部影像学、脑脊液、血钠等有助于诊断颅内结核。

关键词：结核,中枢神经系统脑脊髓液诊断,鉴别血行播散性肺结核头颅影像学

PCR-线性探针杂交酶显色法在结核病诊断与耐药性检测中的应用研究

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中华医院感染学杂志 2016年第7期26卷 1483-1485页

作者：郭明日王冰冰张丽霞张立周洪经天津市海河医院检验科天津医科大学海河临床学院天津300350 天津市呼吸疾病研究所天津300350

目的对比PCR-线性探针杂交酶显色法(简称线性探针法)与BACTEC MGIT960液体培养及药敏在结核分枝杆菌检出率的差异,评价两种方法检测结核分枝杆菌对利福平和异烟肼耐药性的应用效果。方法选取医院结核科2013年8月-2015年5月369例确诊及... 详细信息

目的对比PCR-线性探针杂交酶显色法(简称线性探针法)与BACTEC MGIT960液体培养及药敏在结核分枝杆菌检出率的差异,评价两种方法检测结核分枝杆菌对利福平和异烟肼耐药性的应用效果。方法选取医院结核科2013年8月-2015年5月369例确诊及疑似结核病的住院患者送检标本,同时采用线性探针法和BACTEC MGIT960对其进行结核分枝杆菌及利福平和异烟肼耐药性检测,数据采用SPSS 13.0软件进行统计分析。结果线性探针法检测结核分枝杆菌对利福平耐药性的灵敏度为90.4%、特异度为97.3%、Kappa值为0.872;对异烟肼耐药性检测的灵敏度为86.6%、特异度为96.3%、Kappa值为0.841,两种方法在利福平和异烟肼耐药性检测中具有较好的一致性。结论 PCR-线性探针杂交酶显色法是一种快速、准确的结核分枝杆菌及其对利福平和异烟肼耐药性的诊断方法,对耐多药结核病的快速诊断具有显著的优点。

关键词：线性探针杂交酶显色法结核分枝杆菌耐药性