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HPLC-MS/MS法测定大鼠血浆中的知母皂苷B-Ⅱ

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中国药理学通报 2010年第8期26卷 1064-1068页

作者：王莉贾彦波陈方王清清赵阳马百平陈志武宋海峰安徽医科大学基础医学院药理学教研室安徽合肥230032 军事医学科学院放射与辐射医学研究所药理毒理研究室北京100850 军事医学科学院放射与辐射医学研究所生物技术研究室北京100850

目的建立快速、灵敏和准确的大鼠血浆中知母皂苷B-Ⅱ液质联用(HPLC-MS/MS)定量分析方法。方法大鼠血浆样品用乙腈沉淀蛋白,上清液经Alltima HP C18柱(2.1mm×50mm,5μm)分离,采用负离子检测多反应监测模式(MRM)、电喷雾离子化(ESI)对知... 详细信息

目的建立快速、灵敏和准确的大鼠血浆中知母皂苷B-Ⅱ液质联用(HPLC-MS/MS)定量分析方法。方法大鼠血浆样品用乙腈沉淀蛋白,上清液经Alltima HP C18柱(2.1mm×50mm,5μm)分离,采用负离子检测多反应监测模式(MRM)、电喷雾离子化(ESI)对知母皂苷B-Ⅱ进行定量分析,内标为ParisaponinⅠ(重楼皂苷Ⅰ)。检测离子对为知母皂苷B-Ⅱ离子对(m/z919.4→757.4)与"重楼皂苷Ⅰ"离子对(m/z1033.5→901.4)。结果方法的线性范围为5～2000μg·L-1,最低定量下限5μg·L-1。日内精密度<10.9%,日间精密度<6.6%,准确度为-8.6%～7.5%;每样品分析时间为3min。结论该法准确、灵敏、特异,适用于血浆中知母皂苷B-Ⅱ的测定。

关键词：知母皂苷B-Ⅱ 液质联用法电喷雾电离 SD大鼠血药浓度药代动力学

无机纳米材料在神经胶质瘤诊疗中的应用与特点

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中国生物化学与分子生物学报 2020年第6期36卷 627-633页

作者：兰颖邓桥妹刘斯佳广西医科大学广西生物医药协同创新中心再生医学重点实验室基础医学院生物化学与分子生物学教研室转化医学研究中心长寿与老年相关疾病教育部重点实验室南宁530021

神经胶质瘤是中枢神经系统中恶性程度与侵袭性最高的肿瘤之一,其难治性和高致死性亟需尽快开发新的诊疗方法。近年来,各种无机纳米材料独特的内在物化特性的探索应用,为神经胶质瘤的早期诊断和靶向治疗带来了新希望。该文系统地介绍了... 详细信息

神经胶质瘤是中枢神经系统中恶性程度与侵袭性最高的肿瘤之一,其难治性和高致死性亟需尽快开发新的诊疗方法。近年来,各种无机纳米材料独特的内在物化特性的探索应用,为神经胶质瘤的早期诊断和靶向治疗带来了新希望。该文系统地介绍了当前已应用于神经胶质瘤诊疗研究的一些重要无机纳米材料,包括纳米金、纳米银、超顺磁性氧化铁、石墨烯、碳纳米管、介孔硅、半导体量子点、上转换纳米材料、层状双氢氧化物以及二硫化钼。在神经胶质瘤诊断方面,超顺磁性氧化铁、量子点和上转换纳米材料等无机纳米材料,具有优异的肿瘤组织成像性能,能提高诊断的灵敏性,可实现对神经胶质瘤的早期诊断和实时监测;在治疗方面,大多数无机纳米材料进行功能性修饰后用作靶向药物载体,可加载多种抗癌的药物、基因和抗体等,提高靶向输送能力,以实现对胶质瘤的靶向治疗,延长药物在体内的半衰期,同时减少全身副作用;其中,纳米金和纳米银还可用于神经胶质瘤放射增敏治疗,碳纳米管和超顺磁性氧化铁可分别用于神经胶质瘤光热治疗和磁热治疗,达到安全特异的治疗效果。这些无机纳米材料尽管在体内降解、靶向可控性、个体化等技术性问题上还需要进一步解决,但其探索应用已为神经胶质瘤治疗研究提供了新的方向。

关键词：无机纳米材料神经胶质瘤诊断治疗

树突状细胞在肾切除大鼠肾组织中分布及缬沙坦对其作用的影响

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上海第二医科大学学报 2004年第7期24卷 505-509页

作者：吴开胤周同孙桂芝张玉梅张冬青陈玉英胡庆沈陈楠上海第二医科大学瑞金医院肾内科上海200025 基础医学院上海市免疫学研究所基础医学院细胞生物学教研室

目的探讨树突状细胞(DC)在肾切除大鼠肾小管间质中的分布与作用及缬沙坦对DC作用的影响。方法建立慢性肾衰5/6肾切除大鼠模型,随机分为正常组(n=18)、假手术组(n=18)、模型组(n=18)和缬沙坦治疗组(n=18)。分别于建模1、4、12周,采用... 详细信息

目的探讨树突状细胞(DC)在肾切除大鼠肾小管间质中的分布与作用及缬沙坦对DC作用的影响。方法建立慢性肾衰5/6肾切除大鼠模型,随机分为正常组(n=18)、假手术组(n=18)、模型组(n=18)和缬沙坦治疗组(n=18)。分别于建模1、4、12周,采用免疫双染和荧光图像分析法观察CD1a+CD80+DC在各组大鼠肾组织中的分布变化;免疫组化法观察P-选择素和各纤维化相关指标在肾组织中的表达;Masson染色评定各组肾小管间质纤维化(TIF)程度。结果模型组CD1a+CD80+DC主要分布于肾小管、肾间质和肾血管,以肾间质最为明显;其分布数量于12周较1周、4周明显增多,且与慢性肾功能减退呈正相关;12周时,P-选择素和各纤维化相关指标以肾小管间质为主表达和TIF程度明显增加,并与CD1a+CD80+DC分布数量呈正相关;经缬沙坦治疗后,CD1a+CD80+DC分布减少,P-选择素和各纤维化相关指标表达下降,TIF程度减轻及肾功能改善。结论 DC可能启动或参与了肾小管间质纤维化形成,并与肾功能损害程度密切相关,缬沙坦对此具有明显的抑制和肾脏保护作用。

关键词：树突状细胞肾切除术大鼠 DC 肾组织缬沙坦肾功能肾血管

新城疫病毒抑制小鼠H22移植瘤生长及其机制初探

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新城疫病毒抑制小鼠H22移植瘤生长及其机制初探

槐定碱对大鼠中脑网状结构脑区生物电活动的影响

第十一届全国免疫学学术大会

作者：宋德志樊晓晖梁莹张增峰高灵茜赖振屏广西医科大学基础医学院微生物学教研室

目的:观察新城疫病毒(Newcastle Disease Virus,NDV)7793株对小鼠H22肝癌移植瘤生长的抑制作用,初步探讨NDV体内抑制肿瘤生长的机制。方法:通过腋下接种建立BALB/c小鼠H22肝癌移植瘤模型。给予荷瘤小鼠腹腔注射NDV,记录荷瘤小鼠肿瘤生... 详细信息

目的:观察新城疫病毒(Newcastle Disease Virus,NDV)7793株对小鼠H22肝癌移植瘤生长的抑制作用,初步探讨NDV体内抑制肿瘤生长的机制。方法:通过腋下接种建立BALB/c小鼠H22肝癌移植瘤模型。给予荷瘤小鼠腹腔注射NDV,记录荷瘤小鼠肿瘤生长体积变化。收集荷瘤小鼠外周血,采用ELISA法检测IFN-γ和TRAIL蛋白浓度。剥取肿瘤组织,计算抑瘤率。分离荷瘤小鼠脾脏NK细胞,用RT-PCR法检测NK细胞TRAIL mRNA水平。用Western blotting法检测脾脏NK细胞中TRAIL蛋白水平。用LDH法检测NK细胞对肝癌细胞株Novikoff的杀伤作用。结果:BALB/c小鼠腋下接种H22肝癌腹水6天后形成实体瘤。给荷瘤小鼠注射NDV能降低移植瘤增长速度,平均抑瘤率达52.6%,3只荷瘤小鼠(18.8%)的肿瘤体积较注射前缩小,其中1只(6.3%)移植瘤完全消褪。NDV组荷瘤小鼠生存率显著高于对照组(P0.05),只有同时使用anti-TRAIL、anti-TNF-α和anti-Fas L三种抗体才能显著下调NK细胞对Novikoff的杀伤活性(P<0.01)。结论:荷瘤小鼠腹腔注射NDV能抑制移植瘤生长,显著上调小鼠NK细胞TRAIL蛋白水平,并通过包括TRAIL在内的多种途径增强脾脏NK细胞对肝癌细胞株的杀伤活性。

关键词：新城疫病毒 NK细胞 TRAIL 肝癌

来源： cnki会议评论

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中药药理与临床 2010年第2期26卷 29-31页

作者：余建强李玉香鲁宁清郭风英王峰蒋袁絮宁夏医科大学基础医学院药理学系银川75004 宁夏医科大学护理学院基础护理学系宁夏医科大学基础医学院基础医学实验中心宁夏医科大学颅脑疾病重点实验室银川75004

目的:观察槐定碱(Sophoridine,SR)对麻醉大鼠中脑网状结构区生物电信号(EEG)变化的影响。方法:利用脑立体定位手段,将电极置入大鼠中脑网状结构,采用单极引导法及计算机辅助FFT技术记录并分析槐定碱对大鼠中脑网状结构脑区生物电变化的... 详细信息

目的:观察槐定碱(Sophoridine,SR)对麻醉大鼠中脑网状结构区生物电信号(EEG)变化的影响。方法:利用脑立体定位手段,将电极置入大鼠中脑网状结构,采用单极引导法及计算机辅助FFT技术记录并分析槐定碱对大鼠中脑网状结构脑区生物电变化的影响。结果:与对照组比较,侧脑室注射(icv)槐定碱0.1、0.2、0.4mg/只,大鼠中脑网状结构脑电出现去同步化,并见痫样放电,痫样放电持续时间和频率均表现出明显的差异性(P<0.05,P<0.01),并呈剂量依赖关系。结论:SR具有明显的中枢兴奋作用,其作用与增强中脑网状结构的电活动,激活上行性网状结构系统有关;中脑网状结构可能是槐定碱中枢兴奋作用传导通路上的重要结构之一。

关键词：槐定碱脑电图中脑网状结构大鼠

双氢青蒿素对体外蓝氏贾第鞭毛虫滋养体细胞骨架的损伤作用

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世界华人消化杂志 2006年第20期14卷 1977-1981页

作者：田喜凤卢思奇尚红伟王凤云华北煤炭医学院生物科学系病原生物学学科河北省唐山市063000 首都医科大学基础医学院寄生虫学教研室北京市100069 首都医科大学基础医学院中心实验室北京市100069

目的：观测双氢青蒿素（dihydroartemisinin，DHA）对体外培养的蓝氏贾第鞭毛虫滋养体细胞骨架的损伤作用．方法：将用含双氢青蒿素的改良TYI-S-33培养基培养后的蓝氏贾第鞭毛虫滋养体，用专一性结合f-肌动蛋白（f-actin）的荧光染料罗... 详细信息

目的：观测双氢青蒿素（dihydroartemisinin，DHA）对体外培养的蓝氏贾第鞭毛虫滋养体细胞骨架的损伤作用．方法：将用含双氢青蒿素的改良TYI-S-33培养基培养后的蓝氏贾第鞭毛虫滋养体，用专一性结合f-肌动蛋白（f-actin）的荧光染料罗丹明．鬼笔环肽（rhodanmine phalloidin，RDP）标记微丝，结合微管的紫杉醇（Paclitaxel，Oregen Green488，P22310）标记微管，用流式细胞术（flow cytometry,FCM）检测、分析，用激光共聚焦显微镜（confocal microscopy,CFM）观察滋养体微丝和微管的变化．结果：经双氢青蒿素0．002mg／L（LC50）作用***标记后，流式细胞仪检测结果显示，滋养体的微丝结构有明显的损伤，其FCM激发光荧光强度值（16.18±11．02）明显低于对照组（81．7±6．43），二者有显著性差异（P〈0．01）；激光共聚焦显微镜观察显示，虫体形态及轮廓不完整．经P22310标记后，共聚焦显微镜下显示，虫体的吸盘和鞭毛轮廓不清，荧光强度降低或消失，实验组吸盘面积的荧光强度值与对照组比较有显著性差异（X^2=3．154，P〈0．01）．结论：双氢青蒿素对体外蓝氏贾第鞭毛虫滋养体的细胞骨架有明显的损伤作用．

关键词：双氢青蒿素蓝氏贾第鞭毛虫细胞骨架流式细胞术激光共聚焦显微术

人MCHR2真核表达载体的构建及稳定转染CHO细胞系的建立

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第三军医大学学报 2007年第1期29卷 32-35页

作者：袁成福杨俊霞魏丽丽石华陈济宋方洲重庆医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室教育部临床检验诊断学重点实验室重庆400016

目的构建人MCHR2真核表达载体,转染CHO细胞,建立稳定转染的CHO细胞系。方法采用PCR方法,以人胎脑cDNA文库为模板扩增人MCHR2基因的全长cDNA编码区序列,利用DNA重组技术将其定向插入到真核表达载体pcDNA3.1(+),经酶切和测序鉴定后,用脂... 详细信息

目的构建人MCHR2真核表达载体,转染CHO细胞,建立稳定转染的CHO细胞系。方法采用PCR方法,以人胎脑cDNA文库为模板扩增人MCHR2基因的全长cDNA编码区序列,利用DNA重组技术将其定向插入到真核表达载体pcDNA3.1(+),经酶切和测序鉴定后,用脂质体转染法转染CHO细胞,通过G418筛选,建立稳定转染的CHO细胞系,用RT-PCR、W estern b lot及免疫荧光法检测MCHR2的表达。结果成功构建了pcDNA3.1(+)/MCHR2真核表达载体,并建立了稳定转染的CHO细胞系,成功地表达目的基因。结论真核表达载体成功构建和稳定转染CHO细胞系的建立为进一步研究MCHR2的功能奠定良好的实验基础。

关键词： MCHR2 真核表达载体稳定转染的CHO细胞系基因表达

P53及BCL2蛋白在双表达弥漫大B细胞淋巴瘤中的预后判断价值

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中华血液学杂志 2019年第7期40卷 589-593页

作者：黄浦陈舒杨鑫雷圆圆徐晓莹刘岩雪郭玉虹潘毅王先火张会来付凯孟斌天津医科大学肿瘤医院国家肿瘤临床医学研究中心天津市肿瘤防治重点实验室天津市恶性肿瘤临床医学研究中心天津医科大学肿瘤医院中美淋巴血液肿瘤诊治中心300060 天津医科大学肿瘤医院病理科 300060 天津医科大学肿瘤医院淋巴瘤内科 300060 天津医科大学肿瘤医院中美淋巴血液肿瘤诊治中心美国内布拉斯加大学医学中心病理学与微生物学系

目的探讨P53及BCL2蛋白强表达在MYC和BCL2双表达淋巴瘤(DEL)分层诊断及预后预测中的作用.方法以2011年1月至2016年12月174例DLBCL患者的存档蜡块制作组织芯片,应用免疫组化和FISH技术对相应标记物进行检测并筛选出DEL病例,结合临床病理... 详细信息

目的探讨P53及BCL2蛋白强表达在MYC和BCL2双表达淋巴瘤(DEL)分层诊断及预后预测中的作用.方法以2011年1月至2016年12月174例DLBCL患者的存档蜡块制作组织芯片,应用免疫组化和FISH技术对相应标记物进行检测并筛选出DEL病例,结合临床病理特征及随访资料进行统计学分析.结果筛选出DEL病例45例(27.1%),生存分析显示DEL与非DEL病例的总生存(OS)和无进展生存(PFS)无显著性差异(P=0.668和P=0.790).在随访到的42例DEL病例中,P53和BCL2蛋白单独(P=0.012和P=0.032,P=0.027和P=0.004)或两者联合强表达(P=0.003和P=0.000)的OS和PFS均显著缩短,其中P53和BCL2蛋白联合强表达预后最差,而P53和BCL2蛋白同时弱表达和/或阴性的DEL病例预后甚至优于非DEL病例.虽然总病例中P53阳性和/或BCL2强阳性患者的OS和PFS也明显缩短(P=0.063和P=0.024),但在去除DEL病例的影响后,单独非DEL病例中P53阳性或/和BCL2强阳性对OS和PFS则无显著影响(P=0.590和P=0.550).结论 P53和BCL2蛋白强表达可作为双表达淋巴瘤进一步分层诊断和评估预后的生物学指标.

关键词：弥漫大B细胞淋巴瘤双表达淋巴瘤 BCL2 P53 预后

外源性IL-18基因对C6胶质瘤细胞增殖及相关基因表达的影响

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第四军医大学学报 2006年第13期27卷 1214-1216页

作者：蒋常文闫蕴力马卫东高庆华申园郑力芬王彦玲周娜静河北医科大学基础医学院细胞生物室河北石家庄050017 河北医科大学公共卫生学院流行病学教研室河北石家庄050017

目的:研究IL-18基因转染对C6胶质瘤细胞增殖活性及相关基因表达的影响.方法:用流式细胞仪观察C6/IL-18细胞周期、增殖指数的变化;用RT-PCR,蛋白印迹、免疫细胞化学方法分析C6/IL-18细胞cyc lin D1,cyc lin B1,Bc l-2 mR-NA及蛋白的表达... 详细信息

目的:研究IL-18基因转染对C6胶质瘤细胞增殖活性及相关基因表达的影响.方法:用流式细胞仪观察C6/IL-18细胞周期、增殖指数的变化;用RT-PCR,蛋白印迹、免疫细胞化学方法分析C6/IL-18细胞cyc lin D1,cyc lin B1,Bc l-2 mR-NA及蛋白的表达.结果:与亲代C6细胞相比,C6/IL-18细胞表现为G0/G1期细胞增多、G2/M期细胞减少,细胞增殖指数(PI)降低.C6/IL-18细胞的cyc lin D1和cyc lin B1,Bc l-2 mR-NA及蛋白表达降低.结论:外源性IL-18基因可降低C6细胞的增殖活性,其机制可能与Bcl-2,cyclin B1和cyclin D1表达下调有关.

关键词： Bcl-2 细胞周期蛋白 C6胶质瘤细胞 IL-18基因转染增殖指数