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天麻素通过CCR5/JAK1/STAT1信号通路抑制缺血缺氧新生小鼠小胶质细胞介导的炎症反应

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中国病理生理杂志 2024年第2期40卷 309-316页

作者：石金沙石浩龙左涵珺郭涛张幸霖张皓南李经辉李娟娟昆明医科大学基础医学院人体解剖与组织胚胎学系云南昆明650500 昆明医科大学第一附属医院神经外二科云南昆明650032

目的:探究天麻素(GAS)通过C-C趋化因子受体5(CCR5)对新生小鼠缺血缺氧性脑损伤(HIBD)后小胶质细胞JAK1/STAT1信号通路及其介导的炎症反应的影响。方法:选择新出生10 d的C57BL/6J小鼠48只,随机分为假手术(sham)组、HIBD模型组和HIBD与GA... 详细信息

目的:探究天麻素(GAS)通过C-C趋化因子受体5(CCR5)对新生小鼠缺血缺氧性脑损伤(HIBD)后小胶质细胞JAK1/STAT1信号通路及其介导的炎症反应的影响。方法:选择新出生10 d的C57BL/6J小鼠48只,随机分为假手术(sham)组、HIBD模型组和HIBD与GAS联合处理(HIBD+GAS)组;体外培养BV-2小胶质细胞,分为对照(Con)组、氧糖剥夺(OGD)组、OGD+GAS组、GAS组、Maraviroc(MVC)组、OGD+MVC组和OGD+MVC+GAS组。通过RT-qPCR检测CCL4和CCR5的mRNA表达变化,Western blot检测CCR5、p-JAK1、p-STAT1、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素1β(IL-1β)蛋白的表达变化,免疫荧光双标染色检测CCR5、p-JAK1和p-STAT1的表达变化。结果:(1)与sham组相比,HIBD组小鼠缺血侧胼胝体区CCL4和CCR5的mRNA水平,以及CCR5、p-JAK1和p-STAT1的蛋白水平明显增高(P<0.05),而HIBD+GAS组中CCL4和CCR5 mRNA水平,以及CCR5、p-JAK1和p-STAT1的蛋白水平显著低于HIBD组(P<0.05)。(2)与Con组相比,OGD组BV-2细胞中CCR5、p-JAK1和p-STAT1蛋白水平明显增高(P<0.05),而OGD+GAS组BV-2细胞中CCR5、p-JAK1和p-STAT1蛋白水平显著低于OGD组(P<0.05)。(3)CCR5拮抗剂MVC在0~80μmol/L范围内不会导致显著的BV-2细胞死亡。与OGD组相比,MVC+OGD组p-JAK1、p-STAT1、TNF-α和IL-1β蛋白水平显著降低(P<0.05),而MVC+OGD组与OGD+MVC+GAS组无明显差异。结论:GAS可通过靶向CCR5抑制小胶质细胞p-JAK1/p-STAT1通路及相关炎症因子的表达,发挥神经保护作用。

关键词：缺血缺氧性脑损伤氧糖剥夺天麻素小胶质细胞 CCR5/JAK1/STAT1信号通路

功能化外泌体对实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠治疗的研究

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天津医科大学学报 2024年第3期30卷 212-217页

作者：陈傲邱帅李悦尹海芳天津医科大学基础医学院细胞生物学系天津300070

目的:探究负载髓鞘少突胶质细胞糖蛋白(MOG)的293F细胞来源的外泌体(EXO)对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)小鼠的治疗效果。方法:利用Western印迹、透射电子显微镜以及Nanosight对超速离心分离的293F细胞上清EXO进行表征;利用流式细胞... 详细信息

目的:探究负载髓鞘少突胶质细胞糖蛋白(MOG)的293F细胞来源的外泌体(EXO)对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)小鼠的治疗效果。方法:利用Western印迹、透射电子显微镜以及Nanosight对超速离心分离的293F细胞上清EXO进行表征;利用流式细胞术和共聚焦显微镜检测细胞摄取EXO的生物学功能;利用EXO特异性锚定肽EXP将MOG抗原肽修饰于EXO表面,流式细胞术检测EXO与MOG抗原肽的结合效率(EXO_(MOG));活体成像检测EXO_(MOG)的体内分布;利用小鼠的临床评分、体重变化以及收样时小鼠脾细胞中调节性T细胞变化和脊髓染色,评估EXO_(MOG)对EAE小鼠的治疗效果;利用组织形态学染色检测EXO_(MOG)治疗对各组小鼠不良反应。结果:超速离心可成功分离EXO,且分离的EXO具有被细胞摄取的生物学功能;EXP外泌体锚定肽介导MOG抗原肽高效负载于EXO表面,且不影响EXO的体内分布;在EAE小鼠上测试结果显示:与未治疗组和MOG组相比,EXO_(MOG)组小鼠治疗后第24天的体重显著增加(P<0.05),行为学评分显著降低(P<0.05),且治疗后小鼠脾脏中CD4^(+)CD25^(+)Treg细胞显著增高(P<0.05);病理染色结果表明:EXO_(MOG)组小鼠的各组织器官未见明显病理学改变。结论:EXO_(MOG)能够有效缓解小鼠EAE疾病进展且未检测到相关不良反应。

关键词：多发性硬化实验性自身免疫性脑脊髓炎外泌体 293F悬浮细胞髓鞘少突胶质细胞糖蛋白

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整合多组学数据筛选胰腺癌进展中的关键基因

天津医科大学学报 2024年第2期30卷 132-137,156页

作者：周彤赵倩天津医科大学基础医学院细胞生物学系天津300070

目的:整合多组学数据筛选胰腺癌进展中的关键基因。方法:在GEO数据库中下载GSE149103数据集,对正常胰腺导管细胞系(HPNE)、原发性胰腺癌细胞系(PANC)以及转移胰腺癌细胞系(Capan)的基因表达及染色质开放性测序数据进行差异分析,并对差... 详细信息

目的:整合多组学数据筛选胰腺癌进展中的关键基因。方法:在GEO数据库中下载GSE149103数据集,对正常胰腺导管细胞系(HPNE)、原发性胰腺癌细胞系(PANC)以及转移胰腺癌细胞系(Capan)的基因表达及染色质开放性测序数据进行差异分析,并对差异基因进行GO和KEGG富集分析、PPI网络构建以及Hub基因筛选。结果:HPNE与PANC组筛选出1 640个差异表达基因、1 826个差异峰值区域关联基因;PANC与Capan之间筛选出4 286个差异表达基因、4 489个差异峰值区域关联基因。GO和KEGG富集分析显示两组差异基因均在轴突形成功能、MAPK信号通路和Hippo信号通路富集。最后通过PPI网络的构建与分析得到HPNE与PANC组关键基因集FN1、SOX2、SELPLG、GREM1、MEF2C、CCR7、FMN1、COL6A3、NR5A2、CTNNA2;PANC与Capan组关键基因集KDR、IL6、MMP2、CXCR4、FLT1、PPARG、SOX2、ETS1、GRIN2A、NTRK2。其中SOX2为两组共有关键基因。结论:SOX2可能在胰腺癌发生、发展及转移过程中发挥着重要作用。

关键词：胰腺癌生物信息学分析枢纽基因

IGFBP1在胃癌组织中的表达特点及其预后作用与机制的生物信息学分析

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中国医学物理学杂志 2024年第5期41卷 628-639页

作者：熊珊申洪华南理工大学医学院广东广州510006 南方医科大学基础医学院病理学系广东广州510515

目的:通过综合方法分析IGFBP1在胃癌表达、预后以及参与的生物学功能,探讨其在胃癌中的诊断和治疗价值。方法:基于TCGA数据分析IGFBP1在胃癌中的表达水平,以及不同临床病理分期和生存状态下的表达差异;采用Kaplan-Meier曲线描述IGFBP1... 详细信息

目的:通过综合方法分析IGFBP1在胃癌表达、预后以及参与的生物学功能,探讨其在胃癌中的诊断和治疗价值。方法:基于TCGA数据分析IGFBP1在胃癌中的表达水平,以及不同临床病理分期和生存状态下的表达差异;采用Kaplan-Meier曲线描述IGFBP1表达和胃癌患者预后的关系;采用ROC曲线、Cox回归及Meta分析评价IGFBP1在胃癌中诊断及预后价值,利用LASSO回归分析建立与IGFBP1相关的预后模型,并通过PPI网络筛选IGFBP1相关的核心基因;利用GO、KEGG及CIBERSORT等分析方法分析IGFBP1在胃癌中涉及的潜在致病通路及肿瘤免疫浸润;通过Cell Miner数据库预测IGFBP1与抗肿瘤药物敏感性的相关性。结果:IGFBP1在多种癌症中异常表达,包括胃癌,其中在III~IV期胃癌患者中表达显著上调;Cox回归证实IGFBP1是独立危险因素,预后分析提示IGFBP1与预后不良密切相关;GO分析提示IGFBP1相关差异基因在细胞粘附的正向调节、囊泡管腔和丝氨酸水解酶活性富集,KEGG分析提示其在IL-17信号通路中富集;肿瘤免疫浸润分析提示IGFBP1高低表达组间免疫细胞浸润显著差异;单因素Cox和LASSO回归分析构建了IGFBP1相关的胃癌预后模型,PPI网络从中筛选出7个核心基因,这些基因在胆固醇代谢、嘧啶代谢和PPAR信号通路中富集;IGFBP1的表达水平与Dasatinib等药物的敏感性相关。结论:IGFBP1在胃癌中表达上调并导致患者预后不良,可能通过影响IL-17信号通路和M0巨噬细胞浸润等机制调控胃癌发生发展。

关键词：胃癌 IGFBP1 免疫细胞浸润生物信息预后

静息与感染状态下巨噬细胞和经典树突状细胞的发育及功能研究进展

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细胞与分子免疫学杂志 2024年第6期 556-560页

作者：张蕾崔洁梁尹攀张欢欢伊淑莹山东第一医科大学临床与基础医学院(基础医学研究所)生物化学与分子生物学系

巨噬细胞(MAC)和经典树突状细胞(cDC)是免疫防御的首要防线，在先天免疫和适应性免疫中扮演着重要角色，它们具有高度组织特异性，能够精确的适应环境变化。MAC在维持组织稳态和免疫监视方面发挥作用，而cDC作为最有效的抗原提呈细胞，... 详细信息

巨噬细胞(MAC)和经典树突状细胞(cDC)是免疫防御的首要防线，在先天免疫和适应性免疫中扮演着重要角色，它们具有高度组织特异性，能够精确的适应环境变化。MAC在维持组织稳态和免疫监视方面发挥作用，而cDC作为最有效的抗原提呈细胞，在免疫应答中起关键作用。这两种细胞类型之间也存在相似性和相互联系，MAC和cDC都能识别病原体和组织损伤，它们通过分泌细胞因子激活其他先天免疫细胞，并通过与T细胞的相互作用启动或调节适应性免疫。本文总结了静息与感染过程中MAC及cDC的发育及功能的研究进展，阐述了它们在免疫系统中的关系和相互作用，为疾病的深入研究提供了理论基础。

关键词：巨噬细胞树突状细胞炎症免疫训练免疫耐受综述

三七总皂苷通过p38 MAPK通路抑制内毒素诱导的小胶质细胞活化

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神经解剖学杂志 2024年第2期40卷 196-202页

作者：段兆达王健翔杨力徐冬垚祁志吴春云贾文姬昆明医科大学基础医学院人体解剖与组织胚胎学系昆明650500 昆明医科大学第二附属医院昆明650000 昆明医科大学附属甘美医院昆明650000

目的:探讨三七总皂苷(PNS)通过p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)通路对脂多糖(LPS)诱导活化的BV2小胶质细胞中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达的影响。方法:将BV2小胶质细胞分为空白对照组(Control)、LPS激活组和LPS+三七总皂苷干预组(LPS+... 详细信息

目的:探讨三七总皂苷(PNS)通过p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)通路对脂多糖(LPS)诱导活化的BV2小胶质细胞中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达的影响。方法:将BV2小胶质细胞分为空白对照组(Control)、LPS激活组和LPS+三七总皂苷干预组(LPS+PNS)。CCK-8法检测BV2小胶质细胞的活力,确定最适合的药物干预浓度。利用Western Blot和免疫荧光检测BV2小胶质细胞中p38 MAPK和TNF-α的表达及p38 MAPK磷酸化水平(p-p38 MAPK)变化。结果:与空白对照组相比,PNS对BV2小胶质细胞的细胞活力无显著差异,最终选定100 mg/L作为药物干预浓度。Western Blot、免疫荧光结果提示,LPS激活后,BV2小胶质细胞中TNF-α的表达显著升高,p38 MAPK磷酸化水平增加(P0.05)。此外,p38 MAPK在各组的变化无显著性差异(P>0.05)。结论:PNS可能通过p38 MAPK通路抑制活化的BV2小胶质细胞分泌的炎性因子TNF-α的表达。

关键词：三七总皂苷(PNS) p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK) 脂多糖(LPS) 肿瘤坏死因子-α(TNF-α) BV2小胶质细胞

力学刺激通过PI3K/Akt通路促进骨质疏松小鼠的脂解和骨生成

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天津医科大学学报 2024年第2期30卷 144-151页

作者：吴秋李心乐张平天津医科大学基础医学院人体解剖与组织胚胎学系天津300070

目的:探究力学刺激对骨质疏松小鼠脂解和成骨的调节作用。方法:45只雌性C57BL/6小鼠,使用随机数字表法分为假手术组、造模组和力学刺激组,每组15只。在小鼠卵巢去势造模2周后,进行为期2周的膝关节力学刺激(1 N,5 Hz,6 min/d)治疗,治疗... 详细信息

目的:探究力学刺激对骨质疏松小鼠脂解和成骨的调节作用。方法:45只雌性C57BL/6小鼠,使用随机数字表法分为假手术组、造模组和力学刺激组,每组15只。在小鼠卵巢去势造模2周后,进行为期2周的膝关节力学刺激(1 N,5 Hz,6 min/d)治疗,治疗结束后处死动物。通过HE染色和MacNeal′s染色观察股骨的组织病理改变;油红O染色检测成脂分化;ALP染色检测成骨细胞分化;茜素红S染色检测成骨细胞矿化;细胞免疫荧光和Western印迹检测相关蛋白的表达变化。结果:HE染色和油红O染色结果显示,与造模组相比,力学刺激组抑制骨质疏松小鼠脂肪细胞的数量、周长和面积增多(t=4.544、13.042、6.243,均P免疫荧光结果显示,与造模组相比,力学刺激组促进骨质疏松小鼠PI3K/Akt磷酸化和RUNX2表达(t=-4.715、-2.423、-3.873,均P<0.05);Western印迹分析结果表明,与造模组相比,力学刺激组促进PI3K/Akt通路磷酸化(t=-7.751、-6.048,均P<0.01),使脂解相关蛋白p-HSL、ATGL和成骨相关蛋白RUNX2、ALP的表达升高(t=-1.677、-7.59、-14.702、-4.504,均P<0.05)。结论:力学刺激通过促进PI3K/Akt磷酸化改善骨质疏松小鼠脂解功能和骨生成,有效缓解由卵巢去势引起的脂肪增多和骨量降低。

关键词：力学刺激脂解脂肪细胞成骨细胞骨形成

髓系细胞触发受体2及其信号通路在恶性肿瘤中作用的研究进展

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生理科学进展 2024年第2期55卷 133-138页

作者：齐书畅冯友新刘茜茜关玉雪吴波首都医科大学临床医学专业北京100069 首都医科大学基础医学院人体解剖与组织胚胎学系北京100069

髓系细胞触发受体2(triggering receptors expressed on myeloid cells,TREM2)属于免疫球蛋白超家族成员,是一种跨膜受体,主要在髓系细胞和小胶质细胞中表达。TREM2与相应配体结合后,通过胞内接头蛋白DAP12/DAP10激活下游信号通路,起到... 详细信息

髓系细胞触发受体2(triggering receptors expressed on myeloid cells,TREM2)属于免疫球蛋白超家族成员,是一种跨膜受体,主要在髓系细胞和小胶质细胞中表达。TREM2与相应配体结合后,通过胞内接头蛋白DAP12/DAP10激活下游信号通路,起到重要的免疫信号传递作用。TREM2参与调节多种生物学过程,包括细胞吞噬、炎症反应和代谢过程等,在多种疾病的发生发展中发挥重要作用。近年研究表明,TREM2在恶性肿瘤的发生和发展过程中扮演重要角色。除了调控肿瘤细胞自身的生物学行为外,TREM2还能够调节肿瘤微环境内免疫细胞的活性和功能,参与抑制性免疫微环境的形成。本文着重概述TREM2对不同类型恶性肿瘤的调控作用,并对未来TREM2的靶向治疗相关研究进行展望,旨在为肿瘤防治领域的研究提供新的思路和观点。

关键词：肿瘤肿瘤微环境巨噬细胞髓系细胞触发受体2

大麻二酚对多重脑震荡大鼠NLRP3炎性小体表达的影响

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神经解剖学杂志 2024年第1期40卷 98-104页

作者：于春泽杨丽芳段兆达杨毓甲吴春云于建云杨力昆明医科大学基础医学院人体解剖与组织胚胎学系昆明650500 本溪市中心医院麻醉科本溪117099 昆明医科大学法医学院昆明650500

目的:探究大麻二酚(CBD)对多重脑震荡(MCC)大鼠NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)炎性小体表达的影响。方法:制备大鼠多重脑震荡模型,分为Sham组、MCC组、溶剂组(MCC+TW)、CBD-L组(10 mg/kg)及CBD-H组(40 mg/kg)。应用免疫荧光双... 详细信息

目的:探究大麻二酚(CBD)对多重脑震荡(MCC)大鼠NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)炎性小体表达的影响。方法:制备大鼠多重脑震荡模型,分为Sham组、MCC组、溶剂组(MCC+TW)、CBD-L组(10 mg/kg)及CBD-H组(40 mg/kg)。应用免疫荧光双标染色法观测脑内NLRP3与小胶质细胞的变化,并用Western Blot检测NLRP3炎性小体的表达变化。结果:免疫荧光双标染色显示,MCC后皮质区大量lectin阳性小胶质细胞激活,胞体增大,小胶质细胞中NLRP3的免疫荧光强度明显升高(P<0.05);给予CBD可下调激活的小胶质细胞内NLRP3的表达,且CBD-H组较CBD-L组效果更明显(P<0.05)。Western Blot显示,大鼠MCC后皮质、海马及基底节中NLRP3、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1(caspase-1)和凋亡相关斑点样蛋白(ASC)的表达水平显著升高(P<0.05),且皮质区升高最明显;CBD-L组和CBD-H组中上述蛋白表达下降(P<0.05)。结论:大麻二酚可抑制多重脑震荡大鼠脑内NLRP3炎性小体表达,发挥抗炎保护作用。

关键词：大麻二酚多重脑震荡 NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3) 炎症