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运用微流控技术分析虫草素对剪切诱导血小板聚集和活化的抑制效果

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中国药学杂志 2024年第6期59卷 541-548页

作者：高雪梅张天聪黄小静宦宣容李远重庆医科大学附属永川医院中心实验室重庆402160

目的分析虫草素对不同非生理性剪切率诱导的血小板聚集和活化的抑制效果。方法采用软光刻工艺加工聚二甲基硅氧烷-玻璃微通道芯片。收集健康志愿者枸橼酸钠抗凝全血,用钙黄绿素对血小板进行染色标记,并以虫草素体外孵育后,分别以14.7... 详细信息

目的分析虫草素对不同非生理性剪切率诱导的血小板聚集和活化的抑制效果。方法采用软光刻工艺加工聚二甲基硅氧烷-玻璃微通道芯片。收集健康志愿者枸橼酸钠抗凝全血,用钙黄绿素对血小板进行染色标记,并以虫草素体外孵育后,分别以14.7和50μL·min^(-1)流过带有0.5 mm长的80%狭窄的通道150 s,同时用荧光显微镜实时拍摄血小板在微通道表面的黏附聚集图像;用Image J分析荧光图片,以血小板表面覆盖率作为血小板聚集的量化指标。流式细胞术分析虫草素对血小板钙离子动员,单核细胞-血小板聚集体的抑制效果,并通过凝血检测和溶血实验对虫草素出血风险以及血液相容性做评估。结果虫草素可抑制剪切诱导的血小板聚集。在14.7和50μL·min^(-1)条件下,血小板聚集均可被虫草素抑制。虫草素抑制血小板钙离子动员和单核细胞-血小板聚集具有剪切力相关性,并且对外源性凝血途径和内源性凝血途径无影响,具有良好血液相容性。结论虫草素可有效抑制剪切率诱导的血小板聚集,是一种有潜力的抗血小板药物。

关键词：血小板聚集微流控技术壁剪切率虫草素

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衰老与年龄相关性黄斑变性

中华实验眼科杂志 2024年第1期42卷 76-79页

作者：雷艺(综述) 颜华(审校) 天津医科大学总医院眼科天津医科大学天津300052

随着人口老龄化,与衰老相关的眼病发病率也逐渐升高,尤其是年龄相关性黄斑变性。近年来在年龄相关性黄斑变性(AMD)的治疗方面取得了一定的进展,但其仍然是老年人视力障碍和盲的主要原因之一。目前,大量研究认为AMD主要由衰老和炎症两方... 详细信息

随着人口老龄化,与衰老相关的眼病发病率也逐渐升高,尤其是年龄相关性黄斑变性。近年来在年龄相关性黄斑变性(AMD)的治疗方面取得了一定的进展,但其仍然是老年人视力障碍和盲的主要原因之一。目前,大量研究认为AMD主要由衰老和炎症两方面因素共同作用造成的。尽管更多的研究聚焦于炎症对AMD的作用,衰老作为其重要相关因素,也同样值得我们深入探究。本文就衰老造成的物质堆积、吞噬功能异常、线粒体功能异常和氧化应激损伤等与AMD的发生和发展的密切关系进行综述,以期提高临床医生对AMD的认知。

关键词：衰老年龄相关性黄斑变性 Bruch膜氧化应激

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纳米探针在毒品分析领域的研究进展

中国无机分析化学 2024年

作者：李欣新疆医科大学中心实验室

毒品问题不仅关乎人们的生活健康，还有严重影响社会的稳定。基于纳米材料高选择性与快速响应等优点，开发精准、迅速，便于现场使用的毒品分析方法是目前控制毒品滥用的一个重要方向。总结了近年来金属量子点、碳纳米材料、纳米金颗粒... 详细信息

毒品问题不仅关乎人们的生活健康，还有严重影响社会的稳定。基于纳米材料高选择性与快速响应等优点，开发精准、迅速，便于现场使用的毒品分析方法是目前控制毒品滥用的一个重要方向。总结了近年来金属量子点、碳纳米材料、纳米金颗粒及其他新型纳米材料等，介绍了用于毒品分析的纳米探针的研究机理及应用现状，并对探针存在的问题及研究方向进行了展望，为进一步进行该领域的研究提供理论支撑。

关键词：毒品分析纳米探针特异检测

血浆胎盘源性细胞外囊泡异常增高预警重度子痫前期患者不良妊娠结局

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中华检验医学杂志 2024年第5期47卷 561-569页

作者：陈媛媛门剑龙韩姹天津医科大学总医院妇产科天津市女性生殖健康与优生重点实验室天津300052 天津医科大学总医院精准医学中心天津300052

目的:评价血浆中胎盘源性细胞外囊泡(pcEV)及其清除蛋白乳凝集素(Lactadherin)预测重度子痫前期(sPE)患者妊娠不良结局的诊断性能。方法:回顾性病例对照研究。收集2018年1月31日至2019年1月31日产检并分娩妊娠27~37周诊断为sPE的患者60... 详细信息

目的:评价血浆中胎盘源性细胞外囊泡(pcEV)及其清除蛋白乳凝集素(Lactadherin)预测重度子痫前期(sPE)患者妊娠不良结局的诊断性能。方法:回顾性病例对照研究。收集2018年1月31日至2019年1月31日产检并分娩妊娠27~37周诊断为sPE的患者60例,年龄32(29,36)岁,根据发生终点事件(胎儿窘迫和/或胎儿生长受限)情况,将sPE患者进一步分为事件组34例,无事件组26例。同孕周健康孕妇33例为孕妇对照组,年龄31(29,36)岁。非孕期健康女性25例为健康对照组,年龄26(25,38)岁。采用流式细胞仪检测胎盘碱性磷酸酶抗体阳性者为pcEV,同时膜表面表达磷脂酰丝氨酸者,即膜联蛋白V(AV)阳性为AV+pcEV。ELISA法检测Lactadherin水平。用Logistic回归做多元相关性分析,用受试者工作特征(ROC)曲线评价pcEV和Lactadherin预测妊娠不良结局的性能。用Kaplan-Meier曲线进行生存分析。用Cox比例风险回归模型计算风险比(HR)。结果:sPE组血浆AV+pcEV水平为8260(4991,16751)个/μl,高于健康孕妇组的1088(784,1871)个/μl和健康对照组的206(116,256)个/μl(H=94.490,P<0.05)。事件组sPE患者血浆AV+pcEV水平为11225(7496,20599)个/μl,高于无事件组的5199(2914,8347)个/μl(U=178,P<0.05)。sPE组血浆Lactadherin为2635(1876,3137)pg/ml,高于健康孕妇组的1597(1287,1818)pg/ml和健康对照组的1123(749,1405)pg/ml(H=54.307,P<0.05)。ROC曲线显示,AV+pcEV预测sPE患者77 d内发生胎儿窘迫和/或胎儿生长受限事件的临界值为6524个/μl时,曲线下面积(AUC)为0.799(95%CI 0.680~0.917)。Lactadherin预测的临界值为2336.5 pg/ml时,AUC为0.702(95%CI 0.564~0.841)。Logistic回归分析显示,sPE患者AV+pcEV水平与患者24 h尿蛋白定量(OR=9.288,95%CI 1.993~43.293)以及患者是否需要联合用药降压治疗(OR=18.690,95%CI 1.919~182.077)有相关性(P<0.05)。生存分析显示AV+pcEV水平高于临界值的sPE患者在77 d内的发生胎儿窘迫和/或胎儿生长受限事件的累积概率增高(Log-rankχ^(2)=21.430,P<0.05)。Cox比例回归模型显示AV+pcEV水平可独立识别胎儿窘迫和/或胎儿生长受限事件(HR=7.983,P<0.05)。结论:妊娠晚期孕妇血浆中pcEV水平变化与PE病情发展相关,高浓度pcEV提示胎儿窘迫、胎儿生长受限风险增加,可作为预警不良妊娠结局的有效标志物。

关键词：先兆子痫胎盘源性细胞外囊泡乳凝集素流式细胞技术妊娠结局

IS91的遗传特点及其与细菌耐药关系的研究进展

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中华微生物学和免疫学杂志 2024年第8期44卷 727-733页

作者：熊在坤陈如才赵彩冰王鹏飞昆明医科大学第二附属医院中心实验室昆明650101

细菌抗生素耐药已成为当今世界面临的严峻问题,携带耐药基因的可移动遗传元件(mobile genetic elements,MGEs)在同种或不同种细菌之间的快速传播加速了耐药性的形成,这给临床治疗细菌感染带来了巨大挑战。插入序列(insertion sequence,... 详细信息

细菌抗生素耐药已成为当今世界面临的严峻问题,携带耐药基因的可移动遗传元件(mobile genetic elements,MGEs)在同种或不同种细菌之间的快速传播加速了耐药性的形成,这给临床治疗细菌感染带来了巨大挑战。插入序列(insertion sequence,IS)是最简单的MGE,其编码一个转座酶基因且它的两侧存在反向末端重复序列。IS91家族是目前已知的26种插入序列家族成员之一,其名下现有34名家族成员。近期研究表明,IS91家族的许多成员与抗生素耐药性密切相关,因此本文将从IS91家族的发现、遗传特征、IS91与插入序列共同区(ISCR)的异同以及其与耐药和毒力基因传播的关系等方面展开综述,以期为未来细菌耐药性研究提供参考。

关键词：细菌耐药插入元件 IS91家族插入序列共同区(ISCR)

实验研究THP1细胞过表达腺病毒介导的PEDF抑制炎症过程中关键基因的鉴别

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中华实验眼科杂志 2024年第10期42卷 887-897页

作者：张媛媛吴红莲徐嫚鸿李筱荣邵彦天津医科大学眼科医院、天津医科大学眼视光学院、天津医科大学眼科研究所、天津市视网膜功能与疾病重点实验室、天津市眼科学与视觉科学国际联合研究中心天津300384

目的鉴别人单核细胞白血病细胞THP1过表达腺病毒介导的色素上皮衍生因子(PEDF)抑制炎症过程中的关键基因。方法对THP1细胞过表达腺病毒介导的PEDF进行蛋白质组学分析。将THP1细胞分为GFP组和PEDF组,分别用GFP腺病毒和PEDF腺病毒感染细胞... 详细信息

目的鉴别人单核细胞白血病细胞THP1过表达腺病毒介导的色素上皮衍生因子(PEDF)抑制炎症过程中的关键基因。方法对THP1细胞过表达腺病毒介导的PEDF进行蛋白质组学分析。将THP1细胞分为GFP组和PEDF组,分别用GFP腺病毒和PEDF腺病毒感染细胞;将THP1细胞分为甘露醇组、高糖组、高糖+GFP组和高糖+PEDF组,分别用D-甘露醇、D-无水葡萄糖、GFP腺病毒和PEDF腺病毒培养4、4、3和3 d;将Pedf^(-/-)小鼠采用随机数表法分为Pedf^(-/-)组和Pedf^(-/-)糖尿病组,每组12只,另取10只C57BL/6小鼠为对照组,取小鼠视网膜进行实验。采用实时荧光定量PCR验证差异表达基因(DEGs)的mRNA在视网膜组织和THP1细胞系中的表达水平。与GSE5504数据集进行DEGs交集,使用String数据库构建蛋白-蛋白相互作用(PPI)网络,Cytoscape软件及MCODE应用程序提取PPI网络模块,与Set1数据集取交集并找到关键基因。采用Western blot在THP1细胞和Pedf^(-/-)小鼠中验证关键基因的表达水平。结果通过蛋白质组学和生物信息学分析,筛选出Set1数据集中的105个差异蛋白。实时荧光定量PCR结果显示,PEDF组细胞中ARF5、TCF25和KCTD9 mRNA相对表达量明显高于GFP组,RNPS1、CSF1R、OGA、IBA57和MGST2 mRNA相对表达量明显低于GFP组,差异均有统计学意义(均P<0.001)。对照组、Pedf^(-/-)组和Pedf^(-/-)糖尿病组视网膜组织中表达显著下调的TCF25、KCTD9、ARF5 mRNA和表达显著上调的CSF1R、RNPS1、IBA57 mRNA相对表达量总体比较,差异均有统计学意义(F=64.057、27.561、37.179、65.757、44.024、34.248,均P<0.001);与对照组相比,Pedf^(-/-)组TCF25、KCTD9、ARF5 mRNA相对表达量降低,CSF1R、RNPS1 mRNA相对表达量升高,差异均有统计学意义(均P<0.05);Pedf^(-/-)糖尿病组TCF25、KCTD9、ARF5 mRNA相对表达量降低,CSF1R、RNPS1、IBA57 mRNA相对表达量升高,差异均有统计学意义(均P<0.05)。与Pedf^(-/-)组相比,Pedf^(-/-)糖尿病组TCF25 mRNA相对表达量降低,CSF1R、RNPS1和IBA57 mRNA相对表达量升高,差异均有统计学意义(均P<0.05)。Set1数据集与GSE5504数据集交集后得到20个差异蛋白,主要富集于基因表达的正向调控、ERK1和ERK2级联的正向调节、胰岛素分泌的正向调节参与细胞对葡萄糖刺激的反应和抗原加工与递呈通路上。通过构建PPI网络和Cytoscape软件中MCODE插件筛选出关键基因CSF 1 R。Western blot结果显示,高糖组和高糖+GFP组中细胞CSF1R相对表达量分别为1.961±0.085和1.000±0.069,分别高于甘露醇组的1.000±0.072和高糖+PEDF组的0.469±0.079,差异均有统计学意义(t=14.940、8.765,均P<0.01);Pedf^(-/-)糖尿病组中视网膜CSF1R相对表达量为1.633±0.192,高于Pedf^(-/-)组的1.000±0.050,差异有统计学意义(t=5.537,P<0.01)。结论CSF 1 R可能为THP1细胞过表达腺病毒介导的PEDF抑制炎症过程中的关键基因和治疗靶点。

关键词：糖尿病视网膜病变炎症色素上皮衍生因子生物信息学 CSF 1 R基因 THP1细胞

早发性白内障与年龄相关性白内障患者房水代谢组学的差异研究

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中华眼科杂志 2024年第6期60卷 518-527页

作者：陈曦腾高楠寇振宇吴桂佳蒋元丰杨军白小妹东莉洁田芳天津医科大学眼科医院、天津医科大学眼视光学院、天津医科大学眼科研究所、国家眼耳鼻喉疾病临床医学研究中心天津市分中心、天津市视网膜功能与疾病重点实验室天津300384

目的:探讨早发性白内障与年龄相关性白内障患者房水中代谢物及代谢通路的差异。方法:代谢组学研究。收集2020年8月至2022年9月就诊于天津医科大学眼科医院的16例(17只眼)白内障患者。其中早发性白内障8例(8只眼),年龄相关性白内障8例(9... 详细信息

目的:探讨早发性白内障与年龄相关性白内障患者房水中代谢物及代谢通路的差异。方法:代谢组学研究。收集2020年8月至2022年9月就诊于天津医科大学眼科医院的16例(17只眼)白内障患者。其中早发性白内障8例(8只眼),年龄相关性白内障8例(9只眼)。收集患者年龄、性别、术前裸眼视力、眼压、晶状体功能失调指数和眼轴长度等一般临床资料,并于白内障摘除术中留取房水和前囊膜组织标本,采用液相色谱-串联质谱法非靶向检测房水中的代谢物,进一步使用主成分分析、差异分析、聚类分析、相关性分析筛选差异代谢物,并根据代谢物的变化倍数(FC)对差异代谢物进行排名。使用受试者工作特征(ROC)曲线分析和代谢富集分析来筛选两组间的差异通路,并鉴定早发性白内障的生物标志物。前囊膜组织行免疫组织化学染色。采用比色法检测丙酮酸含量验证代谢组学分析结果。结果:8例早发性白内障患者中男性7例,女性1例,年龄(37.50±4.90)岁;8例年龄相关性白内障患者中男性7例,女性1例,年龄(73.44±5.22)岁;基线资料除年龄外差异均无统计学意义(P>0.05)。差异分析共鉴别出347种差异代谢物,其中10种经ROC曲线分析确定为潜在的早发性白内障生物标志物(均P<0.05),其中阳离子(POS)模式5种,分别是丙氧卡因(log 2FC=7.26)、2-甲基-2,3,4,5-四氢-1,5-苯并氧氮杂卓-4-酮(log 2FC=6.35)、l-焦谷氨酸(log 2FC=-1.72)、亮氨酰脯氨酸(log 2FC=-0.77)和胆碱(log 2FC=-0.56),阴离子(NEG)模式5种,分别是N-苯乙酰谷氨酰胺(log 2FC=-1.84)、丙酮酸(log 2FC=1.07)、抗坏血酸(log 2FC=0.92)、假尿嘧啶核苷(log 2FC=-0.68)和棕榈酸(log 2FC=-0.51)。代谢富集分析共富集到72条差异通路(POS模式32条,NEG模式40条),其中谷胱甘肽代谢及半胱氨酸和蛋氨酸代谢、糖酵解或糖异生、丙酮酸代谢、三羧酸循环两组间的差异有统计学意义(P<0.05)。验证结果显示早发性白内障患者房水中乳酸脱氢酶减少,丙酮酸升高(P<0.05)。结论:丙酮酸等10种代谢物可能是潜在的早发性白内障生物标志物;谷胱甘肽代谢、半胱氨酸和蛋氨酸代谢、糖酵解或糖异生、丙酮酸代谢和三羧酸循环代谢通路在早发性白内障患者中明显失调。

关键词：白内障眼房水代谢组学生物标记计算生物学

Micro CT检测小鼠骨微结构指标受标本通量影响的方案设计

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实验技术与管理 2024年第9期41卷 35-40页

作者：赵媛媛雷建锋首都医科大学中心实验室北京100069

在过去几十年中,Micro CT已成为评估小动物骨骼微结构的金标准。然而Micro CT得到的定量指标会受到很多因素影响,如成像参数、重建像素大小和图像分割阈值等。为了提高相关实验准确性和可重复性,以及在各个研究间进行更可靠的比较,结合... 详细信息

在过去几十年中,Micro CT已成为评估小动物骨骼微结构的金标准。然而Micro CT得到的定量指标会受到很多因素影响,如成像参数、重建像素大小和图像分割阈值等。为了提高相关实验准确性和可重复性,以及在各个研究间进行更可靠的比较,结合小鼠离体股骨的Micro CT实验,设计不同通量的标本及组合方案来验证骨微结构测量结果是否受其影响。结果表明,标本通量及组合方式的不同对骨微结构指标测量没有产生显著性影响,但高通量扫描会降低输出图像的质量,可能会减弱组间差异的检测能力,仍需注意其产生的影响。因此在确定实验方案前需探讨标本通量对实验结果是否产生影响,或者在整个研究中保持标本通量和标本摆放方式的一致性。

关键词：微型CT 骨皮质骨小梁微结构指标扫描通量标本摆放方法

PCOS患者妊娠期过量睾酮影响男性子代生殖发育的机制研究进展

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中华生殖与避孕杂志 2024年第5期44卷 541-547页

作者：连超周宇居蓉陈建泉南京医科大学附属江宁医院中心实验室南京210000 南京医科大学附属江宁医院妇产科南京210000

多囊卵巢综合征患者典型特征之一是体内高雄激素分泌。其妊娠期母体过量睾酮水平不仅影响女性后代生殖健康,也影响男性后代生殖健康。本文主要针对PCOS患者妊娠期母源性睾酮暴露影响男性胎儿生殖发育及精子发生的机制进行综述,为妊娠期... 详细信息

多囊卵巢综合征患者典型特征之一是体内高雄激素分泌。其妊娠期母体过量睾酮水平不仅影响女性后代生殖健康,也影响男性后代生殖健康。本文主要针对PCOS患者妊娠期母源性睾酮暴露影响男性胎儿生殖发育及精子发生的机制进行综述,为妊娠期高雄激素影响男性后代生殖健康的机制研究与临床干预提供参考。

关键词：睾酮精子发生多囊卵巢综合征 cAMP反应元件结合蛋白