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长链非编码RNA LINC00342在头颈鳞癌中的生物学功能及临床意义

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中华耳鼻咽喉头颈外科杂志 2023年第3期58卷 240-249页

作者：董阳洋郑希望买尔哈巴·米吉提田然郭庆博吴勇延高伟温树信山西医科大学第一医院耳鼻咽喉头颈外科耳鼻咽喉头颈肿瘤山西省重点实验室太原030001 深圳市龙岗区耳鼻咽喉医院耳鼻咽喉头颈外科深圳518172 山西白求恩医院耳鼻咽喉头颈外科太原030032

目的明确长链非编码RNA LINC00342表达水平与头颈鳞状细胞癌(简称鳞癌)患者临床病理参数的关系,研究LINC00342在头颈鳞癌细胞中的生物学功能。方法分析癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)数据库头颈鳞癌转录组中LINC00342的... 详细信息

目的明确长链非编码RNA LINC00342表达水平与头颈鳞状细胞癌(简称鳞癌)患者临床病理参数的关系,研究LINC00342在头颈鳞癌细胞中的生物学功能。方法分析癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)数据库头颈鳞癌转录组中LINC00342的表达,利用转录组测序技术检测山西医科大学第一医院27例喉鳞癌组织中该基因的表达;利用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,qPCR)检测人胚肺二倍体细胞2BS和头颈鳞癌细胞系FD-LSC-1、CAL-27、Detroit562中LINC00342的表达水平;使用RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术敲降头颈鳞癌细胞中该基因的表达,利用细胞增殖检测试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)、克隆形成、流式细胞术、Transwell迁移和侵袭等实验检测肿瘤细胞恶性表型的变化;生物信息学方法构建以LINC00342为核心的竞争性内源RNA(competing endogenous RNA,ceRNA)调控网络,并进行基因本体论(gene ontology,GO)富集分析。使用SPSS 25.0软件和GraphPad Prism 6软件进行统计学分析及作图。结果TCGA数据库收录的头颈鳞癌组织与数据库对应的正常组织相比,LINC00342的相对表达量差异无统计学意义(P=0.522);但其表达水平与患者颈淋巴结转移、病理学分级呈正相关,男性患者的表达水平高于女性患者(P值均头颈鳞癌细胞系FD-LSC-1、CAL-27和Detroit562中表达均显著上调(t值分别为-12.17、-23.26和-388.57,P值均头颈鳞癌细胞FD-LSC-1、CAL-27和Detroit562增殖(t值分别为8.95和4.84,2.70和5.55,2.02和3.70)、克隆形成(t值分别为6.66和6.17,7.38和11.65,4.90和5.79)、迁移(t值分别为8.21和7.19,5.76和6.46,6.28和9.92)和侵袭能力(t值分别为9.29和10.25,11.30和11.36,8.02和8.66),同时促进FD-LSC-1及CAL-27细胞凋亡(t值分别为-2.21和-5.83,-3.05和-5.25),差异有统计学意义(P值均头颈鳞癌恶性进展相关,具有促进头颈鳞癌细胞增殖、迁移、侵袭以及拮抗凋亡的重要生物学功能,是头颈鳞癌潜在的重要分子标志物。

关键词：头颈部肿瘤癌,鳞状细胞癌基因长链非编码RNA LINC00342 侵袭转移

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喉咽及食管上段异物181例临床分析

中华医学杂志 2017年第14期97卷 1102-1103页

作者：楚士东慈军方英管骅邹建军浙江省中西医结合医院耳鼻咽喉头领外科杭州310003

喉咽及食管上段异物为耳鼻咽喉头颈外科门急诊常见病，目前耳鼻咽喉头颈外科医师临床上仍沿用间接喉镜和纤维电子喉镜取喉咽部异物，硬质食管镜取食管上段异物。但往往受制于视野不清和光线弱，或者操作需双人配合。我们综合运用3种方... 详细信息

喉咽及食管上段异物为耳鼻咽喉头颈外科门急诊常见病，目前耳鼻咽喉头颈外科医师临床上仍沿用间接喉镜和纤维电子喉镜取喉咽部异物，硬质食管镜取食管上段异物。但往往受制于视野不清和光线弱，或者操作需双人配合。我们综合运用3种方法取喉咽及食管上段异物：硬质鼻内镜视频显示下取异物，支撑喉镜下硬质鼻内镜视频显示下取异物，颈部切开取异物等。其中硬质鼻内镜的创新性运用，直观便捷，提高了检出率和取出率，也减少了医源性的异物嵌顿。现回顾性分析总结181例临床资料，报道如下。

关键词：食管上段异物喉咽部异物临床分析耳鼻咽喉头颈外科视频显示硬质食管镜鼻内镜电子喉镜

1190例非综合征性耳聋患者GJB2基因突变序列分析

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中华医学杂志 2007年第40期87卷 2814-2819页

作者：于飞韩东一戴朴康东洋张昕刘新朱庆文袁永一孙勍薛丹丹李梅刘军袁慧军杨伟炎解放军总医院耳鼻咽喉头颈外科

目的分析非综合征性耳聋(NSHI)患者 GJB2基因的突变序列,为绘制中国 NSHI 人群 GJB2基因的突变图谱奠定基础。方法收集北京、河北、黑龙江、吉林、内蒙古、山西、河南、湖北、陕西、甘肃、宁夏、青海、安徽省、江苏、上海、福建、广东... 详细信息

目的分析非综合征性耳聋(NSHI)患者 GJB2基因的突变序列,为绘制中国 NSHI 人群 GJB2基因的突变图谱奠定基础。方法收集北京、河北、黑龙江、吉林、内蒙古、山西、河南、湖北、陕西、甘肃、宁夏、青海、安徽省、江苏、上海、福建、广东、广西等地区聋哑学校1190例 NSHI 患者及301例正常对照的血样,进行 GJB2基因聚合酶链反应(PCR)扩增产物测序,检测 GJB2基因的序列改变,对 GJB2基因的序列改变进行统计。结果 1190例患者中,共检测到明确病理性突变16种。NSHI 患者组和对照组之间235delC、299-300delAT、176del16bp 差异有统计学意义(均 P<0.01)。结论确定了235delC 为中国 NSHI 人群中 GJB2基因最常见的突变方式,其次为299-300delAT、176del16bp,检测结果为绘制中国 NSHI 人群 GJB2基因的突变图谱奠定了理论基础。

关键词： GJB2基因突变非综合征性耳聋

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P物质调控肥大细胞脱颗粒的实验研究

中华耳鼻咽喉头颈外科杂志 2016年第9期51卷 675-680页

作者：程冯丽李秋婷赵长青安云芳祁雪萍山西医科大学第二医院耳鼻咽喉头颈外科太原030001 临汾市人民医院耳鼻咽喉头颈外科 041000

目的利用体外诱导小鼠骨髓细胞获得的高纯度肥大细胞（mast cells，MC），探讨白细胞介素（IL）4参与诱导获得的MC中神经激肽受体1（neurokinin receptor 1，NK－1R）和Fc段受体Ⅰα（FcεRⅠα）的表达情况；建立神经肽P物质（substanc... 详细信息

目的利用体外诱导小鼠骨髓细胞获得的高纯度肥大细胞（mast cells，MC），探讨白细胞介素（IL）4参与诱导获得的MC中神经激肽受体1（neurokinin receptor 1，NK－1R）和Fc段受体Ⅰα（FcεRⅠα）的表达情况；建立神经肽P物质（substance P，SP）介导的MC脱颗粒模型，初步探讨SP除通过其特异性受体NK－1R调控MC脱颗粒外，是否还存在FcεRⅠα介导的途径。方法从BALB/c小鼠股骨提取骨髓细胞于RPMI 1640完全培养基中，分不同浓度IL－4诱导组即100 μg/L干细胞因子（stem cell factor，SCF）、15 μg/L IL－3以及0、10、15、20、25 μg/L IL－4中进行体外培养。每周换液，将悬浮细胞移入新的培养体系。倒置显微镜观察并记录细胞生长情况。4周后收集各组细胞及上清液，进行甲苯胺蓝染色、流式细胞术检测CD117鉴定MC，流式细胞术以及蛋白印迹Western blot法分析不同组骨髓MC中FcεRⅠα和NK－1R的表达情况。经鉴定培养成功的骨髓MC中分别加入不同浓度的SP（0、0.01、0.1、1.0、10.0 mg/L）孵育0.5 h，检测上清液和细胞内组胺含量，计算组胺释放率。结果不同浓度IL－4（0、10、15、20、25 μg/L）诱导获得MC表面CD117的阳性率分别为（94.8±1.3）%、（95.7±2.5）%、（94.1±1.3）%、（96.6±1.0）%、（96.6±1.1）%，各组比较差异无统计学意义（F＝8.51, P〉0.05）；FcεRⅠα的阳性率分别为（81.5±2.6）%、（84.2±1.8）%、（91.8±2.0）%、（91.6±1.6）%、（93.0±2.6）%，各组比较差异有统计学意义（F＝15.76, P〈0.05）。不同浓度SP（0、0.01、0.1、1.0、10 mg/L）刺激，20 μg/L IL－4诱导组MC释放组胺含量分别为（20.08±1.50）%、（32.76±2.99）%、（42.90±3.36）%、（50.21±1.29）%、（56.10±3.60）%，对照组分别为（19.37±2.02）%、（19.50±1.50）%、（21.77±1.91）%、（32.00±2.50）%、（33.56±1.25）%，各组间比较差异有统计学意义（P值均〈0.05）。20 μg/L IL－4诱导组MC表面FcεRⅠα和NK－1R表达为最佳状态。此时低浓度SP（0.01 mg/L）激活进而发生脱颗粒，其组胺释放率与SP浓度呈正相关；0 μg/L IL－4诱导组表达FcεRⅠα，几乎不表达NK－1R，此时在高浓度SP（1.0 mg/L）作用时MC仍可产生应答。结论骨髓细胞在SCF、IL－3或SCF、IL－3和IL－4诱导下均可定向分化为MC。而经IL－4参与诱导时可促使骨髓MC高表达FcεRⅠα和NK－1R，成功建立SP介导的MC脱颗粒模型。SP调控MC脱颗粒存在其特异性受体NK－1R介导的非免疫性及FcεRⅠα介导的免疫性双途径。

关键词：肥大细胞 P物质受体白细胞介素-4

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甲状腺神经鞘瘤侵犯气管1例

中华耳鼻咽喉头颈外科杂志 2022年第4期57卷 503-504页

作者：宫向荣孙艳清于丽张庆泉烟台市蓬莱人民医院耳鼻咽喉头颈外科烟台265600 烟台毓璜顶医院耳鼻咽喉头颈外科烟台264000

本文报道1例发生于右侧甲状腺的神经鞘瘤患者,肿瘤侵及气管发生呼吸困难,行右侧甲状腺及峡部肿瘤切除+受累气管的切除造口手术。术后6个月行气管造口修补,修补术后随访1年肿瘤无复发,患者呼吸功能良好,伴轻度声音嘶哑。

关键词：右侧甲状腺神经鞘瘤肿瘤切除声音嘶哑呼吸困难呼吸功能峡部气管造口

前颅底生活质量问卷调查表中文版在前、中颅底肿瘤中的应用

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中华耳鼻咽喉头颈外科杂志 2019年第9期54卷 641-646页

作者：魏婷婷王振霖齐岩刘俊其刘剑锋魏宏权任翔中国医科大学附属第一医院耳鼻咽喉头颈外科中日友好医院耳鼻咽喉头颈外科首都医科大学宣武医院耳鼻咽喉头颈外科颅底外科中心

目的研制前颅底生活质量问卷调查表(anterior skull base questionnaire,ASBQ)中文版并验证其在前、中颅底肿瘤中的应用。方法对英文版源量表进行翻译、回译、初测试及调试,得到正式稿件。于2016年10月至2018年12月,纳入就诊于首都医... 详细信息

目的研制前颅底生活质量问卷调查表(anterior skull base questionnaire,ASBQ)中文版并验证其在前、中颅底肿瘤中的应用。方法对英文版源量表进行翻译、回译、初测试及调试,得到正式稿件。于2016年10月至2018年12月,纳入就诊于首都医科大学宣武医院和中日友好医院的51例颅底肿瘤患者作为试验组,年龄24～70岁,男性19例,女性32例,包括前颅底肿瘤组27例和中颅底肿瘤组24例。2016年12月至2018年1月,纳入46名健康志愿者作为对照组,年龄18～36岁,女性26名,男性20名。用正式稿件对试验组及对照组人群进行严格测试,并判断其是否适用。采用SPSS 22.0统计软件分别分析试验组、前颅底组、中颅底组以及对照组数据,评估量表的性能。结果在可行性方面,试验组、前颅底组及中颅底组的问卷回收率和有效率均为100%,完成时间分别为(8.7±3.2)、(11.2±4.0)和(7.3±2.1)min。在信度方面,试验组、前颅底组和中颅底组重测信度r分别为0.96、0.99和0.97,分半信度r分别为0.91、0.90和0.96,克朗巴赫系数α分别为0.91、0.95和0.93。在效度方面,量表的内容效度和结构效度良好,试验组、前颅底组和中颅底组的标准效度r分别为－0.483、-0.509和－0.489。在反应度方面,量表可以很好地区分试验组和中颅底组患者术前和术后生活质量的差异。前颅底组术前和术后生活质量的差异未见统计学意义。结论中文版ASBQ有良好的信效度,适合中国前、中颅底肿瘤患者的生活质量临床调查应用,适宜在中国推广。

关键词：颅底肿瘤量表生活质量

喉鳞癌患者血清氨基酸种类和含量差异与临床价值研究

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临床耳鼻咽喉头颈外科杂志 2024年第8期38卷 715-721页

作者：孙洋干明月吴勇延高伟卢岩锦州医科大学附属第一医院耳鼻咽喉头颈外科辽宁锦州121000 深圳市龙岗区耳鼻咽喉医院耳鼻咽喉头颈外科深圳市耳鼻咽喉研究所

目的:检测喉鳞状细胞癌患者与非肿瘤患者外周血清中氨基酸种类及含量差异,探讨他们与喉鳞癌各临床参数之间的关系以及在诊断中的临床价值。方法:采用高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS)法检测锦州医科大学附属第一医院2018年9月-2021年2月... 详细信息

目的:检测喉鳞状细胞癌患者与非肿瘤患者外周血清中氨基酸种类及含量差异,探讨他们与喉鳞癌各临床参数之间的关系以及在诊断中的临床价值。方法:采用高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS)法检测锦州医科大学附属第一医院2018年9月-2021年2月初诊的62例喉鳞癌患者(实验组)和同时期的141例非肿瘤患者(对照组)血清22种非必需氨基酸及必需氨基酸种类与含量差异,应用ROC曲线及多元线性逻辑回归模型对差异性氨基酸在喉鳞癌早期诊断中的效能进行分析。结果:实验组较对照组血清中有14种氨基酸含量存在差异,其中13种氨基酸含量显著高于对照组(P64岁的喉鳞癌患者血清中天冬酰胺的含量高于≤64岁的喉鳞癌患者(P=0.033),有吸烟史的喉鳞癌患者血清中色氨酸含量均低于无吸烟史患者(P=0.033),有饮酒史的喉鳞癌患者血清中瓜氨酸含量高于无饮酒史的喉鳞癌患者(P=0.003)。ROC曲线分析表明,实验组与对照组间存在差异的14种氨基酸中,除同型半胱氨酸和鸟氨酸不具备统计学意义(P>0.05),瓜氨酸和半胱氨酸作为独立因素诊断喉鳞癌的效能相对较高(AUC数值分别为0.856及0.850);而精氨酸作为单独诊断喉鳞癌因素时的灵敏度则最高(0.855);但单独使用瓜氨酸诊断喉鳞癌时其特异度最高(0.830);将12种氨基酸联合应用于检测可显著提高喉鳞癌的诊断效能,AUC为0.946,灵敏度为0.887,特异度为0.894。基于血清差异氨基酸含量建立多元线性逻辑回归模型的风险评分公式,喉鳞癌组的风险评分高于非肿瘤组(P<0.001),风险评分诊断喉鳞癌的AUC为0.953(敏感度和特异度分别为0.957和0.855)。结论:喉鳞癌患者与非肿瘤患者比较,14种氨基酸的含量存在差异,其中13种氨基酸的含量在喉鳞癌患者血清中升高,并与年龄、临床分期、病理分化程度、吸烟以及饮酒具有相关性。联合其中12种氨基酸进行检测可提高喉鳞癌的诊断效能,具备外周血辅助诊断喉鳞癌的潜力。同时建立风险评分模型发现其对于喉鳞癌的诊断效能更高,表明该模型对于辅助诊断喉鳞癌有重要潜在价值。

关键词：喉鳞状细胞癌外周血血清氨基酸高效液相色谱-串联质谱诊断效能

EphA2/E-cadherin在甲状腺乳头状癌中的表达及临床意义

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临床耳鼻咽喉头颈外科杂志 2015年第11期29卷 1020-1023页

作者：刘岩苗玉花李晓明衡水市人民医院耳鼻咽喉头颈外科河北衡水053000 白求恩国际和平医院耳鼻咽喉头颈外科全军耳鼻咽喉头颈外科中心

目的:检测甲状腺乳头状癌组织中EphA2与E-cadherin蛋白的表达及其临床意义,探究两者的相关性。方法:采用免疫组织化学SP/PV方法检测43例甲状腺乳头状癌、11例甲状腺腺瘤、10例癌旁正常甲状腺组织中蛋白EphA2与E-cadherin表达,并观察其... 详细信息

目的:检测甲状腺乳头状癌组织中EphA2与E-cadherin蛋白的表达及其临床意义,探究两者的相关性。方法:采用免疫组织化学SP/PV方法检测43例甲状腺乳头状癌、11例甲状腺腺瘤、10例癌旁正常甲状腺组织中蛋白EphA2与E-cadherin表达,并观察其与临床病理因素的关系。结果:EphA2蛋白在甲状腺乳头状癌中的表达(阳性率58.14%)分别高于甲状腺腺瘤(阳性率18.18%)和正常甲状腺组织(阳性率10.00%)的表达(P0.05),且EphA2与E-cadherin蛋白在甲状腺乳头状癌中的表达呈负相关(r=-0.416,P<0.01)。结论:甲状腺乳头状癌的发生发展与EphA2和E-cadherin蛋白的表达密切相关。

关键词： EphA2 E-cadherin 甲状腺肿瘤免疫组织化学

原花青素介导的自噬流对喉癌细胞增殖影响及其机制探讨

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中华肿瘤防治杂志 2018年第20期25卷 1413-1421页

作者：刘炜于锋周毅波龚辉成张群慧艾毛毛广州医科大学耳鼻咽喉头颈外科研究所广东广州510620 广州市耳鼻咽喉头颈外科医院耳鼻咽喉头颈外科广东广州510620

目的原花青素(procyanidins,OPC)通过抑制细胞周期、促进凋亡等机制发挥抗肿瘤作用。本研究旨在探讨OPC介导的自噬流对喉癌TU686细胞增殖活力的影响,并进一步探究OPC促进喉癌TU686细胞自噬流可能的分子机制。方法单丹磺酰尸胺(dansylc... 详细信息

目的原花青素(procyanidins,OPC)通过抑制细胞周期、促进凋亡等机制发挥抗肿瘤作用。本研究旨在探讨OPC介导的自噬流对喉癌TU686细胞增殖活力的影响,并进一步探究OPC促进喉癌TU686细胞自噬流可能的分子机制。方法单丹磺酰尸胺(dansylcadaverine,MDC)染色法及流式细胞术检测不同浓度OPC对TU686细胞自噬的诱导作用;蛋白质印迹法检测TU686细胞LC3-Ⅱ和p62蛋白表达变化;并从翻译水平检测相关Atg蛋白表达,使用SiRNA干扰Atg5基因,并采用q-PCR和蛋白质印迹法检测干扰后Atg5转录和翻译水平变化,进一步检测干扰Atg5对LC3-Ⅱ和p62影响;检测PI3K/AKT途径中活化PI3Kp85α和磷酸化P-AKT1蛋白表达情况,采取PI3K/AKT途径激动剂胰岛素样生长因子-1(insulin-like growth factors-1,IGF-1)与OPC共培养细胞的方式以阐明PI3K/AKT途径在OPC诱导的自噬流中具体作用。CCK-8法和台盼蓝染色法检测OPC诱导的自噬流对TU686细胞增殖活力影响。结果 OPC处理组(20~40μg/mL)LC3-Ⅱ相对蛋白表达量高于0加药组,F=1 688.710,P<0.001;p62相对蛋白表达量低于0加药组,F=73.875,P<0.001。40μg/mL OPC作用后Atg5和Atg12蛋白相对表达量分别为3.20±0.08和7.52±0.13,高于0加药组,F 值均为-3.079,P 值均为0.012;40μg/mL OPC作用后PI3Kp85α和P-AKT1蛋白相对表达量分别为0.18±0.01和0.48±0.06,低于0加药组,F 值均为3.079,P 值均为0.012。IGF-1可以逆转OPC引起的LC3-Ⅱ升高和p62降低,与CON组相比,OPC组、IGF-1组和OPC+IGF-1组LC3-Ⅱ相对表达量分别为10.32±0.31、1.02±0.20和5.73±0.11,均P<0.001;p62相对表达量分别为0.64±0.02、1.03±0.02和0.87±0.01,均P<0.001。3-MA预处理后可以逆转OPC引起的LC3-Ⅱ和p62变化,与CON组相比,OPC组、3-MA组和OPC+3-MA组LC3-Ⅱ蛋白相对表达量分别为4.74±0.10、1.05±0.13和1.81±0.05,均P<0.001;p62蛋白相对表达量分别为0.59±0.02、0.94±0.03和0.78±0.03,P 值分别为<0.001、0.002和<0.001。SiRNA干扰Atg5后,抑制OPC引起的LC3-Ⅱ和p62变化,与NC相比,NC+OPC组、Si-Atg5组和Si-Atg5+OPC组中LC3-Ⅱ相对表达量分别为9.43±0.36、1.14±0.11和6.08±0.22,均P<0.001;p62相对表达量分别为0.28±0.02、1.03±0.02和0.68±0.02,均P<0.001。CCK-8结果显示与CON组相比,OPC组、3-MA 组和OPC+3-MA 组细胞活力分别为(49.53±4.29)%、(95.29±1.80)%和(67.19±0.31)%,P 值分别为<0.001、0.001和<0.001。与CON组相比,NC+OPC组、Si-Atg5组和Si-Atg5+OPC组细胞活力分别为(49.53±4.29)%、(100.44±0.50)%和(73.01±1.23)%,均P<0.001。结论 OPC可能通过抑制PI3K/AKT途径促进喉癌TU686细胞自噬流的通畅,并抑制TU686细胞增殖活力。

关键词：原花青素 PI3K/AKT通路喉癌自噬流