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海藻酸盐基复合水凝胶培养乳腺癌类器官中钙离子的关键作用

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中国组织工程研究 2025年第22期29卷 4702-4709页

作者：林志光饶琪梁珊珊王若雨于炜婷大连大学附属中山医院肿瘤中心辽宁省大连市116001 大连大学中山临床学院辽宁省大连市116001 大连市海洋多糖生物材料转化医学重点实验室辽宁省大连市116001

背景:基质胶是当前培养肿瘤类器官的主要材料,但单纯基质胶不足以在体外模拟肿瘤生长的力学环境;在基质胶基础上引入海藻酸盐材料可提升水凝胶刚度,但水凝胶力学性能在长期培养中难以维持稳定。目的:在乳腺癌类器官培养体系中引入少量... 详细信息

背景:基质胶是当前培养肿瘤类器官的主要材料,但单纯基质胶不足以在体外模拟肿瘤生长的力学环境;在基质胶基础上引入海藻酸盐材料可提升水凝胶刚度,但水凝胶力学性能在长期培养中难以维持稳定。目的:在乳腺癌类器官培养体系中引入少量钙离子,观察其对基质胶-海藻酸钠水凝胶长期力学性能的维持作用。方法:(1)在恒定质量浓度(5 mg/m L)的基质胶中引入不同质量浓度(0,2.5,5 mg/m L)的海藻酸钠,分别制备低、中、高刚度水凝胶,使用流变仪定期测量水凝胶的力学性能。(2)将人三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231重悬于不同刚度的水凝胶预凝胶中,成胶后加入含(或不含)钙离子的乳腺癌类器官因子培养基,进行乳腺癌类器官培养,在设定的时间点,使用流变仪定期测量引入钙离子对水凝胶力学性能的影响,光学显微镜下观察乳腺癌类器官形态变化,统计第13天乳腺癌类器官成球率。乳腺癌类器官培养7 d后,加入不同浓度(0.1,1,10,100 nmol/L)的化疗药物多西他赛干预6 d,检测细胞活力,计算多西他赛的半抑制浓度IC_(50)。结果与结论:(1)海藻酸钠的加入有效提高了水凝胶的力学强度。(2)随着乳腺癌类器官培养时间的延长,水凝胶的力学强度均降低,培养第13天,中、高刚度水凝胶在含钙离子培养环境中的力学性能均显著高于在不含钙离子培养环境中的力学性能(P0.05)。在长期培养中(13 d),中、高刚度水凝胶组乳腺癌类器官随水凝胶力学性能的下降由圆形转化为梭形,而引入钙离子后两组乳腺癌类器官形态不随培养时间延长而改变。在培养环境中引入钙离子对低刚度水凝胶组乳腺癌类器官成球率无影响,但可提升中、高刚度水凝胶组乳腺癌类器官成球率。(3)在不含钙离子的培养环境中,随着多西他赛浓度的升高,乳腺癌类器官的细胞活力均降低,3组水凝胶组间的IC_(50)无明显差异(P>0.05);在含钙离子的培养环境中,随着多西他赛浓度的升高,乳腺癌类器官的细胞活力均降低,中、高刚度水凝胶组乳腺癌类器官的细胞活力强于低刚度水凝胶组,IC_(50)高于低刚度水凝胶组(P<0.05)。(4)结果表明,在乳腺癌类器官培养体系中引入钙离子可维持基质胶-海藻酸钠水凝胶的力学性能。

关键词：肿瘤类器官乳腺癌类器官海藻酸钠基质胶复合水凝胶基质刚度药物反应

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肌球蛋白轻链激酶活性片段对肌球蛋白轻链的非钙依赖性磷酸化作用特征(英文)

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Acta Biochimica et Biophysica Sinica 2003年第9期35卷 793-800页

作者：杨静娴王晓明唐泽耀陈华徐红林原大连医科大学药理教研室大连医科大学药理教研室大连116027

肌球蛋白轻链激酶 (MLCK)的活性片段 (MLCKF)能比完整的MLCK更有效地、以非钙依赖性的方式磷酸化肌球蛋白轻链 (MLC2 0 )。该片段是用胰蛋白酶水解MLCK ,再经DEAE 5 2柱层析分离而获得的 ,分子量约为 6 1kD。Western印迹已证实该MLCKF... 详细信息

肌球蛋白轻链激酶 (MLCK)的活性片段 (MLCKF)能比完整的MLCK更有效地、以非钙依赖性的方式磷酸化肌球蛋白轻链 (MLC2 0 )。该片段是用胰蛋白酶水解MLCK ,再经DEAE 5 2柱层析分离而获得的 ,分子量约为 6 1kD。Western印迹已证实该MLCKF与完整的MLCK同源。MLCKF对肌球蛋白轻链的磷酸化作用及其作用特征通过甘油电泳及ScoinImage扫描软件检测 ,肌球蛋白ATP酶活性通过分光光度法检测。实验结果证实 ,MLCKF催化的MLC2 0 非钙依赖性磷酸化 (CIPM)比MLCK催化的CIPM效力高、耗能多 ,但比MLCK催化的MLC2 0 钙依赖性磷酸化 (CDPM)效力低、耗能少 ;MLCKF催化的CIPM与MLCK催化的CIPM均较MLCK催化的CDPM稳定 ,不易受温育温度、温育时间及离子浓度等变化的影响 ,且对MLCK抑制剂ML 9敏感性低。

关键词：蛋白酶解肌球蛋白轻链激酶活性片段磷酸化 ATP酶活性

四氢孕酮与苯巴比妥对保护小鼠最大电休克惊厥的协同作用(英文)

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Acta Pharmacologica Sinica 2001年第4期22卷 75-78页

作者：鲁映青于榕复旦大学基础医学院药理教研室复旦大学基础医学院药理教研室上海中国 200032

目的:观察四氢孕酮与苯巴比妥的抗惊厥相互作用。方法:采用小鼠最大电休克惊厥(MES)试验,测定四氢孕酮和/或苯巴比妥的保护作用;并采用小鼠大脑皮质膜制备,用氚标氟硝安定检测四氢孕酮和/或苯巴比妥对GABAA受体复合物的调节。结果:苯巴... 详细信息

目的:观察四氢孕酮与苯巴比妥的抗惊厥相互作用。方法:采用小鼠最大电休克惊厥(MES)试验,测定四氢孕酮和/或苯巴比妥的保护作用;并采用小鼠大脑皮质膜制备,用氚标氟硝安定检测四氢孕酮和/或苯巴比妥对GABAA受体复合物的调节。结果:苯巴比妥(0.5-50mg·kg-1)对小鼠最大电休克惊厥具剂量依赖性的保护作用,其ED50为2.61mg·kg-1,95％可信限为1.59-4.26mg·kg-1。同样,四氢孕酮(0.01-1.0mg·kg-1)也有剂量依赖性的保护作用,其ED50为0.11(0.06-0.18)mg·kg-1。四氢孕酮和苯巴比妥联合用药(1:20)的ED50为0.73(0.44-1.21)mg·kg-1,Q值小于1。测定四氢孕酮和/或苯巴比妥增加氚标氟硝安定的结合,其浓度效应曲线与功能性协同作用的理论曲线相符。结论:四氢孕酮和苯巴比妥对抗小鼠最大电休克惊厥有协同作用;两者对增加氚标氟硝安定与GABAA受体复合物的结合也有功能性协同作用。

关键词：甾类四氢孕酮苯巴比妥药物协同作用惊厥 GABAA受体

Allopregnanolone与GABA在大鼠大脑的皮层细胞中对kainate诱导乳酸脱氢酶释放的不同作用(英文)

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Acta Pharmacologica Sinica 2002年第8期23卷 10-14页

作者：于榕徐昕红盛美萍中国 200032 复旦大学基础医学院药理教研室复旦大学基础医学院药理教研室上海

目的:观察allopregnanolone与γ氨基丁酸(GABA)对兴奋性毒性的作用.方法:对原代培养大鼠大脑的皮层细胞,采用kainate(KA)处理,诱发兴奋性毒性.通过测定释放至细胞培养基中的乳酸盐脱氢酶(LDH)活性。观察allopregna-nolone与GABA对兴奋... 详细信息

目的:观察allopregnanolone与γ氨基丁酸(GABA)对兴奋性毒性的作用.方法:对原代培养大鼠大脑的皮层细胞,采用kainate(KA)处理,诱发兴奋性毒性.通过测定释放至细胞培养基中的乳酸盐脱氢酶(LDH)活性。观察allopregna-nolone与GABA对兴奋性毒性的作用.结果:短期或长期KA处理,均增加 LDH活性的释放,其作用呈剂量依赖性,EC50值分别为(0.16±0.03)mol/L和(0.257±0.15)mmol/L.短期(3 h)allopreg-nanolone (10-1000 nmol/L)处理对0.2 mmol/L KA诱导的 LDH活性的释放无明显影响.而长期(24 h)allopregnanolone(10-1000 nmol/L)处理抑制KA诱导的LDH活性的释放,其作用呈剂量依赖性,EC50值为(436±19)nmol/L.短期GABA(0.1-100μmo 1/L)处理,加剧KA(0.2 mmol/L)诱导的 LDH活性的释放,其作用呈剂量依赖性,EC50值为(2.7±1.0)μmol/L.长期GABA处理,对KA诱导的LDH活性的释放无明显影响.结论;allopregnanolone和 GABA对KA诱导的兴奋性毒性有不同作用.

关键词：甾类 allopregnanolone 细胞培养乳酸脱氢酶 GABAA受体

云南甘草总皂甙对氧自由基诱导羊心肌细胞膜Na~＋，K~＋－ATP酶活性降低的保护作用

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中国药理学通报 1996年第3期12卷 277-279页

作者：刘磊张学梅大连大学医学院药理教研室

云南甘草总皂甙对正常羊心肌细胞膜Ｎａ＋，Ｋ＋－ＡＴＰ酶活性无影响；但对氧自由基诱导羊心肌细胞膜Ｎａ＋，Ｋ＋－ＡＴＰ酶活性的降低有明显保护作用，随浓度增高，酶的活性逐渐升高。与对照组比较，总皂甙浓度为０．２ｍｇ·Ｌ－１... 详细信息

云南甘草总皂甙对正常羊心肌细胞膜Ｎａ＋，Ｋ＋－ＡＴＰ酶活性无影响；但对氧自由基诱导羊心肌细胞膜Ｎａ＋，Ｋ＋－ＡＴＰ酶活性的降低有明显保护作用，随浓度增高，酶的活性逐渐升高。与对照组比较，总皂甙浓度为０．２ｍｇ·Ｌ－１时，酶的活性恢复２７．９％，浓度为０．８ｍｇ·Ｌ－１，酶的活性恢复４６．６％。

关键词：云南甘草总皂甙心肌细胞膜钠离子钾离子 ATP

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三七二醇甙抗实验性心律失常的作用

中草药 1991年第5期22卷 212-214页

作者：但汉雄张宝恒谢世荣徐明清北京医科大学药理教研室大连大学医专药理教研室

三七二醇甙（PDS）为三七组分之一,能明显对抗乌头碱、BaCl2和结扎冠状动脉前降支诱发大鼠的室性心律失常,并能明显对抗小鼠由CaCl2-Ach诱发的房颤和房扑。PDS能降低离体大鼠右心房的自发频率。对大鼠和家兔心电图实验,证明PDS有负性频... 详细信息

三七二醇甙（PDS）为三七组分之一,能明显对抗乌头碱、BaCl2和结扎冠状动脉前降支诱发大鼠的室性心律失常,并能明显对抗小鼠由CaCl2-Ach诱发的房颤和房扑。PDS能降低离体大鼠右心房的自发频率。对大鼠和家兔心电图实验,证明PDS有负性频率作用、负性传导作用。

关键词：三七二醇甙心律失常奎尼丁

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欠驱动无人船路径跟踪:一种有限时间正切漂角视线制导方法

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控制与决策 2025年第1期 187-195页

作者：王宁贾薇吴浩峻大连海事大学轮机工程学院大连市智能船舶绿色动力控制与测试重点实验室水路交通控制全国重点实验室

海洋环境复杂多变,为提升欠驱动无人船(underactuated marine vehicle, UMV)的自主航行与故障应对能力,提出基于有限时间正切漂角视线制导的指令滤波路径跟踪控制策略.在包括内部动力学未知、时变大漂角和执行器故障的复杂情况下,该策... 详细信息

海洋环境复杂多变,为提升欠驱动无人船(underactuated marine vehicle, UMV)的自主航行与故障应对能力,提出基于有限时间正切漂角视线制导的指令滤波路径跟踪控制策略.在包括内部动力学未知、时变大漂角和执行器故障的复杂情况下,该策略可使UMV在有限时间内遵循所需的路径.首先,构建有限时间漂角观测器,用于快速精准地估计时变大漂角;随后,引入有限时间正切漂角视线制导律,不仅能提升制导性能,还能有效避免因非光滑制导指令产生高频震荡导致UMV失稳;此外,通过采用有限时间指令滤波控制技术降低计算负担,并提出滤波补偿方案减少滤波误差;最后,基于径向基函数神经网络和有限时间理论,设计自适应有限时间容错路径跟踪控制器,使得UMV的纵向速度和艏向角跟踪误差在有限时间内能够收敛到原点附近的小邻域.仿真实验验证了所提出方案的有效性和优越性.

关键词：欠驱动无人船有限时间正切漂角视线制导指令滤波路径跟踪控制神经网络

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清醒大鼠动脉压力感受性反射-血压控制的测定

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Acta Pharmacologica Sinica 2002年第2期23卷 11-17页

作者：苏定冯陈力孔宪波程勇中国 200433 第二军医大学基础部药理学教研室第二军医大学基础部药理学教研室上海

目的:研究清醒大鼠动脉压力感受性反射(ABR)-血压控制(ABR-BP)的测定.方法:用计算机化清醒自由活动大鼠血压连续监测技术.记录动物的血压.ABR-BP测定的原理是比较阻断ABR前后机体对血管活性物质反应的差异.结果:(1)用血管紧张素-Ⅱ测得... 详细信息

目的:研究清醒大鼠动脉压力感受性反射(ABR)-血压控制(ABR-BP)的测定.方法:用计算机化清醒自由活动大鼠血压连续监测技术.记录动物的血压.ABR-BP测定的原理是比较阻断ABR前后机体对血管活性物质反应的差异.结果:(1)用血管紧张素-Ⅱ测得的ABR-BP值与用新福林测得的ABR-BP值密切相关,在一定范围内药物的剂量不影响结果.(2)ABR-BP与ABR-心动间期控制(ABR-HP)显著相关.(3)麻醉抑制ABR-BP,ABR-BP本身存在昼夜节律性变化.(4)血压波动性与ABR-BP相关,而与ABR-HP不相关.(5)高血压时ABR-BP受损.结论:本项工作使ABR-BP的测定成为可能.ABR-BP在维持血压的稳定性中起重要作用,在高血压时其功能受损.

关键词：麻醉压力感受性反射血压血压波动性近交SHR大鼠

清醒大鼠动脉压力感受性反射的功能研究(英文)

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Acta Pharmacologica Sinica 2002年第8期23卷 3-9页

作者：苏定冯缪朝玉中国 200433 第二军医大学基础部药理学教研室第二军医大学基础部药理学教研室上海

本文综述本室近10年来对清醒自由活动大鼠动脉压力感受性反射(ABR)的功能性研究.首先,建立了ABR对血压的控制(ABR-BP)的测量方法.ABR-BP是与用经典方法测量的ABR功能(ABR-HP)不同的成份.其次,我们的研究表明ABR功能与高血压的器官损伤有... 详细信息

本文综述本室近10年来对清醒自由活动大鼠动脉压力感受性反射(ABR)的功能性研究.首先,建立了ABR对血压的控制(ABR-BP)的测量方法.ABR-BP是与用经典方法测量的ABR功能(ABR-HP)不同的成份.其次,我们的研究表明ABR功能与高血压的器官损伤有关.损毁ABR功能可导致严重的器官损伤.该损伤的机制与血压波动性增高、肾素血管紧张素系统激活有关.酮色林能改善ABR功能.基于对酮色林研究的结果,我们提出改善ABR功能可作为改善某些心血管疾病预后的新策略.最后,提到了我们正在进行中的自发性ABR功能缺陷大鼠的培育.

关键词：压力感受性反射血压血压波动性高血压酮色林去窦弓神经近交SHR大鼠