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毛囊类器官研究:现状、问题与前景

中国组织工程研究 2025年第31期29卷 6733-6742页

作者：王钊龚琳朴永君大连医科大学附属第一医院皮肤科辽宁省大连市116000

背景:毛囊体外重建依赖于毛乳头细胞及角质形成细胞3D共培养时的自组装行为,该过程与毛囊胚胎发育极为相似,因此,毛囊类器官可作为毛囊再生相关基础研究良好的体外模型,目前,通过仿生系统培养的全人源毛囊类器官已能成功移植到动物体内... 详细信息

背景:毛囊体外重建依赖于毛乳头细胞及角质形成细胞3D共培养时的自组装行为,该过程与毛囊胚胎发育极为相似,因此,毛囊类器官可作为毛囊再生相关基础研究良好的体外模型,目前,通过仿生系统培养的全人源毛囊类器官已能成功移植到动物体内。毛囊类器官研究使毛囊再生成为可能,但构建方法亦无统一定论,仍面临诸多挑战。目的:综述目前毛囊类器官的研究进展,总结毛囊类器官培养方法及表征,阐述应用前景,为后续研究提供可靠依据,以期促进其在组织工程及脱发治疗的临床转化。方法:应用计算机在中国知网(CNKI)及PubMed数据库中,以“毛囊再生,毛发再生,类器官”为中文检索词,“hair growth,hair loss,hair regeneration,hair follicle,dermal papilla cell,organoid”为英文检索词进行检索,查阅国内外关于毛囊类器官的相关文献,共纳入文献67篇进行后续分析。结果与结论:①不同来源的毛乳头细胞与角质形成细胞可在体外构建毛囊类器官,以获得鼠源、人-鼠嵌合及人源毛囊类器官,并成功用于啮齿动物移植模型;②多种重编程方法如电刺激、添加重组蛋白、解离细胞基因过表达等可用于促进毛囊类器官毛胚形成及毛钉伸长,同时,多种3D打印技术的应用已实现大小可控毛囊类器官的批量生产,极大提高了生产效率;③在解离细胞共培养体系中加入黑素细胞时,或可破译新生毛囊的色素缺失难题,而加入人脐静脉血管内皮细胞时,细胞聚集体内的新生血管可改善营养供给,减少中心部位坏死;④随着工程化类毛囊技术逐渐趋于成熟,患者自体细胞构建的毛囊类器官或可用于严重脱发的个体化医疗。

关键词：脱发毛囊再生毛乳头细胞毛囊类器官上皮-间充质交互作用 3D培养类器官组织工程工程化类器官

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C57BL/6新生乳鼠肠神经胶质细胞的提取与培养

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中国组织工程研究 2025年第31期29卷 6656-6660页

作者：赵楠丁勇修航刘鹏飞梁国刚大连医科大学附属第一医院中西医结合临床国家重点学科实验室辽宁省大连市116000 大连医科大学附属第一医院普外三科辽宁省大连市116000

背景:炎症性肠病的发病机制涉及炎症、免疫激活、内脏高敏感、肠道菌群失调等,其中炎症促使免疫细胞释放炎症递质,损伤肠神经系统。肠神经胶质细胞是肠神经系统的重要组成部分,是研究肠道神经炎症的良好细胞。原代肠神经胶质细胞对于探... 详细信息

背景:炎症性肠病的发病机制涉及炎症、免疫激活、内脏高敏感、肠道菌群失调等,其中炎症促使免疫细胞释放炎症递质,损伤肠神经系统。肠神经胶质细胞是肠神经系统的重要组成部分,是研究肠道神经炎症的良好细胞。原代肠神经胶质细胞对于探索肠神经系统疾病的细胞疗法具有至关重要的作用,而目前获得该细胞的方法大多较繁琐,因此找到一种便捷、快速提取该细胞的方法十分关键。目的:建立优化分离培养及鉴定小鼠肠神经胶质细胞的方法。方法:通过过量吸入异氟烷处死0-7 d龄C57BL/6乳鼠,将其浸泡于体积分数75%乙醇消毒后腹正中线开腹取出十二指肠(幽门下1 cm至屈氏韧带上1 cm),用1 mL注射器充满DPBS反复冲洗肠内容物至肠道半透明,剥离肠系膜及血管。将十二指肠剪至1 mm大小,放入含0.25%EDTA胰酶中消化20 min后加入等量DMEM/F12完全培养基终止消化,用100μm细胞滤器过滤后离心,加入1 mL DMEM/F12完全培养基重悬后培养细胞,细胞贴壁生长密度至80%时消化传代。细胞培养至第3代时用标记肠神经胶质细胞的胶质纤维酸性蛋白进行免疫荧光鉴定。结果与结论:分离培养的细胞胶体饱满,突起向外延展,可以传代,胶质纤维酸性蛋白染色阳性。该方法可成功分离培养肠神经胶质细胞,且操作简便,为肠神经系统的病理生理学研究提供稳定的模型。

关键词：肠神经胶质细胞乳鼠细胞培养炎症性肠病肠神经系统胶质纤维酸性蛋白工程化细胞

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微容量负荷试验对老年骨科患者蛛网膜下腔阻滞后低血压的预测价值

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实用医学杂志 2025年第1期 60-64页

作者：梁长宁陈小萍魏静静葛亚丽高巨扬州大学临床医学院江苏省苏北人民医院麻醉科大连医科大学扬州临床医学院

目的探讨微容量负荷试验对老年骨科患者腰麻后低血压的预测价值。方法严格按照入选和排除标准筛选出行髋关节或膝关节置换的老年患者72例，均为安排蛛网膜下腔阻滞麻醉的择期手术患者。依据研究对象接受单次细针腰麻后于仰卧位状态下1... 详细信息

目的探讨微容量负荷试验对老年骨科患者腰麻后低血压的预测价值。方法严格按照入选和排除标准筛选出行髋关节或膝关节置换的老年患者72例，均为安排蛛网膜下腔阻滞麻醉的择期手术患者。依据研究对象接受单次细针腰麻后于仰卧位状态下15 min内血压改变进行分组，参考既往文献低血压定义标准分为血压降低组（H组）和血压正常组（N组）共两组。实施细针腰麻前进行微容量负荷试验，采用无创心排血量监测仪测量每搏量指数变异度（variation of stroke volume index，ΔSVI）并记录血压及心率等循环数据的基线值。采用多因素logistic回归分析接受腰麻下行骨科关节置换手术的老年患者低血压的影响因素，绘制ΔSVI的受试者工作特征（ROC）曲线并计算曲线下面积（AUC），评价ΔSVI的预测价值。结果腰麻后有29例（40.27%）患者发生低血压。与N组相比，仰卧位状态下15 min内发生低血压的H组患者年龄更大，ASAⅢ级、合并高血压比例更高。分析结果显示ΔSVI是老年患者腰麻后低血压的独立影响因素。ΔSVI在≥0.805%时，预测腰麻后低血压的敏感度为82.8%，特异度为81.4%，曲线下面积为0.868。ΔSVI与SBP最大降低幅度呈正相关（r=0.562,P <0.01）。结论微容量负荷试验是一种有效预测老年骨科患者腰麻后低血压的方法。

关键词：老年髋关节置换术膝关节置换术蛛网膜下腔阻滞后低血压微容量负荷试验蛛网膜下腔阻滞

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肌球蛋白轻链激酶活性片段对肌球蛋白轻链的非钙依赖性磷酸化作用特征(英文)

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Acta Biochimica et Biophysica Sinica 2003年第9期35卷 793-800页

作者：杨静娴王晓明唐泽耀陈华徐红林原大连医科大学药理教研室大连医科大学药理教研室大连116027

肌球蛋白轻链激酶 (MLCK)的活性片段 (MLCKF)能比完整的MLCK更有效地、以非钙依赖性的方式磷酸化肌球蛋白轻链 (MLC2 0 )。该片段是用胰蛋白酶水解MLCK ,再经DEAE 5 2柱层析分离而获得的 ,分子量约为 6 1kD。Western印迹已证实该MLCKF... 详细信息

肌球蛋白轻链激酶 (MLCK)的活性片段 (MLCKF)能比完整的MLCK更有效地、以非钙依赖性的方式磷酸化肌球蛋白轻链 (MLC2 0 )。该片段是用胰蛋白酶水解MLCK ,再经DEAE 5 2柱层析分离而获得的 ,分子量约为 6 1kD。Western印迹已证实该MLCKF与完整的MLCK同源。MLCKF对肌球蛋白轻链的磷酸化作用及其作用特征通过甘油电泳及ScoinImage扫描软件检测 ,肌球蛋白ATP酶活性通过分光光度法检测。实验结果证实 ,MLCKF催化的MLC2 0 非钙依赖性磷酸化 (CIPM)比MLCK催化的CIPM效力高、耗能多 ,但比MLCK催化的MLC2 0 钙依赖性磷酸化 (CDPM)效力低、耗能少 ;MLCKF催化的CIPM与MLCK催化的CIPM均较MLCK催化的CDPM稳定 ,不易受温育温度、温育时间及离子浓度等变化的影响 ,且对MLCK抑制剂ML 9敏感性低。

关键词：蛋白酶解肌球蛋白轻链激酶活性片段磷酸化 ATP酶活性

腹腔镜脾切除联合断流术对肝脏合成功能和肝纤维化程度影响的前瞻性研究

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中华外科杂志 2025年第1期63卷 51-57页

作者：肖坤清高添铭蔡金红史招宝金圣杰张弛周保换柏斗胜蒋国庆扬州大学附属苏北人民医院肝胆外科扬州大连医科大学扬州临床医学院肝胆外科扬州江苏省苏北人民医院肝胆外科扬州

目的探讨腹腔镜脾切除联合断流术(LSD)对肝脏合成功能和肝纤维化程度的影响。方法本研究为前瞻性病例系列研究。纳入2014年9月至2016年1月扬州大学附属苏北人民医院肝胆外科连续收治的接受了LSD的肝硬化合并门静脉高压患者的围手术期和... 详细信息

目的探讨腹腔镜脾切除联合断流术(LSD)对肝脏合成功能和肝纤维化程度的影响。方法本研究为前瞻性病例系列研究。纳入2014年9月至2016年1月扬州大学附属苏北人民医院肝胆外科连续收治的接受了LSD的肝硬化合并门静脉高压患者的围手术期和随访资料。收集患者的门静脉直径、门静脉血流速度、血常规、肝功能、肝合成蛋白 [抗凝血酶Ⅲ(AT-Ⅲ)、蛋白S、蛋白C]、肝硬化四项(Ⅳ型胶原、Ⅲ型前胶原、层粘连蛋白、透明质酸)等临床数据。多组间比较采用重复测量方差分析, 事后多重比较采用最小显著性差异法。结果研究共纳入106例患者, 其中男性70例, 女性36例, 年龄(51.8±9.8)岁(范围:28～75岁)。术后门静脉直径和门静脉血流速度均较术前有下降趋势(F值分别为14.03、12.15, P值均<0.01), 总胆红素、白蛋白、凝血酶原时间、国际标准化比值、Child-Pugh评分和分级有所改善(F值分别为17.96、56.01、66.63、35.83、33.49和27.50, P值均<0.01), AT-Ⅲ、蛋白S、蛋白C、Ⅳ型胶原、Ⅲ型前胶原、层粘连蛋白和透明质酸水平亦有改善(F值分别为47.87、36.26、18.02、2.79、14.58、44.35和14.38, P值均<0.01)。与术前相比, 术后第1周至术后第24个月门静脉直径有所降低(t=5.45～9.39, P值均<0.01)。与术前相比, 术后第1周至术后第24个月门静脉血流速度有所降低(t=4.02～8.43, P值均<0.01)。与术前相比, 术后第24个月血常规(白细胞计数、血红蛋白、血小板计数)、肝功能(总胆红素、白蛋白、凝血酶原时间、国际标准化比值、Child-Pugh评分)、肝合成蛋白(AT-Ⅲ、蛋白S、蛋白C)、肝硬化四项(Ⅳ型胶原、Ⅲ型前胶原、层粘连蛋白、透明质酸)等均得到不同程度的改善(t=-20.46～11.93, P值均<0.01)。结论初步研究结果显示, LSD可降低肝硬化门静脉高压患者的门静脉压力、恢复血细胞数量, 并改善肝脏合成功能和肝纤维化程度。

关键词：肝硬化高血压, 门静脉腹腔镜脾切除术断流术

哺乳动物多能干细胞:在创建疾病模型、发病机制、药物发现和个性化治疗中的作用

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中国组织工程研究 2025年第1期29卷 136-146页

作者：许文强陈浩林颜昌徐涛谢雅彬李雪玲内蒙古自治区低氧转化医学重点实验室医学技术与麻醉学院基础医学与法医学院包头医学院内蒙古自治区包头市014060 草原家畜生殖调控与繁育国家重点实验室内蒙古大学内蒙古自治区呼和浩特市010010 大连医科大学附属第一医院大连医科大学辽宁省大连市116000

背景:多能干细胞的自我更新和多向分化的特征有可能彻底改变人们对生物学、医学、发育和疾病的理解。干细胞在胚胎发育的早期发挥着重要作用,研究干细胞可以深入理解生物体发育和组织器官形成的基本原理,探索各种疾病的潜在机制,研究受... 详细信息

背景:多能干细胞的自我更新和多向分化的特征有可能彻底改变人们对生物学、医学、发育和疾病的理解。干细胞在胚胎发育的早期发挥着重要作用,研究干细胞可以深入理解生物体发育和组织器官形成的基本原理,探索各种疾病的潜在机制,研究受损组织和器官的修复和再生,以及推动药物发现和个性化治疗。目的:回顾多能干细胞的研究历程,并对多能干细胞的基本类别进行归纳总结,同时阐述常见哺乳动物中各类多能干细胞的建系情况。方法:应用计算机检索PubMed、Web of Science、中国知网和万方数据库,检索词为“多能干细胞,胚胎干细胞,诱导多能干细胞,扩展多能干细胞,家畜多能干细胞,Pluripotent stem cells,Embryonic stem cells,Induced pluripotent stem cells,Expanded potential stem cells,Livestock pluripotent stem cells等”,根据纳入标准和排除标准系统地筛选与哺乳动物多能干细胞相关的文献99篇进行综述分析。结果与结论:(1)小鼠胚胎干细胞经典理论认为,干细胞的多能态分为“初始”(na?ve)态和“始发”(primed)态两种,na?ve态对应于早期胚胎未植入子宫壁前的囊胚内细胞团;primed态对应于植入后的上胚层,二者在表观遗传特征、转录活性、外部信号依赖性和代谢表型等方面存在显著的特征差异;后来研究发现在初始态和始发态之间,还存在一个过渡状态——“形成态”(formative态);事实上,胚胎干细胞的多能性属于连续阶段的发展进程,而不是某种独立的细胞状态。(2)除了从囊胚内细胞团获得多能干细胞之外,还有多种多能干细胞获得方式和建系方法:如利用来源于小鼠胎儿原始生殖细胞所建立的胚胎生殖干细胞;利用Oct3/4,Sox2,c-Myc和Klf4因子诱导成年小鼠和人的成纤维细胞去分化所建立的诱导多能干细胞;体细胞核移植,孤雌激活,以及从新生或成体睾丸组织或卵巢组织中分离并进行类胚胎干细胞培养所建立的胚胎干细胞样细胞系;来源于多种成体组织的极小胚胎样干细胞和来源于前囊胚期的扩展多能干细胞,这些多能干细胞的共同特征为不断自我更新,表达核心多能因子,并具备原始三胚层分化能力。(3)目前,多能干细胞正在被用于疾病建模,以便研究不同疾病的机制并开发新的药物。同时,科学家正在尝试用多能干细胞培养各种组织和器官,为再生医学和移植提供新的可能性。然而,多能干细胞的临床应用面临着安全性挑战,包括细胞畸变和免疫排斥问题。不断改进多能干细胞的产生方法,将使其更安全、高效地适用于临床。(4)借鉴小鼠和人多能干细胞的获得方式和建系方法,研究者们已经在家畜中建立了各类多能干细胞,包括胚胎干细胞、诱导性多能干细胞、生殖细胞谱系的多能干细胞和扩展多能干细胞,这将为动物繁殖育种、基因工程、疾病模型、新药筛选和野生濒危动物保护提供新的途径。

关键词：多能干细胞胚胎干细胞诱导多能干细胞扩展多能干细胞家畜多能干细胞患者特异性多能干细胞

“德成自然”:道家“自然”理念对高校思想政治教育的启示

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黑龙江教师发展学院学报 2025年第1期 45-48页

作者：魏微李铭安徽医科大学

道家主张以尊重万物“自然”之性的方式助化万物生长，为高校思想政治教育带来了“德成自然”的启示。即高校思想政治教育应遵循大学生思想品德形成规律，充分激发大学生的主体自觉，引导大学生积极主动地提升道德修养。在方法上，高校... 详细信息

道家主张以尊重万物“自然”之性的方式助化万物生长，为高校思想政治教育带来了“德成自然”的启示。即高校思想政治教育应遵循大学生思想品德形成规律，充分激发大学生的主体自觉，引导大学生积极主动地提升道德修养。在方法上，高校思想政治教育可汲取道家“无为而为”的精华，善用隐性教育，让教育教学回归生活叙事，巧妙运用“行不言之教”的艺术，以增益道德培养实效。

关键词：道家 “自然”理念高校思想政治教育德育

采用定量蛋白质组学技术筛选小鼠肝癌淋巴道转移相关蛋白

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生物化学与生物物理进展 2007年第8期34卷 856-864页

作者：孙成荣唐建武孙明忠刘淑清张宏颖王波宋波张亚楠张竹清赵志英大连医科大学病理教研室大连116027 大连医科大学生物技术专业大连116027 大连医科大学生化教研室大连116027

淋巴道转移是上皮来源恶性肿瘤转移的早期阶段,其发生机制不清,一直是肿瘤学研究面临的难题,为寻找淋巴道转移相关蛋白,以一对来源于同一亲本细胞,且淋巴道转移潜能显著不同的小鼠肝癌腹水型细胞株为研究对象,其中Hca-F为高淋巴道转移... 详细信息

淋巴道转移是上皮来源恶性肿瘤转移的早期阶段,其发生机制不清,一直是肿瘤学研究面临的难题,为寻找淋巴道转移相关蛋白,以一对来源于同一亲本细胞,且淋巴道转移潜能显著不同的小鼠肝癌腹水型细胞株为研究对象,其中Hca-F为高淋巴道转移力细胞株,Hca-P为低淋巴道转移力细胞株,采用定量蛋白质组学技术——荧光差异双向凝胶电泳,建立了高低淋巴道转移力小鼠肝癌细胞荧光差异蛋白表达图谱,高通量筛选与肿瘤淋巴道转移相关的蛋白质.经DeCyde软件分析,共得到163个有统计学差异的蛋白质点,选择2倍以上的差异性蛋白质点23个,经质谱鉴定得到17个蛋白质,在Hca-F中高表达的蛋白质有7个:转羟乙醛酶、波形蛋白、肌酸激酶(脑)、膜联蛋白7、膜联蛋白5、烯酰辅酶A水合酶1(过氧化物酶体)、核内异质核糖核蛋白A2/B1异构体1.而在Hca-F中低表达的蛋白质有10个:真核翻译延长因子2、Ero1样蛋白、乙醛脱氢酶2(线粒体)、苹果酸盐脱氢酶2(NAD)、β-内酰胺酶2、谷胱甘肽S转移酶"1、泛素C末端水解酶同工酶L3、内质网蛋白29(前体)、溶血磷脂酶1、微管不稳定蛋白.这些差异性蛋白质的功能涉及到代谢、蛋白质分泌、蛋白质结合、核苷酸结合,钙离子结合、凋亡和调节生长等过程.对这些蛋白质功能的进一步验证,将有助于解析肿瘤淋巴道转移的分子机制.

关键词：肝癌淋巴道转移定量蛋白质组荧光差异双向凝胶电泳质谱

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生物学自主性与广义还原

自然辩证法研究 1996年第3期12卷 13-16页

作者：董国安吕国辉哈尔滨师范大学自然辩证法教研室哈尔滨医科大学社会科学部

生物学自主性与广义还原董国安，吕国辉生物学自主性问题之所以成为生物学哲学争论的焦点，是因为它事关理论生物学构建的根本途径，决定着未来生物学发展的方向和道路。本文提出：①自主论与还原论直接对立，只要承认生物学不能被完全... 详细信息

生物学自主性与广义还原董国安，吕国辉生物学自主性问题之所以成为生物学哲学争论的焦点，是因为它事关理论生物学构建的根本途径，决定着未来生物学发展的方向和道路。本文提出：①自主论与还原论直接对立，只要承认生物学不能被完全还原（或归结）为物理学和化学，也就...

关键词：生物学生物科学生物学自主性