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巨噬细胞迁移抑制因子对人胚胎干细胞存活、增殖和分化的影响

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中国组织工程研究 2025年第7期29卷 1380-1387页

作者：黄婷郑晓晗钟远吉魏艳召魏绪芳曹旭东冯晓丽赵振强海南医学院第一附属医院神经内科海南省海口市570100 海南医学院海南省海口市570100 海南省热带脑科学研究与转化重点实验室海南省海口市570100 渥太华大学加拿大渥太华K1N6N5

背景:巨噬细胞迁移抑制因子(macrophage migration inhibitory factor,MIF)是一种具有多效性作用的细胞因子,可以在不同类型干细胞中自分泌并且能调控细胞的增殖、分化和迁移。课题组前期研究证实人胚胎干细胞自分泌MIF,且在培养液中浓... 详细信息

背景:巨噬细胞迁移抑制因子(macrophage migration inhibitory factor,MIF)是一种具有多效性作用的细胞因子,可以在不同类型干细胞中自分泌并且能调控细胞的增殖、分化和迁移。课题组前期研究证实人胚胎干细胞自分泌MIF,且在培养液中浓度基本固定。然而,MIF是否参与了人胚胎干细胞的存活、增殖和分化尚不清楚。目的:探究MIF对人胚胎干细胞存活、增殖和分化的作用。方法:(1)培养人胚胎干细胞H9,CCK-8法检测并绘制细胞生长曲线,采用酶联免疫吸附法定量检测培养基中MIF水平。(2)为了明确外源性MIF对人胚胎干细胞存活、增殖的影响,分为:对照组,细胞在干细胞培养基中正常培养;外源性MIF组,在干细胞培养基中分别添加30,100,300 ng/m L的MIF;MIF抑制剂ISO-1组,在干细胞培养基中分别添加2,7,21μmol/L的ISO-1;MIF+ISO-1组,在不同浓度ISO-1组中分别添加100 ng/m L MIF,采用CCK-8法检测上述各组细胞活力。(3)为进一步阐明MIF基因对人胚胎干细胞存活、增殖的影响,采用CRISPRCas9技术构建MIF敲除的H9细胞系,观察建系情况。(4)为了明确高浓度MIF对人胚胎干细胞初步分化是否有影响,在培养基中分别添加100 ng/m L MIF和100 ng/m L CXCR4中和抗体,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-q PCR)、免疫细胞荧光、蛋白质印迹法(Western blot)检测干细胞自我更新因子(KLF4、c-MYC、NANOG、OCT4、SOX2)及分化转录因子(FOXA2、OTX2)的表达水平。结果与结论:(1)人胚胎干细胞H9的对数生长期为3-6 d,正常生长的情况下自分泌MIF水平约为20 ng/m L,与细胞量无关;(2)与对照组相比,添加不同质量浓度MIF对人胚胎干细胞的增殖无影响(P>0.05);ISO-1明显抑制人胚胎干细胞的增殖,ISO-1浓度越大,抑制越明显(P<0.05);ISO-1中添加MIF可以减少ISO-1的抑制作用(P<0.05);(3)RT-q PCR检测MIF基因敲除约50%后,人胚胎干细胞生长活力显著降低并且无法建系成功;(4)在培养基中添加100 ng/m L外源性MIF,自我更新转录因子KLF4的m RNA、蛋白及荧光表达水平均下降;分化因子FOXA2的m RNA、蛋白及荧光表达水平均上升;(5)在培养基中添加100 ng/m L CXCR4中和抗体,KLF4的m RNA及蛋白表达水平均上升;FOXA2的m RNA及蛋白表达水平均下降,与MIF组表达趋势相反。综上所述,人胚胎干细胞自分泌的MIF是其存活所必需的;培养基中额外添加MIF并不能促进人胚胎干细胞增殖,但可以使自我更新因子KLF4表达下降,转录因子FOXA2表达上升,为下一步探明MIF对人胚胎干细胞分化的影响及机制提供了线索,MIF-CXCR4轴在其中起到一定的调控作用。

关键词：巨噬细胞迁移抑制因子人胚胎干细胞自分泌存活分化 CXCR4 KLF4 FOXA2

中药天年饮对衰老大鼠脑单胺类神经递质含量的影响

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中国应用生理学杂志 2006年第2期22卷 167-168页

作者：宋成军陈志宏张松岩高福禄承德医学院中心实验室河北承德067000

目的:观察中药天年饮(Tiannianyin,TNY-traditional chinese medicine)对D-半乳糖衰老大鼠脑单胺类神经递质去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)、5-羟色胺(5-HT)含量的影响。方法:选用成年雄性SD大鼠40只,随机分为4组,每组均为10只:正常组、... 详细信息

目的:观察中药天年饮(Tiannianyin,TNY-traditional chinese medicine)对D-半乳糖衰老大鼠脑单胺类神经递质去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)、5-羟色胺(5-HT)含量的影响。方法:选用成年雄性SD大鼠40只,随机分为4组,每组均为10只:正常组、衰老模型组、TNY用药组、阴性对照组。D-半乳糖连续腹腔注射制作亚急性衰老的大鼠模型,采用高效液相色谱—电化学法检测各组大鼠下丘脑、海马NE、DA、5-HT的含量。结果:D-半乳糖衰老大鼠下丘脑、海马NE、DA、5-HT的含量明显降低(与正常大鼠相比P<0.01):TNY可明显提高脑单胺类神经递质的含量(用药组与模型组相比P<0.05)。结论:TNY可有效调整中枢神经递质的合成,具有良好延缓衰老的作用。

关键词：天年饮衰老脑单胺类神经递质

AnnexinV/PI、TdT和PI法检测细胞凋亡的比较

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中华微生物学和免疫学杂志 2000年第4期20卷 387-388页

作者：黄健沈永生周宏平郑俊年王秀英徐州医学院附属医院中心实验室

目的研究COX-1、COX-2、iNOs于浅表性胃炎、胃粘膜不典型增生及胃癌组织中表达的意义,探讨COX-2,iNOS与胃癌、幽门螺杆菌(Hp)感染的关系.方法应用多克隆抗体COX-1、COX-2、iNOS免疫组化方法检测33例浅表性胃炎、30例胃粘膜不典型增生、2... 详细信息

目的研究COX-1、COX-2、iNOs于浅表性胃炎、胃粘膜不典型增生及胃癌组织中表达的意义,探讨COX-2,iNOS与胃癌、幽门螺杆菌(Hp)感染的关系.方法应用多克隆抗体COX-1、COX-2、iNOS免疫组化方法检测33例浅表性胃炎、30例胃粘膜不典型增生、29例胃癌石蜡包埋组织中的COX-1,COX-2,iNOS表达情况及Hp感染率.结果COX-2,iNOS在胃癌中的表达率明显高于浅表性胃炎(65.5%,62.1%比18.2%,18.2%;P<0.01).Hp阳性的胃炎组织中COX-2,iNOS表???????????????????

关键词：细胞调亡 AnnexinV/PI TdT PI法检测

全生育期增温对济麦229生长发育、旗叶和产量的影响

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麦类作物学报 2025年第1期 63-72页

作者：黄金鑫刘百川展晓孟张玉梅郭雷李丹萍刘秀坤刘建军李豪圣赵振东高欣曹新有青岛农业大学农学院山东省农业科学院作物研究所/山东省农业科学院/小麦玉米国家工程研究中心/小麦育种全国重点实验室/农业农村部黄淮北部小麦生物学与遗传育种重点实验室/山东省小麦技术创新中心

为探究气候变暖对强筋优质小麦生长发育和产量的影响及机理，以强筋优质小麦济麦229为试验材料，以田间自然温度生长的小麦为对照，研究了全生育期增温对济麦229生长发育、旗叶衰老特性和产量的影响。结果表明，与对照相比较，全生育期... 详细信息

为探究气候变暖对强筋优质小麦生长发育和产量的影响及机理，以强筋优质小麦济麦229为试验材料，以田间自然温度生长的小麦为对照，研究了全生育期增温对济麦229生长发育、旗叶衰老特性和产量的影响。结果表明，与对照相比较，全生育期增温使济麦229营养生长阶段的分蘖数、株高、倒一叶面积、叶绿素含量和地上部干物质积累量显著增加，加快了花后旗叶面积和叶绿素含量的降低速度，减少干物质向穗部转运量；增温对济麦229孕穗期和开花期旗叶SOD、POD和CAT活性影响较小，旗叶中MDA和脯氨酸含量较低，但花后旗叶SOD活性显著增加，POD和CAT活性不同程度降低，导致MDA、脯氨酸含量和相对电导率增加；增温使济麦229的穗数和千粒重分别降低了20.3%和10.0%,产量减少了24.1%,对穗粒数的影响不显著。综上，全生育期增温可促进济麦229的营养生长，不利于生殖生长阶段小麦旗叶的光合作用和抗氧化作用，导致旗叶加速衰老和产量降低。

关键词：小麦全生育期增温分蘖旗叶抗氧化产量

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新疆小麦过氧化物酶活性基因TaPod-A1、TaPod-A3和TaPod-D1等位变异及分布规律

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作物学报 2025年第1期51卷 68-78页

作者：刘鑫源程宇坤王丽丽战帅帅马孟瑶郭玲耿洪伟新疆农业大学农学院/新疆优质专用麦类作物工程技术研究中心新疆乌鲁木齐830052 新疆作物遗传改良与种质创新重点实验室新疆乌鲁木齐830052

小麦面粉的颜色是其品质分级的重要指标,为了使小麦面粉的品质得到进一步提升,本研究利用位于TaPod-A1、TaPod-A3和TaPod-D1位点基因的功能标记对110份新疆小麦品种(系)进行等位变异基因检测。基因型与表型方差分析结果显示, TaPod-A1、... 详细信息

小麦面粉的颜色是其品质分级的重要指标,为了使小麦面粉的品质得到进一步提升,本研究利用位于TaPod-A1、TaPod-A3和TaPod-D1位点基因的功能标记对110份新疆小麦品种(系)进行等位变异基因检测。基因型与表型方差分析结果显示, TaPod-A1、TaPod-A3和TaPod-D1位点的等位变异类型TaPod-A1b (35.5%)、TaPod-A3c (53.6%)和TaPod-D1b(60%)较其他等位变异类型TaPod-A1a (64.5%)、TaPod-A3a (46.4%)和TaPod-D1a(40%)均具有较高的POD活性。在新疆小麦材料中, TaPod-A1、TaPod-A3和TaPod-D1的3个不同基因位点上高POD活性的优异等位变异类型的分布频率均表现为引进品种(系)≈自育品种(系)>地方品种。TaPod-A3b在110份新疆小麦材料中并未检测出,说明该等位变异为稀有等位变异。具有TaPod-A1、TaPod-A3和TaPod-D1基因等位变异组合品种(系)的平均POD活性高低依次为TaPod-A1b/TaPod-A3c/TaPod-D1b (2836.25 U g^(–1) min^(–1))> TaPod-A1b/TaPod-A3c/TaPod-D1a (2796.00 U g^(–1)min^(–1))> TaPod-A1b/TaPod-A3a/TaPod-D1b(2520.31Ug^(–1)min^(–1))> TaPod-A1a/TaPod-A3c/TaPod-D1b(2473.91Ug^(–1)min^(–1))> TaPod-A1a/TaPod-A3a/TaPod-D1b(2407.65Ug^(–1)min^(–1))> TaPod-A1b/TaPod-A3a/TaPod-D1a(2339.06Ug^(–1)min^(–1))> TaPod-A1a/TaPod-A3c/TaPod-D1a(2320.38Ug^(–1)min^(–1))> TaPod-A1a/TaPod-A3a/TaPod-D1a(2210.69Ug^(–1)min^(–1))。其中,具有TaPod-A1b/TaPod-A3c/TaPod-D1b等位变异基因的活性(2836.25Ug^(–1)min^(–1))极显著高于具有TaPod-A1a/TaPod-A3a/TaPod-D1a(2210.69Ug^(–1)min^(–1))(P<0.01)的品种,说明具有较多优异等位变异类型的品种具有较高的POD活性。

关键词：小麦过氧化物酶等位变异分子标记检测

阿魏酸钠对大鼠肝线粒体氧化性损伤的保护作用

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药学学报 1994年第3期29卷 171-175页

作者：林迎晖张家俊陈文为北京中医学院中心实验室

观察到阿魏酸钠有明显抑制硫酸亚铁和维生素Ｃ系统诱导的脂质过氧化反应和线粒体膨胀作用，且呈量效关系，并缓解丙二醛（脂质过氧化产物之一）对线粒体氧化磷酸化过程的解偶联反应。线粒体膜蛋白电泳图谱呈现阿魏酸钠有抑制丙二醛与膜... 详细信息

观察到阿魏酸钠有明显抑制硫酸亚铁和维生素Ｃ系统诱导的脂质过氧化反应和线粒体膨胀作用，且呈量效关系，并缓解丙二醛（脂质过氧化产物之一）对线粒体氧化磷酸化过程的解偶联反应。线粒体膜蛋白电泳图谱呈现阿魏酸钠有抑制丙二醛与膜蛋白交联作用。上述结果提示阿魏酸钠可缓解自由基损伤反应，有益机体能量合成代谢。

关键词：阿魏酸钠线粒体呼吸控制药理学

外源褪黑素与乙烯交互对盐胁迫下紫花苜蓿幼苗生长和生理特性的影响

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草业学报 2025年第1期 80-93页

作者：蔡文祺李淑霞王晓彤宋文学麻旭霞马小梅李小红代昕瑶宁夏大学林业与草业学院宁夏草牧业工程技术研究中心农业农村部饲草高效生产模式创新重点实验室

为明确外源褪黑素和乙烯在调控植物耐盐性方面的交互作用，以‘中苜一号’紫花苜蓿为试验材料，通过叶面喷施褪黑素、乙烯利和褪黑素+乙烯利的方法，研究外源施加褪黑素和乙烯对盐胁迫下紫花苜蓿幼苗生长和生理特性的影响。结果表明：... 详细信息

为明确外源褪黑素和乙烯在调控植物耐盐性方面的交互作用，以‘中苜一号’紫花苜蓿为试验材料，通过叶面喷施褪黑素、乙烯利和褪黑素+乙烯利的方法，研究外源施加褪黑素和乙烯对盐胁迫下紫花苜蓿幼苗生长和生理特性的影响。结果表明：外源施加一系列浓度的褪黑素处理(0.01、0.02、0.05、0.10 mmol·L-1MT)和乙烯利处理(0.05、0.15、0.25、0.50 mmol·L-1ETH)均对盐胁迫下(250 mmol·L-1NaCl)紫花苜蓿幼苗的生长损伤具有缓解作用，并以0.05 mmol·L-1褪黑素处理和0.15 mmol·L-1乙烯利处理缓解效果最佳，其幼苗株高、叶面积、鲜重、叶绿素含量和类胡萝卜素含量显著增加，相对电导率显著降低。采用以上最佳处理浓度试验发现：与对照组相比，盐胁迫下紫花苜蓿幼苗的生长明显被抑制；与单独盐处理组相比，外源施加激素后紫花苜蓿幼苗长势明显较好，尤其是同时施加褪黑素和乙烯利时，紫花苜蓿幼苗的株高、叶面积和鲜重分别增加了54.1%、76.8%和32.1%，组织含水量和叶绿素含量分别增加了46.2%和47.8%，相对电导率和丙二醛含量分别降低了23.5%和39.7%，过氧化氢和超氧阴离子含量分别减少了42.7%和63.8%，超氧化物歧化酶SOD、过氧化物酶POD、过氧化氢酶CAT和抗坏血酸过氧化物酶APX活性分别增加了54.1%、54.1%、59.1%和62.0%，还原性谷胱甘肽GSH含量增加32.8%，脯氨酸和可溶性糖含量增加了42.2%和27.2%，钾钠离子比值增加了217.5%，植株内源褪黑素和乙烯含量分别增加了60.0%和10.6%。综合分析表明，外源施加褪黑素和乙烯能够显著降低紫花苜蓿膜脂过氧化水平和活性氧积累，增加抗氧化酶活性和渗透调节物质含量，调控植株体内离子平衡，增加幼苗内源激素含量，提高紫花苜蓿幼苗的耐盐性，从而促进盐胁迫下幼苗的生长。

关键词：紫花苜蓿盐胁迫褪黑素乙烯生理响应

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石墨炉原子吸收法测定水样中的痕量锌

光谱学与光谱分析 2003年第6期23卷 1188-1190页

作者：张源罗文鸿李慧汕头大学医学院中心实验室广东汕头515031

文章对锌含量在μg·mL^(-1)～mg·L^(-1)范围的水样品的石墨炉原子吸收法测定进行了研究。通常由于在石墨炉原子吸收法测定中,由于锌的灵敏度很高使制样过程易受到污染,而火焰原子吸收法测定需较繁杂的富集。通过在样品加入乙醇降低空... 详细信息

文章对锌含量在μg·mL^(-1)～mg·L^(-1)范围的水样品的石墨炉原子吸收法测定进行了研究。通常由于在石墨炉原子吸收法测定中,由于锌的灵敏度很高使制样过程易受到污染,而火焰原子吸收法测定需较繁杂的富集。通过在样品加入乙醇降低空白值和改进精密度,调节仪器条件的内气流为0.5L·min^(-1)以降低锌的灵敏度,使方法线性范围达到0～20μg·L^(-1)。本法相对标准偏差为0.5％～5.9％之间,检测限为0.098μg·L^(-1)。应用于天然河水、自来水及瓶装矿泉水中锌的测定,结果令人满意。

关键词：水分析痕量锌含量测定石墨炉原子吸收法检测限

钙离子通道A23187对血小板聚集和蛋白质磷酸化的影响

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生物化学与生物物理进展 1998年第4期25卷 344-350页

作者：陈日炎江黎明覃燕梅梁念慈广东医学院生化教研室广东医学院附属医院中心实验室

以３２ＰＮａ２ＨＰＯ４标记猪血小板，在阿斯匹林阻断花生四烯酸代谢，Ａｐｙｒａｓｅ去除分泌的ＡＤＰ情况下，以Ａ２３１８７和ＰＭＡ为血小板激动剂，ｓｔａｕｒｏｓｐｏｒｉｎｅ为ＰＫＣ抑制剂，研究Ｃａ２＋和蛋白激酶Ｃ在血小... 详细信息

以３２ＰＮａ２ＨＰＯ４标记猪血小板，在阿斯匹林阻断花生四烯酸代谢，Ａｐｙｒａｓｅ去除分泌的ＡＤＰ情况下，以Ａ２３１８７和ＰＭＡ为血小板激动剂，ｓｔａｕｒｏｓｐｏｒｉｎｅ为ＰＫＣ抑制剂，研究Ｃａ２＋和蛋白激酶Ｃ在血小板聚集中的作用．结果表明，ａＡ２３１８７在１～２０μｍｏｌ／Ｌ引起血小板聚集，相应地，明显地引起４０ｋｕ、２０ｋｕ蛋白质磷酸化，且存在剂量和时间效应关系．ｂＡ２３１８７和ＰＭＡ在血小板聚集和蛋白质磷酸化上都存在着协同效应．ｃ１μｍｏｌ／Ｌｓｔａｕｒｏｓｐｏｒｉｎｅ可大部分抑制２０μｍｏｌ／ＬＡ２３１８７诱导的血小板聚集和２０ｋｕ、４０ｋｕ蛋白质磷酸化．结果提示，Ｃａ２＋激活血小板是建立在激活ＰＫＣ的基础上，Ｃａ２＋通过激活ＰＫＣ诱导血小板聚集，这是Ｃａ２＋激活血小板的主要途径．

关键词： A23187 PMA 血小板聚集蛋白激酶C